遗传多样性研究中的分子生物学方法
几种常用分子标记遗传多样性参数的统计分析
张德全1,2,杨永平(1中国科学院昆明植物研究所,云南昆明650204;2中国科学院研究生院,北京 100049)摘要:对235篇文献中314种野生种子植物的遗传多样性参数进行了统计分析。
结果表明,目前常用的五种分子标记中,ISSR 、等位酶和SSR 的参数值间差异显著,彼此不宜直接比较,且与RAPD 和AFLP 的参数也不宜直接比较;显性标记RAPD 和AFLP 的参数之间可以直接比较。
基于Hardy -Weinberg 平衡的遗传分化指数G st 值明显低于基于A MOV A 分析的Φst 值,两者亦不宜直接比较。
对基于RAPD 和AFLP 标记的179种植物的遗传多样性参数进行联合分析,结果表明:在种群水平上,裸子植物的遗传多样性比双子叶植物和单子叶植物都要高,而其遗传分化值较低;乔木的遗传多样性比草本和灌木高,而分化值更低;克隆植物具有比有性生殖更高的遗传多样性,在有性生殖植物中,异交植物最高,而自交植物最低;广布种的遗传多样性明显高于濒危和狭域分布种。
关键词:遗传多样性;生活史特性;显形标记;等位酶;SSR 中图分类号:Q 16 文献标识码:A文章编号:0253-2700(2008)02-159-09ZHANG De -Quan1,2,YANG Yong -Ping1**(1Kunming Institute of Botany ,Chinese Academy of Sciences ,Kunming 650204,China ;2G raduate University of Chinese Academy of Sciences ,Beijing 100049,China )This paper presented a statistical and comparative analysis of common parameters of plant genetic diversity by using relevant data of 314wild plant species fro m 235published articles .The results indicated that the parameters of genet -ic diversity revealed by RAPD and AFLP are comparable ,but all parameters of genetic variation detected by ISSR ,allo z -yme and SSR are incomparable ,which are not comparative with those by RAPD and AFLP .The genetic differentiation val -ue G st based on Hardy -Weinberg equilibrium is obviously lower than the value Φst based on AM OVA analysis ,which showed that these two parameters are inco mparable as well .Furthermore ,the statistical and comparative results of genetic diversity of 179plant species by RAPD and AFLP indicated that at population level :1)the genetic diversity of gy mnosperm is higher than those of both dicotyledon and m onocotyledon of angiosperm ,but lower genetic differentiation ;2)the genetic diversity of tree is higher than those of shrub and herb ,but lower genetic differentiation ;3)the clonal plant has higher ge -netic diversity than those reproduce sexnally ,and 4)the cross -breeding plant has higher genetic diversity than self -breeding plant ;5)the widespread plant species has higher genetic diversity than the rare ,endangered or endemic species .Genetic diversity ;Life history ;Dominant molecular markers ;Allozyme ;SSR遗传多样性是生物多样性的重要组成部分,是地球上所有生物携带的遗传信息的总和(施立明,1993)。
dna分子标记技术概述
dna分子标记技术概述DNA分子标记技术是一种基于DNA序列的分析方法，可以用来研究生物体的遗传变异和基因表达。
它是现代分子生物学和遗传学研究的重要工具之一，被广泛应用于农业、医学、生态学等领域。
DNA分子标记技术的基本原理是利用DNA序列的差异性，通过特定的方法将其转化为可检测的标记，然后利用这些标记来分析不同生物体之间的遗传关系和基因表达差异。
常用的DNA分子标记技术包括PCR-RFLP、RAPD、AFLP、SSR、SNP等。
PCR-RFLP是一种利用PCR扩增DNA片段后，通过酶切鉴定其长度差异的方法。
RAPD是一种利用随机引物扩增DNA片段后，通过其长度和数量的差异来分析不同生物体之间的遗传关系的方法。
AFLP是一种利用限制性内切酶和连接酶对DNA片段进行特异性扩增的方法。
SSR是一种利用特定的引物扩增含有重复序列的DNA片段的方法。
SNP是一种利用单核苷酸多态性来分析不同生物体之间的遗传关系和基因表达差异的方法。
DNA分子标记技术具有高度的灵敏性、准确性和可重复性，可以用来研究不同生物体之间的遗传关系、基因表达差异、基因型鉴定等问题。
它在农业领域的应用主要包括品种鉴定、遗传多样性分析、杂交种育种等方面。
在医学领域，DNA分子标记技术可以用来研究遗传疾病的发生机制、基因诊断、药物反应等问题。
在生态学领域，DNA分子标记技术可以用来研究物种多样性、种群遗传结构、生态系统功能等问题。
总之，DNA分子标记技术是一种重要的分子生物学和遗传学研究工具，具有广泛的应用前景。
随着技术的不断发展和完善，它将在更多领域发挥重要作用，为人类的生产和生活带来更多的福利。
生物群落多样性的测度方法多样性的测度方法
生物群落多样性的测度方法多样性的测度方法一、本文概述本文旨在探讨生物群落多样性的测度方法。
生物群落多样性作为生物学研究的核心领域之一，对于理解生态系统的稳定性、物种间的相互作用以及生物多样性的保护具有重要意义。
本文首先将对生物群落多样性的基本概念进行界定，并阐述其研究的重要性和价值。
随后，本文将详细介绍几种常用的生物群落多样性测度方法，包括物种丰富度指数、物种均匀度指数和物种多样性指数等。
这些方法在生态学研究中被广泛应用，可以帮助我们量化描述生物群落的组成和结构。
在介绍完测度方法后，本文将对这些方法的优缺点进行分析，并讨论其在实际应用中的限制和适用范围。
本文还将探讨生物群落多样性测度方法在不同生态系统中的应用，以及它们在生物多样性保护、生态恢复和环境监测等领域的潜在应用。
本文将对未来生物群落多样性测度方法的发展趋势进行展望，以期为生态学研究和生物多样性保护提供有益的参考和启示。
二、生物群落多样性的基本类型生物群落多样性可以从多个维度进行测度和理解，这些维度包括但不限于物种多样性、生态系统多样性和遗传多样性。
物种多样性：物种多样性是最直观也是最常见的生物群落多样性类型。
它主要关注群落中物种的种类和数量，以及物种间的相对丰度。
常见的物种多样性测度方法包括物种丰富度（群落中物种的总数）、物种均匀度（不同物种在群落中的分布均匀程度）和物种优势度（群落中优势物种的影响力）。
生态系统多样性：生态系统多样性关注的是群落内部不同生态系统或生境的类型和数量。
这包括森林、草原、湖泊、河流等不同类型的生态系统。
生态系统多样性的测度方法可能涉及生态系统的类型数量、空间分布、以及各生态系统间的相互作用和联系。
遗传多样性：遗传多样性是生物群落多样性的重要组成部分，它涉及到物种内部遗传变异的程度和分布。
遗传多样性对于物种的适应性和生存能力具有重要影响。
常见的遗传多样性测度方法包括基因多样性指数、遗传距离和种群结构分析等。
这些基本类型的生物群落多样性是相互关联、相互影响的。
分子生物学技术在动物学研究方面的应用
分子生物学技术在动物学研究方面的应用引言：动物学作为生物学的一个重要分支，研究动物的分类、形态、生理生态以及进化等方面的知识。
随着科技的进步，分子生物学技术在动物学研究中的应用越来越广泛。
本文将重点介绍分子生物学技术在动物学研究方面的应用。
一、DNA测序技术的应用DNA测序技术是目前分子生物学研究中最重要的技术之一。
通过DNA测序，可以准确地获得动物的基因组信息，进而研究动物的遗传特征和进化关系。
例如，通过DNA测序可以对不同物种的基因组进行比较，揭示物种间的亲缘关系和进化历史。
此外，通过DNA测序还可以研究动物的基因突变和遗传病等方面的问题，为动物的保护和疾病治疗提供重要依据。
二、PCR技术的应用PCR技术是一种重要的分子生物学技术，可以在短时间内扩增特定DNA片段。
在动物学研究中，PCR技术的应用非常广泛。
例如，通过PCR技术可以快速检测动物的遗传多样性，评估物种的保护状况和对环境变化的适应能力。
此外，PCR技术还可以用于动物的基因表达研究，揭示不同组织和不同发育阶段的基因表达模式，深入了解动物的生理功能和发育过程。
三、蛋白质组学技术的应用蛋白质组学技术是研究动物蛋白质组成和功能的重要手段。
通过蛋白质组学技术，可以全面地分析动物体内的蛋白质组成和蛋白质相互作用关系。
例如，通过质谱技术可以鉴定动物体内的蛋白质，进而研究其功能和调控机制。
此外，蛋白质组学技术还可以用于研究动物的蛋白质修饰和功能调控，揭示动物的生理过程和疾病发生机制。
四、基因编辑技术的应用基因编辑技术是近年来发展起来的一项重要技术，可以对动物的基因进行精确的编辑和修饰。
通过基因编辑技术，可以研究动物基因的功能和调控机制，揭示基因与表型之间的关系。
例如，通过基因编辑技术可以构建特定基因缺失或突变的动物模型，模拟人类遗传疾病，研究疾病的发生机制和治疗方法。
此外，基因编辑技术还可以用于改良和优化动物的农业性状，提高动物的生产性能。
总结：分子生物学技术在动物学研究中的应用是一项重要且不断发展的领域。
贝类动物的遗传及其遗传多样性研究
贝类动物的遗传及其遗传多样性研究贝类动物是一类广泛分布于海洋、淡水和陆地的无脊椎动物，包括珍珠贝、扇贝、蛤蜊、蚝、蚌等。
贝类动物的生长周期长、繁殖力低、遗传多样性高，成为生物遗传资源的重要组成部分。
对其遗传及遗传多样性的研究对于保护生物多样性、改良贝类和推进人工养殖具有重要意义。
遗传是指后代获得父母的遗传物质并产生新的基因型和表型的过程。
贝类动物的遗传研究早在20世纪初就有了发展。
随着科技的进步，现代分子生物学工具的应用，使贝类动物遗传研究更加深入。
现代遗传学以DNA为依据，研究基因结构和功能的遗传性质，成为贝类动物遗传研究的重要手段。
基因组测序技术的发展，使贝类动物基因组注释成为可能，并有助于新基因的发现和解析。
贝类动物的遗传多样性主要表现在两个方面：一是种内遗传多样性，即种群内个体基因型、表型的差异；二是种间遗传多样性，即不同种群基因型、表型的差异。
研究表明，种内遗传多样性可以反映群体适应性、遗传驱动力等生物学特征，而种间遗传多样性可以反映生物进化历史、种群分化、隔离等生物学特征。
贝类动物保持高度的遗传多样性，一定程度上是由于它们生殖方式的不同。
贝类动物的生殖方式多样，包括有交配的和无交配的。
有交配的生殖方式主要有两种：一是外受精，即在海水中受精。
珍珠贝、扇贝属于此类。
二是内受精，即在体内受精。
如蚶、蛤属于此类。
而无交配的生殖方式包括单性生殖和多种轮回生殖。
单性生殖是指个体通过分裂或发育成熟的小细胞产生新的个体。
如某些蚌类和蜗牛类。
多种轮回生殖是指个体在不同生活阶段表现出不同的形态和生殖方式。
如珊瑚虫类。
每种生殖方式都有其特点，对遗传多样性产生一定的影响。
例如，外受精的珍珠贝、扇贝的种内遗传多样性比内受精的蚶、蛤高。
这可能是因为外受精时，不同个体的精卵有机会结合，形成更多的基因组合，从而增加了遗传多样性。
同时，生存环境、物种间的竞争或异种生殖均可能影响到贝类动物的遗传多样性。
贝类动物的遗传多样性研究对保护生物多样性、改良贝类和推进人工养殖等方面有重要意义。
生物多样性研究的方法与实践
生物多样性研究的方法与实践首先，科学家们会进行野外调查和样本收集。
他们会前往各个地区，通过观察和记录，了解当地的生物多样性情况。
如物种的种类和数量、地理分布、栖息地要求等。
同时，科学家们还会采集样本，如植物标本、动物组织和遗传物质等，用于后续的实验和分析。
其次，科学家们还会利用遥感技术进行生物多样性的研究。
遥感技术通过卫星和航空器获取地面上的图像和数据，可以较为直观地观测到大范围的地理景观、栖息地和物种分布。
同时，遥感技术还可以提供大规模的数据，用于生物多样性的监测和评估。
此外，科学家们还会利用分子生物学技术进行生物多样性的研究。
分子生物学技术可以通过分析生物体内的DNA、RNA和蛋白质等分子，了解物种的遗传信息和亲缘关系。
例如，科学家们可以通过DNA条形码技术，通过比对物种特定的DNA区域，鉴定物种的身份和分类，快速评估物种多样性。
除了上述方法，科学家们还会利用数学模型和统计学方法进行生物多样性的研究。
数学模型可以模拟和预测生物多样性在不同环境条件下的变化趋势和影响因素。
统计学方法则可以通过对野外数据进行统计分析，了解物种的丰富度、生物量和多样性指数等。
在生物多样性的研究实践中，科学家们会注重跨学科的合作和全球合作。
生物多样性研究需要涉及生态学、遗传学、地理学、环境科学等多个学科的知识和技术。
同时，由于生物多样性是全球性的问题，科学家们需要跨越国界和文化差异，共同合作来解决这一问题。
此外，在生物多样性研究实践中，保护和管理生物多样性也是非常重要的一环。
科学家们会通过研究结果提供政策建议和管理措施，促进生态系统的保护和恢复。
同时，他们还会与政府、非政府组织和社区等利益相关者合作，促进生物多样性的保护和可持续利用。
总之，生物多样性研究的方法和实践是多样的，包括野外调查和样本收集、遥感技术、分子生物学技术、数学模型和统计学方法等。
此外，跨学科的合作和全球合作也至关重要。
通过这些方法和实践，科学家们能够更好地了解和保护生物多样性，维护地球的生态平衡和可持续发展。
分子生态学的研究方法及应用
分子生态学的研究方法及应用随着生物学研究的深入，科学家们开始关注微观生态环境——分子生态学。
分子生态学是一门利用分子生物学技术研究生物群体与其生态环境相互作用的学科。
本文将介绍分子生态学的研究方法和应用。
一、分子生态学的基本研究方法1. DNA条形码DNA条形码是一种将物种DNA序列编码的技术，用于区分物种和确定其演化关系。
该技术可应用于分子生态学研究中，通过分析环境样本中不同物种DNA条形码的相对丰度，可以了解生态环境中不同生物群体的分布情况。
例如，利用DNA条形码技术可以在同一个地理区域内对比测定不同水域中鱼类的种类和数量，探究环境因素对鱼类群体生态演化的影响。
2. 基因测序基因测序是分子生态学的重要研究方法之一。
该技术可以揭示不同生物群体的遗传信息，包括基因型、表型和生境适应性等。
例如，在对植被群体进行基因测序时，可以分析群体内的基因多样性，了解不同地理区域植被群体的进化和生态适应性。
3. 元转录组测序元转录组测序是利用高通量测序技术对环境样本中不同生物体细胞的RNA序列进行分析，用于研究生态环境中不同生物群体在代谢、生长和免疫方面的差异。
例如，在研究微生物群落的时候，可以通过元转录组测序分析不同类群微生物的代谢途径和生境适应能力，并了解它们在环境中的功能角色。
二、分子生态学的应用1. 生态环境监测随着人类活动不断增多，自然环境受到了威胁。
分子生态学技术可以用于生态环境监测，了解环境变化对生物群体的影响。
例如，通过分析水域样本中不同微生物群体的丰度，可以说明水质是否受到了污染。
2. 种群生态学研究分子生态学可以用于种群生态学研究，了解种群的基因流动和遗传多样性变化情况。
例如，在研究蝴蝶种群时可以通过基因测序分析不同种群的基因型，了解种群间的遗传多样性和遗传流量。
3. 生物多样性研究生物多样性是生态学的重要研究内容，分子生态学技术可以揭示生物多样性的内在规律。
例如，通过元转录组测序分析植物、昆虫、哺乳动物等不同生物群体间的基因表达和环境适应性，可以为保护生物多样性提供科学依据。
分子生物学的新研究方法
分子生物学的新研究方法分子生物学是生物学的一个重要分支，研究对象是生命体内分子层面上的生命过程。
随着生物学研究的深入，分子生物学的研究方法也在不断地发展和更新。
本文将介绍分子生物学的新研究方法，包括单细胞测序、CRISPR-Cas9技术和光遗传学。
一、单细胞测序在分子生物学的研究中，传统的测序方法只能对大量细胞的基因表达进行测量。
然而，单个细胞的表达谱是有差异的，这些差异都不能被所谓的平均值来描述。
因此，单细胞测序近年来得到普及。
单细胞测序技术能够快速地捕获单个细胞的转录组数据，并从成千上万个单细胞中识别和分类。
它能够揭示细胞之间的多样性和功能异质性，并为研究单个细胞的生命过程提供丰富的信息。
单细胞测序技术主要分为两种：单细胞RNA测序（scRNA-seq）和单细胞DNA测序（scDNA-seq）。
其中，scRNA-seq技术应用最为广泛。
二、CRISPR-Cas9技术CRISPR-Cas9技术是近年来分子生物学研究中的一大亮点。
它是一种基于人造的DNA切割工具，可以实现精准、高效的基因编辑。
CRISPR-Cas9技术以一种快速、简单和高效的方式来操纵基因中的特定序列。
它能够去除、添加或修复基因的特定区域，并在细胞、组织和动物等多种模型中得到应用。
CRISPR-Cas9技术已经在众多领域得到了成功的应用，如基因治疗、疾病诊断和治疗、农业生产等。
它被认为是基因工程领域的一项革命性技术。
三、光遗传学光遗传学是一种新的分子生物学研究方法，在光和基因学的交叉领域中应用较广。
它利用人造的光敏蛋白来刺激或抑制细胞的活动，并实现对生命过程的基因表达和神经元活动的精确控制。
光遗传学技术主要依赖于两类光敏蛋白：一类是光激活钠离子通道（如ChR2），可触发神经元的电信号；另一类是光抑制钙离子通道（如NpHR），可以用于精确抑制神经元活动。
这种技术可在分子和细胞层面促进生命过程的研究。
光遗传学技术的应用范围广泛，包括神经科学、基因工程、药物研发等。
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第3期 1996年东北师大学报自然科学版JOURNALOFNORTHEASTNORMALUNIVERSITYNo.3
1996
遗传多样性研究中的分子生物学方法
黄百渠 曾庆华 尹 东
(东北师范大学遗传与细胞研究所,长春,130024)
摘要 论述了遗传多样性研究在物种保护中的地位,并介绍了同工酶和蛋白质
分析,限制性片段长度多态标记,多聚酶链式反应,随机扩增多态性DNA,扩
增和错配对检测以及基因克隆和转移等分子生物学技术在遗传多样性研究中的
应用和前景.
关键词 遗传多样性;分子生物学方法;物种保护
1 遗传多样性与物种保护
1.1 重要性 遗传多样性是用以衡量一个种,亚种或种群内基因变异性的概念,它是生
物多样性的基础,它在生物界中是广泛存在的,在一个自然群体中,不会有两个个体的
遗传背景是一致的.高度的遗传多样性是维持物种长期生存的基础,这是因为由单一纯
合个体组成的群体对环境不断变化的压力不能有效地适应.人们发现很多灭绝或受到威
胁的物种有非常高的遗传纯合性,在相当程度上,它们的灭绝是遗传多样性的减小或丢
失引起的,很明显,遗传多样性的保护是对人类及生活环境中可再生生物资源保护的一
个极其重要的方面.
1.2 研究方面 同生物多样性其它等级(物种和生态系统)相比,遗传多样性显得多变
而且不稳定,因此,更难精确地解释与测量.然而,由于遗传多样性是其它多样性的基
础,所以对一个特定物种或群体遗传背景和结构的知识的掌握是保护和利用这一物种或
群体的基础.例如,遗传多样性的重要尺度是基因频率.一特定群体遗传多样性的变化
通常是通过描述一定基因频率变化来体现的.低频率的等位基因经传代会通过一种被称
为随机基因漂移过程而丢失.这会导致群体适应性的降低,因此要注意保护这些低频基
因以维持高的遗传多样性和群体生存性.此外,除了环境的变化和人类的影响等因素之
外,遗传隔离(例如,群体中缺乏基因的交换)是物种灭绝的主要原因.通过增加杂交
亲和性和其它种群基因掺入等手段将帮助打破遗传隔离和促进多样性.遗传多样性的研
究主要包括两方面,一是检测和确定物种或种群内的基因结构组成、变异及其种间的遗
传和进化关系;二是在此基础上建立并发展保护和利用基因资源的手段和措施.
收稿日期:1996-05-10
—90—
2 分子生物学方法
同其它生物多样性的研究相比,遗传多样性的研究目前并不深入.因为要想进一步
深入研究基因结构会遇到很多困难.研究这些问题的传统方法包括对大量的可遗传的性
状的分析,以及通过细胞学的方法对染色体形态,结构及有丝分裂和减数分裂过程中形
态变化的观察.最近,由于染色体标记和原位杂交技术的应用,使得发生在染色体上的
变异能够更加特异地被确认和定位.
过去几十年分子生物学的迅速发展给遗传多样性的研究提供了新的手段和方法.一
类新的遗传标记的应用,即在遗传分析和基因图谱构建中应用分子标记,使得对物种基
因结构的描述更加仔细和深入.这使得不同来源遗传变异可在基因水平或它们的产物水
平上进行检测和比较.进而分子克隆和重组DNA技术在基因保护、保持生物多样性中起
着重要作用.
下面是一些有关分子生物学技术以及它们现在和将来应用于遗传多样性研究的例
子.
2.1 同工酶和蛋白质分析 同工酶和蛋白质是基因的产物.由凝胶电泳揭示的同工酶和
蛋白质组成的变化可以反映编码它们的基因的变异.它简单而且快速,并已广泛应用于
种内或种间变异性及动物系统学的研究.这一方法的主要缺点是一种生物的同工酶和蛋
白质易受环境和生长阶段变化的影响,因此在对同工酶和蛋白质的多态性评价时要注意
区别是由遗传变异还是由其它因素引起的.此外,有些蛋白质成分并不一定是基因的直
接产物.
2.2 限制性片段长度多态性(RFLP)标记 RFLP是在DNA分子水平上的遗传标
记〔1〕.当一特定生物的基因组DNA用一种(或几种)限制性内切酶消化后就会产生大量
不同长度的限制性片段,然后通过电泳把这些片段分离并印迹到滤膜上,DNA片段在滤
膜上变性并与基因组DNA互补的放射性标记的探针进行杂交,通过放射性自显影,由探
针识别的限制性片段可看作为一系列代表这些特异性片段数目和长度的带型.当研究不
同个体基因组DNA时,片段的数目和长度可发生多态性变化,这能直接反映基因组
DNA的结构差异.由相同的限制性内切酶和特异性探针产生的多态性可认为是按孟德尔
遗传的标记.如果应用足够数量的限制性内切酶和探针组合,一特定物种的RFLP图谱
就可以建立起来.RFLP图谱通常比基于表型标记的遗传图谱具有更高的密度和分辨率.
因此,可以绘出更详细的遗传结构图谱.RFLP普遍存在于生物界中,它们以共显等位基
因的形式出现,所以它们很容易被检测到.在研究不同基因组变异时,RFLP图谱和标记
是极其有用的.
2.3 多聚酶链式反应(PCR) 这一新的有效的DNA扩增技术,是在80年代后期伴随
着耐热DNA多聚酶的发现而创建的.PCR过程是以一对特异性寡核苷酸(20-30)作引
物,通过模板DNA变性,引物退火及用DNA聚合酶延伸引物的重复循环而迅速扩增
DNA
片断.由于在每一循环中合成的引物延伸产物可作为下一循环的模板,在几小时内
的30～40次的PCR循环中将产生上百万拷贝的扩增产物.PCR扩增极为敏感、迅速和
特异,并且只需要微量的DNA模板.这一技术对特异性DNA片段的克隆和测序分析有
较高的应用价值.现在通过PCR技术可以对博物馆档案以至化石标本进行基因追溯.
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PCR技术的其它应用包括直接DNA测序,DNA探针的特异性标记,并可用于原位DNA
突变的检测.这一方法的局限性是需预先知道待扩增的DNA两个旁侧区域的序列.
2.4 随机扩增多态性DNA(RAPD) RAPD是基于PCR技术的另一种新的遗传标
记〔2〕.在这一方法里,所用PCR引物是混合的随机序列较短的寡核苷酸,而不是一对特
异性引物.这些随机引物可以结合到DNA片段上.DNA片段上不同位置被扩增后,用
琼脂糖凝胶电泳分离.被特定随机引物扩增的特定DNA片断,对于一种生物的基因组
DNA是稳定的.因此可以作为该物种的遗传标记.RAPD
已被于遗传图谱,动植物的分
类学和系统学,以及种间种内变异及多样性的研究.它在鉴定和确定受体生物中外源基
因和染色体片断的存在也同样有价值.
2.5 扩增和错配对检测(AMD) AMD分析法是PCR与化学错配对方法的结合,用
来扩增和检测某一个体的基因组DNA的特定区域.用参照样本的PCR产物(如,要检
测突变,就用正常个体DNA)进行放射性标记并与过量的待测个体的PCR产物混合.混
合物变性然后复性进行杂交.参照链与其它链之间存在的任何变异将影响碱基配对,这
些错配对的位点对定的化学修饰敏感(如羟基胺对胞嘧啶,锇酸对胸腺嘧啶),并能被相
应的化学处理裂解.处理过的DNA片断变性,电泳和放射性自显影.从自显影胶片上可
见到突变点到标记末端的距离以确定裂解物的大小.AMD是检测结构和点突变的敏感
方法.
2.6 基因克隆和转移 外源基因的克隆和转移现在已成为分子生物学实验室的常规实
验方法.这些技术开辟了保护和促进遗传多样性的新手段.例如,对受威胁或灭绝物种
基因文库的建立,并进行低温长期保存.用这种方法保留有价值的遗传资源有时比保护
存活个体和组织要容易和有效.另外,来自一个体的有益基因可以被分离和克隆,然后
转移到另外的生物体内产生转基因植物和转基因动物,以提高物种适应性(例如,高的
抗病能力以及对恶劣条件的耐受性等).
参考文献
1 Gyllensten,UBandHAErlich.Generationofsingle-strandedDNAbythepolymerasechamreactionandits
applicationtodirectsequencingoftheHL-DQAlocus.ProcNatlAcadSci,1988,85:7652
2 ScharfSJ,GIHornandHAErlich.
Directcloningandsequenceanalysisofenzymaticallyamplifiedgenomic
sequences.Science,1986,223:1076
MolecularApproachesinStudiesofGeneticDiversity
HuangBaiqu ZengQinghua YinDong
(InstituteofGeneticsandCytology,NortheastNormalUniversity,Changchun,130024)
Abstract Inthispaper,thesignificanceandaspectsofstudiesingeneticdiversityand
speciesconservationwerediscussed.Somemolecularapproachesthatareusefulinstud-
iesoflifediversitiesandspeciesconservationwereintroduced.
Keywords geneticdiversity;molceularapproaches;speciesprotection
—92—