试验十蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜是我们日常生活中不可或缺的食物之一，是我们餐桌上重要的一部分。
随着农业生产的发展，农药的使用也在逐渐增加，为了提高产量和质量，农民们经常使用有机磷及氨基甲酸酯类农药来防治病虫害。
这些农药的残留问题却引起了人们的关注。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测成为了一个迫切需要解决的问题。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前农业生产中广泛使用的一类农药，它们能够有效地抑制害虫和杂草的生长，提高作物产量。
在农药使用过程中，由于农民对农药的使用不当或者过量使用，导致蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量超标的情况屡见不鲜。
这些农药残留会对人体健康造成潜在的威胁，因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测显得尤为重要。
目前，关于蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测的方法有很多种，包括色谱法、光谱法、质谱法等。
这些方法虽然在检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留方面具有一定的灵敏度和准确性，但是它们需要昂贵的设备和复杂的操作流程，并且需要较长的时间才能得到结果，无法满足快速检测的需求。
研究人员正在不断寻找更加简便、快速和准确的方法来检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留。
近年来，基于生物传感技术的快速检测方法逐渐成为研究热点。
生物传感技术是一种利用生物材料的特异性反应来检测目标化合物的技术，具有操作简便、灵敏度高、结果快速等优点。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中，常用的生物传感技术包括酶传感技术、免疫传感技术和核酸传感技术等。
酶传感技术是利用酶对目标化合物的特异性反应来进行检测的技术。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中，常用的酶包括乙酰胆碱酯酶、磷酸化酶等。
当有机磷及氨基甲酸酯类农药存在时，它们会与酶发生特异性的化学反应，产生颜色变化或发光信号，从而实现对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。
除了传统的生物传感技术之外，近年来还出现了一些新的快速检测方法，如基于纳米材料的快速检测方法、基于光学技术的快速检测方法等。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
随着人们生活水平的提高，对于蔬菜的需求量也越来越大，这也就导致了蔬菜的生产
量和种植面积也不断增加。
而随之而来的问题就是蔬菜生产的过程中使用的农药残留问题。
农药残留问题一直备受人们关注，因为它直接关系到人们的健康。
其中有机磷及氨基甲酸
酯类农药一直是蔬菜中常见的一种农药，因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量
的快速检测显得尤为重要。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前蔬菜中最常见的一类农药，它们在蔬菜生产过程中
被广泛使用，可以有效地防治害虫和病害，提高蔬菜产量。
有机磷及氨基甲酸酯类农药在
使用过程中也存在一定的风险，因为它们对人体健康有一定的危害，长期食用残留有机磷
及氨基甲酸酯类农药过量的蔬菜对人体健康将会产生严重的影响，甚至会引发一些严重的
疾病。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测变得尤为重要。
目前，常见的
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留检测方法有气相色谱法、液相色谱法和免疫测定法等。
这
些方法可以对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留进行比较精确的检测，但是需要花费较长的
时间和费用，无法满足蔬菜快速上市的需求。
为了解决这一问题，近年来，一些新型的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技
术开始逐渐出现。
基于光谱技术的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术备受关注。
光谱技术是一种非破坏性的检测技术，它可以通过测量样品对光的吸收、散射、发射等特
性来分析样品的成分和性质。
这种技术具有快速、简便、高效的特点，非常适合于蔬菜中
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测【摘要】本文围绕蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测展开讨论。
在介绍了相关背景和研究意义。
正文部分分析了农药残留对人体健康的危害，现有检测方法存在的问题，快速检测技术的发展，有机磷及氨基甲酸酯类农药的特点以及蔬菜中残留检测方法。
结论部分探讨了快速检测方法的应用前景和需要进一步研究的方向。
通过本文的研究，可以更好地了解蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测技朧，有助于保障人们健康。
【关键词】有机磷、氨基甲酸酯、农药残留、快速检测、蔬菜、健康风险、检测方法、技术发展、应用前景、研究方向1. 引言1.1 背景介绍随着农业生产的发展，农药的使用量逐渐增加。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前主要的农药类型之一，广泛应用于蔬菜种植中。
随着人们对食品安全的关注度增加，蔬菜中农药残留问题日益凸显。
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留不仅会影响蔬菜的品质和食用安全，还可能对人体健康造成潜在的危害。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测技术的研究具有重要意义。
当前，主要的检测方法包括气相色谱-质谱联用技术、高效液相色谱-质谱联用技术等，然而这些方法存在着操作复杂、耗时长、成本高等问题。
研究快速、准确、低成本的蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测方法具有深远意义。
本文将从农药残留对人体健康的危害、现有的检测方法及问题、快速检测技术的发展、有机磷及氨基甲酸酯类农药的特点以及蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测方法等方面进行探讨，旨在为提高蔬菜食品安全提供技术支持和参考。
”1.2 研究意义有机磷及氨基甲酸酯类农药残留对人体健康造成潜在危害，引起了广泛关注。
蔬菜作为人们饮食中不可或缺的一部分，其农药残留量直接关系到人体健康。
开展对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测研究具有重要的社会意义和健康意义。
目前，针对蔬菜中农药残留的检测方法存在一些问题，如检测周期长、检测结果不准确等，制约了蔬菜农药残留监测工作的进行。
KJ01蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测(精)
§3.1 蔬菜中有机磷和氨基甲 酸酯类农药残留量的快速检测
1.农药残留测试的相关知识点 2.农药残留的快速检测技术 3.多功能食品安全检测仪的使用
上海农林职业技术学院
一、背
景
2001年，杭州的空心菜有机磷中毒事件。 2003年，南京蔬菜有机磷残留导致中毒的事件。
2007年，福建大田发生有机磷污染水源导致中毒事件。
品种类中的“空白测”项，按“确认”键。
将放置10min的样液倒入比色皿中，加入0.1 mL低物摇匀，吹吸混匀
马上放入仪器中，按“检测”键，进行空白检测，记录反应3 min，过
程中请勿打开盖子。
《食品安全快速检测》
上海农林职业技术学院
实验：蔬菜农药残留快速检测技术-仪器法
3、 样品溶液测定
先于试管中加入2.5 mL样品提取液，再加入0.1 mL酶液、0.1 mL显色 剂。摇匀后于35 ℃放置10 min以上。 于“检测”状态下选择“农药残留”项目，按“确认”键，选择样品 种类中的“蔬菜”项，按“确认”键。 将放置10min的样液倒入比色皿中，加入0.1 mL低物摇匀，吹吸混匀 马上放入仪器中，按“检测”键，进行空白检测，记录反应3 min， 过程中请勿打开盖子。
药的总称。大多为磷酸酯类或硫代磷酸酯类。
有机磷类农药包括：甲胺磷、水胺硫磷、乐果、敌百虫、敌敌畏、氧化 乐果、马拉硫磷、甲基异柳磷、辛硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、乙酰甲 胺磷、久效磷、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱等。 氨基甲酸酯类农药包括：叶蝉散、速灭威、西维因、涕灭威、克百威 （呋喃丹）、异丙威、灭多威等。
《食品安全快速检测》
上海农林职业技术学院
实验：蔬菜农药残留快速检测技术-仪器法
试验十蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测(GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测 )方法一快速卡法一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。
二、实验原理：胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色) ，有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂：1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片；2、pH 7.5磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠［Na2HPO4?12HO］与1.59g无水磷酸二氢钾［KH2PQ］，用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤：1 、整体测定法(1)选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右方形碎片，取5g防入带盖瓶中，加入10 mL 缓冲溶液，振摇50 次，静置2min 以上.(2)取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37 C 恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
(3)将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
2、表面测定法(粗筛法)( 1 )擦去蔬菜表面泥土，滴2~3 滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
(2)取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
(3)放置10 min以上进行预反应，有条件时在37 C恒温装置中放置10 min。
预反应10 min , 预反应后的药片表面必须保持湿润。
(4)将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判断：1结果判断结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测【摘要】本文针对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测进行研究。
在分别阐述了研究背景、研究意义以及研究目的。
在详细介绍了有机磷类农药和氨基甲酸酯类农药的种类和残留量，以及快速检测技术的发展。
还探讨了蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的危害和现有快速检测方法的局限性。
在提出了发展更快速、灵敏的检测方法、加强对农药残留的监管措施以及保障蔬菜食品安全的重要性。
通过本研究，有望为解决蔬菜中农药残留问题提供有效的应对措施，保障公众健康。
【关键词】关键词：有机磷类农药、氨基甲酸酯类农药、农药残留、快速检测技术、蔬菜、食品安全、监管措施1. 引言1.1 研究背景农药残留一直是蔬菜安全问题中备受关注的话题。
随着人们生活水平的提高，蔬菜的需求量也越来越大，为了提高产量和保护作物免受病虫害的侵袭，农民逐渐使用了大量的农药。
农药残留却成为一个令人担忧的问题。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是常用的农药之一，它们在农作物生长过程中被广泛使用，而这些农药具有较强的毒性，对人体健康产生潜在风险。
目前，我国蔬菜中农药残留问题严重，尤其是有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量较高。
据统计，蔬菜中有机磷类农药残留超标的情况时有发生，部分蔬菜中氨基甲酸酯类农药的残留量也存在较大的波动。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测势在必行。
通过对不同农产品中农药残留问题的分析研究，可以有效提高农产品质量安全，保障食品安全，减少对人体健康的潜在风险。
开展蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测研究，对于促进农产品质量安全和人民身体健康至关重要。
1.2 研究意义有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前农业生产中广泛使用的农药种类，其在提高农产品产量和质量方面发挥着重要作用。
随着农药残留对人体健康的不良影响逐渐被重视，快速、准确地检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的方法显得尤为重要。
本研究的意义主要表现在以下几个方面：蔬菜是人们日常生活中不可缺少的食品，而农药残留会对人体健康产生潜在威胁，因此必须对蔬菜中的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留进行及时检测，以保障消费者的健康。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
随着工业的发展和农业的现代化，化学农药的广泛应用成为农业生产中的常见现象。
因此，农产品中农药残留已成为一个普遍的问题。
为了确保消费者的健康和安全，需要对
农产品中的农药残留进行检测。
其中，有机磷类及氨基甲酸酯类农药是最常见的农药残留
物之一。
本文将介绍如何快速检测蔬菜中的有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留量。
有机磷类农药是一类广泛使用的农药，它的主要成分是磷酸酯化合物。
这种农药可以
杀死害虫、杂草和真菌，从而保护作物的生长。
但是，它往往会对环境和人体产生有害影响，因此需要对其进行检测。
在蔬菜中，有机磷类农药的常见成分包括马拉硫磷、甲胺磷、乐果等。
针对这些残留物的检测方法主要有色谱法、荧光法和电化学法等。
其中，色谱法
是最常见的检测方法之一。
该方法可以快速和准确地检测出有机磷类农药在蔬菜中的残留量。
除了现有的检测方法之外，近年来还出现了一种新型的检测技术——基于光纤传感器
的检测技术。
这种技术利用光纤的传导性能和敏感度来检测蔬菜中的农药残留。
与传统的
检测方法相比，基于光纤传感器的检测技术具有响应快、准确、灵敏度高等特点，可以快
速地检测出蔬菜中的农药残留，同时可节省检测成本和时间。
总之，在蔬菜中确定有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测对保障农产品质
量和消费者的健康至关重要。
通过创新技术和不断的研究，我们可以期望未来的检测方法
会更加成熟、高效和安全。
农药残留快速检测方法操作规程
农药残留快速检测方法操作规程1目的能快速检测有机磷和氨基甲酸脂类农药在蔬菜中的残留，检验室操作人员按本规程操作，保证公司到货蔬菜的质量。
2范围本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留量的快速筛选测定，规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留量的快速检验方法。
有两种检验方法：速测卡片（纸片法）、酶抑制率法（分光光度法）3依据GB/T 5009.199-2003,蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测。
一、速测卡片（纸片法）4原理胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酯酸类农药的存在，农药速测卡片是用对农药高度敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的酶试纸。
5试剂速测卡片：胆碱酯酶和靛酚乙酸试剂做成的纸片6仪器常量天平37°C±2°C恒温装置4.分析步骤4.1整体测定法①样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取5&放入带盖瓶中，加入10mL缓冲液或纯净水中，振摇50次，静置2min以上。
②取一片速测卡片，撕去上盖膜，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件的在37C 恒温装置中，放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
③将速测卡片对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应，根据白色药片的颜色判断结果。
每批测定应设一个空白对照卡。
4.2表面测定法（粗筛法）①擦去蔬菜表面泥土，滴2滴〜3滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
②取一片速测卡片，撕去上盖膜，将蔬菜上的液滴滴到白色药片上。
放置10min以上进行预反应，有条件的在37°C恒温装置中，放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
③将速测卡片对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应，根据白色药片的颜色判断结果。
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实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
（GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测）
方法一快速卡法
一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。
二、实验原理：
胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂：
1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片；
2、pH 7.5 磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4•12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤：
1、整体测定法
（1）选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中，加入10 mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上.
(2) 取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
（3）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
2、表面测定法（粗筛法）
（1）擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
（2）取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
（3）放置10 min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10 min。
预反应10 min，预反应后的药片表面必须保持湿润。
（4）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判断：
1、结果判断
结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。
与空白对照卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。
对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。
2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。
六、实验注意事项及说明：
1、速测卡灵敏度指标如下表所示。
部分农药检出限参考表
2、速测卡法符合率：在检出的30份以上阳性样品中，经气相色谱法验证，阳性结果的符合率应在80%以上。
3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性，处理样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提或采用表面测定法。
对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提法，减少色素的干扰。
4、当温度条件低于37℃，酶反应速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间也应相对延长，延长时间的确定，应以空白对照卡用手指（体温）捏3min时可以变蓝，即可往下操作。
注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。
空白对照卡不变色的原因：一是药片表面缓冲溶液加得少、预反应后的药片表面不够湿润；二是温度太低。
5、红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准，3 min后的蓝色会逐渐加深，24h后
颜色回逐渐退去。
方法二酶抑制率法（分光光度法）
一、目的要求：学习酶抑制率法测定果蔬有机磷和氨基甲酸脂类农药残留的原理和方法，注意实验过程的操作要点。
二、实验原理：
根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性原理，向蔬菜的提取液中加入生化反应底物碘化乙酰硫代胆碱和乙酰胆碱酯酶，如果蔬菜不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低，酶的活性就不被抑制，实验中加入的底物就能被酶水解，水解产物与加入的显色剂反应产生黄色物质。
如果蔬菜的提取液含有农药并残留量较高时，酶的活性被抑制，底物就不被水解，当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小。
用分光光度计在412nm 处或农药残毒快速检测仪测定吸光值，根据计算出的抑制率，就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。
三、实验试剂和仪器：
（一）试剂
1、pH8.0缓冲液分别称取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾，溶解于1000 mL蒸馏水中。
2、乙酰胆碱酯酶（实验专用酶）根据酶活力用缓冲溶液溶解，3 min的吸光值变化ΔA0值应控制在0.3以上。
摇匀后在0~5℃冰箱中保存，保存期不超过4天。
3、底物碘化乙酰硫代胆碱称取25.0 mg碘化乙酰硫代胆碱，用3.0 mL缓冲溶液溶解，在0~5℃下保存。
保存期不超过2周。
4、显色剂分别称取160 mg二硫代二硝基苯甲酸和15.6 mg碳酸氢钠，用20 mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱保存。
5、可选用由以上试剂配置的试剂盒。
乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0.3以上。
（二）仪器
1、分光光度计或相应的农残快速检测仪；
2、天平（0.01g）；
3、恒温水浴或恒温培养箱。
四、实验步骤： 1、样品处理
选取有代表性的蔬菜样品，去掉不可食部分后称取蔬菜试样，冲洗掉表面泥土，剪成1 cm 左右碎片。
取样品1 g ，放入烧杯或提取瓶中，加入5 mL 缓冲液，振荡1~2 min ，倒出提取液，静置3~5 min ，待用。
2、对照溶液测试
先于试管中加入2.5 mL 缓冲液，再加入0.1 mL 酶液、0.1 mL 显色剂。
摇匀后于37 ℃放置15 min 以上（每批样品的控制时间应一致）。
加入0.1 mL 低物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入比色皿中，记录反应3 min 的吸光度的变化值ΔA 0。
3、 样品溶液测定
先于试管中加入2.5 mL 样品提取液，其他操作与对照测定相同，记录反应3 min 的吸光度的变化值ΔA t 。
五、结果计算：
抑制率（%）=
1000
0⨯∆∆-∆A A A t
式中 ΔA 0——对照液反应3 min 吸光度的变化值； ΔA t ——样品溶液反应3 min 吸光度的变化值。
六、实验结果判断：
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率大于50% 时，表示样品中有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药残留，可判定样品为阳性结果，对检验结果阳性的样品需重复检验两次以上。
检验结果记录：
七、实验注意事项及说明
1、对检验结果阳性的样品，需用其他方法进一步确定残留农药的种类和进行定量测定。
2、酶抑制率法对部分农药的检出限为：
3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性，处理样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提或采用表面测定法。
对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提法，减少色素的干扰。
4、当温度条件低于37℃，酶反应速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间也应相对延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶空白对照测试的吸光度变化
ΔA0在0.3以上为准。
注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。
酶的活性不够和温度太低都可能造成胆碱酯酶空白对照液3 min的吸光度ΔA0变化值＜0.3。
5、该法适用于大量蔬菜样本的筛检，不适用于最后的仲裁检测。
八、思考题
1、使用速测卡的注意事项有哪些？
2、影响胆碱酯酶抑制检测法的因素有哪些？如何解决？
3、可用何种检测方法对检验结果为阳性样品，进行进一步的定性和定量？。