共聚焦显微镜
激光共聚焦缩写

激光共聚焦缩写激光共聚焦显微镜(LSM)的全称为激光共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope),是一种高分辨率的显微镜技术。
它采用激光束聚焦的方式获取样品的三维图像,并具有优异的光学性能和空间分辨率。
激光共聚焦显微镜在生物医学、材料科学以及其他领域的研究中具有广泛应用,并且在科学研究和医学诊断中发挥着重要作用。
激光共聚焦显微镜的工作原理是利用激光束的聚焦来扫描样品,并通过控制激光束的聚焦深度以获得不同深度的图像。
激光束照射在样品表面后,其透射或反射部分被收集并聚焦到探测器上,从而生成样品的二维或三维图像。
与传统显微镜相比,激光共聚焦显微镜具有以下优点:1. 高分辨率:激光共聚焦显微镜利用激光束的聚焦和探测器的高灵敏度,可以获得比传统显微镜更高的分辨率。
这使得研究者可以观察到更细微的细胞或材料结构。
2. 光学切片能力:激光共聚焦显微镜可以通过调整激光束的聚焦深度来获取样品在不同深度的图像。
这种光学切片的能力使得研究者可以对样品进行三维重建,并观察材料或细胞的内部结构。
3. 抗散射能力:由于采用点对点的聚焦方式,激光共聚焦显微镜可以减少或消除散射效应,提高图像的清晰度和对比度。
这特别适用于观察厚样品或多细胞层结构。
4. 实时成像:激光共聚焦显微镜能够快速地扫描样品并生成图像,使研究者能够观察到样品的动态过程。
这对于研究生物过程的快速变化以及材料的动态演化至关重要。
除了以上的优点,激光共聚焦显微镜还具有一些其他功能。
例如,通过使用特定的探测器和染料,研究者可以观察到特定分子在细胞内的定位和活动;通过结合荧光共振能量转移(FRET)技术,可以研究蛋白质与蛋白质相互作用的过程;通过激光刺激,还可以进行光治疗等。
尽管激光共聚焦显微镜具有广泛的应用前景,但它也存在一些局限性。
首先,激光共聚焦显微镜的成本相对较高,需要较高的设备和维护费用。
其次,样品准备和染色等步骤较为复杂,需要专业的操作技能和时间。
激光扫描共聚焦显微镜名词解释

激光扫描共聚焦显微镜名词解释激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,简称LSCM)这名字听起来是不是有点高大上?别急,让我用大白话给你解释一下。
这玩意儿就像是个微观世界的超级侦探,它能在细胞、组织甚至整个生物体内部进行“侦查”,帮我们找出那些隐藏的秘密。
咱们先来说说它的工作原理。
LSCM的“大脑”是一个小型的激光器,它能够发出一束非常细的光束,就像一根针一样。
然后,这根针会“嗖”的一声,穿过样本的表面,直达深处。
在这个过程中,光束会被样本中的不同物质吸收,就像侦探在追踪线索一样。
这束被吸收的光会再次被反射回来,就像侦探找到了线索的所在位置。
现在,想象一下你正站在一个神秘的森林里,你需要找到隐藏在树丛中的宝藏。
LSCM就是那个拿着放大镜的侦探,它通过观察光的反射情况,就能知道宝藏在哪里。
而这个宝藏,可能是一个细胞内的分子,也可能是一片叶子上的花粉,甚至是一颗沙粒里的微生物。
那么,这个神奇的工具是怎么工作的呢?其实很简单。
LSCM会发射一束光线,然后它会收集从样本中反射回来的光线。
接着,这些光线会被送到一个特殊的镜头里,镜头就像一个小窗户,让光线能够进入并照射到样本上。
这些光线会被收集起来,并通过一个透镜系统送到探测器上进行分析。
在这个过程中,LSCM就像是一个神奇的“魔术师”,它能够捕捉到那些肉眼无法看见的细节。
比如,科学家们可以通过LSCM观察到细胞内部的结构,就像看一场精彩的魔术表演一样。
他们可以看到细胞核、线粒体、内质网等等,这些结构就像是微观世界的“舞台”,而LSCM就像是那个最懂观众的导演。
但是,LSCM并不是万能的。
它也有一些局限性。
比如说,它只能观察那些对激光有反应的物质,也就是说,它只能在那些“喜欢”光的地方工作。
而且,它也不能像人眼那样看到色彩和形状,它只能看到光的强度和方向。
总的来说,LSCM就像是微观世界的“超级英雄”,它能够帮助我们揭开生命奥秘的面纱。
激光共聚焦荧光通道

激光共聚焦荧光通道
激光共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscopy,简称LSCM)是一种高分辨率的显微镜技术,它利用激光光源来聚焦样品表面的特定区域,通过采集经过激光激发的荧光信号来获取高质量的细胞或组织的三维图像。
在激光共聚焦显微镜中,荧光通道是指用于检测和记录样品中荧光信号的特定光学通道。
激光共聚焦显微镜通常配备多个荧光通道,每个通道可以选择特定的荧光染料来激发和检测。
通过选择不同的荧光通道,可以同时观察多种荧光标记物,或者对同一标记物的不同特性进行观察,从而获取更加丰富的信息。
这些荧光通道通常与特定的激光波长和荧光滤光片相对应,以确保精确的激发和检测荧光信号。
在实际的显微镜操作中,研究人员可以根据实验需求选择合适的荧光通道组合,以获得最佳的荧光成像效果。
不同的荧光通道可以用于观察不同的细胞器、蛋白质或其他生物分子的位置和分布,从而帮助研究人员理解细胞结构和功能。
同时,荧光通道的选择也需要考虑到荧光染料的光谱特性和相互干扰的情况,以避免信号重叠和混淆。
总之,激光共聚焦显微镜中的荧光通道是非常重要的,它们为研究人员提供了丰富的荧光成像选择,帮助揭示生物样品内部结构和功能的细节。
通过合理选择和使用荧光通道,研究人员可以获得高质量的荧光成像数据,为生物学研究和医学诊断提供重要的支持和帮助。
激光共聚焦扫描显微镜检测ros的原理

激光共聚焦扫描显微镜检测ros的原理
激光共聚焦扫描显微镜检测ROS(活性氧簇)的原理如下:
1. 共聚焦显微镜采用单色激光扫描束形成点光源,对标本内焦平面上每一点进行扫描。
2. 标本上被照射点在检测器检测针孔处成像,由检测针孔后光电倍增管逐点或逐线接受,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。
3. 照明针孔与检测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,即焦平面点同步聚焦于照明针孔和检测针孔,焦平面以外点不会在检测针孔处成像。
这样得到的共聚焦图像是标本的光学横切面,克服了普通荧光显微镜图像模糊的缺陷。
4. 通过显微镜载物台上加装的微量步进马达,可以使载物台沿着Z轴上下移动,将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上,使样品不同层面的图像都能清晰地显示,成为持续光切图像。
通过以上步骤,可以有效地利用激光共聚焦扫描显微镜检测ROS,获得更准确的结果。
尼康共聚焦显微镜使用手册

尼康共聚焦显微镜使用手册一、引言尼康共聚焦显微镜是一种高级光学显微镜,广泛应用于生物、医学、材料科学等领域。
本使用手册将介绍尼康共聚焦显微镜的基本结构、操作方法以及常见故障处理方法,帮助用户熟练掌握该设备的使用技巧。
二、基本结构1. 光学系统:尼康共聚焦显微镜采用共聚焦技术,具有优秀的深度分辨能力和高倍率成像功能。
光学系统包括目镜、物镜和共聚焦激光扫描系统。
2. 机械系统:显微镜的机械系统包括标本平台、焦平面控制系统和Z轴控制系统,可以实现对标本的精确控制。
3. 软件系统:尼康共聚焦显微镜配备专业的成像和数据处理软件,能够对观察到的图像进行实时处理和分析。
三、操作方法1. 打开电源:将显微镜连接至电源,并按下电源开关,待系统启动完成后即可进入操作界面。
2. 调整标本:将待观察的标本放置在标本平台上,并利用X、Y、Z轴控制系统进行精确定位。
3. 开启激光扫描:根据需要选择合适的激光波长和功率,通过软件系统开启激光扫描功能。
4. 观察和成像:通过目镜观察标本,同时可使用软件系统进行图像实时采集和处理,以获取清晰的成像结果。
5. 关机和维护:在完成观察后,依次关闭激光扫描、软件系统和电源,同时对显微镜进行常规维护和清洁工作。
四、常见故障处理1. 图像模糊:可能是由于物镜未对焦或标本未平整导致,可通过调节焦平面控制系统和Z轴控制系统来改善。
2. 激光无法启动:检查激光源和激光器是否连接良好,保证激光通道畅通。
3. 软件无响应:重新启动软件或检查计算机连接是否正常,如有需要可进行软件更新或重新安装。
五、注意事项1. 使用前需仔细阅读本手册,并按照操作步骤进行操作,避免操作失误导致设备损坏或人员受伤。
2. 对于激光器等高功率模块,应特别注意安全防护,避免直接暴露于激光光束下。
3. 定期对显微镜进行清洁和维护,保持设备的良好状态。
六、结语通过阅读本使用手册,相信您已经对尼康共聚焦显微镜有了更全面的了解,并能够熟练操作和维护该设备。
激光扫描共聚焦显微镜-仪器百科

一、激光扫描共聚焦显微镜简介激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,简称CLSM)是近代生物医学图像仪器。
它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。
利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。
二、激光扫描共聚焦显微镜原理在普通宽视野光学显微镜中,整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明,图像可以用肉眼直接观察。
同时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大,尤其是标本的厚度在2um以上时,其影响更为明显。
激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,采用激光束作光源,激光束经照明针孔,经由分光镜反射至物镜,并聚焦于样品上,对标本焦平面上每一点进行扫描。
组织样品中如果有可被激发的荧光物质,受到激发后发出的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜,通过探测针孔时先聚焦,聚焦后的光被光电倍增管(PMT)探测收集,并将信号输送到计算机,处理后在计算机显示器上显示图像。
在这个光路中,只有在焦平面的光才能穿过探测针孔,焦平面以外区域射来的光线在探测小孔平面是离焦的,不能通过小孔。
因此,非观察点的背景呈黑色,反差增加,成像清晰。
由于照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔与探测针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,即共聚焦。
以激光作光源并对样品进行扫描,在此过程中两次聚焦,故称为激光扫描共聚焦显微镜。
三、激光扫描共焦显微镜的优点1.动态连续扫描及三维图像重组。
LSCM可以对对活细胞和组织或细胞切片样品的不同层面进行连续逐层扫描,来获得各个层面的图像,即所谓的“无损伤的光学切片”。
激光扫描共聚焦显微镜扫描的每个层面之间的间距可以达到0.1um甚至更小。
获得的图像通过计算机重组,可获得精细的细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统的三维图像。
扫描共聚焦显微镜原理

扫描共聚焦显微镜原理一、引言扫描共聚焦显微镜(Scanning Confocal Microscope,SCM)是一种先进的显微成像技术,它在生物学、医学、材料科学等领域有着广泛的应用。
与传统的显微镜相比,扫描共聚焦显微镜具有更高的分辨率和更好的成像质量。
本文将重点介绍扫描共聚焦显微镜的工作原理。
二、扫描共聚焦显微镜的工作原理扫描共聚焦显微镜的基本原理是通过逐点扫描样品,并对每个像素点的荧光信号进行检测和记录,从而获得高分辨率的图像。
以下是扫描共聚焦显微镜的工作原理:1.逐点扫描:扫描共聚焦显微镜使用快速振镜或声光器件等扫描装置,对样品进行逐点扫描。
在每个像素点上,激光束聚焦在样品上,激发荧光。
2.激发荧光:当激光束照射到样品上时,会激发荧光。
这些荧光信号是样品特性的反映,可以用于成像。
3.检测荧光信号:在每个像素点上,荧光信号被检测器收集并转换为电信号。
这个过程是在焦平面上完成的,因此每个像素点都有良好的焦深。
4.记录图像:电信号被记录并转换为数字信号,然后通过计算机进行图像处理和显示。
由于每个像素点的荧光信号都被独立记录,因此最终获得的图像具有高分辨率和高对比度。
5.图像重建:通过将所有像素点的图像信息组合起来,可以重建出整个样品的图像。
这个过程可以通过计算机软件实现。
三、扫描共聚焦显微镜的特点和优势扫描共聚焦显微镜具有以下特点和优势:1.高分辨率:由于逐点扫描和独立检测每个像素点的荧光信号,扫描共聚焦显微镜可以获得高分辨率的图像,远高于传统的显微镜。
2.更好的焦深:由于在焦平面上进行检测,每个像素点都有良好的焦深,使得获得的图像具有更好的立体感。
3.减少杂散光干扰:通过只检测焦平面的荧光信号,扫描共聚焦显微镜有效地减少了杂散光干扰,提高了图像的对比度。
4.定量分析:由于每个像素点的荧光信号都可以独立记录,因此可以对样品进行定量分析,如测量荧光强度、测量荧光光谱等。
5.适合各种样品:扫描共聚焦显微镜适用于各种样品,如生物切片、细胞培养物、组织样本等。
激光共聚焦扫描显微镜用途

激光共聚焦扫描显微镜用途激光共聚焦扫描显微镜(Laser Scanning Confocal Microscopy, LSCM)是一种高分辨率的成像技术,主要用于对细胞、组织和材料进行非破坏性的三维成像和分析。
它通过使用激光束扫描样品,获取高质量的荧光图像,并通过计算机处理和重建,实现对样品的横向和纵向解剖结构的可视化。
1.生物医学研究:激光共聚焦显微镜可用于观察活细胞的形态、结构和功能。
通过标记细胞的一些结构或分子,可以观察细胞器官的形态与位置、蛋白质的表达和分布、细胞的生理活动等。
同时,LSCM还可以进行细胞动力学研究,包括细胞迁移、分裂和凋亡等生物学过程。
2.神经科学研究:LSCM可以帮助神经科学家观察和研究神经元的形态和连接。
通过标记神经元的轴突和树突,可以实现对神经网络的全面观察和分析,从而揭示神经系统的组织构建和功能运作机制,并对神经退行性疾病和神经变性疾病的发生、发展和治疗提供重要参考。
3.组织学研究:激光共聚焦显微镜提供了对组织样本的高分辨率成像,在组织学研究中具有重要的应用前景。
可以观察和分析组织的细胞组织结构、器官形态、局部代谢情况等,进而探究组织发育、器官功能和疾病发展等问题。
4.生物材料分析:LSCM可用于研究生物材料的形态、结构和功能。
可以观察和分析材料的粒子分布、孔隙结构、表面性质、生物相容性等特征,从而用于材料的设计、制备和性能优化。
5.药物研究和药物筛选:激光共聚焦显微镜在药物研究和药物筛选中具有重要作用。
可以观察和分析药物的靶位结合情况、药物的进入细胞和细胞内分布、药物代谢等,从而揭示药物的作用机制和效应,对药物研发和药物筛选提供有力支持。
总之,激光共聚焦显微镜作为高分辨率的成像技术,在生命科学、材料科学和医学研究领域具有广泛应用前景。
通过对样本的高效成像和分析,可以揭示细胞和组织的细微结构和功能,进而促进研究人员对生命科学和材料科学的深入理解和应用发展。
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1 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考 共聚焦显微镜 从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。共焦显微镜[confocallaserscanningmicroscope(clsm或lscm)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichroicmirror),将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在其焦点上有一个带有针孔(pinhole)的挡板,小孔就位于焦点处,挡板后面是一个光电倍增管 (photomultipliertube,pmt)。可以想像,探测光焦点前后的反射光通过这一套共焦系统,必不能聚焦到小孔上,会被挡板挡住。于是光度计测量的就是焦点处的反射光强度。其意义是:通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。 激光扫描共聚焦显微镜是二十世纪80年代发展起来的一项具有2 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
划时代的高科技产品,它是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,把光学成像的分辨率提高了30%--40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如ca2+、ph值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。激光共聚焦成像系统能够用于观察各种染色、非染色和荧光标记的组织和细胞等,观察研究组织切片,细胞活体的生长发育特征,研究测定细胞内物质运输和能量转换。能够进行活体细胞中离子和ph值变化研究(ratio),神经递质研究,微分干涉及荧光的断层扫描,多重荧光的断层扫描及重叠,荧光光谱分析荧光各项指标定量分析荧光样品的时间延迟扫描及动态构件组织与细胞的三维动态结构构件,荧光共振能量的转移的分析,荧光原位杂交研究(fish),细胞骨架研究,基因定位研究,原位实时pcr产物分析,荧光漂白恢复研究(frap),胞间通讯研究,蛋白质间研究,膜电位与膜流动性等研究,完成图像分析和3 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
三维重建等分析。 一.激光共聚焦显微镜系统应用领域: 涉及医学、动植物科研、生物化学、细菌学、细胞生物学、组织胚胎、食品科学、遗传、药理、生理、光学、病理、植物学、神经科学、海洋生物学、材料学、电子科学、力学、石油地质学、矿产学。 二.基本原理 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(pmt)或冷电耦器件(cd)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。 4 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
三.应用范围: 细胞形态学分析(观察细胞或组织内部微细结构,如:细胞内线粒体、内质网、高尔基体、微管、微丝、细胞桥、染色体等亚细胞结构的形态特征;半定量免疫荧光分析);荧光原位杂交研究;基因定位研究及三维重建分析。 1.细胞生物学:细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化 2.生物化学:酶、核酸、fish(荧光原位杂交)、受体分析 3.药理学:药物对细胞的作用及其动力学 4.生理学:膜受体、离子通道、细胞内离子含量、分布、动态 5.神经生物学:神经细胞结构、神经递质的成分、运输和传递、递质受体、离子内外流、神经组织结构、细胞分布 6.微生物学和寄生虫学:细菌、寄生虫形态结构 7.病理学及临床应用:活检标本诊断、肿瘤诊断、自身免疫性疾病诊断、hiv等 5 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
8.遗传学和组胚学:细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断 四.激光共聚焦显微镜在医学领域中的应用a.在细胞及分子生物学中的应用1.细胞、组织的三维观察和定量测量2.活细胞生理信号的动态监测3.粘附细胞的分选4.细胞激光显微外科和光陷阱功能5.光漂白后的荧光恢复6.在细胞凋亡研究中的应用b.在神经科学中的应用 1.定量荧光测定 2.细胞内离子的测定 3.神经细胞的形态观察 c.在耳鼻喉科学中的应用 1.在内耳毛细胞亚细胞结构研究上的应用 2.激光扫描共聚焦显微镜的荧光测钙技术在内耳毛细胞研究中的应用 3.激光扫描共聚焦显微镜在内耳毛细胞离子通道研究上的应用 6 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
4.激光扫描共聚焦显微镜在嗅觉研究中的应用 d.在肿瘤研究中的应用 1.定量免疫荧光测定2.细胞内离子分析3.图像分析:肿瘤细胞的二维图像分析4.三维重建e.激光扫描共聚焦显微镜在内分泌领域的应用1.细胞内钙离子的测定2.免疫荧光定位及免疫细胞化学研究3.细胞形态学研究:利用激光扫描共聚焦显微镜f.在血液病研究中的应用1.在血细胞形态及功能研究方面的应用 2.在细胞凋亡研究中的应用 g.在眼科研究中的应用 1.利用激光扫描共聚焦显微镜观察组织、细胞结构 2.集合特殊的荧光染色在活体上观察角膜外伤修复中细胞移行及成纤维细胞的出现 3.利用激光扫描共聚焦显微镜观察视网膜中视神经细胞的分布以及神经原的树枝状形态 4.三维重建 7 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
h.激光扫描共聚焦显微镜在肾脏病中的应用 可以系统观察正常人肾小球系膜细胞的断层扫描影像及三维立体影像水平,使图像更加清晰,从计算机分析系统可从外观到内在结构,从平面到立体,从静态到动态,从形态到功能几个方面对系膜细胞的认识得到提高。共聚焦显微镜 基本原理 从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。共焦显微镜在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichroicmirror),将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在其焦点上有一个带有针孔(pinhole),小孔就位于焦点处,挡板后面是一个光电倍增管(photomultipliertube,pmt)。可以想像,探测光焦点前后的反射光通过这一套共焦系统,必不能聚焦到小孔上,会被挡板挡住。于是光度计测量的就是焦点处的反射光强度。其意义是:通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。这样8 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
的构想,是在1953年,美国学者马文·明斯基提出,经过了30年的发展,才利用激光为光源,发展出符合马文·明斯基理想的共轭焦显微镜。相关应用 全内反射萤光显微镜tirfmicroscope 海德堡视网膜地形图(hrt),以此原理对视网膜,特别是视盘,进行分层的扫描,以重建视盘的三维结构。主要用于青光眼的诊断和随访 激光共聚焦显微镜的原理与应用范围 激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。把光学成像的分辨率提高了30%~40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代的研究工具。 9 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
1激光扫描共聚焦显微镜(lscm)的原理 从基本原理上讲,共聚焦显微镜是一种现代化的光学显微镜,它对普通光镜从技术上作了以下几点改进: 1.1用激光做光源因为激光的单色性非常好,光源波束的波长相同,从根本上消除了色差。1.2采用共聚焦技术在物镜的焦平面上放置了一个当中带有小孔的挡板,将焦平面以外的杂散光挡住,消除了球差;并进一步消除了色差 1.3采用点扫描技术将样品分解成二维或三维空间上的无数点,用十分细小的激光束(点光源)逐点逐行扫描成像,再通过微机组合成一个整体平面的或立体的像。而传统的光镜是在场光源下一次成像的,标本上每一点的图像都会受到相邻点的衍射光和散射光的干扰。这两种图像的清晰度和精密度是无法相比的。 1.4用计算机采集和处理光信号,并利用光电倍增管放大信号图 在共聚焦显微镜中,计算机代替了人眼或照相机进行观察、摄像,得到的图像是数字化的,可以在电脑中进行处理,再一次提高图像的清10 / 24 __来源网络整理,仅作为学习参考
晰度。而且利用了光电倍增管,可以将很微弱的信号放大,灵敏度大大提高。由于综合利用了以上技术。可以说LSCM是显微镜制作技术、光电技术、计算机技术的完美结合,是现代技术发展的必然产物。 2LSCM在生物医学研究中的应用 目前,一台配置完备的LSCM在功能上已经完全能够取代以往的任何一种光学显微镜,它相当于多种制作精良的常用光学显微镜的有机组合,如倒置光学显微镜、紫外线显微镜、荧光显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜(PH)、微分干涉差显微镜(DIC)等,因此被称为万能显微镜,通过它所得到的精细图像可使其他的显微镜图像无比逊色。 2.1观察活细胞、活组织LSCM在不损伤细胞的前提下,对活组织、活细胞进行观察和测量,这不仅省去了繁琐的样品前期处理过程(如脱水、脱蜡、染色等);而且观察过的样品还可以继续用于其他的研究。这种功能对于细胞培养、转基因研究尤为重要。这可以说是LSCM最大的优势。