初期培养条件对甘蓝和萝卜原生质体培养效果的影响
大棚蔬菜种植中的光照条件对营养素合成和积累的影响研究
大棚蔬菜种植中的光照条件对营养素合成和积累的影响研究大棚蔬菜种植作为一种现代化的种植方式，已经成为满足日益增长的蔬菜需求的重要途径。
而光照条件作为大棚蔬菜生长的重要环境因素之一，对于蔬菜的营养素合成和积累有着重要的影响。
本文将探讨大棚蔬菜种植中光照条件对营养素合成和积累的影响，并提出相应的研究结果和建议。
首先，光照是植物进行光合作用的重要条件之一，光合作用是植物通过光能将二氧化碳和水转化为有机物质的过程。
光合作用中的光反应和暗反应是蔬菜营养素合成的关键过程。
光反应中，光能转化为化学能，产生能量丰富的三磷酸腺苷（ATP）和还原型辅酶NADPH。
暗反应中，ATP和NADPH提供能量和电子，与二氧化碳反应，合成有机物质。
因此，光照条件的好坏将直接影响蔬菜营养素的合成和积累。
其次，光照条件对大棚蔬菜中一些重要营养素的含量和积累量具有明显的影响。
研究表明，适宜的光照条件可以促进蔬菜中维生素C、叶绿素、胡萝卜素和类黄酮等营养素的合成和积累。
例如，适当的光照条件可以提高蔬菜中维生素C的含量，维生素C是一种重要的天然抗氧化剂，对预防慢性疾病和提高人体免疫力具有重要作用。
而光照不足则会使蔬菜中的这些营养素含量减少，降低了蔬菜的营养价值。
此外，光照条件还会影响蔬菜中的矿物质含量。
矿物质是人体所需的一类重要营养素，包括钙、钾、镁、铁、锌等。
研究表明，适宜的光照条件可以提高蔬菜中矿物质的含量。
例如，适当的光照可以促进蔬菜中钙的合成和积累，增加蔬菜的钙含量，对于满足人体对钙的需求具有重要意义。
而光照不足则会降低蔬菜中矿物质的含量，影响人体对这些重要营养素的摄取。
最后，为了提高大棚蔬菜中营养素的合成和积累，我们可以采取一些措施来改善光照条件。
首先是合理选择大棚的位置和方位，确保大棚能够充分接受阳光的照射。
其次是对大棚内的光线进行优化，可以利用反射材料、光导设备等来增加蔬菜叶面的光照强度。
此外，还可以根据不同蔬菜的生长需求，合理设定光照的强度和持续时间，提供适宜的光照条件，促进蔬菜的营养素合成和积累。
培育技术对农产品质量与营养价值的影响
培育技术对农产品质量与营养价值的影响农业是人类社会的基础产业，而农产品则是人类生活不可或缺的重要组成部分。
然而，随着人口的增加和城市化进程的加速，传统农业面临着越来越多的挑战，如土地资源的匮乏、气候变化的影响等。
为了解决这些问题，并确保农产品的质量和营养价值，培育技术成为了现代农业的重要手段之一。
培育技术包括了育种、栽培、施肥等多个方面，可以全面提升农产品的产量、质量和营养价值。
首先，育种技术的进步可以培育出更优良的品种，提高作物的抗病能力和适应能力。
例如，通过转基因技术，科学家可以向作物中引入抗虫、耐旱等基因，使其能够在恶劣环境下生长，并减少对农药和化肥的依赖。
这样不仅可以提高农产品的产量，还能够减少对环境的污染。
其次，培育技术还可以增加农产品的品质。
传统农业中，很多作物因为生长过程中的自然局限，无法达到人们对品质的要求。
而通过培育技术，例如优化种植技术、精细化管理、营养调控等，可以提高农产品的口感、色泽、香气等品质特点。
同时，优良品种的选育也能够改善农产品的外观，使之更加符合市场需求。
此外，培育技术对提高农产品的营养价值也起到了关键作用。
在我国，膳食结构失衡和盲目追求产量导致了许多人们缺乏某些重要营养素的问题。
通过培育技术，科学家可以增加农产品中特定营养物质的含量，或者降低某些对人体健康有害的物质含量。
例如，通过改良稻谷的种质，培育出富含赖氨酸的高赖米，可以提供更多的必需氨基酸，改善人们的膳食营养状况。
又如，通过优化果蔬种植技术，可以增加农产品中的维生素、矿物质等营养素的含量。
然而，培育技术也面临着一些挑战和争议。
一方面，培育新品种的过程往往需要长时间和大量的投入，对科研人员和农民来说都是一项巨大的挑战。
另一方面，培育技术也存在风险，例如转基因作物可能对生态环境和人类健康造成潜在风险，需要更加严谨的评估和管理。
综上所述，培育技术对农产品的质量和营养价值有着积极的影响。
通过育种、栽培、施肥等多方面的技术手段，农产品的产量得以提高，品质得到提升，营养价值得以增加。
细胞工程知识点总结
《细胞工程》知识点总结一、细胞工程（Cell Engineering）：在体外对生物的细胞进行生长与分化的调控、遗传重组与改良，使其生产出人类所需要的产品。
包括：细胞培养、细胞融合、细胞器移植、核质移植、染色体移植、转基因等产品：生物的组织、器官、个体；抗体、多肽药物、蛋白质、酶；天然药物、色素、香精；等二、生物工程包括：发酵工程、酶工程、细胞工程、基因工程、蛋白质工程。
三、1996年Dolly羊的克隆是通过核移植技术，最后在体内生长、分化、发育而成的。
四、植物组织培养：在人工培养基上无菌培养整株植物或植物的器官、组织、细胞或原生质体。
又称为无菌培养（aseptic culture）、离体培养（in vitro culture）。
五、植物组织培养的类型：1、植株培养（Plant Culture）：在容器（玻璃瓶、透明塑料瓶等）中无菌培养完整的植株。
植株来源：由种子无菌萌发而来；通过植物器官、组织、细胞再生而来。
在快速繁殖中，后期的成苗和壮苗阶段属于植株培养。
（一般时间较短）2、胚培养（Embryo Culture）：无菌培养植物的成熟胚或未成熟胚，使其形成正常的植株。
目的：○1促进胚的提早萌发，缩短育苗时间；○2克服远源杂种胚的夭折，以获得新的育种材料；○3在科学研究中，用胚培养所得到的幼苗作为其它试验的材料。
3、器官培养（Organ Culture）：无菌培养植物的根、茎、叶、芽、花、果等器官，使其增殖或形成其它的组织或器官等。
4、组织培养（Tissue Culture）：指无菌培养植物各种组织（如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、皮层、薄壁组织、胚乳等），或由外植体分化形成的愈伤组织（callus），使其增殖或者分化。
注：Callus（愈伤组织）：具有旺盛分裂能力，但没有组织和器官分化的细胞群。
5、花药与花粉培养：无菌培养植物的花药（带花粉）或花粉，形成单倍体植株。
补充：有效的育种辅助手段：单倍体植株获得以后，通过染色体加倍，即得到可以稳定遗传的纯和二倍体，缩短植物育种年限。
萝卜丝菜实验实训报告
一、实验目的1. 了解萝卜丝菜组织培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握无菌操作技术，提高实验操作能力。
3. 观察萝卜丝菜组织培养过程中的形态变化，分析影响培养效果的因素。
二、实验材料与设备1. 材料：萝卜、MS培养基、琼脂、蔗糖、活性炭、维生素B1、青霉素、链霉素、无菌水、无菌滤纸、手术刀、镊子、酒精灯、培养箱、无菌操作台等。
2. 设备：显微镜、天平、电子分析天平、pH计、高压灭菌器、高压蒸汽灭菌器等。
三、实验原理萝卜丝菜组织培养是利用植物组织细胞的全能性，通过离体培养的方式，使植物组织细胞在人工控制的条件下生长发育成完整的植株。
实验过程中，通过调整培养基的成分、pH值、温度等条件，优化培养效果。
四、实验步骤1. 材料预处理（1）将新鲜萝卜洗净，去皮，切成约1cm×1cm的小块。
（2）用无菌水冲洗萝卜块，去除杂质。
（3）将萝卜块放入75%酒精中浸泡30秒，再用无菌水冲洗。
（4）将萝卜块放入5%次氯酸钠溶液中浸泡10分钟，再用无菌水冲洗。
（5）将萝卜块放入无菌滤纸中吸干水分。
2. 组织培养（1）将萝卜块切成0.5cm×0.5cm的小块，作为外植体。
（2）将外植体放入MS培养基中，置于无菌操作台中。
（3）用手术刀切取外植体，将其放入含有活性炭、青霉素、链霉素的MS培养基中。
（4）将外植体放入培养皿中，放入培养箱中培养。
3. 观察与记录（1）每天观察萝卜丝菜组织培养过程中的形态变化，记录培养天数、外植体生长状况等。
（2）定期用显微镜观察外植体生长情况，记录细胞分裂、生长点形成等。
（3）分析影响培养效果的因素，如培养基成分、pH值、温度等。
4. 数据分析（1）对实验数据进行统计分析，比较不同处理条件下萝卜丝菜组织培养的效果。
（2）根据实验结果，提出优化萝卜丝菜组织培养条件的建议。
五、实验结果与分析1. 实验结果（1）在适宜的培养基、pH值、温度等条件下，萝卜丝菜外植体能成功诱导出愈伤组织。
原生质体的培养
原生质体的培养原生质体（Protoplast）:指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。
一、原生质体的应用由于没有细胞壁，原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。
原生质体可以用于下面几种研究。
用作细胞杂交服务于作物改良用作遗传转化的对象研究细胞壁的发生过程筛选突变体膜的结构、运输、激素接受位点等的研究用于分离细胞器和大分子种质资源保存二、原生质体分离、纯化原生质体分离的最基本原则是保证原生质体不受伤害及不损害它的再生能力。
（一）分离方法机械法分离缺点：产量极低；应用的材料受限制；操作极费力酶法分离Cocking最早开展这方面研究，克服了机械法分离的缺陷，可分为直接法和顺序法两种。
酶法可在短时间内获得大量原生质体，缺点是：不纯的酶制剂所含杂质对原生质体可能有不同程度的毒害作用。
（二）影响原生质体分离的因素（酶法）从理论上讲，只要用适当的酶处理，就能从任何活组织中分离得到原生质体。
但是对于原生质体培养来说，要得到活性高、能进行分裂、形成愈伤组织、最后再生完整植株的原生质体则受许多因素的影响。
原生质体分离时主要应考虑取材、酶的种类、纯度、酶液的渗透压、酶解时间、温度等。
1. 外植体来源:生长旺盛、生命力强的组织和细胞是获得高活力原生质体的关键，并影响着原生质体的复壁、分裂、愈伤组织形成乃至植株再生。
用于原生质体分离的植物外植体有叶片、叶柄、茎尖、根、子叶、茎段、胚、愈伤组织、悬浮培养物（Suspensioncultures）、原球茎、花瓣和叶表皮等。
叶肉细胞是常用的材料,因为叶片很易获得而且能充分供应。
取材时，一般用刚展开的幼嫩叶片。
另一个分离原生质体的常用材料是愈伤组织或悬浮细胞，采用其作材料可以避免植株生长环境的不良影响，可以常年供应，易于控制新生细胞的年龄，处理时操作方便，无需消毒. 选用悬浮细胞作材料时，需每隔3-5天继代一次，培养一段时间使细胞处于旺盛生长状态。
一般在继代后的第三天游离原生质体。
萝卜诱导愈伤组织的影响因素_龙雯虹
第28卷第1期 西 南 农 业 大 学 学 报(自然科学版)V o.l28,No.1 2006年2月J ourna l o f South w est Ag ricult ura l University(N atural Science)F eb.2006文章编号:1000-2642(2006)01-0131-03萝卜诱导愈伤组织的影响因素龙雯虹,许 彬,张丽萍,张应华(云南农业大学 园林园艺学院,云南 昆明 650201)摘要:以萝卜种子为试材,研究了不同外植体、不同激素、不同激素浓度及继代培养对萝卜外植体形成愈伤组织的影响。
结果表明:(1)诱导萝卜愈伤组织最好的外植体为子叶。
(2)不同的生长素诱导效果不同,诱导效果为NAA> 2,4-D>IBA;(3)萝卜子叶和下胚轴诱导愈伤组织的最佳初代培养基均为M S+3m g/L6-BA+0.5m g/L NAA+ 3%蔗糖+0.8%琼脂。
(4)继代培养能促进愈伤组织的形成,子叶和下胚轴的最佳继代培养基分别为:M S+6mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂和M S+4m g/L6-B A+0.5mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂。
关键词:萝卜;激素;愈伤组织;子叶;下胚轴;继代培养中图分类号:S631.1 文献标识码:AF ACTORS I NFL UENC I NG CALL U S I N DUCT I ON I N RAD I S HLONG W en-hong,XU B in,ZHANG L i-p i n g,ZHANG Y i n g-hua(Co llege o f L andscape and H orticu lture,Y unnan A gr i cultural U nivers it y,K un m i ng,Y unnan650201,Ch i na)Abstrac t:H ypo co t y ls and coty l edons o f radish(Raphanus sa tivus L.)w ere used as explan ts and cultured on M S m edia s upp l em ented w i th d ifferen t co m bi nations o f ho r mones a t different concentrati ons.M ore and better calli w ere i nduced fro m co tyledons than from hypo co tyls. NAA w as better than2,4-D and2,4-D was bette r than IBA i n ca llus induction.T he opti m u m med i u m for call us forma ti on from co t y ledons and hypoco ty l s w ere M S+6-BA3m g/L+NAA0.5mg/L+3%sucrose+0.8%agar.Subculture pro m oted t he f o r m ati on o f calli and the opti m u m subcu lture wasM S+6-B A6mg/L+NAA0.5m g/L+3%sucrose+0.8%agar for coty ledon explants andM S+ 6-BA4m g/L+NAA0.5mg/L+3%sucrose+0.8%agar for hypoco tyl explan ts.K ey word s:radish;hor m one;ca ll us;co tyledon;hypoco ty l s;subcu lt ure萝卜(Raphanus sativus L.)是我国重要蔬菜作物之一,具有较高的食用价值和医用价值。
甘蓝与大白菜的原生质体融合(2)
·７卷８期梁丹等甘蓝与大白菜的原生质体融合３４４９质体平铺在２０％及１８％蔗糖溶液下，在６００ｒ／ｍｉｎ下离心３ｍｉｎ，去细胞碎片及不完整原生质体，使得原生质体得到纯化。
１．２．８聚集。
取下胚轴和子叶上层溶液于一个离心管中，在６００ｒ／ｒａｉｎ下离心１０ｒａｉｎ，去上清，混匀剩下的少许溶液滴在培养皿中间，静置１０—１５ｍｉｎ，使原生质体可以沉淀。
１．２．９原生质体融合的诱导。
向原生质体溶液周围滴加ＰＥＧ融合液，静置１０～１５ｍｉｎ，使原生质体粘连在一起，然后继续向原生质体溶液周围滴加高ｐＨ值高ｃａ溶液（ｐＨ值９．５）使原生质体融合。
大约４～５ｈ内可以通过倒置显微镜观察到原生质体的融合现象“。
２结果与分析２．１酶解条件的优化建立不同浓度配比的ｌ１１１ｌ酶液体系（ｙ甘露醇：Ｖ纤维素：Ｖ果胶酶＝２：１：１）后处珲材料，发现１８％甘露醇由于浓度大．渗透势变大，导致细咆破裂，而６％甘露醇则与细胞液浓度一致，能够维持细胞状态。
２％纤维素酶由于浓度不适宜，导致细胞酶解不完整；８％纤维索酶，２％果胶酶则可以较完整地酶解材料，获得完整原生质体。
最终获得优化体系：６％甘露醇＋８％纤维素酶＋２％果胶酶。
２．２酶解时间的优化在确定酶液成分及浓度后，要对酶解时间进一步确定，以每小时为单位，设置几个时间梯度进行观察。
结果发现，２～３ｈ酶解不充分，游离的原生质体很少；而在４—５ｈ的时候酶解比较充分，可以获得大量的游离原生质体；在７ｈ以后，原生质体开始出现破裂现象。
最终获得最佳酶解时间为４ｈ。
２．３原生质体分离结果在材料酶解４ｈ后，去少许溶液进行观察原生质体状态，大部分均呈圆形，散乱地游离在原生质体溶液各处，单个观察如图１所示。
注：Ａ：白菜下胚轴原生质体；Ｂ：甘蓝子叶原生质体。
Ｎ吐ｅ：Ａ．Ｈｙｐｏｃｏｔｙｌｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓｏｆｃａｂｂａｇｅ；Ｂ．Ｃｏｔｙｌｅｄｏｎｐｍｔｏ－ｐｌ∞ｔｓｏｆｃａｂｂａｇｅ．图１游离的原生质体Ｆｉｇ．１ＦｒｅｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔＳ２．４原生质体融合结果两种原生质体加入ＰＥＧ融合液后，只发生粘连，在洗涤过程中才发生膜融合。
新高考生物课后分层检测案40 植物细胞工程
新高考生物课后分层检测案40 植物细胞工程[基础巩固练]——学业水平一、二考点一 植物组织培养1．下图是某组织培养过程的简图。
下列有关说法，正确的是（ ）花粉粒――→① 愈伤组织――→② 胚状体――→③植株A ．花药离体培养的条件与种子萌发的条件完全相同B ．若花粉粒核中有两个或多个染色体组，则所得植株为二倍体或多倍体C ．②③过程都是细胞分化的过程，因此起作用的激素只有生长素D ．该过程体现了植物细胞的全能性2. （不定项选择）“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。
下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图。
以下说法正确的是（ ）A ．除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶和果胶酶B ．通常诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG 融合法和灭活病毒诱导法C ．杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D ．从愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程 考点二 植物体细胞杂交3．[2022·南京模拟]下列关于植物体细胞杂交的叙述，错误的是（ ）A ．不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程B ．参与杂种细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体C.植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种植株D ．杂种植株表现出的性状是基因选择性表达的结果4．[2022 ·大连模拟]如图为植物体细胞杂交过程，下列叙述错误的是（ ）A ．上述技术应用的生物学原理包括细胞膜的流动性、植物细胞的全能性B ．若细胞膜表面只有红色荧光，则融合的原生质体至少由两个番茄细胞形成C ．③过程为脱分化，过程中杂种细胞失去了其特有的结构和功能D．当细胞分裂素的效应高于生长素时，主要诱导根原基的形成5．如图列举了几种植物的育种方式，下列相关叙述正确的是（）A．甲过程形成的细胞c内的染色体数一定是a细胞内染色体数的两倍B．乙方式射线处理后可以获得大量的具有有利性状的材料C．通过丁方式，细胞c发育成新植株涉及同源染色体的联会与分离D．与杂交育种相比，丙方式能克服远缘杂交不亲和的障碍考点三植物细胞工程的应用6．如图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程，据图分析错误的是（）A．①过程需用酶解法去除细胞壁B．②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变C．③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能D．④过程是再分化过程，涉及细胞的分裂和分化[提能强化练]——学业水平三、四7．[2022·河南许昌市长葛一中高三阶段测试]两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。
影响原生质体培养的因素课件
生物融合
总结词
利用生物酶或微生物诱导原生质体融合。
详细描述
生物融合技术利用某些生物酶或微生物分泌 的物质，促进原生质体的融合。该方法对细 胞损伤较小，但融合效率相对较低，需要进
一步优化和改进。
PART 06
原生质体培养的应用与展 望
在细胞生物学研究中的应用
细胞膜结构和功能研究
原生质体培养可用于研究细胞膜的组成、结构和功能，以及膜运 输、信号转导等过程。
THANKS
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REPORTING
VS
原生质体的渗透压一般较低，培养基 的渗透压过高或过低都可能对原生质 体造成伤害。因此，在选择培养基时 ，要根据原生质体的渗透压进行选择 ，以确保适宜的渗透压条件。同时， 在培养过程中，要避免培养基过度蒸 发或稀释，以保持适宜的渗透压。
光照
光照是影响原生质体培养的环境因素之一，它能够影响原生质体的光合作用和形态建成。
浓度优化
优化无机盐浓度，以促进原生质体的生长和分裂 。
生长因子
生长因子
促进细胞分裂和增殖的微量 有机物。
种类选择
根据细胞类型选择适当的生 长因子。
浓度调整
根据实验需求，调整生长因 子的浓度，以获得最佳的生 长效果。
PART 03
培养条件
温度
温度是影响原生质体培养的重要因素之一，过高或过低的温度都可能对原生质体造成伤害。
细胞活力
原生质体培养时，细胞的活力对其分 裂和生长能力具有显著影响。
高活力的细胞具有更强的分裂和生长 能力，能够更好地适应原生质体培养 的环境。因此，选择活力较高的细胞 进行原生质体培养是提高培养效率的 重要因素。
PART 05
原生质体的融合与遗传转 化
结球甘蓝原生质体培养及植株再生
结球甘蓝原生质体培养及植株再生本试验以结球甘蓝不同熟性的6个品种为材料,对影响其原生质体培养的主要因素进行了探讨；初步建立了适合结球甘蓝原生质体游离、纯化、收集、培养以至再生出完整植株的实用技术体系；为其非对称细胞融合及品种改良与创新等研究奠定了基础。
研究结果如下：1.原生质体的游离条件优化表明：以2% Cellulase R-10+0.5% Pectolase Y-23 +9CPW+5mmol/L MES酶液组合的酶解效果最佳。
其对4d苗龄的结球甘蓝下胚轴原生质体进行游离纯化,16h后以100rpm,4min的离心条件对游离的原生质体进行纯化,得到原生质体产量为16.85×105个/g,所获得原生质体活力为86.3%。
2.原生质体培养条件的优化表明：以YP+NAA 0.2mg/L+2,4-D 0.5mg/L+ 6-BA0.2mg/L的原生质体培养效果最佳,10d后细胞分裂频率与40d后植板率分别为20.8%和0.53%。
采用固液双层培养的方法,细胞分裂频率与液体浅层培养相差不大,但植板率明显大于液体浅层培养法获得的植板率。
由MS培养基添加NAA0.025mg/L+2,4-D0.025mg/L+6-BA0.1mg/L对结球甘蓝下胚轴原生质体微愈伤组织增殖效果好。
MS培养基附加6-BA 2g/L,ZT 0.5mg/L对结球甘蓝下胚轴原生质体再生愈伤组织芽分化效果较佳。
在结球甘蓝原生质体培养再生植株过程中,往芽分化培养基中添加AgNO37.5mg/L,能明显提高再生绿芽的分化,出芽率由51.3%提高至65.2%,褐化率下降约5个百分点。
取生长状态好的再生绿芽,以1/2MS附加IBA 0.2mg/L为生根培养基进行生根培养,能全部生根获得完整再生植株,植株再生率为100%。
3.再生植株差异性检测表明：所获得的QL再生植株,在外观形态上基本与母本植株相同,仅有数株表型略有不同。
流式细胞仪细胞倍性检测结果显示,所检测的原生质体再生植株,其中有79.6%为正常二倍体,9.1%为单倍体植株,6.8%为单/二倍体嵌合体植株,4.5%为四倍体植株。
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在原生质体培养中， 初期的培养条件，特别是培养基组成 、 激素、渗透压 、 培养密度等条件对原生 质培养的效果形成影响很大， 赢接影响细胞的分裂频率及分化。同时， 也对后期的植株再生产有重要影 响【 。因而 ，找 出适宜的原生质体初期培养条件就显得非常重要 。 卜 引
１ 材料和方法
１ 试验材料 ． １ 本试验中所用甘蓝品种有：金 １０ （ １ 、紫甘蓝 （ ２ 、冬王 （ ３ ；萝 卜 ０号 Ｃ） ｃ） Ｃ） 品种有心里美 （ １ Ｒ）
和 守 口大 根 （ ２ 。 Ｒ ） １ ． 无菌 苗培养 ２
甘蓝和萝 卜 种子用 ７ ％乙醇浸泡 １ ｎ ０ ． ｍｉ，无菌水冲洗 １ ５ 次，再用 ｌ 次氯酸钠灭菌 １ ｎ后，无 ％ ５ｍｉ 菌水冲洗 ３ 次，接种于含琼脂 Ｏ ％、蔗糖 Ｏ３ ． ６ ． ％、ｐ ． 的 ＭＳ固体培养基中培养。 Ｈ５８ １ 原生质体分离 、收集与培养 ． ３ 取１ Ｏ日苗龄 的甘蓝子叶、萝 卜 子叶和下胚轴 （ 子叶每处理 ４ Ｏ片，下胚轴 ２ 根 ） Ｏ ，在 Ｃ Ｗ 盐溶液 Ｐ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ａｔｔ ｅ ｅ ｒｙ ｓ ｇ ｆ ｃ ｔ ｌ ｄ ｎ ａ ｄ ｈ ｐ ｃ ｔ ｌ ｐ ｏ ｏ ｌ ｓｓ ｃ ｌ ｒ ｆ ｃ ｂ ａ ｅ ａ ｄ ｒ ｄ ｓ ， ｔｅ ｈ ｇ ｅ ｌｄ ｖ ｓｏ ｓｒ ｃ ： ｈ ａ ｌ ｔ ｅ ｏ ｏ ｙ ｅ ｏ ｎ ｙ ｏ ｏ ｙ ｒ ｔ ｐ ａ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ａ ｂ ｇ ａ ｕ ｎ ａ ｉｈ ｈ ｉ ｈ ｃ ｌ ｉ ｉｉ ｎ
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第１ ３卷 第 ２期 ２０ ０ ６年 ６月
天 津 农 学 院 学 院
ｖ０ ．３ Ｎｏ２ １ ． ． １
Ｊ ｕｎ ｌ ｆ ｉ ｊ ｇ ｃ ｌ ｒｌ ｉ ｒｉ ｏ ｒａｏ ａ ｉ Ａ ｒ ｕｔ ａＵｎｖ ｓｙ Ｔ ｎｎ ｉ ｕ ｅ ｔ
ｆｅ ｕ ｎ ｙｃ ｎｂ ｂａｎ ｄｆｏ ｉ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ｖ ｄＭ Ｓｍｅ ｉｍ ｎ ｒｑ ｅ ｃ ａ ｅｏ ｔｉ ｅ ｍ ｒ ｍｐ ｏ ｅ ｄｕ ａ ｄＫＭ ８ ｄｕ ６ ％ ｄｖｓｏ ｒｑ ｅ ｃ ｓ ｂａｎ ｄｂ ｓ ｇ０５Ｍ ｐｍｅ ｉｍ． ５ ｉｉｉｎｆｅ ｕ ｎ ｙｗａ ｔｉｅ ｙｕ ｉ ． ｏ ｎ
摘 要： 在甘蓝、 １ 萝 － 子叶及下胚轴原生质体的初期培养中， 改良ＭＳ培养基及 Ｋ ｐ Ｍ８ 培养基可以
获得较高 的细胞分裂率 。 Ｏ５Ｍ 的甘 露醇调节渗透压可 以达 到 ６ ％的细胞 分裂 率。在甘蓝子 叶原 用 ． ５ 生质体培养 中，最佳的初期培养 密度 为 １ ０／ Ｌ。 ×１ ｍ 关键词 ：甘 蓝：萝 Ｉ － ：原生质体 ：初期培 养 中图分类号 ： ６ ３６ ￥０ ． 文献标识码 ： Ａ
收稿 日 期：２０ ３２ ０６０—４ 作者简介： 孙振久 （９６ ） 男， 宁本溪 人， １５一 ， 辽 副研究员 ， 士， 博 主要从事蔬菜育种学和生物 技术的研 究 。 系电话 ： ０２ ２７３ １ 联 （２ ） ３８５０
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中【 ５ ｉ ｎ后，子叶切成 １ ＩＩ 浸 ｍ Ｉ 宽的细丝。下胚轴从中间切开一分为二，然后分别放入 ２ Ｌ酶解液 ＩＹ Ｔ ０ ｍ
５ ｍ ｎ ０ ／ ｉ 振荡处理 ２ 进行酶解 。 ｒ ～４ ｈ 酶解液及培养液经 Ｏ ２ｔ 混合纤维素微孔滤膜过滤灭菌。原生质 ． ２ ａ ｍ 体培养用 ｃｌｗ ｌ浅层培养法。 ｅ ｅ ｌ ｌ
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文章编号： １０ — ３ ４（０ ６ ０ ０ ９ ０ ０８５９ ２０） ２０２ ３
初 期培养条件 对甘 蓝和 萝 ｌ ＼ 原生质体培养 效果 的影 响半
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（ ．天津农学 院 园艺系 ，天津 ３ ０ ８ ：２ １ ０ ３４ ．天津人学 农业 与生物 工程学院 ，天津 ３ ０ ７ ） ０ ０ ２