琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书
胶回收QC操作标准

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(离心柱型)QC标准操作流程1. 实验试剂和耗材1.2 实验试剂1.3 耗材2. 实验操作流程胶回收试剂盒的检测须进行两个实验验证,第一个实验为GelRed染色法,第二个实验为EB染色法。
2.1 GelRed染色法2.1.1 1.5%琼脂糖凝胶的制备(1)准确称取1.5g琼脂糖置于250ml三角锥形瓶中,添加125ml 1×TAE溶液。
(2)轻微混匀后将其置于微波炉中,高火加热6min至溶液沸腾,取出锥形瓶放置室温2min。
(3)添加1×TAE溶液至110ml,再次于微波炉中高火加热3min至溶液沸腾。
(4)室温放置10min后将溶液倒入插有梳子的胶槽内,待胶块凝固后使用。
2.1.2 胶回收实验(1)取6个2ml离心管,依次编号为1-6号,使用分析天平准确称取空离心管的重量。
(2)用干净锋利的手术刀片切下不含核酸染料的1.5%琼脂糖凝胶胶块,放入已称重的2ml离心管中,称取胶块与离心管总重,计算凝胶块的重量。
要求胶块重量不超过200mg 为宜。
(3)添加溶胶液Binding Solution B,要求1、2号管中每100mg琼脂糖凝胶加入200ul Binding Solution B,3、4号管中每100mg琼脂糖凝胶加入300ul Binding Solution B,5、6号管中每100mg琼脂糖凝胶加入400ul Binding Solution B.(4)每管中添加50ul DL2502,混匀后置于60℃水浴5min,期间间断混合,直至凝胶块完全融化。
【注意事项】观察各管内溶胶液溶解胶块的快慢程度。
(5)将上述混合液转移至套放于2ml收集管的GenClean柱中,室温放置2min,10000rpm 室温离心1min,取出GenClean 柱,并倒掉收集管中废液。
(6)将GenClean 柱重新放回收集管中,加入500ul Wash Solution,于12000rpm,室温离心1min,倒掉收集管中废液。
爱思进胶回收说明书

爱思进胶回收说明书
爱思进胶回收试剂盒的使用说明书如下:
1. 制备琼脂糖凝胶电泳:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据Marker 判断PCR产物的大小是否符合要求。
2. 切胶:切下包含目的片段的凝胶,尽量切去上下两端的凝胶,以减少非特异性产物的影响。
3. 胶的融化:将切下的凝胶放入一个离心管中,加入适量的胶融化液,使凝胶完全溶解。
4. 洗涤:将凝胶溶液加入一个离心柱中,离心柱的管底会有一个膜,可以吸附凝胶中的DNA片段。
然后加入洗涤液,将离心柱离心,去除残留的胶融化液。
5. 洗脱:加入适量的洗脱液,离心柱离心,将DNA从膜上洗脱下来。
6. 检测:取洗脱液进行电泳检测,观察电泳结果是否包含目的片段。
以上是爱思进胶回收试剂盒的使用说明书的大致步骤,由于不同版本的产品可能存在差异,因此建议在使用前仔细阅读说明书或咨询专业人士。
DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期:常温运输和保存,保质期一年。
产品描述:本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。
试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系,或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ,回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。
得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
产品组分:使用方法:1.凝胶回收:切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中,用移液枪头捣碎,按重量比为1:3到1:5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。
PCR 产物回收:直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液,混匀,然后跳过第2步、直接从第3步做起。
如果PCR 反应中使用了石蜡,需要预先去除。
2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟),其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。
如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下,建议不要加热,以免DNA变性,影响回收率。
3.在等待期间,活化离心吸附柱。
在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12,000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。
活化后的离心吸附柱必须在当天使用。
4.在上柱前,在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇(对100mg胶块,加50uL),快速振荡10秒混匀。
takara 胶回收试剂盒说明书

操作流程1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶,然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面的液体。
此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶,尽量减小凝胶体积,提高DNA回收率。
胶块超过300 mg时,请使用多个Column进行回收,否则严重影响收率。
注)切胶时请注意不要将DNA 长时间暴露于紫外灯下,以防止DNA损伤。
3. 切碎胶块。
胶块切碎后可以加快操作步骤6的胶块溶解时间,提高DNA回收率。
4. 称量胶块重量,计算胶块体积。
计算胶块体积时,以1 mg=1 μl 进行计算。
5. 向胶块中加入胶块溶解液Buffer GM,Buffer GM的加量如下表:凝胶浓度Buffer GM使用量1.0%3个凝胶体积量1.0%~1.5%4个凝胶体积量1.5%~2.0%5个凝胶体积量6. 均匀混合后室温15-25℃溶解胶块(胶浓度较大或比较难溶时可以在37℃加热)。
此时应间断振荡混合,使胶块充分溶解(约5~10分钟)。
7. 当凝胶完全溶解后,观察溶胶液的颜色,如果溶胶液颜色由黄色变为橙色或粉色,向上述胶块溶解液中加入3 M醋酸钠溶液(pH5.2)10 μl,均匀混合至溶液恢复黄色。
当分离小于400 bp的DNA片段时,应在此溶液中再加入终浓度为20%的异丙醇。
8. 将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。
9. 将上述操作步骤7的溶液转移至Spin Column中,12,000 rpm离心1分钟,弃滤液。
注)如将滤液再加入Spin Column中离心一次,可以提高DNA的回收率。
10. 将700 μl 的Buffer WB加入Spin Column中,室温12,000 rpm离心30秒钟,弃滤液。
注)请确认Buffer WB中已经加入了指定体积的100%乙醇。
11. 重复操作步骤10。
12. 将Spin Column安置于Collection Tube上,室温12,000 rpm离心1分钟。
AxyPrep DNA 凝胶回收试剂盒 说明书

AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至8 μg DNA(70bp-10Kb),回收率为60-85%。
琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A溶液)中溶解,其中的保护剂能防止线状DNA在高温下降解,然后在DE-B溶液的作用下使DNA选择性结合到膜上。
纯化的DNA纯度高,并保持片断完整性和高生物活性,可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性说明书,耗材:DNA制备管、2 ml离心管、1.5 ml离心管。
Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA保护剂,防止DNA在高温下降解。
室温密闭贮存。
Buffer DE-B:结合液(促使大于70 bp的DNA片段选择性结合到DNA制备膜上)。
室温密闭贮存。
若出现沉淀,应于70°C温育溶解并冷却至室温后再使用。
Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液,使用前,根据瓶上数量加入乙醇,混合均匀,室温密闭贮存。
可用100%无水乙醇或95%乙醇。
Eluent:2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5,室温密闭贮存。
二、注意事项1. 在步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型DNA长时间暴露在高温条件下易于水解),从而提高回收率。
勿将含DNA的凝胶长时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA 造成的损伤。
2. 在步骤2中凝胶必须完全熔化,否则将严重影响DNA回收率。
3. 将Eluent或水加热至65°C,有利于提高洗脱效率。
4. DNA分子呈酸性,建议在2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5洗脱液中保存。
三、实验准备1. 第一次使用前,Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇。
2. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。
3. 准备75°C水浴。
四、操作步骤1. 在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面液体并切碎。
Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书

完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段1. 凝胶融解将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作。
如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入400 μl 漂洗液W1,以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 (回收DNA进行测序实验)1. 凝胶融解 将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作.如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 重复向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中,以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书三、从PCR 反应液或酶切反应液中回收DNA 1. 样品前处理取20-100 μl PCR 反应液或酶切反应液加入1.5 ml 离心管中,向其中加入五倍体积溶液Gel/PCR ,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油). 注意: 如PCR 反应体系为50 μl (不包括石蜡油体积),则加入250 μl 溶液Gel/PCR . 樣品混匀后溶液应呈现黄色,即可进行后续操作. 如果溶液的颜色为紫色,请加入10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作. 2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 将上一步所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 注意:吸附柱容积为750 μl ,若样品体积大于750 μl 可分批加入.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除. 注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download。
DNA纯化回收试剂盒

DNA纯化回收试剂盒一、试剂盒内容溶液PC 25ml 100ml平衡液BL 30ml 120ml漂洗液PW 15ml 50ml洗脱缓冲液EB 15ml 30ml吸附柱CB2 50个200个收集管(2ml)50个200个说明书1份1份二、操作步骤(一)、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段1、柱平衡步骤:向吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管)加入500ul 平衡液BL,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
(请使用当天处理过的柱子)2、将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入赶紧的离心管中,称取重量。
3、向胶块中加入等倍体积溶液PC(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100ul,则加入100ulPC溶液),50℃水浴放置10分钟左右,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
(若胶块的体积过大,可事先将胶块切成碎块)4、将上一步所得溶液加入到一个吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CB2放回收集管中。
5、向吸附柱CB2中加入600ul漂洗液PW,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CB2放回收集管中。
6、重复步骤5.7、将吸附柱放入收集管中,12000rpm(~13400×g)离心2分钟,尽量出去漂洗液。
将吸附柱置于室温放置数分钟,彻底晾干。
8、将吸附柱CB2放入一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟。
12000rpm(~13400×g)离心2分钟,收集DNA溶液。
(二)、从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA1、柱平衡步骤:向吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管)加入500ul 平衡液BL,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
凝胶DNA回收试剂盒说明书

凝胶DNA 回收试剂盒说明书产品组成凝胶DNA回收试剂盒Cat. No. 5次样品200100550次制备2001050250次制备2001250核酸纯化柱2 ml离心管1.5 ml离心管Buffer GBuffer WSBuffer WG(浓缩液)Buffer TE说明书5个5个5个3 ml3 ml2.4 ml0.5 ml1份50个50个50个30 ml30 ml24 ml5 ml1份50个×550个×550个×5150 ml150 ml72 ml ×225 ml1份产品储存与有效期产品如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品储存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上。
技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部:e-mail: *******************,电话:400-0099-857。
产品介绍本试剂盒采用了柱纯化的原理,适合从多至400mg琼脂糖凝胶中回收DNA (70bp-10kb),回收率为70~85%。
溶胶试剂为不含碘化钠的温和溶解液,确保回收的DNA 保持片断完整性和高生物学活性,回收的DNA可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品1.无水乙醇2.1.5ml离心管、移液器及吸头3.一次性手套、纸巾及防护用品4.台式小量离心机(可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子)使用前准备1)如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。
2)根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WG中加入无水乙醇,并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。
3)将水浴锅的温度设置为50°C。
4)可能需要使用3 M 醋酸钠(pH 5.0)及异丙醇。
操作步骤1)在紫外灯下将含有DNA片段的琼脂糖凝胶切下,转移到一个自备的1.5 ml 离心管中。
* 尽量减少多余的凝胶体积,可缩短溶胶时间。
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琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书
琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书如下:
琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒是用于从混合物中纯化和回收琼脂糖凝胶的试剂盒。
下面是具体的操作方法及步骤说明:
1. 准备工作:
a. 将琼脂糖凝胶样品放置于冷室中,在4℃下保存。
b. 准备所需的琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒及其附件。
2. 细胞破碎:
a. 将琼脂糖凝胶样品加入细胞破碎试剂,并将细胞破碎试剂与样品混合均匀。
b. 在室温下,将样品放置于振荡器中,并在高速摇床上以600 rpm摇动60分钟。
3. 退火:
a. 将样品加热至70℃,并在水浴保温器中保温5分钟。
b. 然后快速将样品冷却至室温。
4. 离心:
a. 将样品离心15分钟,以去除细胞碎片和残留杂质。
b. 将上清转移到干净的离心管中,并避免沉淀。
5. 琼脂糖凝胶回收:
a. 向离心管中加入等体积的琼脂糖凝胶凝胶缓冲液,并将样品与凝胶缓冲液混合均匀。
b. 将混合物加热至65℃,并保温10分钟。
c. 快速冷却混合物至室温,并离心10分钟,从而使琼脂糖凝胶沉淀。
d. 将上清倒掉,并保留沉淀。
6. 洗涤:
a. 向琼脂糖凝胶沉淀中加入1 mL 75%乙醇,然后轻轻颠倒离心管,使乙醇与琼脂糖凝胶充分混合。
b. 离心琼脂糖凝胶沉淀和乙醇混合物10分钟,并将上清倒掉。
c. 重复上述步骤一次。
7. 干燥:
a. 向琼脂糖凝胶沉淀中加入1 mL无水乙醇,然后快速颠倒离心管,使无水乙醇与琼脂糖凝胶充分混合。
b. 离心琼脂糖凝胶沉淀和无水乙醇混合物10分钟,并将上清倒掉。
c. 重复上述步骤一次。
8. 最终回收:
a. 将琼脂糖凝胶沉淀放置在干燥器中,将温度设置为50℃,并将它们完全干燥。
b. 最后,将琼脂糖凝胶沉淀转移到干净的容器中,并储存于冷室中。
请注意,以上操作步骤仅供参考。
在使用试剂盒之前,务必阅读和按照试剂盒的详细说明书执行实验。