食品中致病菌的快速检测技术的研究现状与进展
试析食源性致病菌快速检测技术现状及进展

试析食源性致病菌快速检测技术现状及进展食源性致病菌是最常见的食源性致病菌致病因素,食源性致病菌检测技术不仅灵敏度高、特异性高,而且检测结果精确、微量、快速、检测成本较低,本文主要就食源性致病菌快速检测技术现状及进展进行阐述。
标签:食源性致病菌;快速检测技术;研究;进展1食源性致病菌检测技术发展的必要性当前,食源性致病菌检测技术在食品安全检验领域中占据着重要的位置,包括食品的质量安全监督、生产过程的质量监控以及食品安全研究等方面,保障食品的安全质量达标[1]。
据WHO估计,全世界每年发生食源性疾病数十亿人,每年约有二百万儿童死于腹泻,其中66%以上是由细菌性致病菌所致[2]。
出于对食品安全的保障,采用食源性致病菌快速检测技术对食品质量安全进行检测,确保流通于市场中的食品安全质量都已经达标,使消费者放心购买、放心食用。
2食源性致病菌快速检测技术分析PCR检测技术、免疫检测技术、基因探针检测技术、生物芯片检测技术展开分析:2.1PCR检测技术PCR技术又称为聚合酶链反应技术,是DAN的体外扩增技术之一。
PCR技术主要应用于检测食品中的致病微食源性致病菌及转基因成分[3],此种技术专业性要求高、技术含量大、操作也较为复杂,而且所需的检测仪器价格高昂,对PCR实验室的要求相当严格。
而沙门氏菌属是肠杆菌科中最重要的病原菌属,在世界各地的食物中毒中沙门氏菌食物中毒常占首位或第二位[4],目前共发现2541个血清型。
黄金林[5]等从上个世纪90年代就开始尝试利用PCR技术检测食品中以及临床样品和环境中的沙门氏菌。
范宏英[6]等建立了沙门氏菌的实时定量PCR检测方法和同时检测沙门氏菌和其他菌的多重PCR体系,但在特异性方面还存在一定的欠缺。
金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的主要病原菌之一。
目前,金黄色葡萄球菌常用的目标基因主要包括毒素相关基因和特异性鉴别基因。
王韶等[7]利用nuc基因序列建立了葡萄球菌PCR检测体系。
流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展

流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展流式细胞术是一种通过流式细胞仪对细胞进行快速、精确、高通量的检测和分析的技术。
它具有高度的自动化和高通量性能,可以实现对微生物的快速、准确的检测,因此在食品微生物检测领域具有巨大的潜力。
本文将对流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展进行详细介绍。
1. 细菌检测食品中的微生物污染是导致食品安全问题的重要原因之一。
传统的微生物检测方法通常需要数天的时间才能得出结果,而流式细胞术可以大大缩短检测时间,同时具有更高的灵敏度和准确性。
利用流式细胞仪可以对食品中的细菌进行快速检测,包括大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌种,为食品安全提供有力支持。
2. 酵母菌和霉菌检测除了细菌,食品中也会存在酵母菌和霉菌的污染,它们可能产生毒素严重影响食品质量和食品安全。
利用流式细胞术可以对酵母菌和霉菌进行快速准确的检测,为食品质量的控制和保障提供了有效手段。
3. 总菌数检测除了对特定的致病菌种进行检测外,流式细胞术还可以用于快速检测食品中的总菌数。
这对于食品的储存和保鲜具有重要意义,可以帮助食品企业及时采取措施,保证食品的安全和卫生。
1. 流式细胞术在快速检测技术中的应用传统的微生物检测方法通常需要进行培养和分离,这些步骤需要较长的时间,无法满足快速检测的需求。
而流式细胞术可以通过对样品中的微生物进行高通量的快速检测,显著缩短了检测时间,提高了检测效率。
2. 流式细胞术在微生物分类鉴定中的应用流式细胞术不仅可以对微生物进行数量上的检测,还可以结合荧光染色技术对微生物进行分类和鉴定。
通过染色标记不同的微生物成分,流式细胞仪可以对微生物进行快速准确的鉴定,大大提高了检测的精准度。
三、流式细胞术在食品微生物检测中的挑战与展望1. 技术标准化流式细胞术虽然在食品微生物检测领域具有巨大的应用潜力,但目前还存在技术标准化不足的问题。
不同的实验室可能使用不同的流式细胞仪,使用的染色荧光物质也各不相同,这将对不同实验室的检测结果产生较大影响。
食品中致病菌的多重快速检测技术

食品中致病菌的多重快速检测技术食品安全一直是人们关注的重要问题,由于食品中常常存在着致病菌,给人们的健康带来了潜在的威胁。
因此,快速检测食品中的致病菌成为食品安全领域亟待解决的问题之一。
近年来,随着科技的不断进步,食品中致病菌的多重快速检测技术逐渐成为研究热点,并取得了令人瞩目的成果。
一、PCR技术的应用多重快速检测技术中的PCR技术是一种基于分子生物学原理的检测方法。
它是通过放大食品中的致病菌的DNA序列,并通过特定的荧光探针来检测致病菌的存在与否。
这种技术具有高灵敏度、高准确性和高特异性的特点,可以迅速、准确地检测到食品中的致病菌。
在PCR技术中,常用的目标基因有16S rRNA基因、23S rRNA基因等。
通过选择合适的引物和探针,可以选择性地检测目标致病菌。
例如,可以设计特异性引物和探针用于检测大肠杆菌、沙门氏菌等常见的致病菌。
此外,PCR技术还可以实现多种致病菌的同时检测,提高检测效率。
二、免疫技术的应用除了PCR技术,免疫技术也是常用的食品中致病菌快速检测方法之一。
免疫技术是通过检测食品中的致病菌抗原或特定的抗体来判断食品是否受到致病菌的污染。
常见的免疫技术有ELISA、荧光免疫分析等。
免疫技术具有灵敏度高、操作简便等优点,适用于大规模的食品快速检测。
例如,可以通过ELISA方法检测食品中的沙门氏菌,快速准确地判断食品是否受到沙门氏菌的污染。
三、基于质谱的快速检测技术基于质谱的快速检测技术是近年来迅速发展的一种食品中致病菌检测方法。
这种技术利用食品中致病菌的代谢产物或特定标记物质的质谱特征来进行快速检测。
例如,基于质谱的快速检测技术可以通过检测食品中的挥发性有机化合物来鉴定食品中的细菌。
通过对质谱数据的分析,可以快速准确地确定食品中是否存在致病菌。
此外,还有基于纳米材料技术的快速检测方法,利用纳米材料的特殊性质,通过检测特定的物质变化来判断食品中是否存在致病菌。
这种技术具有高灵敏度、快速性和简便性的特点,对提高食品安全具有重要意义。
快速检测食品中微生物方法的进展研讨

快速检测食品中微生物方法的进展研讨快速检测食品中微生物的方法在食品行业中起着重要的作用,能够帮助食品生产商和监管部门及时发现食品中存在的微生物污染问题,保障食品安全。
近年来,快速检测方法的研究不断取得进展,本文将对这方面的研究进展进行探讨。
其次,免疫学方法也在快速检测食品中微生物方面得到了广泛应用。
酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫荧光法(IFA)和免疫层析法(IC)等免疫学方法可以通过检测微生物的抗原或抗体来进行快速检测。
同时,近年来还发展了一些新的免疫学方法,如免疫磁珠分离、荧光微球免疫分析法(FMIA)和表面等离子共振(SPR)等技术,提高了快速检测的准确性和性能。
此外,基于生物传感器的方法也在快速检测食品中微生物方面展现了巨大潜力。
生物传感器能够将生物分子与传感器技术有效结合,实现对微生物的快速检测。
例如,使用DNA或RNA探针修饰的电化学传感器、光学传感器和表面等离子共振传感器等,可以通过监测微生物与探针的特异性相互作用来实现快速检测。
此外,还可以利用纳米技术的进展,如纳米颗粒和纳米结构修饰的传感器,提高生物传感器的灵敏度和选择性。
最后,微流控芯片技术也在快速检测食品中微生物方面展现了潜力。
微流控芯片具有微型化、集成化和高通量等特点,可以在很短的时间内完成样品的处理、分离和检测,大大提高了检测的速度和效率。
例如,可以使用微流控芯片对微生物进行富集、分离和特异性检测,通过微流控芯片上的微通道和微阀门实现快速检测。
综上所述,快速检测食品中微生物的方法在食品安全监测中扮演着重要角色,能够及时发现食品中存在的微生物污染问题。
未来,随着分子生物学、免疫学、生物传感器和微流控芯片等技术的持续发展,相信快速检测食品中微生物的方法将得到进一步改进和优化,为食品安全提供更加可靠的保障。
食品中致病菌的快速检测技术研究

食品中致病菌的快速检测技术研究食品安全一直是人们关注的焦点,食品中的致病菌往往会给人们的健康带来严重威胁。
因此,研究食品中致病菌的快速检测技术显得尤为重要。
本文将探讨当前食品安全领域中的一些新兴技术,并讨论其在食品检测中的应用前景。
首先,快速检测致病菌技术中的一项重要进展是基于PCR方法的检测技术。
PCR(聚合酶链反应)是一种分子生物学技术,可以快速复制并扩增特定的DNA序列。
以此为基础,科学家们开发出了一系列快速、高灵敏度的PCR方法,用于检测食品中的致病菌。
这些方法通过检测食品样品中的致病菌特定基因的存在与否,可以快速准确地判断食品的卫生状况。
其次,近年来,光学传感技术的应用给食品检测带来了一系列的创新。
光学传感器可以通过测量食品样品中特定物质的吸收光谱或发射光谱来判断样品中是否存在致病菌。
这种技术不仅可以实现快速检测,还具有灵敏度高、非侵入性等优点。
此外,激光散斑技术也被应用于食品安全领域中的快速致病菌检测。
激光散斑技术通过测量食品表面激光光斑的散射和衍射情况,可以对样品中的细菌进行非接触式的检测。
除了传统的实验室方法外,生物传感技术也被广泛应用于食品安全领域中的致病菌快速检测。
例如,基于免疫反应的生物传感技术利用抗体和抗原的特异性结合来检测致病菌。
这种技术灵敏度高、选择性强,可以在短时间内检测出食品中的致病菌。
另外,基于DNA杂交的生物传感技术也被广泛研究和应用。
这种方法通过将食品样品中的致病菌RNA与DNA探针杂交,然后通过特定的检测方法来测量杂交物质的存在,从而判断样品中是否存在致病菌。
当然,上述的技术只是众多食品安全领域中致病菌快速检测技术的冰山一角。
随着科技的不断进步,越来越多的新技术被应用于食品安全领域。
例如,纳米技术可以通过纳米材料与致病菌的特异性相互作用,实现对致病菌的快速检测。
此外,微流控技术的应用也有望在食品中的致病菌快速检测领域产生重要影响。
利用微流控技术,可以实现对微小样品的高通量、自动化检测,从而提高食品样品的分析效率和准确性。
食品安全快速检测技术的研究与应用

食品安全快速检测技术的研究与应用食品安全一直备受关注,食品安全快速检测技术的研究与应用也备受关注。
新技术可以快速识别食品中的有害物质,并保护公众免受食品污染的侵害。
本文将谈论食品安全快速检测技术的研究现状和应用前景。
一、食品安全快速检测技术的研究现状随着科技的发展,现代生物技术、分子生物学技术、光学传感技术等各种先进技术的出现,食品安全快速检测技术得到了大大提高。
现在已有不同类型的检测技术应用于食品安全快速检测领域。
其中包括传统的传染病学检测技术、酶学、生物传感等技术。
1. 传染病学检测技术传统的传染病学检测技术是检测食品中是否存在有害物质的常用方法,如可检测出细菌、霉菌和病毒等。
但是传统方法检测需要分离、培养菌株,需要3-5天才能得到结果。
传染病学检测技术虽然可靠,但时间成本较高,不适合快速检测食品中有无有害物质。
2. 微生物学检测技术微生物学检测技术是一种新型的检测技术,已经广泛应用于食品安全检测中。
该技术不需要分离和培养菌株,可以直接从样品中检测到微生物物种及数量。
微生物学检测技术非常灵敏且快速,可以在72小时内检测到微生物并得到结果。
该技术的不足之处是只能检测某些特定微生物,其他物质无法检测。
3. 快速生物传感技术快速生物传感技术可以直接检测食品中的分子,如核酸、蛋白质和小分子。
该技术的优点是灵敏、快速、准确。
但是,它的成本高且技术门槛较高,仅适用于高端市场。
二、食品安全快速检测技术的应用前景食品安全快速检测技术的应用前景广泛。
尤其是在现代工业化加速食品生产和标准化中,这种技术可以使食品生产线上的检测更为简便、实时和准确。
同时,消费者对食品安全也非常关注,快速检测技术有助于满足消费者的需求。
1. 食品生产线食品生产线上的食品安全检测可以使用快速生物传感技术。
传感器可直接与生产线相连,在生产过程中检测蛋白质、核酸及小分子物质。
这种技术可以将检测时间大大缩短,有助于直接控制食品安全的品质。
2. 餐饮行业餐饮行业可以使用快速微生物学检测技术检测食品中的细菌、霉菌等微生物。
食品微生物快速检测技术的现状分析及应用

食品微生物快速检测技术的现状分析及应用摘要:食品是人类赖以生存的物质基础,近年来食品安全问题频发提升了人们对食品安全检测的关注度。
影响食品安全的主要因素是微生物污染,据报道,每年世界上约33%的粮食损失是由微生物腐败导致,约6亿人因食用微生物污染的食物而患病。
食品中微生物快速检测技术可帮助人们有效规避被微生物污染的食物。
近年来,食品行业飞速发展,食品微生物快速检测技术也越来越先进,相较于传统检测方法,其具有操作简单、实验周期短和精确度高的优势。
因此,对食品微生物快速检测技术作详细分析和探讨非常必要。
关键词:食品;微生物快速检测技术;应用1食品微生物快速检测技术的重要性(1)提供快速结果。
传统的微生物检测方法通常需要较长的时间来获得结果,这可能导致食品在流通过程中被销售或消费之前出现微生物污染的风险。
而快速检测技术能够减少检测时间,快速获得结果,提供实时的微生物信息,有助于较早地发现和控制潜在的微生物污染,减少食品安全风险。
(2)节省成本。
传统的微生物检测方法通常需要复杂的实验室条件、技术设备和人力资源,成本较高。
而快速检测技术通常具有简便、快速、高效的特点,可以减少实验室和人力成本,提高效率,降低检测费用。
(3)增加产品质量控制能力。
快速检测技术具有高灵敏度和高选择性,可以准确地检测和鉴定微生物的种类和数量。
这样的技术可以有效地监控食品生产过程中的微生物污染,并迅速采取措施进行调整和控制,提高产品质量的稳定性和可靠性。
(4)增强食品安全监管能力。
快速检测技术不仅能够在食品生产和加工环节中使用,还可以在进口和出口食品的质量安全检测中应用。
这样的技术有助于提高食品安全监管的效率和准确性,保障公众的健康和权益。
2食品微生物快速检测技术的应用2.1三磷酸腺苷(ATP)生物发光法在食品微生物检测中的应用ATP生物发光技术具有灵敏度高、检测快速、程序简便、数据稳定的明显优势所在,ATP生物发光技术用荧光强度把ATP数量化,目前普遍开始使用在食品安全检验检测中。
食品中致病菌检测与控制技术研究

食品中致病菌检测与控制技术研究食品安全一直是人们关注的焦点,而食品中的致病菌是引发食物中毒和疾病的主要原因之一。
因此,致病菌的检测与控制技术的研究及应用显得尤为重要。
本文将探讨食品中致病菌检测与控制技术的研究进展和应用前景。
一、致病菌检测技术1. 基于PCR技术的致病菌检测聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术是一种常用的分子生物学技术,通过扩增致病菌的基因片段进行检测。
相比传统的培养方法,PCR技术能够提高检测的灵敏度和准确性,并且能够快速获得结果。
2. 基于质谱技术的致病菌检测质谱技术是一种高分辨率、高灵敏度的分析方法,能够直接检测食品中的微生物。
通过对菌落或者食品样品进行质谱分析,可以快速准确地鉴定致病菌的种类和数量。
3. 基于流式细胞术的致病菌检测流式细胞术是通过将样品中的细胞通过激光逐个单独探测和测定的技术,适用于快速检测食品中致病菌的浓度和活性。
二、致病菌控制技术1. 温度控制许多致病菌在高温下会失去活性,因此,温度控制是食品加工过程中控制致病菌繁殖的重要手段。
通过加热、冷藏等方式,可以有效抑制和杀灭食品中的致病菌。
2. 灭菌技术灭菌技术是通过高温、高压或者化学物质等方式杀灭食品中的致病菌。
常用的灭菌方法包括高温灭菌、紫外线灭菌、臭氧灭菌等。
3. 添加剂控制添加剂被广泛应用于食品加工过程中,其中一些具有抗菌活性,如抗氧化剂、防腐剂等。
通过添加这些具有抑菌作用的化学物质可以有效抑制致病菌的繁殖。
4. 酸碱调节调节食品的酸碱度可以改变致病菌的环境适应性和繁殖能力,从而达到控制致病菌的目的。
例如,降低食品的酸度可以抑制肉毒杆菌的繁殖。
三、致病菌检测与控制技术的应用前景致病菌检测与控制技术的不断发展和应用将对食品安全产生积极的影响。
首先,这些技术能够提高食品安全管理的效率和准确性,有助于排查潜在的食品安全隐患。
其次,食品生产企业可以通过采用致病菌检测与控制技术,提高产品的质量和安全性,从而增强消费者对产品的信任。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
参考文献:[1]李文印.芹菜芫荽保鲜法[J]. 北方园艺,1992,(1):51.[2]车芙蓉,马岩松.现代蔬菜果品贮藏保鲜产业中发展的若干问题(下)[J].中国果菜,2002,(2):46-47.[3]李容.几种蔬菜的无公害贮藏保鲜技术[J].西南园艺,2001,29(3):32-33.[4]李素芬,郑素月.MA包装对芫荽贮藏性的影响[J].农业与技术,2000,20(5):23-25.[5]顾振新,饭本光雄,田川彰南等.弱光照射和无机营养供给对冷藏绿芦笋(Asparagus offinalis L.)品质变化的影响[J].南京农业大学学报,2001,24(4):84-88.[6]田浩,名和义彦,黑木吉,等.野菜の收获后にぉけゐ品质に及ほす光の影响(第1报)コマシナ(Detached leaf)の贮藏中にぉけゐ成分变化[J].食品综合研究所报告,1981,38:33-39.[7]富士原和宏,高久晃一,饭本光雄.收获后チャビルの低温贮藏のための赤色光グィォ-ドにょゐ弱光照射ゎょび养液ゲル利用[J].生物环境调节,1997,35(2):51-54.[8]小林玲子,高坦美智子,久保田智惠利,等.低温贮藏中の弱光照射ガクィワレゲィコンの影响[J].生物环境调节,1996,34(2):57-59.[9]潘瑞炽,董愚德.植物生理学(第3版)[M].北京:高等教育出版社,1995.67-11.食品中致病菌的快速检测技术的研究现状与进展陈庆森1,冯永强2,黄宝华1,魏国祥1,庞广昌1,胡志和1(1.天津商学院生物工程系,天津 300134; 2.天津市海河乳业有限公司,天津 300134)摘 要:本文从食品中致病菌快速检测的技术发展现状的角度出发,较系统地介绍了利用生物化学、免疫学和分子生物学的技术手段快速检测病原菌的技术和方法,特别是近几年来基因操作技术在病原菌快速检测方面的应用研究,这些技术对该领域产生了很大的推动作用。
关键词:致病菌;快速检测技术;微生物The Development and the Research Status of Fast DetectionTechinque of Pathogenic Bacteria in FoodstuffCHEN Qin-seng1,FENG Yong-qiang2,HUANG Bao-hua1,WEI Guo-xiang1,PANG Guang-cang1,HU Zhi-he1(1.Department of Biolgical Engineering, Tianjin Unirersity of Commerce, Tianjin 300134, China; 2.Tianjin Haihe Dairy Co. Ltd., Tianjin 300134,China)Abstract :This text causes the angle of technological current situation of the development that the germ measures fast to setout from the food, have recommended utilizing the technological means of biochemistry, immunology and molecular biology tomeasure the technology and method of pathogens fast more systematically, Especially the operating technology of gene hasmeasured the application study of the respect fast in pathogens in recent years, The technology has produced the enormousimpetus to this field.Key words:pathogen;fast detection technique;microorganism中图分类号: TS207.7 文献标识码: A 文章编号:1102-6630(2003)11-0148-05收稿日期:2003-05-08作者简介:陈庆森(1957-),男,教授,从发酵生物技术及活性蛋白质、酶技术的研究。
随着科学技术水平的日新月异的发展,人类对文明程度的要求越来越高,特别是对危害人类健康的重要的致病微生物。
人类进入21世纪,一些致病微生物的快速检测技术也得到了迅速地发展[1][9][13],如:免疫学中的放射免疫分析(RIA)、酶免疫分析(EIA)[6]、荧光免疫分析(FIA)、时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)、化学发光免疫分析(CIA)、生物发光免疫分析(BIA)等,足以检出临床标本中痕量的(10-18~10-21)微生物抗原;生物化学中的快速专有酶反应和细菌代谢产物的检测技术;分子生物学方面已经形成了核酸探针(Nuclear acid probe)[2][5]和聚合酶链反应(Polymerase chain reaction)[3,4]的检测技术,该技术以其敏感、特异、简便、快速的特点成为世人瞩目的生物技术革命的新产物,业已逐步应用于食源性病原菌的检测。
然而传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究,更跟不上人类对致病微生物快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的快速诊断及检测的方法。
本文仅就微生物实验室可常规应用的技术即快速微生物检查法作一介绍。
1以生物化学手段建立的快速检测技术1.1常规的致病微生物的检测技术法国科学家巴斯德(Louis Pasteur,1822~1895年)首先实验证明有机物质发酵和腐败是由微生物引起,而酒类变质是因污染了杂菌所致,从而推翻了当时盛行的“自然发生说”。
巴斯德的研究,开始了微生物的生理学时代,人们认识到不同微生物间不仅有形态学上的差异,在生理学特性方面亦有所不同,进一步肯定了微生物在自然界中所起的重要作用。
众所周知,不同病原体的化学组成或所产生的代谢产物各异,利用微生物(主要是细菌)的不同生化和生理特性,可以对细菌进行鉴定。
生化鉴定是检测细菌最常用的方法。
细菌检验中的微量化和自动化,是微生物学诊断中的发展方向,经过多年的研究和不断改进,常规的临床细菌学诊断已由系列的试剂盒商品成套供应,来替代各检验部门自行配制试剂,手工操作的缓慢和繁琐状态[9]。
另外,气相色谱和高效液相色谱的分析也应用到致病微生物的检测中,主要是依据不同病原体的化学组成或所产生的代谢产物各异,利用上述色谱检查可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白、氨基酸、多肽、多糖等,以确定病原微生物的特异性化学标志成分,协助病原诊断和检测,其中以气相色谱应用较多。
尽管该法具有简单、快速、可靠,在数小时内即可得出结果的特点,但由于使用的仪器设备相对比较昂贵,所以不适应现场的快速检测,特别是食品加工过程中的HACCP中的关键控制点的检测;另外其特异性和低耗也是不明显的。
天津医科大学检验系王金良教授报道了快速检测细菌生化反应的色原或荧光底物及成套鉴定系统(Chromogenic orfluorescence substrates for rapid identification of bacteria)的技术,该生化反应的成套系统中底物系由色原(呈色)或荧光与糖类或氨基酸人工合成。
此底物无色,经细菌的细胞内或细胞外酶的作用而释放出色原(呈色)或荧光,其优点是特异性强,反应迅速,易于自动化检测,明显提高了细菌生化反应的准确性,实现了细菌生化反应革命性变化。
常用的酶有:糖苷酶和氨基肽酶;呈色的色原有:α、β萘酚、邻位或对位硝基酚、对硝基苯胺、酚酞、2-氨4-硝基苯……;常用的荧光物有:4-甲基伞形酮(4MU)、7-氨基-4-甲基伞形酮香豆素。
以此类先进的生化反应底物为基础,已制成各菌属细菌鉴定装置,一次可做10~40项试验,反应结果可由人工或仪器判定,在通过编码得出鉴定结果。
先进的细菌自动鉴定系统可在2~6h完成鉴定,就是在鉴定系统中应用了此类色原或荧光底物。
1.2微生物专有酶快速反应系统的检测技术微生物专有酶快速反应是根据细菌在其生长繁殖过程中可合成和释放某些特异性的酶,按酶的特性,选用相应的底物和指示剂,将他们配制在相关的培养基中。
根据细菌反应后出现的明显的颜色变化,确定待分离的可疑菌株,反应的测定结果有助于细菌的快速诊断。
这种技术将传统的细菌分离与生化反应有机的结合起来,并使得检测结果直观,正成为今后微生物检测发展的一个主要发展方向。
利用细菌中某些具有特征性的酶,应用适当的底物可迅速完成细菌鉴定。
如沙门氏菌具有辛酸酯酶,以4MU-辛酸酯酶为底物,经沙门氏菌酶解,在紫外灯下观察游离4MU的荧光。
卡他莫拉菌具有丁酸酯酶,可用丁酸酯色原底物快速鉴定等。
现将快速鉴定用细菌的特异性酶列于表1。
表1 致病菌快速诊断用的特异性酶部分微生物种类所具有的特异性酶脑膜炎奈瑟菌γ谷氨酰转肽酶肠球菌吡咯芳胺酶(PYR)、亮氨酸氨肽酶(LAP)沙门菌辛酸酯酶大肠埃希菌β葡萄糖醛酸酶白色念珠菌脯氨酸氨肽酶、N-乙酰β-D半乳糖苷酶热带念珠菌吡咯磷酸酶产单核李斯特菌丙氨酸氨肽酶金黄色葡萄球菌β- N-乙酰葡萄糖胺酶腐生,中间,斯氏葡萄球菌β半乳糖苷酶A族链球菌吡咯芳胺酶(PYR)难辨梭菌谷氨酸脱氢酶(GDH)、脯氨酸酶克柔念珠菌酸性磷酸酶Delise等新合成一种羟基吲哚-β-D葡萄糖甘酸(IBDG),在β-D葡萄糖苷酶的作用下,生成不溶性的蓝,将一定量的IBDG加入到麦康盖培养基琼脂中制成MAC-IBDG平板,35℃培养18h,出现深蓝色菌落者为大肠埃希氏阳性菌株。
其色彩独特,且靛蓝不易扩散,易与乳糖发酵菌株区别。
王金良教授等应用β-萘酚辛酯酶为底物,经沙门氏菌酶解,释出β- 萘酚与固兰作用出现紫色,反应在纸片上进行,只需5min即可完成沙门氏菌的鉴定。
这对食品与环境卫生检验有重要价值。
他们还运用对硝基酚-β-葡萄糖醛酸为底物不仅可快速鉴定大肠埃希菌,尚可在405 nm测定对硝基酚的释放量而定量,检测最低限可达100CFU/ml。
定量检测在环境与食品卫生检验中极为重要,此法提供一新的手段。
2以免疫学方法建立的快速检测技术免疫检测的基本原理是抗原抗体反应。
抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。
不同的微生物有其特异的抗原并能激发机体产生相应的特异性抗体。
在免疫检测中,可利用单克隆抗体检测微生物的特异抗原,也可利用微生物抗原检测体内产生的特异抗体,两种方法均能判断机体的感染状况。