HE染液的配制
染色步骤
HE染色是应用最广泛的组织病理学常规染色技术。
㈠染色程序1．石蜡切片HE染色（常规HE染色）（1）二甲苯Ⅰ 5～10min（2）二甲苯Ⅱ 5～10min（3）无水乙醇Ⅰ 1～3min（4）无水乙醇Ⅱ 1～3min（5）95%乙醇Ⅰ 1～3min（6）95%乙醇Ⅱ 1～3min（7）80%乙醇 1min（8）蒸馏水 1min（9）苏木素液染色 5～10min（10）流水洗去苏木素液 1min（11）1%盐酸-乙醇 1～3s（12）稍水洗 1～2s（13）返蓝（用温水或1%氨水等） 5～10s（14）流水冲洗 1～2min（15）蒸馏水洗 1～2min（16）0.5%伊红液染色 1～3min（17）蒸馏水稍洗 1～2s（18）80%乙醇 1～2s（19）95%乙醇Ⅰ 2～3min（20）95%乙醇Ⅱ 2～3min（21）无水乙醇Ⅰ &, nbsp; 3～5min（22）无水乙醇Ⅱ 3～5min（23）石炭酸-二甲苯 3～5min（24）二甲苯Ⅰ 3～5min（25）二甲苯Ⅱ 3～5min（26）二甲苯Ⅲ 3～5min（27）中性树胶封固注：①（12）和（13）项可省去，但（14）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。
②（23）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。
2．冰冻切片HE染色（1）冰冻切片固定 10～30s（2）稍水洗 1～2s（3）苏木素液染色（60℃） 30～60s（4）流水洗去苏木素液 5～10s（5）1%盐酸-乙醇 &n, bsp; &nbs, p; &nb, sp; 1～3s（6）稍水洗 1～2min（7）返蓝（用温水或1%氨水等） 5～10s（8）流水冲洗 15～30s（9）0.5%伊红液染色 1～2min（10）蒸馏水稍洗 1～2min（11）80%乙醇 1～2min（12）95%乙醇 1～2min（13）无水乙醇Ⅰ 1～2min（14）无水乙醇Ⅱ 1～2min（15）石炭酸-二甲苯 2～3min（16）二甲苯Ⅰ 2～3min（17）二甲苯Ⅱ 2～3min（18）中性树胶封固注：①（7）和（8）项可省去，但（9）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。
HE染色
HE染色实验步骤及常见问题解析一、HE染色HE染色全名为苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法，是最基本的也是最重要的病理学染色技术。
一张质上乘的HE切片是病理医生得以做出正确诊断的关键。
HE染色是目前国内外病理诊断上广泛采用的常规染色方法。
切片质量的好坏，可直接影响疾病诊断的及时与准确性。
因此，能制作出一张高质量的HE染色切片，是必须掌握的技术之一。
二、染色原理1.细胞核染色原理：苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。
苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2.细胞浆染色原理：细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。
当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。
因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。
伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。
3.分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。
在HE染色中用0.5%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木精的醌型结构，使组织与色素分离而褪色。
经苏木精染色后，必须用0.5%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木精染料和细胞浆吸附的苏木精染料脱去，在进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
病理片HE染色步骤
病理片HE染色步骤：烤片80度半小时(1)二甲苯（Ⅰ）5min(2)二甲苯（Ⅱ）5 min(3)二甲苯（III）5min(4)100%乙醇（Ⅰ）2min(5)90%乙醇（Ⅱ） 2 min(6)80%乙醇（III）2min(7)70%乙醇（IV）2 min(8) 流水冲洗5min(9) 苏木精液染色5 min(10) 流水稍洗去苏木精液1-3 s(11) 1%盐酸乙醇1-3 s(12)流水过洗至返蓝(13) 0.5%伊红液染色1-3 min(14) 蒸馏水稍洗1-2 s(15) 80%乙醇稍洗1-2 s(16) 95%乙醇（Ⅰ）2-3 s(17) 100%乙醇（Ⅱ）3-5 s(18) 二甲苯（Ⅰ）2 min(19) 二甲苯（Ⅱ）2 min(20) 二甲苯（Ⅲ）2 min(21) 中性树胶封固* 冷冻切片HE染色步骤：（1）冰冻切片固定10～30 s（2）水洗1～2 s（3）苏木精液染色（60℃）30～60 s（4）流水洗去苏木精液5～10 s（5）1%盐酸乙醇1～3 s（6）稍水洗1～2 s（7）促蓝液返蓝（8）流水冲洗15～30 s（9）0.5%曙红液染色30～60 s（10）蒸馏水洗1～2 s（11）80%乙醇1～2 s（12）95%乙醇1～2 s（13）无水乙醇1～2 s（14）石炭酸二甲苯2～3 s（15）二甲苯（Ⅰ）2～3 s（16）二甲苯（Ⅱ）2～3 s（17）中性树胶封固。
H-E染色评定标准：（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕；（2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。
HE染色步骤
HE染色步骤1．将于60℃烤箱中的烤片取出后立即放入二甲苯Ⅰ（透明）中15min，若切片已放置已久，则在浸二甲苯之前需将切片在60℃烤箱中烤2h以上；2．将切片于二甲苯Ⅱ15min，应观察到组织切片呈透明状，否则继续浸于二甲苯中；3．切片浸于1/2酒精+1/2二甲苯5min；4．将切片从二甲苯中取出稍甩掉二甲苯，于梯度乙醇中脱去二甲苯：无水乙醇Ⅰ5min→无水乙醇Ⅱ5min →95%酒精5 min→90%酒精5min→80%酒精5min→70%酒精5min；5．切片从70%酒精取出后稍冲洗：浸洗于蒸馏水Ⅰ5min →蒸馏水Ⅱ5min；6．蒸馏水浸洗后稍甩干水分用苏木精染色约15min；7．苏木精染色后用自来水冲洗(稍洗)；8．冲洗后用1%盐酸酒精（99毫升70%酒精+1毫升浓HCl）镜检分化，操作时可以按先浸10S后用自来水稍冲洗，吸水纸吸掉水珠后镜检，若观察到细胞质部分染色很浅而核仍较深则自来水冲洗约15分钟（时间可为几分钟至1小时不等，以充分洗掉HCl），否则分化不全时则继续学浸于盐酸酒精中至20S、30S等直至达到满意染色。
9．冲洗后判断染色，浸入1%氨水酒精（99毫升70%酒精+1毫升浓氨水）迅速（约几s至半分钟不等，不同的组织情况不同，需进行摸索）取出用蒸馏水冲洗后于蒸馏水Ⅰ(3min) →蒸馏水Ⅱ(3min)；10．甩干水分，1%伊红(水溶性伊红Y 1g溶于100毫升85%酒精)染色约3min，若着色困难可在每100毫升染液中加入1～2滴冰醋酸，使易着色且不易脱色；11．70%酒精稍冲洗切片将伊红洗掉，之后则梯度乙醇浸洗（脱水作用）：70%酒精(1 min) →80%酒精(1min) →90%酒精(3min) →95%酒精(2min) （此段时间应尽量缩短，因伊红易在95%酒精中脱色）→无水酒精Ⅰ(5min) →无水酒精Ⅱ(5min) ；12．1/2二甲苯+1/2酒精(5min) →二甲苯Ⅰ(5min) →二甲苯Ⅱ(15min)；13．将染色完成的切片取出，确保二甲苯未干燥，迅速用移液枪吸取树胶滴在组织上，盖上盖玻片，待凝固后观察结果。
结晶紫染色液配制及使用说明
规格
货品名称
500ml 结晶紫水溶液(0.1%)
500ml 核固红染色液(0.1%)
100ml 天狼星红染色试剂盒
500ml 0.5%伊文斯蓝/埃文斯蓝溶液
7×50ml 茜素红 S 染色液(1%,pH4.2)
2*50ml 0.2%核固红染色液
2*100ml 改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液
100ml 苏木素伊红(HE)染色液
革兰氏染色液试剂盒
4×10ml 苏木素伊红(HE)染色液
醋酸洋红染色液
100ml Core 苏木素染色液
姬姆萨原液
100ml Core 苏木素染色液
姬姆萨工作液
100ml Carazzi 苏木素染色液
瑞氏-姬姆萨复合染液
100ml Carazzi 苏木素染色液
瑞氏染液
50ml Delafield 苏木素染色液
结晶紫染色液(2.5%)
10ml Delafield 苏木素染色液
结晶紫染色液(1%)
10ml Gill 苏木素染色液(Gill No.1)
结晶紫染色液(0.1%)
10ml Gill 苏木素染色液(Gill No.1)
荚膜染色液（试剂盒）
50ml×2 Gill 苏木素染色液(Gill No.2)
结
晶
紫
染
色
液
(
1
%
)
编码 北京华越洋生物 GT79031-10ml 北京华越洋生物 GT79032-100ml 北京华越洋生物 GT79033-500ml
产品说明：
品名
规格
单位
结晶紫染色液(1%) 10ml
瓶
结晶紫染色液(1%) 100ml
组织he染色步骤
设备用具：切片机、恒温箱、溶蜡箱、玻璃缸、载玻片、盖玻片、手术刀片、镊子、包埋盒。
试剂：10％福尔马林、酒精、二甲苯、固体石蜡、苏木精、酸水、氨水、酒精伊红染色剂型、加拿大树胶（二）HE染色石蜡切片的制作过程步骤一：取材与固定：取动物新鲜组织块(一般厚度不超过0．5厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林，Bouin氏固定液)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。
步骤二：脱水透明：一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。
再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。
步骤三：浸蜡包埋：将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。
待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器(如折叠一小纸盒)，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。
冷却凝固成块即成。
包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。
步骤四：切片与贴片：将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。
切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。
步骤五：脱蜡常用HE染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。
苏木精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。
伊红(Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。
染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后入蒸馏水，就可染色。
步骤六：染色HE染色过程是：①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。
②酸水及氨水中分色，各数秒钟。
③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。
④入70％和90％酒精中脱水各10分钟。
⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟。
步骤七：脱水透明：染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。
He染色技术实验报告
He染色技术实验报告实验目的：本实验旨在通过He染色技术对细胞或组织样本进行染色，以观察其结构特征和形态变化，进而分析细胞或组织的健康状况。
实验原理：He染色技术是一种常用的组织学染色方法，通过使用苏木精（Hematoxylin）和伊红（Eosin）两种染料对细胞或组织样本进行染色。
苏木精主要对细胞核进行染色，使其呈现蓝色；而伊红则对细胞质进行染色，使其呈现红色。
通过这种对比染色，可以清晰地观察到细胞核与细胞质的形态和结构。
实验材料：1. 待染色的细胞或组织样本2. He染色液（苏木精和伊红混合液）3. 酒精系列（70%、90%、95%、100%）4. 二甲苯5. 显微镜载玻片和盖玻片6. 吸水纸7. 显微镜实验步骤：1. 将待染色的细胞或组织样本固定在载玻片上。
2. 用70%酒精轻轻清洗样本，去除杂质。
3. 依次使用90%、95%、100%酒精进行脱水处理。
4. 将样本浸入二甲苯中进行透明处理。
5. 将样本从二甲苯中取出，滴上He染色液，染色时间根据样本不同而有所变化，一般为5-10分钟。
6. 染色完成后，用吸水纸吸去多余的染色液。
7. 用70%酒精轻轻冲洗样本，去除未结合的染料。
8. 将样本浸入水中，轻轻摇动，使染色更加均匀。
9. 用吸水纸吸干水分，然后进行脱水、透明处理。
10. 最后，将样本放在显微镜下观察，记录细胞或组织的结构特征。
实验结果：通过He染色技术，我们观察到细胞核呈现深蓝色，细胞质呈现粉红色。
细胞边界清晰，细胞核与细胞质的对比明显，有助于对细胞形态进行详细分析。
实验讨论：He染色技术是一种简便、快速的染色方法，适用于多种细胞和组织的染色。
然而，染色效果可能会受到样本固定、染色时间、冲洗等因素的影响。
因此，在实验过程中需要严格控制操作步骤，以确保染色效果的准确性。
实验结论：本实验成功地应用了He染色技术对细胞或组织样本进行了染色，观察到了清晰的细胞结构，为进一步的细胞形态分析和病理学研究提供了基础。
组织常规HE染色
5min；
❖ 6．90%乙醇
5min；
❖ 7．80%乙醇,
5min；
❖ 8．70%乙醇
5min；
❖ 9．蒸馏水，
3min;
❖ 10．苏木素
5min;
❖ 11．流水,
2min;
❖ 12．1%盐酸酒精,
10s;（此步骤较为重要）
❖ 13．流水,
50min;
❖ 14．蒸馏水,
3min;
❖ 15．伊红
4min;
组织透明
❖ 原理：透明剂具有与酒精和石蜡相混合的性质，当 二甲苯渗入组织后，酒精即被置换，这时组织内出 现一种透明状态，亦称透明。
❖ 注意： (1).透明不彻底，石蜡难渗入组织，透明过 度则组织易使组织收缩和变脆。
❖ （2）.二甲苯必须保持无水。 ❖ （3）. 二甲苯透明的时间不宜过长。 ❖ 其它透明液：甲苯，苯，仿 ，香柏油，冬青油
0:20
❖ 6.
100%ALC
0:20
❖ 7.
XYL
0;05
❖ 8.
XYL
:10
❖ 10.
WAX
0:20
❖ 11.
WAX
0:20
❖ 12.
WAX
0:20
石蜡切片
❖ 切片完整、贴片 恰当
❖ 切片较薄和均匀 ❖ 无皱折 ❖ 无刀痕
贴片烤片
❖ 切出的蜡片置恒温水中， 水温约为39～42℃
❖ 要求 ❖ 1.材料要新鲜; ❖ 2.保持组织的原有状态,避免变形; ❖ 3.正确选择所需部位; ❖ 4.组织快的大小一般为1.0cm×1.5cm×0.2cm; ❖ 5.避免各种穿刺标本,内镜钳取物等活检小组织丢失.
组织固定
❖ 固定的目的：保持细胞与生活时的形态相似，防止自溶与腐败。 ❖ 常用固定剂 ❖ 一.甲醛（HCHO），饱和量为40%，配制百分浓度时将饱和量视为
(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书
苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。
苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。
带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。
伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。
此染色法可观察到清晰的细胞结构。
样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。
伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。
返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。
由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。
使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。
【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。
保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。
产品使用效期为2年，具体效期见标签。
【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。
为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
苏木精染色
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
HE染色常规试剂配制
1．Harris氏苏木素（1990）
苏木素2.5g
无水酒精25ml
硫酸铝钾（钾明矾）50g
蒸馏水500ml
黄*色氧化汞1.25g
冰醋酸20ml
配制时，先将苏木素溶于酒精（平时也可将苏木素以10%的浓度溶解好，贮存备用），取一2000ml的烧杯，倾入钾明矾，加入蒸馏水，于电炉上加热，熔解钾明矾，完全熔解后，待温度至90℃左右时，加入预先溶解好的酒精苏木素，继续加热至沸腾，延续3-5min，此时溶液逐渐加深，变为紫红色，拔离电源，加入黄*色氧化汞，当充分氧化后，重新插上电源继续加热3-5min，此时溶液变深紫色，拔去电源，直接将烧杯插入预先备好的冰水里，放于暗处，第二天过滤后加入冰醋酸，即可使用三个月，但据我们的实践及多年的经验认为，只要掌握好切片的“无水化”，该染液可反复使用达一年之久（天天使用）。
注意事项：
①苏木素一定要预先溶解，否则较难彻底溶解。
②加入黄*色氧化汞后，可产生大量的气泡，因此，配制500ml的溶液，一定要选择2000ml以上的容器，否则液体便会溢出。
③当溶液变为深紫色后，应终止氧化，烧杯应直接插入冰水中，不要担心玻璃瓶会爆裂，因烧杯经特殊处理的，不会有爆裂的危险，如果有，那是属于产品质量问题。
迅速冷却的主要目的是不让溶液过度氧化，以免缩短溶液的使用寿命。
④溶液过滤后方加入冰醋酸，不要颠倒过来。
如果加入冰醋酸后再过滤，过滤速度将非常慢，这是因为醋酸会使滤纸中的纤维膨胀，增加了密度，使溶液不易通过，导致过滤时间延长。
⑤该苏木素在使用一段时间后，可以在表面产生金属膜。
当出现这种现象时，可用粗滤纸捞去，否则贴于切片上将较难除去。
⑥苏木素加入冰醋酸后，其PH值在2－2.28之间。
2. 伊红1g
75%酒精100ml
先将伊红用蒸馏水(少许)调成浆糊状，再加入酒精，边加边搅拌，直到彻底溶解，此时试剂有些混浊，取少许冰醋酸，加入到试剂中去，试剂逐渐转变为清亮，呈鲜红色，染出切片，效果很好。
3.1%盐酸酒精:99份无水酒精加上1份浓盐酸。