粪便钙卫蛋白与炎症性肠病活动性 关系的探讨
粪便钙卫蛋白在溃疡性结肠炎诊疗中的研究概况
综述China &Foreign Medical Treatment 中外医疗粪便钙卫蛋白在溃疡性结肠炎诊疗中的研究概况张富，林晓东，吴光耀，李松湖，黄玫婷，黄亮东莞康华医院消化内科，广东东莞 523000［摘要］ 溃疡性结肠炎以加重和缓解交替出现为特点，确定一种监测方法预测炎症的活动性尤为重要。
粪便钙卫蛋白临床上应用较广泛，在几种粪便生物标志物中，粪便钙卫蛋白在预测静止期肠炎黏膜愈合更准确，生物标志物监测相较于结肠镜具有无创、操作简便、患者易接受等优点；能直接反映肠管炎症反应中粒细胞的状态，能让活动期的溃疡性结肠炎患者避免不必要的侵入性手术，在疾病情况的评估、临床管理、随访等方面有望形成新的评分和管理策略。
［关键词］ 粪便钙卫蛋白；溃疡性结肠炎；研究进展［中图分类号］ R4 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1674-0742（2023）03(a)-0189-05Research Overview of Fecal Calprotectin in the Diagnosis and Treatment of Ulcerative ColitisZHANG Fu, LIN Xiaodong, WU Guangyao, LI Songhu, HUANG Meiting, HUANG LiangDepartment of Gastroenterology, Dongguan Kanghua Hospital, Dongguan, Guangdong Province, 523000 China [Abstract] Ulcerative colitis is characterized by exacerbation and remission alternately. It is particularly important to determine a monitoring method to predict the activity of inflammation. Fecal calprotectin is widely used clinically. Among several fecal biomarkers, fecal calprotectin is more accurate in predicting mucosal healing in quiescent enteri‐tis. Compared with colonoscopy, biomarker monitoring has the advantages of non-invasiveness, simple operation, and easy acceptance by patients, which can directly reflect the state of neutrophils in the intestinal inflammatory response,and can avoid unnecessary invasive surgery for patients with active ulcerative colitis. It is expected to form a new score and management strategy for the convenience of disease assessment, clinical management, and follow-up.[Key words] Fecal calprotectin; Ulcerative colitis; Research progress溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC ）是一种病因不明的慢性炎症性肠病，临床过程是不可预测的，以加重和缓解的交替时期为标志[1]。
粪便新喋呤及钙卫蛋白对炎症性肠病活动性的诊断价值
粪便新喋呤及钙卫蛋白对炎症性肠病活动性的诊断价值叶院宁;余纳;孙文荣;张钰坪;陆恒;吴晓辰;王少东;汪芳裕【期刊名称】《医学研究生学报》【年(卷),期】2016(29)2【摘要】Objective Fecal biomarkers have emerged as an important tool for assessing and monitoring disease activity in patients with inflammatory bowel disease ( IBD) .We aimed to investigate the diagnostic value of fecal neopterin and calprotectin in pa-tients with active inflammatory bowel disease and made comparison with that of serum C-reactive protein( CRP) . Methods A total of 151 consecutive patients with IBD (84 CD and 67 UC) provided 2 gram fecal samples for the measurement of fecal neopterin( FNP) and calprotectin( FCP) concentrations and 2 milliliter blood samples for the serum C-reactive protein measurement before undergoing a colonoscopy.ELISA was applied in the measurement.Clinical disease activities were scored independently according to the Best Crohn′s Disease Activity Index(CDAI) in patients with CD, while the Modi-fied Mayo Scores in patients with aprison was made in the relativity of each fecal marker and IBD activity score, the optimum value of diagnosing IBD acitivity as to each fecal marker, as well as sensitivity, specificity, moreover, receiver operating characteristic curve ( ROC) was drawn.50 healthy volunteers who received a normal colonoscopy were also enrolled as the control group and asked to give a 2 gram fresh stool sample. Results TheFNP and FCP concentrations in patients with IBD were significantly higher than those in healthy control group(P<0.05).Both FNP and FCP concentrations differed significantly in clinically active IBD when compared with those in patients with inactive disease( P<0.001) .In CD patients, the correlation coefficients of FNP and FCP with CDAI were 0.55 and 0.59, respectively(P<0.001).In UC patients, the correlation coefficients of FNPand FCP with Mayo scores were 0.74 and 0.77, respectively( P<0.001) .The correlation coefficients of serum CRP in CD and UC patients with clinical scores were 0.49 and 0.60, respectively(P<0.001).The area under the ROC curve(AUC) of FNP and FCP for the diagnosis of clinical activity in pa-tients with CD were 0.75 and 0.80, respectively.The AUC of FNP and FCP in UC patients were 0.85 and 0.90, respectively.The AUC of serum CRP in patients with CD and UC were 0.65 and 0.74, respectively.When combined FNP with FCP, the AUC in pa-tients with CD and UC were 0.85 and 0.92, respectively. Conclusion FNP is a novel reliable and non-invasive biomarker to evalu-ate clinical disease activity in patients with IBD as accurate as FCP, It is advisable to combine FNP with FCP to evaluate disease activi-ty in patients with IBD.%目的：粪便生物标志物目前已成为评价和监测炎症性肠病（ inflammatory bowel disease，IBD）活动性的一项重要工具。
粪便钙卫蛋白检测在肠道疾病诊断中的价值
粪便钙卫蛋白检测在肠道疾病诊断中的价值李昶;姜敏【摘要】钙卫蛋白(calprotectin)是近年来新发现的一种急性炎症标志物,最早于1980年从中性粒细胞中分离发现,是一种杂合性的钙结合蛋白,具有抗蛋白酶的活性,并因具有螯合锌离子的能力而具有抗热性.钙卫蛋白是中性粒细胞更新的标志物,具有抗微生物、调节免疫、抗增殖、传递信号等多种生物学功能,在许多炎症情况下升高.研究发现,炎症性肠病(IBD)患者粪便中的钙卫蛋白水平明显高于结肠癌患者及肠易激综合征(IBS)患者,并且同患者病变程度呈正相关.因此,可以作为一项诊断指标区分IBD、结肠癌、IBS,并用来监测IBD活动性,对疾病的复发、治疗效果具有重要指导意义.【期刊名称】《国际消化病杂志》【年(卷),期】2010(030)004【总页数】4页(P210-212,216)【关键词】钙卫蛋白;炎症性肠病;结肠癌【作者】李昶;姜敏【作者单位】110001,中国医科大学附属第一医院消化内科;110001,中国医科大学附属第一医院消化内科【正文语种】中文炎症性肠病(IBD)、结肠癌和肠易激综合征(IBS)是消化道常见的三种疾病,因为临床症状上都伴有腹痛、排便习惯和粪便性状的改变等特点,故需要借助一定的辅助检查方法加以鉴别。
如果一个标志物能可靠地把活动期的IBD与结肠癌、IBS区分开,那么它就可以用于指导临床诊断和治疗。
近年来,越来越多的临床医学者证实了粪便钙卫蛋白在IBD、结肠癌、IBS的诊断与鉴别诊断中的价值,很多文章也见诸相关国际期刊。
2005年3月在伯明翰召开的英国肠胃病学学会(BSG)年会,专题讨论了IBD-钙卫蛋白-IBS,将钙卫蛋白作为一个新的有用的诊断参考标志,用于区别IBD、结肠癌和IBS,评估IBD炎症活动性及黏膜治愈情况。
1 钙卫蛋白的概况钙卫蛋白是近年来新发现的一种急性炎症标志物,最早在1980年从中性粒细胞中分离发现,命名为L1蛋白。
粪便钙卫蛋白检测在肠易激综合征和炎症性肠病鉴别诊断中的意义分析
fective endocarditis in adults diagnosis,antimicrobial therapy,and management of complications:a scientific statement for healthcare professionals from the American Heart AssociationQj].Circulation,2015,132(15):1435-1486.[8]李佳，王树敏,胡淑华，等•感染性心内膜炎致病菌分布与临床特征[J].西部医学,2020,32(10):1488-1491.[9]ANANTHA N M,MAHFOOD H T,KALIL A C,et al.Early versus late surgical intervention of medical management for infective endocarditis:a systematic review and meta-analysis[J].Heart,2016,102(12):950-957.[10]梅莉.412例感染性心内膜炎的临床特点及预后因素分析[D].杭州：浙江大学,2020.口口郭小荣，郭成龙,崔巧梅，等.预后营养指数对老年骨质疏松症患者髓关节置换术后风险预测及影响因素分析[J1中国骨质疏松杂志,2020,26(7):967-971.[12]ODUNCU V,ERKOL A,KARABAY C Y,et al.Theprognostic value of serum albumin levels on admission in patients with acute ST-segment elevation myocardial infarction undergoing a primary percutaneous coronary in-tervention[J].Coron Artery Dis,2013,24(2)：88-94.[13]MARCULA M,DE SOUZA BUTO M F,MADALOSOB A,et al.Lymphocyte count and prognosis in patientswith heart failure]J].Int J Cardiol,2015,188:60-62. [14]HAYROGLU M I,KESKIN M,KESKIN T,et al.A no-•短篇论著•vel independent survival predictor in pulmonary embolism：prognostic nutritional index]J].Clin Appl Thromb Hemost,2018,24(4)-633-639.[15]WADA H,DOHI T,MIYAUCHI K,et al.Relationshipbetween the prognostic nutritional index and longterm clinical outcomes in patients with stable coronary artery disease^].J Cardiol,2018,72(2)：155-161.[16]KAHRAMAN S,ZENCIRKRAN A H,KALKAN A K,et al.Prognostic nutritional index predicts mortality in infective endocarditisQJ].Turk Kardiyol Dern Ars,2020,48(4)：392-402.[17]张智文，王山岭,刘静静，等.中性粒细胞/淋巴细胞比值预测急性心肌梗死患者新发心房颤动的临床意义[J1中国心血管杂志,2020,25(5):432-436.[18]CHEN Y,YE L J,WU Y,et al.Neutrophil-lymphocyteratio in predicting infective endocarditis:a case-control retrospective study[J].Mediators Inflamm,2020,27, 2020:858641&[19]MESHAAL M S,NAGI A,ELDAMATY A,et al.Neutrophil-to-lymphocyte ratio(NLR)and platelet-to-lym-phocyte ratio(PLR)as independent predictors of outcome in infective endocarditis(IE)[J].Egypt Heart J, 2019,71(1):13.(收稿日期=2021-10-11修回日期-2021-12-28)粪便钙卫蛋白检测在肠易激综合征和炎症性肠病鉴别诊断中的意义分析負红婷，徐元宏公安徽医科大学第一附属医院检验科，安徽合肥230000摘要：目的探讨并分析粪便钙卫蛋白(FCP)检测在肠易激综合征和炎症性肠病鉴别诊断中的意义。
粪便钙卫蛋白对炎性肠病诊断的临床应用研究进展
粪便钙卫蛋白对炎性肠病诊断的临床应用研究进展刘洋;韩晓芳【摘要】@@ 钙卫蛋白(calprotectin)是近年发现的一种与钙锌结合的、不均一复合蛋白,主要来自于中性粒细胞,也有少部分来源于单核细胞和反应性的巨噬细胞,广泛分布于粒细胞、上皮细胞及各种组织和体液中.具有抗微生物、免疫调节、信号传递、抗增殖及诱导细胞凋亡等生物学功能.新近的研究显示,钙卫蛋白在炎症性肠病(IBD)患者肠黏膜及粪便中的含量明显高于正常对照者,且稳定性要好于以往的粪便生物标记物,不仅可以作为评价疾病活动性的指标,而且还可以作为预测疾病复发、指导临床治疗等作用的指标.【期刊名称】《内蒙古医学杂志》【年(卷),期】2011(043)004【总页数】3页(P451-453)【关键词】粪便钙卫蛋白;炎性肠病;诊断【作者】刘洋;韩晓芳【作者单位】内蒙古医学院2008级,内蒙古,呼和浩特,010059;内蒙古自治区医院检验科,内蒙古,呼和浩特,010017【正文语种】中文【中图分类】R574.62钙卫蛋白(calprotectin)是近年发现的一种与钙锌结合的、不均一复合蛋白,主要来自于中性粒细胞,也有少部分来源于单核细胞和反应性的巨噬细胞,广泛分布于粒细胞、上皮细胞及各种组织和体液中。
具有抗微生物、免疫调节、信号传递、抗增殖及诱导细胞凋亡等生物学功能。
新近的研究显示,钙卫蛋白在炎症性肠病(IBD)患者肠黏膜及粪便中的含量明显高于正常对照者,且稳定性要好于以往的粪便生物标记物,不仅可以作为评价疾病活动性的指标,而且还可以作为预测疾病复发、指导临床治疗等作用的指标。
1 钙卫蛋白的结构和理化特性及检测方法钙卫蛋白首先是由Fagerhol于1980年从中性粒细胞中分离出来,当时命名为L1蛋白,后因发现其结构中含有钙并有抗微生物的特性又将这种具有保护性的、多功能、与钙结合的蛋白质被命名为钙卫蛋白。
它是一个分子量为36 kD的钙、锌结合蛋白。
便钙卫蛋白在炎性肠病中的生物学作用
镜下活组织检查 ， 属于侵入性检查 ， 但 且不 能检测
整个 胃肠 道 ， 同时需 要 专 业 熟 练 的操 作 员 与 不舒 服 的检 查前 准备 ， 者 常不 愿 接 受 。 临床 疾 病 活 动性 患 指数 是 一 种 相 对 比较 简 便 实 用 的 方 法 ， 主 观 性 但 强 ， 果判 定较 粗 糙 。这 样 ， 需 要 一 种简 单 、 速 结 就 迅 的、 敏度 高 、 异 性 强 、 价 的 、 侵 袭 性 的 方 法 灵 特 廉 非
・
综 述 ・
便 钙 卫 蛋 白在 炎 性 肠 病 中 的 生 物 学 作 用
万佳 红 柳越 冬
【 关键词 】 便 钙卫 蛋 白； 炎性肠病 ； 炎性标记物
炎 性肠 病 包 括 克 罗 恩病 （ｒｈ ’ ｉ ａｅ Ｃ ｃｏｎ Ｓｄｓ ｓ ，Ｄ） ｅ 和溃疡 性结 肠炎 （ｌ ｒｔｅｃｌｉ， Ｃ ， ｕｃ ａｉ ｏｔ Ｕ ） 它们 具有 慢 ｅ ｖ ｉｓ 性和反 复发 作 的临 床特 点 ， 因此 维 持 治 疗 和 预 防复 发成为 治 疗 的 关 键 。疾 病 活 动 性 的准 确 评 价 是 疗 效判定 和 治疗 方 案 调 整 （ 量 或停 药 ） 减 的依 据 。 目
世界 中西 医 结合 杂 志 ２０ ０ ９年第 ４卷第 １ 期
Ｗｏｌ ｏｒａ ｏ Ｉｔｇａ ｄＴａ ｉ ｎｌ ｎ ｓ ｒ ｅｉｉ ２ ０ Ｖ １ Ｎ ． ｒ Ｊｕ ｌ ｆ ｎｅｒｔ ｒｄ ｉ ａ ａｄＷｅｔ ｎＭ ｄｃｎ ｄ ｎ ｅ ｔ ｏ ｅ ｅ ０９，ｏ． ｏ １ ４，
・７３ ・
粪钙卫蛋白在炎症性肠病诊断和管理方面的研究进展
。 钙卫蛋白主要来源于中性粒
炎性反应中其浓度随着中性粒细胞增加而急 细胞，
］ ３ 剧升高［ 。人类粪便中钙卫蛋白浓度大约是血浆中
时， 诊断器质性肠道疾病的敏感度和特异度分别为
［ ］ ０ 具有重要鉴别价值。Ｄ 对 ８ ９ ％和７ ９ ％， ｉ ａ ｍ ａ ｎ ｔ ｉ等 １ 疑诊为 Ｉ ／ Ｂ Ｄ 患儿的研究发现， Ｆ Ｃ 浓度为 １ ０ ０μ ｇ ｇ
更新的中性粒细胞， 故粪钙卫蛋白（ 可间接反映 Ｆ Ｃ） 中性粒细胞在肠道的迁移， 其含量与粪便中排泄出 的
１ １ １
铟标记白细胞数量呈正相关， 为理想的替代选 。研究表明， Ｆ Ｃ 对Ｉ Ｂ Ｄ 的诊断及鉴别诊断、
择
［ ， ］ ３ ７ ８
华中科技大学同济医学院附属同济医 ４ ３ ０ ０ ３ ０ 作者单位： 武汉， 院消化内科 廖家智， ： Ｅ ｍ ａ ｉ ｌ ｌ ｉ ａ ｏ ｉ ａ ｚ ｈ ｉ ｔ ｈ ． ｔ ｍ ｕ ． ｅ ｄ ｕ ． ｃ ｎ 通信作者： ＠ ｊ ｊ ｊ
［ ］ １ ２
炎性反应活动度的评估、 治疗与随访、 疾病复发及 手术预后的预测等具有重要指导意义。 １ 与 诊断及鉴别诊断 由于 Ｆ Ｃ浓度在肠道发生急性炎性反应时急剧 升高， 故其对鉴别器质性与功能性胃肠疾病具有重要
［］ 腹泻为主要腹部症状 意义。Ｔ ｉ ｂ ｂ ｌ ｅ等 ９ 研究以腹痛、 的患者， 发现将 Ｆ ／ （ 即５ ／ ） Ｃ临界值设为１ ０ｍ Ｌ ０μ ｇ ｇ ｇ
［ ］ ３ 表明， 。 Ｆ Ｃ 能较好地评估Ｉ Ｂ Ｄ 的炎性反应活动度 １ ［ ］ ４ 对Ｉ Ｃ ａ ｎ ａ ｎ ｉ等 １ Ｂ Ｄ 患儿的研究发现， Ｆ Ｃ 具有良好
炎性反应 区 域 集 聚， 然后迁移至肠道后随粪便排
粪便钙卫蛋白联合血清学抗体检测诊断炎症性肠病的临床应用价值
·425·· 论著 ·粪便钙卫蛋白联合血清学抗体检测诊断炎症性肠病的临床应用价值高丹1，王科峰2，卢丽萍1 （中国医科大学附属盛京医院 1. 检验科；2. 泌尿外科，沈阳 110004） 摘要 目的 探讨粪便钙卫蛋白 （FC ） 联合血清炎症性肠病 （IBD ） 相关抗体检测IBD 的临床应用价值。
方法 回顾性分析2019年3月至2020年3月中国医科大学附属盛京医院消化内科收治的106例肠道疾病患者FC 和慢性IBD 抗体检测结果。
将106例患者以病理检查及肠镜检查为金标准分为溃疡性结肠炎 （UC ） 组 （64例） 和克罗恩病 （CD ） 组 （42例） ，另选取同期30例健康体检者作为对照组。
绘制FC、慢性IBD 抗体及联合检测诊断IBD 的受试者工作特征 （ROC ） 曲线，评价诊断价值。
结果 FC、慢性IBD 抗体及联合检测诊断IBD 的ROC 曲线下面积分别为0.859、0.583、0.828，FC 诊断IBD 准确性更高。
在IBD 诊断方面，FC+慢性IBD 抗体检测灵敏度 （90.6%） 和阴性预测值 （73.0%） 高于2项指标单独检测；FC 单独检测特异性 （91.7%） 和阳性预测值 （96.6%） 高于慢性IBD 抗体单独检测及FC+慢性IBD 抗体联合检测。
结论 FC、慢性IBD 抗体联合检测可以提高检测的敏感性，在IBD 的诊断中具有重要的临床应用价值。
关键词 粪便钙卫蛋白； 炎症性肠病； 慢性炎症性肠病抗体中图分类号 R446.12 文献标志码 A 文章编号 0258-4646 （2021） 05-0425-04网络出版地址 https:///kcms/detail/21.1227.R.20210514.1119.036.html DOI：10.12007/j.issn.0258‐4646.2021.05.008The diagnostic utility of fecal calprotectin used in combination with an antibody against chronic inflammatory bowel disease GAO Dan 1，WANG Kefeng 2，LU Liping 1 （1. Department of Clinical Laboratory，Shengjing Hospital of China Medical University，Shenyang 110004，China；2. Department of Urology Surgery，Shengjing Hospital of China Medical University，Shenyang 110004，China ） Abstract Objective To investigate the clinical utility of fecal calprotectin （FC ） used along with serum inflammatory bowel disease （IBD ） -related antibody in the diagnosis of IBD. Methods We retrospectively analyzed the FC and chronic IBD antibody test results of 106 patients with intestinal disease admitted to the Department of Gastroenterology，Shengjing Hospital，China Medical University between March 2019 and March 2020. The patients were divided into two groups based on the findngs of pathological examination and colonoscopy. There were 64 cases of ulcerative colitis （UC ） and 42 cases of Crohn disease （CD ） . Thirty healthy people were selected as the control group in the same period. Results The area under the ROC curves when using FC，the antibody against chronic IBD，and both FC and the antibody were 0.859，0.583，and 0.828，respectively. FC is more accurate than the other two methods in the diagnosis of IBD. In the diagnosis of IBD，the sensitivity （90.6%） and negative predictive value （73.0%） of FC+the chronic IBD antibody were higher than those of the two indicators used separately，while the specificity （91.7%） and positive predictive value （96.6%） of FC single detection were higher than those of the single detection of chronic IBD antibody and the combined detection of FC+chronic IBD antibody. Conclusion The combination of both FC and the antibody is clinically useful in the diagnosis of chronic IBD as it could improve the sensitivity of detection of IBD.Keywords fecal calprotectin； inflammatory bowel disease； antibody against chronic inflammatory bowel disease炎症性肠病 （inflammatory bowel disease，IBD ） 是一类主要累及消化道的慢性非特异性肠道炎症性疾病，主要包括溃疡性结肠炎 （ulcerative colitis，UC ） 和克罗恩病 （Crohn disease，CD ）。
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第10卷 第8期 2010年3月1671 1815(2010)08 1955 04科 学 技 术 与 工 程Sc i ence T echno l ogy and Eng i neer i ngV o l10 N o 8 M a r2010 2010 Sci T ech Engng粪便钙卫蛋白与炎症性肠病活动性关系的探讨王志红 郭汉斌 曹建彪 李浩然(北京军区总医院消化内科,北京100700)摘 要 探讨研究粪便钙卫蛋白与炎症性肠病(i n fla mma tory bow l disease ,IBD )活动性的关系。
收集52例北京军区总医院消化内镜中心接受肠镜检查患者的新鲜粪便标本提取钙卫蛋白,其中炎症性肠病患者32例、溃疡性结肠炎24例、克罗恩病8例、正常对照者20例。
采用EL ISA 法定量检测粪便中钙卫蛋白浓度。
采用M ayo 评分系统判断IBD 有否活动,积分 3为有活动性。
结果20例健康者粪便钙卫蛋白浓度为(77.15 160.9) g /g ,32例IBD 患者为(646.58 439.44) g /g 。
I BD 患者与健康者粪便钙卫蛋白浓度比较有显著差别(P <0 001)。
以450 3 g /g 为临界值时,粪便钙卫蛋白判断IBD 是否活动的灵敏度和特异度分别为75%和90%,活动期IBD 患者与静止期IBD 患者和健康者粪便钙卫蛋白浓度比较均有显著差别(P <0.05)。
说明粪便钙卫蛋白检测是一种非侵入性观察指标,为判断IBD 活动性具有一定的临床意义。
关键词 炎症性肠病(I BD ) 钙卫蛋白 粪便中图法分类号 R572; 文献标志码B2009年11月2日收到第一作者简介:王志红(1953!),安徽宿州人,主任技师。
研究方向:炎症性肠病的基础。
目前认为,炎症性肠病(i n fla mm atory bo w l d is ease ,I BD )的发生主要是由遗传、环境及肠道菌群等多种病因导致的机体对肠道抗原免疫应答失调所致。
钙卫蛋白(C alpr o tecti n ,S100A8/S100A9)是一种肠道炎性标志物,来源于中性粒细胞和巨噬细胞。
由于其能与钙离子结合,且在粪便中极稳定。
本实验采用ELI SA 法定量检测I BD 患者与健康志愿者粪便钙卫蛋白,以探讨粪便钙卫蛋白浓度与I B D 活动性的关系,从而为临床诊治提供有意义的辅助检查指标。
1 材料与方法1.1 检测对象以2007年12月至2008年4月在北京军区总医院消化内镜中心就诊的52例患者为检测对象。
32例I BD 患者,男15例,女9例,平均年龄35岁,均符合2007年5月中华医学会消化病学分会的诊断标准[1]。
根据患者临床表现(如每日水样便或稀便次数、腹痛、一般情况、并发症及肠道出血情况或腹部肿块情况),采用M ayo 评分系统进行活动指数评定[2]来判断I BD 活动性, 3分为有活动。
20例健康者,男8例,女12例,平均年龄46岁,内镜下均未见器质性病变,并排除其他疾病,在检测前均未长期服用质子泵抑制剂、激素、非甾体类消炎药。
1.2 标本采集所有入组病人留取镜检前日粪便(10-20)g (口服清肠药前)。
粪便样本在采集后12h 之内送达实验室,密封后4∀冷藏<6d ,6d 内提取钙卫蛋白,提取液-30∀冻存备用。
1.3 试剂及仪器粪便钙卫蛋白检测试剂盒(瑞士B hl m ann 公司生产,北京海瑞祥天生物科技有限公司惠赠),全自动多功能酶标仪(芬兰雷勃公司M ultiskan MK3)。
1.4 方法1.4.1 粪便钙卫蛋白萃取按照粪便重量(g):萃取液体积(mL)=1#49的比例加入专用萃取液,充分振荡混匀,取5mL混悬液,10000∃g离心5m in,取上清液-30∀冻存备用。
1.4.2 ELI SA检测将粪便钙卫蛋白提取液平衡至室温,10000∃g 离心5m in,1#50稀释,各标本均设复孔,按照说明书流程进行操作(双抗体夹心法),于450nm处比色,分别记录标准品、样品、阳性对照、阴性对照和空白孔的OD值,各取平均值进行结果计算。
如1#49体积比稀释的标本超出标准曲线范围时,则增加或降低稀释比例至其OD值在标准曲线范围之内。
1.5 结果判断根据不同浓度标准品OD值(10、30、100、300、400g/g)绘制标准曲线,标准曲线上各样本OD值对应的浓度,即为各样本的粪便钙卫蛋白浓度。
1.6 数据处理数据采用SPSS17.0统计软件,中位数、四分位间距、全距,组间比较采用非参数检验K r uskal W a l lisH检验,P<0.05具有统计学意义。
检测指标的灵敏度和特异度,采用受试者工作特征曲线[3](re ce iver operati n g characteristic curve,ROC),计算ROC 曲线下面积(A rea Under Curve AUC):一般情况下, AUC<0.5时,表示该指标无诊断价值;>0.7时,表示诊断准确性较高,即面积越大,诊断准确性越大。
2 结果2.1 IBD患者与健康者粪便钙卫蛋白浓度比较32例I BD患者粪便样本浓度为(646.60 439 44) g/g。
20例健康者粪便钙卫蛋白浓度为(77.15160 9) g/g。
经正态性检验,两组粪便钙卫蛋白水平呈非正态分布,故以计算中位数、四分位间距、全距,采用非参数检验进行组间比较。
结果显示:I B D患者粪便钙卫蛋白浓度明显升高,与健康者比较,差别非常显著(P<0.001,表1)。
表1 I BD患者与健康者粪便钙卫蛋白浓度比较Nx s( g/g)M( g/g)Q L-Q U( g/g)m i n m ax( g/g)健康者2077.15160.916.7511.21-39.531.65-645.9I BD32%646.6439.44971.21464.51-1373.942.49-1618.2注:N例数;x s平均值标准差;M中位数;QL-QU四分位间距 全距;m i n m ax最小数 最大数;与健康者比较:%P<0 001 2.2 静止期I BD患者与活动期IBD和健康者粪便钙卫蛋白浓度比较12例静止期I BD患者粪便钙卫蛋白浓度为(337.06390.52) g/g,20例健康者为(77.15 160.9) g/g,二者比较无显著差别(P>0.05);20例活动期I BD患者为(956.13488.36) g/g,与静止期I B D患者比较有显著差别(P<0.05)(表2)。
表2 活动期和静止期I BD患者的粪便钙卫蛋白浓度比较Nx s( g/g)M( g/g)Q L-Q U( g/g)m i n m ax( g/g)健康者20&77.15160.916.7511.21-39.531.65-645.9I BD活动期20&956.13488.361173.3640.22-1433.4461.14-1618.2静止期12337.06390.5272.6964.42-439.4742.49-1006.11注:与静止期I BD比较&P<0.052.3 ROC曲线分析绘制受试者工作特征曲线(Receiver Operati n g Characteristic curve,ROC),计算粪便钙卫蛋白水平用于判断I BD活动性的敏感性和特异性。
常规取ROC曲线左上方的最高点为最佳截断点[3],并计算ROC曲线下面积AUC为0.798(AUC>0.7表示该指标诊断准确性较高)(见图1)。
3 讨论I BD是一组病因不十分明确的慢性肠道炎症性疾病,主要包括UC和CD。
以往用于诊断I B D及其活动性主要依靠结肠镜、x线钡剂造影、病理活检1956科 学 技 术 与 工 程10卷图1 IBD活动期组和非活动期组粪便钙卫蛋白浓度的ROC曲线AU C=0.798,P=0.006等,而这些检查均为有创性的,患者依从性差。
因炎性肠黏膜中含有大量中性粒细胞,故检测中性粒细胞来源的蛋白可能有一定意义。
钙卫蛋白是中性粒细胞和单核细胞的主要蛋白质,中性粒细胞钙卫蛋白分布在溶酶体外的细胞液中,其含量约为(5-15)m g/m L,约占细胞总蛋白的5%,亦是中性粒细胞更新的标志物,在许多炎症情况下都可升高[4]。
钙卫蛋白是由两条14kD重链和一条8kD 轻链共价相连的钙结合蛋白异三聚体构成,每条链可结合两个钙分子,具有耐热性和水解性,其在常温下保存一周可不被细菌和各类酶降解,具备良好的标志物条件[4,5]。
有实验证明,利用放射性标记白细胞技术,可直观、定量观察到肠黏膜组织与粪便中标记物的关系:被标记的自体白细胞注入自体血液后,首先聚集于肠道炎症区域,但并不停留在肠壁内,而是迁移至肠腔,经肠道从粪便中排出。
收集粪便中放射性标记物进行测定证实,其与组织炎症程度呈正比。
I BD患者的粪便111铟标志白细胞3d排泄率和24h粪便钙卫蛋白排泄率(r=0.87)、一次取样粪便钙卫蛋白排泄率(r=0.80)都显示了很好的相关性。
根据这一原理,测定粪便钙卫蛋白水平可直接反映受累组织炎症程度[6]。
有研究发现,血浆钙卫蛋白含量在健康成人为(0.1!0.6)m g/L,病毒感染者(0.1!11.4)m g/L,细菌感染者(0.6!11.0) mg/L[7]。
健康成年男性的血浆钙卫蛋白浓度明显高于女性,而粪便钙卫蛋白浓度约是血浆钙卫蛋白的6倍,且无性别差异[8]。
我们采用ELI SA法定量检测I BD患者和健康者粪便钙卫蛋白浓度的结果提示,健康者粪便钙卫蛋白浓度较低,与国外学者的报道相符[9,10]。
I B D 活动期、静止期患者的粪便钙卫蛋白浓度比较有显著差别,提示其可能是区分I BD静止期、活动期的指标。
与结肠镜检查比较,患者依从性好,可反复多次检测,客观而连续地反映肠道局部炎症变化,有利于实时监测,且粪便钙卫蛋白检测对UC活动性的判断可能优于目前临床常用的CRP和ESR两项指标[11]。
另外,对于急性发作期的重症患者,结肠镜检查往往被视为禁忌,以免引起肠穿孔,此时粪便钙卫蛋白检测就显得尤为相宜。
由于在许多肠道感染情况下,其检测值也会有一定水平的升高,故粪便钙卫蛋白不宜用于诊断I BD。
本实验结果提示,粪便钙卫蛋白定量检测,作为一种无创性初筛试验,其检测方法便捷、价格低廉,可弥补肠镜、结肠造影等有创检查的痛苦、价格昂贵、不便随时复查等不足,具有较好的灵敏性和特异性,对于监测I BD活动性及调整治疗方案具有一定的临床应用价值。
参 考 文 献1 中华医学会消化病学分会炎症性肠病协作组.中国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见中华内科杂志,2008;47(1):73!79 2 G ionchett,i D Arienzo A,R iz zello F,e t al.T op i ca l treat m ent of d i st a l active u l cerati ve coliti s w it h beclo m et has one d i prop ionate or m e sala m ine:a s i ngle b li nd rando m i nzed con trolled tri a.l J C li n i calGas troen terol ogy,2005;39(4):291!2973 陈卫中,潘晓平,宋兴勃,等.ROC曲线中最佳工作点的选择.中国卫生统计,2006;23(2):157!1584 J ohn e B,FagerholM K,Lyb rg T,et al.Fun cti on aland cli n ical aspectsof the myel o m on ocyte protei n cal protecti n.J C lin Pat h M ol Path, 1997;50(3):113!12319578期王志红,等:粪便钙卫蛋白与炎症性肠病活动性关系的探讨5 Gebhard tC,Ne m et h J,Angel P,e t a l.S100A8and S100A9i n infl a mm ati on and cancer.B ioche m icalPhar m acology,2006;72(11): 1622!16316 Roseth A G,Schm idt P N,FagerholM K.Correl ation bet w een faecalexcreti on of i nd i um 111 labelled granu l ocytes and cal protecti n,a granu l ocytem arker protei n,i n p ati en ts w ith i n fl a mm at ory bo w el dis ease.S cand J Gas troen tero,1999;34(1):50!547 Sander J,Fagerl olM K,Bakkon J S,et al.Plas ma levels of t he leukocyte L1protei n i n febrile cond iti ons:relati on to aetilol gy,numb er of l eu cocytes i n b lood,b l ood sed i m en tati on reacti on and C reacti on protei n.Scand J C li n Lav Invest,1984;44(4):357!3628 R oset h A G,Fagerho l M K,Aad land E.A s sess m en t of t h e neu troph ildo m i nati ng protei n cal protecti n i n feces.am ethodog i c study.S cand JG astroen t ero,l1992;27(9):793!7989 Inc R D,Pon tE D,L eo V D,et a l.Ca l protecti n and l act oferri n i nt h e asses s m en of i ntestinal i n fl a mm ati on and organ ic diseas e.Int J ColorectalD i s,2007;22(4):429!43710 Schoep f er A M,Trumm ler M,Seeholz er P,et a l.Accuracy of fou rfecal assays i n t h e d i agnosis of coli tis.D i s Colon Rect um,2007;50(10):1697!170611 Angri m an I,Scarpa M,D Inc R,et a l.E nzy m es i n f eces:u s efulm arkers of chronic i nfl a mmatory bo w el d i sease.C li n ica Ch i m i caA c t a,2007;381(1):63!68A Study of Relati onshi p bet w een Fecal Lactoferri nand Infla mmatory B o w l D iseaseWANG Zhi hong,GUO H an b i n,CAO Ji a n b iao,LI H ao ran(Depart m ent ofGastroenterology,GeneralH osp it al ofB ek i ngM ilitary Reg i on,Beiji ng100700,P.R.Ch i na)[Abstract] To i n vesti g ate the relationsh i p bet w een leve ls o f fecal ca l p rotecti o n in t h e i n fla mm atory bo w l disease (I BD)of acti v ated and inactivated by ELI SA quantitative analysis,a tota l of52fresh fecal sa mp les w ere co llected fro m the patients w ith I BD and the health l y vo l u nteers,incl u di n g24cases o fUC,8cases o f CD,and20healt h y vo l u nteers.EK C AL w as used to quantitatively deter m i n e the leve l o f feca1calpro tecti o n.M ayo active i n dex adop tied to evaluate the acti v ity o f I BD.The score equa l or higher than3consi d ered to be acti v e I BD.The level o f feca l calpro tecti o n w as(77.15160.9) g/g i n healthy volunteers,(956.13488.36) g/g i n active I BD,(337.06 390.52) g/g in i n acti v e I BD,respective ly.There w as si g n ificanted difference bet w een the I BD co m pared w ith t h e hea lthy vo lunteers(P<0 001).W hen I BD beca m e acti v e,the level o f feca l ca l p rotection increased si g nifican t l y co m pared w ith the i n active I BD and healthy vo l u nteers,respectively(P<0 05).W hen the upper li m it w as 450 3 g/g,the sensitiv ity and specificity o f fecal calpro tecti o n in differentiating the active I BD w as75%and 90%,respecti v e l y.A s a non i n vasi v e m et h od,feca l calpro tecti o n is the m ar ker for evaluate I BD activ ity,it has a clinical si g nificance.[Key words] infla mm atory bo w l d i s ease calpro tecti o n feces1958科 学 技 术 与 工 程10卷。