蛋白质
提蛋白质的原理及步骤
蛋白质提取是一项基础实验，通常用于从组织或细胞中提取纯度较高的蛋白质样品，以便进行各种蛋白质研究。
常规的蛋白质提取步骤包括以下几个主要步骤：
1. 细胞或组织的裂解：将待提取的样品裂解以释放出蛋白质。
裂解方法取决于被裂解的细胞类型，可使用机械法、化学法、超声波或高压等方法进行裂解。
2. 蛋白质的分离：将蛋白质与非蛋白质组分进行分离，常用的方法有沉淀、过滤、离心和柱层析等。
3. 蛋白质的纯化：通过进一步的分离和纯化来获得高纯度的蛋白质。
这些步骤通常需要进行多次，每次都使用不同的方法来分离和纯化蛋白质。
提蛋白质的原理是基于蛋白质的化学和物理特性进行分离和纯化。
蛋白质分子量大小、电荷、亲水性等特性不同，容易与不同化学试剂、柱层析介质或生物酶相互作用。
通过调节这些条件和步骤，就可以使不同的蛋白质与其它组分分离出来，并得到纯度较高的蛋白质样品。
虽然蛋白质提取步骤较多，但因为各种蛋白质的特性不同，所以实验时需要根据需要选择不同的提取和分离方法以获得更理想的效果。
蛋白质的化学式
蛋白质的化学式蛋白质是由氨基酸通过肽键连接起来的生物大分子。
其化学式为CnHnNnO2，其中n代表的是不同种类氨基酸在蛋白质中出现的数量。
下面，本文将详细介绍蛋白质的化学式和蛋白质的化学成分。
一、蛋白质的结构和化学成分蛋白质是由二十种不同的氨基酸通过肽键连接成的线性聚合物。
在自然界中，共有约10万种不同形式的蛋白质，其分子量从数千到数百万不等。
蛋白质分子通常分为四个层次的结构：一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
蛋白质的化学成分主要包括以下三个部分：1. 氨基酸：氨基酸是蛋白质的最基本单元，可分为20种不同的类型。
每种氨基酸的核心结构相同，但它们的侧链在结构和化学性质上不同。
2. 肽链：肽链是由氨基酸肽键连接而成的线性聚合物。
氨基酸的氨基与羧基通过脱水反应形成肽键，最终生成长链结构。
3. 附加结构：蛋白质通过不同的氢键、疏水相互作用、离子键、二硫键等来保持空间结构的稳定。
二、蛋白质的化学式蛋白质的化学式可以用一般式CnHnNnO2来表示，其中n代表的是不同种类氨基酸在蛋白质中出现的数量。
蛋白质分子的化学式可通过计算不同氨基酸的化学式总和而得到。
例如，假设一种蛋白质分子由5个亮氨酸、3个丙氨酸和2个谷氨酸等氨基酸组成，则它的化学式可以计算如下：5 x C6H13NO2 + 3 x C3H7NO2 + 2 x C5H9NO4= C37H65N11O13因此，这种蛋白质分子的化学式为C37H65N11O13。
三、氨基酸的化学式蛋白质是由氨基酸通过肽键连接起来的聚合物，因此氨基酸对蛋白质的化学式具有重要的影响。
共有20种常见的氨基酸，它们的分子式各不相同，但都包含一个羧基、一个氨基和一个侧链。
下面列出了20种氨基酸的化学式：1. 丙氨酸（Alanine，简写Ala）：C3H7NO22. 缬氨酸（Valine，简写Val）：C5H11NO23. 亮氨酸（Leucine，简写Leu）：C6H13NO24. 异亮氨酸（Isoleucine，简写Ile）：C6H13NO25. 苏氨酸（Serine，简写Ser）：C3H7NO36. 苯丙氨酸（Phenylalanine，简写Phe）：C9H11NO27. 赖氨酸（Lysine，简写Lys）：C6H14N2O28. 芳香氨基酸（Tyrosine，简写Tyr）：C9H11NO39. 色氨酸（Tryptophan，简写Trp）：C11H12N2O210. 苏氨酸（Threonine，简写Thr）：C4H9NO311. 甘氨酸（Glycine，简写Gly）：C2H5NO212. 缬二氨酸（Cystine，简写Cys）：C6H12N2O4S213. 谷氨酰胺（Glutamine，简写Gln）：C5H10N2O314. 谷氨酸（Glutamic acid，简写Glu）：C5H9NO415. 脯氨酸（Proline，简写Pro）：C5H9NO216. 精氨酸（Arginine，简写Arg）：C6H14N4O217. 组氨酸（Histidine，简写His）：C6H9N3O218. 鸟氨酸（Asparagine，简写Asn）：C4H8N2O319. 天冬氨酸（Aspartic acid，简写Asp）：C4H7NO420. 脯氨酰胺（Methionine，简写Met）：C5H11NO2S这些氨基酸在蛋白质中的化学式和组成可以根据蛋白质的结构进行推导和计算。
蛋白质用途
蛋白质用途
一、蛋白质用途
1、食品工业
蛋白质在食品工业中有着重要的作用，可以用于制造面包、调味品、果冻、冰淇淋等，以及蛋糕、汤和饮料等。
蛋白质的添加可以增加食物的口感和营养价值，而且还能改善食物的稳定性、延长其寿命。
2、医学治疗
蛋白质还可以用于医学治疗，可以用来治疗某些疾病，比如血症、营养不良、贫血等。
此外，蛋白质还可以用于注射用药，如抗生素、癌症药物等，以及血液制品等。
3、动物饲料
蛋白质也是动物饲料的重要成分，可以增加动物体内氨基酸的含量，从而提高动物的营养吸收和体型，同时也有助于改善动物的健康状况。
4、其他用途
除了以上应用，蛋白质还有其他应用，如用于植物生长、制造化妆品、制造服装等。
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人体29种蛋白质
人体29种蛋白质咱今儿个就来唠唠人体里的那些事儿，特别是那29种蛋白质。
你听我给你一一道来，保你听得津津有味，像是打开了新世界的大门。
话说这蛋白质啊，它们在咱们的身体里可都是大忙人，忙得像陀螺一样。
你想啊，没有它们，咱们这身体就像是一家工厂突然没了工人，那还能运转得起来吗？首先得介绍的是那个“大力士”蛋白质——肌动蛋白，它负责着肌肉的收缩，想象一下，咱们搬东西、跑步，哪样儿少得了它？再来说说“建筑工人”蛋白质——胶原蛋白，这家伙就像是人体的脚手架，支撑起我们的皮肤、骨骼和关节。
你想，要是没有了胶原蛋白，咱们不就成了软绵绵的一滩泥？这可不是闹着玩儿的。
还有一种叫“邮差”蛋白质——血红蛋白，这家伙可了不得，负责给全身的细胞送氧气，这就好比是快递小哥，穿梭在繁忙的街道上，将氧气这个“快递包裹”准时送达。
一旦它罢工，那咱们可就要缺氧了，头晕眼花的滋味儿可不好受。
这29种蛋白质里啊，还有一位“爱情使者”——催产素。
它能让咱们感受到亲情、友情和爱情，就像是生活中的调味剂，让我们的关系更加和谐。
你说，这么重要的蛋白质，是不是得好好珍惜呢？记得有个故事，说是有个小伙子，因为失恋心情低落，结果催产素分泌不足，整个人都变得冷漠。
后来，在亲朋好友的关心下，他又重新感受到了温暖，催产素水平也渐渐恢复正常。
瞧，这蛋白质的作用大吧！还有一种蛋白质，我叫它“清洁工”——免疫球蛋白。
它负责清除体内的病毒、细菌，就像是一支强大的环卫队伍，让咱们的生活环境保持干净整洁。
要是没有它，咱们可就要被各种疾病困扰了。
我有个朋友，体质特差，动不动就感冒。
后来医生告诉他，他的免疫球蛋白水平偏低，于是他开始调整作息，加强锻炼，这不，现在他的身体棒棒的，再也不是那个“病秧子”了。
这29种蛋白质，就像是人体的守护神，各司其职，共同维护着我们的健康。
它们之间的故事，三天三夜都说不完。
比如说，那个“能量供应站”蛋白质——酶，它能加速化学反应，让咱们的新陈代谢顺利进行。
蛋白质科普知识
蛋白质是生物体内一类重要的生物大分子，扮演着多种关键角色，从构建细胞结构到催化化学反应，都离不开蛋白质的作用。
以下是关于蛋白质的一些科普知识：1.组成和结构：蛋白质由氨基酸分子组成，氨基酸通过肽键连接在一起，形成多肽链，进而构成蛋白质的三维结构。
蛋白质的结构可分为四级：原始结构、二级结构（α螺旋和β折叠）、三级结构和四级结构。
2.功能：蛋白质在生物体内扮演着多种重要功能，包括：结构功能：构建细胞、组织和器官的结构，如肌肉蛋白、胶原蛋白等。
酶功能：作为生物催化剂，参与化学反应，如消化酶、DNA复制酶等。
转运功能：运输物质穿越细胞膜，如载脂蛋白、载氧蛋白。
免疫功能：作为抗体参与免疫反应，对抗外来入侵。
调节功能：控制细胞内信号传递，如激素受体。
运动功能：使肌肉收缩，实现生物体运动。
3.合成和折叠：蛋白质的合成发生在细胞内，通过遵循遗传信息从基因转录成RNA，再翻译成蛋白质。
蛋白质的正确折叠是实现其功能的关键，不正确的折叠可能导致蛋白质失去功能或形成异常聚集。
4.蛋白质结构与功能关系：蛋白质的结构决定了其功能。
小的结构变化可以导致功能的巨大改变。
在研究中，了解蛋白质的三维结构有助于理解其功能和相互作用。
5.蛋白质来源：蛋白质存在于各种食物中，尤其是动物食品（肉、蛋、奶制品）和豆类、坚果等。
不同食物提供不同种类的氨基酸，因此多样化饮食有助于获得多种蛋白质。
6.蛋白质结构预测和设计：现代生物技术和计算生物学技术允许科学家对蛋白质的结构进行预测和设计，从而在药物开发、生物工程等领域发挥作用。
蛋白质是生物体内不可或缺的重要分子，其多样性和功能使其成为生命科学研究的重要领域之一。
功能性蛋白质
功能性蛋白质
功能性蛋白质是一种特殊类型的蛋白质，它具有特定的生物活性和功能，能够参与和调控多种生物过程。
这些功能性蛋白质在机体内起到重要作用，可以影响细胞的生存、增殖和分化，以及体内的代谢、免疫和抗病等多个方面。
功能性蛋白质的种类繁多，根据其功能和生物活性的不同，可以分为多个类别，下面列举几个常见的功能性蛋白质。
1. 激素：激素是一类能够调节身体各个方面功能的蛋白质，例如胰岛素、生长激素和甲状腺激素等。
它们通过与细胞表面受体结合，进而改变细胞内的信号传递，从而调节新陈代谢、生长发育和免疫等生理过程。
2. 酶：酶是一类能够催化化学反应的蛋白质，例如淀粉酶、蛋白酶和DNA聚合酶等。
它们能够加速生物体内的化学反应，从而促进代谢过程，如消化、合成和修复等。
3. 抗体：抗体是一类能够识别和结合外来抗原的蛋白质，它们由免疫系统产生，可以与抗原结合形成免疫复合物，从而激活免疫细胞来清除病原体和异物。
4. 结构蛋白：结构蛋白是一类能够提供细胞骨架支持和细胞结构稳定的蛋白质，例如胶原蛋白和骨胶原等。
它们在细胞的结构和功能上起到重要作用，如维持细胞的形态、支撑组织和器官的结构等。
5. 运输蛋白：运输蛋白是一类能够在细胞膜上进行物质的运输和转运的蛋白质，例如携带氧气的血红蛋白和携带脂质的载脂蛋白等。
它们能够促进物质的进出细胞，维持细胞内外的平衡和稳定。
功能性蛋白质的特点是具有特异性和专一性，能够针对特定的目标进行结合和调控。
它们在维持生命活动和身体健康方面起着重要作用，对人类的生存和发展至关重要。
因此，研究和了解功能性蛋白质的结构和功能，对于探索生命现象和开发药物具有重要意义。
蛋白质沉淀原因
蛋白质沉淀原因蛋白质沉淀是指在溶液中蛋白质发生不可逆的凝聚或沉淀现象。
蛋白质沉淀可能由多种原因引起，包括温度、pH值、盐浓度、溶剂、离子强度、蛋白质浓度等因素的改变。
本文将详细介绍几种常见的蛋白质沉淀原因。
1. 温度温度是影响蛋白质稳定性的重要因素之一。
当温度过高或过低时，蛋白质的结构可能发生改变，导致蛋白质失去溶解性而沉淀。
一般来说，蛋白质沉淀的温度范围是在其最适活性温度的高温或低温端。
因此，在进行蛋白质实验时，需要根据蛋白质的特性选择合适的温度条件，以避免蛋白质沉淀。
2. pH值pH值是溶液中酸碱性的度量指标，对蛋白质的稳定性有重要影响。
蛋白质在特定的pH条件下具有最佳的溶解性和稳定性。
当溶液的pH值偏离蛋白质的最适pH值时，蛋白质可能会发生结构改变，导致蛋白质的沉淀。
因此，在进行蛋白质实验时，需要控制好溶液的pH值，以保持蛋白质的稳定性。
3. 盐浓度盐浓度是影响蛋白质溶解性和稳定性的另一个重要因素。
适量的盐可以增加蛋白质的稳定性，而过高或过低的盐浓度可能导致蛋白质结构的改变，从而引起蛋白质的沉淀。
一般来说，不同的蛋白质对盐的耐受性是不同的，因此，在进行蛋白质实验时，需要根据具体蛋白质的特性选择合适的盐浓度。
4. 溶剂溶剂的选择也会影响蛋白质的溶解性和稳定性。
常见的溶剂如水、有机溶剂等对蛋白质的溶解性和稳定性有不同的影响。
一些蛋白质在水中容易沉淀，而在有机溶剂中则溶解性较好。
因此，在进行蛋白质实验时，需要根据蛋白质的特性选择合适的溶剂，以保持蛋白质的溶解性。
5. 离子强度离子强度是指溶液中离子的浓度和种类。
高离子强度会增加蛋白质之间的静电相互作用力，从而促进蛋白质的凝聚和沉淀。
因此，在进行蛋白质实验时，需要控制好离子强度，以避免蛋白质的沉淀。
6. 蛋白质浓度蛋白质的浓度也会影响蛋白质的溶解性和稳定性。
当蛋白质的浓度过高时，蛋白质之间的相互作用力增强，易发生凝聚和沉淀。
因此，在进行蛋白质实验时，需要根据蛋白质的特性选择合适的浓度，以避免蛋白质的沉淀。
恩格斯关于蛋白质的论述原文
恩格斯关于蛋白质的论述原文恩格斯在他的著作《自然辩证法》中对蛋白质进行了一些论述。
以下是其中的一段原文摘录："蛋白质是生命体中最重要的有机化合物之一。
它们是由氨基酸组成的复杂分子，通过肽键连接在一起。
蛋白质在细胞中扮演着许多重要的角色，包括构建和修复组织、调节代谢过程、传递信号以及参与免疫反应等。
蛋白质的种类繁多，每种蛋白质都具有特定的结构和功能，这使得它们能够在生物体内发挥各种各样的作用。
蛋白质的合成是一个复杂而精确的过程。
它涉及到DNA的转录和翻译过程，其中DNA中的基因序列被转录成RNA，然后通过翻译作用转化为氨基酸序列，最终形成蛋白质。
这个过程在细胞中进行，需要依赖于多种酶和其他辅助因子的参与。
蛋白质的结构与功能密切相关。
蛋白质的结构可以分为四个层次，一级结构是指氨基酸的线性排列顺序；二级结构是指氨基酸之间的局部空间排列，如α-螺旋和β-折叠；三级结构是指整个蛋白质分子的立体空间结构；四级结构是由多个蛋白质分子组装而成的复合物。
这种层次结构的形成决定了蛋白质的功能和稳定性。
此外，蛋白质的结构和功能还受到环境条件的影响。
例如，温度、pH值、离子浓度等因素都可以影响蛋白质的结构和功能。
当环境条件发生变化时，蛋白质可能发生变性，导致其失去原有的功能。
总之，蛋白质在生命体中具有重要的地位和功能。
它们的合成、结构和功能都是一个复杂而精密的过程，受到多种因素的调控和影响。
了解蛋白质的性质和特点对于深入理解生命现象和研究疾病机制具有重要意义。
"以上是根据恩格斯在《自然辩证法》中关于蛋白质的论述进行的摘录和总结。
希望对你有所帮助。
高蛋白质的标准
高蛋白质的标准
高蛋白标准是，固体食品的蛋白质含量大于等于20%NRV，液体食品的蛋白质含量大于等于10%NRV。
高蛋白是指食物的蛋白质含量高，凡蛋白含量高的肉、禽、鱼、海产等动物类蛋白都是高蛋白食物，但此类食物必需氨基酸的组成比例并不接近人体需要，或含较高的脂肪、胆固醇，不能很好的被人体利用，因此吃过多高蛋白食物会引起高血脂，影响身体健康。
除以上食物外豆类、蛋类、奶类食物等等也属于高蛋白食物。
建议日常生活中饮食应该均衡，如可以吃一些富含维生素、矿物质的新鲜蔬菜水果或者牛奶、豆腐等富含优质蛋白的食物。
少吃辛辣刺激的食物，如辣椒、胡椒、芥末、生姜等。
还要规律作息，避免熬夜，适当进行运动，对身体健康是有利的。
平时还需要定期进行体检，出现异常及时治疗。
蛋白质鉴定内容
百泰派克生物科技
蛋白质鉴定内容
蛋白质鉴定就是对蛋白进行定性鉴定，主要鉴定内容包括蛋白质的相对分子质量、氨基酸序列、等电点、分子结构等。
蛋白质的相对分子质量就是组成蛋白质的各原子的相对分子质量之和，蛋白质分子量测定的方法有很多，目前常用的主要包括化学法、渗透压法、凝胶色谱法、SDS-聚丙烯凝胶电泳法、沉降法、光散射法以及质谱法等。
蛋白质的氨基酸序列又称蛋白一级结构或初级结构，主要通过测序法进行鉴定，如质谱法、Sanger法、毛细管电泳法和Edman降解法等。
蛋白质的等电点就是其在溶液中溶解度最小时溶液的pH值，通常利用沉淀法或等
电聚焦法进行测定。
蛋白质的高级结构测定比较复杂，现有的一些预测方法的准确度还有待进一步提升。
目前分析蛋白高级结构的主要方法有圆二色光谱法、X射衍射法、核磁共振技术、
同源模拟法、折叠识别法、从头计算法以及基于神经元网络的统计方法等。
百泰派克生物科技采用高分辨率质谱平台提供蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴
定等，欢迎免费咨询。
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2 蛋白质化学
1．用于测定蛋白质多肽链N端、C端的常用方法有哪些？基本原理是什么？
解答：（1） N-末端测定法：常采用2,4―二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。
①2,4―二硝基氟苯(DNFB或FDNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与2,4―二硝
基氟苯（2,4―DNFB）反应（Sanger反应），生成DNP―多肽或DNP―蛋白质。由于DNFB
与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNP―多肽经酸水解后，只有N―末端氨基
酸为黄色DNP―氨基酸衍生物，其余的都是游离氨基酸。
② 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（DNS―Cl）反应
生成DNS―多肽或DNS―蛋白质。由于DNS与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此
DNS―多肽经酸水解后，只有N―末端氨基酸为强烈的荧光物质DNS―氨基酸，其余的都
是游离氨基酸。
③ 苯异硫氰酸脂（PITC或Edman降解）法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰
酸苯酯（PITC）反应（Edman反应），生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中
加热时，N―末端的PTC―氨基酸发生环化，生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来，
除去N―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。
④ 氨肽酶法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的N端逐个地向里切。
根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量，按反应时间和残基释放量作动力
学曲线，就能知道该蛋白质的N端残基序列。
（2）C―末端测定法：常采用肼解法、还原法、羧肽酶法。
肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除C端氨基酸以游离形式存
在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。
② 还原法：肽链C端氨基酸可用硼氢化锂还原成相应的α―氨基醇。肽链完全水解后，
代表原来C―末端氨基酸的α―氨基醇，可用层析法加以鉴别。
③ 羧肽酶法：是一类肽链外切酶，专一的从肽链的C―末端开始逐个降解，释放出游
离的氨基酸。被释放的氨基酸数目与种类随反应时间的而变化。根据释放的氨基酸量（摩尔
数）与反应时间的关系，便可以知道该肽链的C―末端氨基酸序列。
2．测得一种血红蛋白含铁0.426%，计算其最低相对分子质量。一种纯酶按质量计算含
亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%，问其最低相对分子质量是多少？
解答：
（1）血红蛋白：
55.8100100131000.426铁的相对原子质量
最低相对分子质量＝＝
铁的百分含量
（2）酶：
因为亮氨酸和异亮氨酸的相对分子质量相等，所以亮氨酸和异亮氨酸的残基数之比为：
1.65%:2.48%=2:3，因此，该酶分子中至少含有2个亮氨酸，3个异亮氨酸。
r
2131.11100159001.65M
最低
r
3131.11100159002.48M
最低
3．指出下面pH条件下，各蛋白质在电场中向哪个方向移动，即正极，负极，还是保
持原点？
（1）胃蛋白酶（pI 1.0），在pH 5.0；
（2）血清清蛋白（pI 4.9），在pH 6.0；
（3）α-脂蛋白（pI 5.8），在pH 5.0和pH 9.0；
解答：（1）胃蛋白酶pI 1.0＜环境pH 5.0，带负电荷，向正极移动；
（2）血清清蛋白pI 4.9＜环境pH 6.0，带负电荷，向正极移动；
（3）α-脂蛋白pI 5.8＞环境pH 5.0，带正电荷，向负极移动；
α-脂蛋白pI 5.8＜环境pH 9.0，带负电荷，向正极移动。
4．何谓蛋白质的变性与沉淀？二者在本质上有何区别？
解答：蛋白质变性的概念：天然蛋白质受物理或化学因素的影响后，使其失去原有的
生物活性，并伴随着物理化学性质的改变，这种作用称为蛋白质的变性。
变性的本质：分子中各种次级键断裂，使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序
的状态，一级结构不破坏。
蛋白质变性后的表现：① 生物学活性消失； ② 理化性质改变：溶解度下降，黏度增
加，紫外吸收增加，侧链反应增强，对酶的作用敏感，易被水解。
蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中
加入适当的试剂，破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，则蛋白质胶体溶液就不稳定
而出现沉淀现象。沉淀机理：破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。
蛋白质的沉淀可以分为两类：
（1）可逆的沉淀：蛋白质的结构未发生显著的变化，除去引起沉淀的因素，蛋白质仍
能溶于原来的溶剂中，并保持天然性质。如盐析或低温下的乙醇（或丙酮）短时间作用蛋白
质。
（2）不可逆沉淀：蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质变性而沉淀，不再能溶
于原溶剂。如加热引起蛋白质沉淀，与重金属或某些酸类的反应都属于此类。
蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在，并不析出。因此变性蛋白质
并不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已经变性。
5．下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中：CNBr，异硫氰酸苯酯，丹磺酰氯，脲，
6mol/L HCl β-巯基乙醇，水合茚三酮，过甲酸，胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，其中哪一个最
适合完成以下各项任务？
（1）测定小肽的氨基酸序列。
（2）鉴定肽的氨基末端残基。
（3）不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂？
（4）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。
（5）在甲硫氨酸残基羧基侧水解肽键。
（6）在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。
解答：（1）异硫氰酸苯酯；（2）丹黄酰氯；（3）脲；-巯基乙醇还原二硫键；（4）胰
凝乳蛋白酶；（5）CNBr；（6）胰蛋白酶。
6．由下列信息求八肽的序列。
（1）酸水解得 Ala，Arg，Leu，Met，Phe，Thr，2Val。
（2）Sanger试剂处理得DNP-Ala。
（3）胰蛋白酶处理得Ala，Arg，Thr 和 Leu，Met，Phe，2Val。当以Sanger试剂处
理时分别得到DNP-Ala和DNP-Val。
（4）溴化氰处理得 Ala，Arg，高丝氨酸内酯，Thr，2Val，和 Leu，Phe，当用Sanger
试剂处理时，分别得DNP-Ala和DNP-Leu。
解答：由（2）推出N末端为Ala；由（3）推出Val位于N端第四，Arg为第三，而
Thr为第二；溴化氰裂解，得出N端第六位是Met，由于第七位是Leu，所以Phe为第八；
由（4），第五为Val。所以八肽为：Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe。
7．一个α螺旋片段含有180个氨基酸残基，该片段中有多少圈螺旋？计算该α-螺旋片
段的轴长。
解答：180/3.6=50圈，50×0.54=27nm，该片段中含有50圈螺旋，其轴长为27nm。
8．当一种四肽与FDNB反应后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及其他3种氨基酸；
当这四肽用胰蛋白酶水解时发现两种碎片段；其中一片用LiBH4（下标）还原后再进行酸水
解，水解液内有氨基乙醇和一种在浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫（红）色产物的氨基
酸。试问这四肽的一级结构是由哪几种氨基酸组成的？
解答：（1）四肽与FDNB反应后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val，证明N端为Val。
（2）LiBH4还原后再水解，水解液中有氨基乙醇，证明肽的C端为Gly。
（3）水解液中有在浓H2SO4条件下能与乙醛酸反应产生紫红色产物的氨基酸，说明此
氨基酸为Trp。说明C端为Gly－Trp…
（4）根据胰蛋白酶的专一性，得知N端片段为Val－Arg（Lys）…，以（1）、（2）、（3）
结果可知道四肽的顺序：N－Val－Arg（Lys）－Trp－Gly－C。
9．概述测定蛋白质一级结构的基本步骤。
解答：（1）测定蛋白质中氨基酸组成。
（2）蛋白质的N端和C端的测定。
（3）应用两种或两种以上不同的水解方法将所要测定的蛋白质肽链断裂，各自得到一
系列大小不同的肽段。
（4）分离提纯所产生的肽，并测定出它们的序列。
（5）从有重叠结构的各个肽的序列中推断出蛋白质中全部氨基酸排列顺序。
如果蛋白质含有一条以上的肽链，则需先拆开成单个肽链再按上述原则确定其一级结
构。如是含二硫键的蛋白质，也必须在测定其氨基酸排列顺序前，拆开二硫键，使肽链分开，
并确定二硫键的位置。拆开二硫键可用过甲酸氧化，使胱氨酸部分氧化成两个半胱氨磺酸。