中药成分对延边黄牛耳成纤维细胞氧化修复的作用
中药对线粒体能量代谢的影响

中药对线粒体能量代谢的影响中药是中国特有的药物治疗方法,其疗效主要来自于其对人体各个系统的调节作用。
线粒体是细胞内的一个重要细胞器,是细胞内能量代谢的关键部位,对于维持细胞的正常功能至关重要。
许多中药可以通过影响线粒体的能量代谢来达到治疗的效果。
中药可以通过调节线粒体的呼吸链来影响能量代谢。
呼吸链是线粒体内的一系列酶和蛋白质复合物,参与细胞内的氧化磷酸化反应,产生细胞所需的ATP分子。
一些中药可以通过调节呼吸链中各个复合物的活性,来增强线粒体的氧化磷酸化反应,提高ATP的产生能力。
人参中的人参皂苷可以增强线粒体呼吸链中的电子传递,增加ATP的生成。
黄芪可以增强线粒体膜的稳定性,提高线粒体的呼吸和能量代谢水平。
中药可以通过调节线粒体的脂肪酸氧化来影响能量代谢。
脂肪酸氧化是线粒体内的一个重要代谢途径,能够将脂肪酸转化为能量。
一些中药可以通过调节线粒体脂肪酸氧化的酶活性,来增强线粒体的脂肪酸氧化能力,促进脂肪的分解和能量的产生。
山楂中的山楂酸可以增强线粒体中脂肪酸酰基转移酶的活性,促进脂肪酸的氧化。
红景天中的红景天素可以抑制线粒体中的脂肪酸合成酶,促进脂肪酸的氧化和能量的产生。
中药可以通过抗氧化作用来保护线粒体的能量代谢。
线粒体是细胞内最重要的氧自由基产生和清除的地点,氧自由基的过度产生会造成线粒体的功能损伤和能量代谢的紊乱。
一些中药具有较强的抗氧化作用,可以减轻氧自由基的损伤,保护线粒体的功能和能量代谢水平。
当归、枸杞等中药中的活性成分可以清除线粒体内的氧自由基,保护线粒体的膜结构和呼吸链功能,增强能量代谢能力。
中药对线粒体能量代谢的影响主要表现在调节线粒体的呼吸链和脂肪酸氧化,以及保护线粒体免受氧化损伤。
通过调节线粒体的功能和能量代谢水平,中药能够提高细胞的能量供应,促进细胞的正常功能,从而达到治疗和保健的效果。
中药对线粒体能量代谢的影响

中药对线粒体能量代谢的影响
线粒体是细胞内的能量生产中心,能够将食物中的营养物质转化成细胞所需的ATP能量,维持正常的生物体代谢。
中药作为传统药物之一,具有调节能量代谢的作用,能够对线粒体能量代谢产生影响,本文从中药对线粒体能量代谢的影响角度进行论述。
1.中药对线粒体呼吸链的影响
中药能够影响线粒体内的呼吸链,从而调节线粒体的能量产生。
例如中药桑叶中有丰富的黄酮类化合物,其中黄酮会通过作用于线粒体呼吸链,调节氧化磷酸化过程,增加氧化磷酸化能量的产生。
此外,黄酮还能够促进线粒体的氧化还原能力,提高线粒体的电子传递速度,加速线粒体的能量产生过程。
4.中药对线粒体的抗氧化作用
线粒体是细胞内最主要的氧自由基来源,氧自由基可导致线粒体的损伤和功能障碍,因此抗氧化具有重要的生理意义。
中药对线粒体的抗氧化作用十分显著。
例如中药黄芪、龙虎山脉南芥、细辛、白芍等,均具有抗氧化作用,能够保护线粒体免遭氧自由基的损害。
综合来看,中药对线粒体的能量代谢具有广泛的调节作用,其中包括对线粒体呼吸链的影响、调节膜电位、增加ATP产量和抗氧化作用等。
这些作用有助于维持线粒体的正常功能,从而保持机体的健康状态,同时这些作用也为中药的临床应用提供了科学的理论基础。
中药对神经损伤的治疗作用与机制研究

中药对神经损伤的治疗作用与机制研究中药对神经损伤的治疗作用与机制研究中药是中国传统医学的重要组成部分,广泛应用于各种疾病的治疗中。
近年来,越来越多的研究显示,中药对于神经损伤的治疗具有显著效果,并且可以促进神经再生和修复。
本文将综述中药对神经损伤的治疗作用及其机制的研究。
一、中药对神经损伤的治疗作用1. 促进神经再生和修复中药中的一些有效成分可以通过促进神经细胞的生长和分化,加速神经再生和修复过程。
例如,人参黄酮具有增加神经突起生成和生长的作用,可以刺激神经再生。
另外,当归中的活性成分川芎嗪和川芎酮通过增加神经生长因子的表达,促进神经细胞的生长和分化,从而加速神经再生和修复。
2. 减轻炎症反应神经损伤后,炎症反应是一个重要过程,过度的炎症反应会加剧神经损伤。
中药中的一些成分具有抗炎作用,可以抑制炎症反应,减轻炎症损伤。
例如,当归中的川芎酮可以抑制炎性细胞的活化和炎性因子的释放,从而减轻炎症反应。
3. 抗氧化作用氧化损伤是神经损伤过程中一个重要的病理改变,中药中的一些有效成分具有抗氧化作用,可以减轻氧化损伤,保护神经细胞。
例如,黄芪中的黄酮类成分具有抗氧化作用,可以清除自由基,减轻氧化损伤。
4. 降低神经细胞凋亡神经细胞凋亡是神经损伤后一个常见的现象,过度的细胞凋亡会导致神经功能的进一步丧失。
中药中的有效成分可以通过抑制神经细胞凋亡,保护神经细胞。
例如,生地黄中的大黄酚和大黄酸可以通过调节细胞凋亡相关蛋白的表达,抑制神经细胞凋亡,减轻神经损伤。
二、中药对神经损伤的治疗机制1. 调节神经生长因子的表达神经生长因子是神经细胞生长和分化的重要调节因子,中药中的一些成分可以通过调节神经生长因子的表达,促进神经细胞的生长和分化。
例如,红景天中的景天苷可以通过上调神经生长因子的表达,促进神经再生和修复。
2. 抑制神经炎性因子的释放神经损伤过程中,炎性因子的释放会导致炎症反应的发生,进而加剧神经损伤。
中药中的一些成分可以通过抑制神经炎性因子的释放,减轻炎症反应,保护神经细胞。
中药对线粒体能量代谢的影响

中药对线粒体能量代谢的影响1. 引言1.1 中药在调节线粒体能量代谢中的作用中药可以通过多种途径影响线粒体能量代谢。
一些中药成分可以直接影响线粒体的功能,提高氧化磷酸化效率,增加ATP的合成。
部分中药还具有抗氧化和抗炎特性,减少线粒体受到损伤的可能性,保护线粒体健康。
许多中药成分被发现具有调节线粒体功能的潜力,如黄芩、黄连、当归等。
这些成分可以调节线粒体膜的通透性,促进电子传递链的正常运作,改善线粒体的功能。
中药在调节线粒体能量代谢中表现出潜在的疗效,为预防和治疗相关疾病提供了新的可能性。
在接下来的我们将更深入地探讨中药对线粒体能量代谢的影响机制以及在相关疾病中的应用情况。
2. 正文2.1 线粒体能量代谢及其在人体内的重要性线粒体是细胞内的能量生产中心,通过氧化磷酸化反应产生大部分细胞内的三磷酸腺苷(ATP),供给细胞各项生理活动所需的能量。
线粒体能量代谢对于人体内多种生理过程至关重要,如细胞分裂、蛋白质合成、细胞凋亡等。
线粒体在维持细胞内能量平衡的还参与调节细胞凋亡、细胞增殖等生命过程,对人体内的新陈代谢和细胞功能起着不可或缺的作用。
线粒体能量代谢的紊乱可导致细胞功能障碍、细胞凋亡增加以及细胞内氧化应激亢进等一系列问题。
维持线粒体能量代谢的稳定对于细胞和人体的健康至关重要。
线粒体在人体内的重要性不言而喻,其功能减退或异常可能导致多种疾病的产生,如代谢性疾病、神经系统疾病等。
研究中药对线粒体能量代谢的影响,探讨中药如何调节线粒体功能,对于预防和治疗与线粒体相关的疾病具有非常重要的意义。
中药作为传统医学的重要组成部分,其在调节线粒体能量代谢中的作用值得深入研究。
2.2 中药对线粒体能量代谢的影响机制1. 调节线粒体膜功能:一些中药成分如黄酮类化合物、生物碱等可以通过影响线粒体内膜的通透性和稳定性来调节线粒体的能量代谢。
这些成分可以改善线粒体的内环境,促进细胞内能量的产生和传输。
2. 活化线粒体呼吸链:线粒体呼吸链是细胞内能量合成的主要途径,中药中的一些活性成分可以通过激活线粒体呼吸链中的关键酶,促进氧化磷酸化过程,增加ATP产生,从而提高细胞内的能量水平。
《川射干异黄酮类化学成分的神经保护作用》

《川射干异黄酮类化学成分的神经保护作用》一、引言川射干,一种传统中药材,其药效成分中以异黄酮类化合物为主。
近年来,随着神经科学和药理学研究的深入,异黄酮类化学成分的神经保护作用逐渐成为研究热点。
本文将重点探讨川射干异黄酮类化学成分的神经保护作用及其可能的作用机制。
二、川射干及其异黄酮类化学成分川射干,又名紫花地丁、黄花草等,是一种具有清热解毒、利咽消肿等功效的中药材。
其药效成分主要包括异黄酮类化合物、黄酮苷、酚酸等。
其中,异黄酮类化合物是川射干的主要活性成分之一,具有抗氧化、抗炎、抗抑郁等作用。
三、神经保护作用的研究川射干异黄酮类化学成分在神经保护方面的作用日益受到关注。
多项研究表明,这类化合物在中枢神经系统损伤的保护和治疗中发挥了重要作用。
下面将重点探讨其神经保护作用的研究成果。
(一)抗氧化作用氧化应激是导致神经细胞损伤和死亡的重要原因之一。
川射干异黄酮类化合物具有较强的抗氧化能力,能够清除自由基,减轻氧化应激对神经细胞的损害。
实验表明,川射干异黄酮类化合物能够显著降低脑缺血再灌注损伤模型中氧化应激指标的升高,保护神经细胞免受氧化应激的损害。
(二)抗炎作用炎症反应是神经损伤后的重要病理过程。
川射干异黄酮类化合物具有显著的抗炎作用,能够抑制炎症介质的释放和炎症反应的进展。
研究表明,川射干异黄酮类化合物能够减轻脑缺血再灌注损伤模型中的炎症反应,保护神经细胞免受炎症的损害。
(三)抗抑郁作用抑郁症是一种常见的精神障碍,与神经系统的功能异常密切相关。
川射干异黄酮类化合物具有抗抑郁作用,能够改善抑郁症状,提高神经系统的功能。
研究表明,川射干异黄酮类化合物能够调节神经递质的释放和代谢,改善神经系统的功能,从而发挥抗抑郁作用。
四、作用机制探讨川射干异黄酮类化学成分的神经保护作用机制尚未完全明确,但研究表明其主要通过以下几个方面发挥作用:(一)调节氧化应激反应川射干异黄酮类化合物能够清除自由基,减轻氧化应激对神经细胞的损害,从而保护神经细胞免受氧化应激的损害。
双肽功效与作用是什么

双肽功效与作用是什么双肽是一类由两个氨基酸残基连接而成的肽链,具有多种生物活性和功效,包括促进细胞增殖、增强免疫功能、提高机体抗氧化能力等。
在医学美容领域,双肽已被广泛应用于护肤品和保健品中,被认为具有抗衰老、美白、紧致、抗皱等功效。
本文将详细介绍双肽的主要作用和各种功效。
一、促进细胞增殖与修复双肽能够促进细胞增殖和修复,主要通过激活细胞信号传导途径、提高胶原蛋白合成等途径实现。
研究表明,双肽能够刺激表皮细胞的分裂和增殖,促进细胞的更新和修复,并且可以通过提高细胞的自我修复能力,加速伤口愈合和皮肤组织的再生。
此外,双肽还能够促进基质细胞的增殖和胶原蛋白的合成,具有提高皮肤弹性和紧致度的作用。
二、增强免疫功能双肽还具有增强免疫功能的作用。
研究表明,双肽能够刺激免疫细胞的活性和功能,包括提高自然杀伤细胞的活力和增强巨噬细胞的吞噬功能等。
此外,双肽还能够促进抗体的生成和增强免疫细胞的信号传导,从而提高机体的免疫功能和抵抗力。
三、提高机体抗氧化能力双肽具有抗氧化作用,主要通过清除自由基、减少脂质过氧化和抑制氧化应激反应等途径实现。
研究表明,双肽能够有效中和多种自由基、减少氧化应激反应,并且能够增加抗氧化酶的活性,提高机体的抗氧化能力。
此外,双肽还能够修复氧化损伤的细胞和组织,减少氧化应激对机体的损害。
四、抗炎作用双肽具有抗炎作用,能够抑制炎症反应和炎症因子的产生。
研究表明,双肽能够抑制炎性介质的合成和释放,减轻炎症反应,提高机体抵抗炎症的能力。
此外,双肽还能够调节免疫细胞的活性和平衡炎症因子的产生,从而减少组织损伤和炎症反应。
五、抗衰老作用双肽具有抗衰老作用,主要通过促进细胞活力、提高胶原蛋白合成、抑制蛋白降解等途径实现。
研究表明,双肽可以减少皮肤细胞的老化,延缓皮肤衰老的进程。
此外,双肽还能够减少皮肤中的皱纹和黑色素,提高皮肤的光滑度和亮度,具有美白的作用。
另外,双肽还能够促进胶原蛋白的合成和阻断胶原蛋白的降解,保持皮肤的弹性和紧致度,减少皱纹和松弛现象。
长白山千济方金边桑黄的成分、功效、抗癌原理
长白山千济方金边桑黄的成分、功效、抗癌原理桑黄是一种大型的珍贵药用真菌,素有“森林软黄金”的美称。
长白山桑黄为金边桑黄,长白山为千济方金边桑黄的主要仿野生种植地域,千济方金边桑黄不仅外观美丽,而且里面的次代谢物质也丰富,抑制癌细胞转移的“Hispidin”含量是其他桑黄的5倍以上。
桑黄的主要成分是高分子多糖、黄酮、甾醇及三萜、多酚,其他为氨基酸、生物碱类等,有效成分达150多种。
桑黄的主要有效成分1)多糖明显抑制肿瘤的生长和转移,诱发肿瘤细胞的凋亡。
刺激淋巴细胞发挥免疫效应:刺激自然杀伤细胞吞噬肿瘤部位;诱导NO的产生,提高巨噬细胞的抗肿瘤活性。
最新实验表明,千济方金边桑黄多糖含量高达66.8%,是其它企业桑黄多糖含量的3倍;2)黄酮清除心血管中垃圾和自由基,排除体内毒素,修复呼吸道组织和皮肤受损组织,抗氧化、诱导肿瘤细胞凋亡。
3)甾醇及三萜增强人体免疫力,具有明显的抑菌抗炎功效,提升人体抵抗疾病的能力。
4)多酚抗氧化,清除自由基,促进血管舒张,降低炎症反应和降低血凝块形成。
桑黄已有2000多年的使用历史,中药古书早有记载:“久服轻身,不老延年”,适合长久服用。
目前,在抗癌植物药方面,桑黄的抗癌疗效在国际上被公认第一,其萃取物对肿瘤的增殖抑制率高达96.7%。
它的名气远不如冬虫夏草,但经日本、韩国多年的系统性研究发现,桑黄在抑制癌症的功效上远比目前发现的其他天然药材优胜。
日本、韩国更是广泛用于制药、保健食品、保健产品、美容护肤品及高端饮品。
桑黄的主要作用1、抗癌作用;(1)强化免疫力,尤其提高特异性免疫力,诱导癌细胞自行死亡(2)抑制癌细胞的增殖及转移(3)减轻化疗和放疗的副作用(4)缓解癌细胞患者特有的疼痛(5)阻止溃疡、息肉良性肿瘤等恶变为癌症(6)预防避免癌症的复发2、保肝护肝作用,抗肝纤维化,促进肝细胞再生,可用于防治慢性肝炎、肝硬化、肝腹水等;3、降低和调整血糖浓度,有效的预防及改善糖尿病;4、降低血脂,防止动脉硬化,防止心脑血管病的发生;5、预防和治疗类风湿性关节炎;6、桑黄提取物能够完全抑制尿酸,对痛风有良好效果;7、抗过敏,对过敏性鼻炎、久治不愈的湿疹疗效很好;8、化结节,如甲状腺结节、乳腺结节、肺结节等;桑黄的抗癌原理桑黄能明显增强四大免疫细胞(T细胞、B细胞、巨噬细胞、NK细胞)活性,提高机体免疫功能,通过免疫调节产生抗肿瘤作用。
延更丹的功效与作用
延更丹的功效与作用
延缓丹是一种中药材制成的药物,已经被广泛应用于中医临床中。
它具有以下几方面的功效与作用:
1. 延缓衰老:延缓丹中的活性成分具有抗氧化的作用,可以中和自由基,减少氧化应激对细胞和组织的损伤,从而延缓衰老过程。
2. 改善免疫功能:延缓丹中的活性成分具有免疫调节作用,可以提高机体的免疫力,增强机体对外界病原体的抵抗能力。
3. 调节内分泌:延缓丹中的活性成分可以影响内分泌系统的功能,调节激素水平,从而维持身体内各器官和系统的正常功能。
4. 促进消化:延缓丹中的活性成分对胃肠道具有保护作用,可以缓解胃肠道炎症,促进胃肠道的消化和吸收功能。
5. 抗炎止痛:延缓丹中的活性成分具有抗炎作用,可以缓解炎症反应,减轻疼痛感。
6. 改善心血管功能:延缓丹中的活性成分可以降低血脂、抗血小板凝聚,改善心血管功能,减少心血管疾病的发生风险。
需要注意的是,延缓丹作为中药药物,在使用时需要根据个人情况和医生的指导进行,不能乱用或过量使用。
中药美容中药精华液的抗衰老功效
中药美容中药精华液的抗衰老功效随着人们对美容的需求不断增加,中药美容逐渐受到关注并成为一种热门的美容方式。
中药精华液作为中药美容的重要产品之一,在抗衰老方面发挥着重要的作用。
本文将探讨中药美容中药精华液的抗衰老功效,并介绍一些常见的中药成分及其相关研究。
一、中药精华液的抗衰老机制中药精华液是由多种中药经过提取、浓缩而成,其中蕴含着丰富的活性成分。
这些活性成分具有抗氧化、抗炎和促进细胞再生的作用,从而对抗衰老起到重要的作用。
1. 抗氧化作用中药精华液中富含的多酚类化合物、黄酮类成分等具有显著的抗氧化作用。
抗氧化剂可以清除体内的自由基,减少自由基对细胞的损害,从而延缓细胞老化和皮肤衰老的过程。
2. 促进胶原蛋白合成胶原蛋白是皮肤中的主要结构蛋白,对保持皮肤的弹性和紧致起着重要的作用。
中药精华液中的一些成分,如人参、枸杞等,能够促进胶原蛋白的合成,从而改善皮肤的弹性和紧致度。
3. 抑制糖基化反应糖基化反应是衰老的一个重要原因之一。
中药精华液中的一些成分,如黄芪、何首乌等,具有抑制糖基化反应的作用,有助于减缓皮肤老化过程。
二、常见中药成分及其抗衰老研究1. 人参人参被广泛应用于中药美容领域,并被证实具有显著的抗衰老功效。
研究发现,人参中的活性成分可以促进胶原蛋白的合成,增强皮肤弹性,减少皱纹和细纹的产生。
2. 枸杞枸杞是一种常见的中药材,也是中药美容中常用的成分之一。
研究表明,枸杞中所含的多种活性成分具有显著的抗氧化作用,可以中和自由基,减少皮肤老化的程度。
3. 黄芪黄芪是中药中常用的滋补品,也有着抗衰老的功效。
黄芪中的多种成分能够抑制糖基化反应的发生,减少皮肤的老化现象。
4. 何首乌何首乌在中药美容中也被广泛应用,并被称为“黑发圣药”。
研究发现,何首乌中的成分可以增强毛囊细胞的活力,促进头发生长,同时也具有抗衰老的功效。
总结:中药精华液作为中药美容的重要产品,具有显著的抗衰老功效。
其抗氧化、促进胶原蛋白合成、抑制糖基化反应等作用,都对延缓皮肤老化、保持肌肤年轻有着重要的作用。
黄芪的抗衰老作用及其对皮肤的益处
黄芪的抗衰老作用及其对皮肤的益处黄芪,又称黄耆,是一种具有丰富药用价值的中草药材。
它在传统中医中被广泛应用,并被认为具有抗衰老的功效。
本文将介绍黄芪的抗衰老作用以及对皮肤的益处,并探讨其应用前景。
一、黄芪的抗衰老作用1. 抗氧化作用黄芪富含多种抗氧化剂,如黄酮类化合物、多糖和黄酰苷等。
这些化合物能够帮助清除自由基,减少氧化应激反应的发生,并保护细胞免受氧化伤害。
研究表明,黄芪的抗氧化作用能够延缓细胞老化过程,减少皮肤的皱纹和松弛。
2. 促进胶原蛋白合成胶原蛋白是构成皮肤组织的主要成分,对维持皮肤弹性和紧致起着重要作用。
黄芪中的多糖类化合物能够刺激体内胶原蛋白的合成,增强皮肤的弹性,并减少皮肤松弛和皱纹的形成。
3. 抑制细胞衰老黄芪中的黄酰苷和黄酮类化合物具有抑制细胞衰老的作用。
它们能够靶向DNA损伤、氧化应激和细胞凋亡等衰老过程,减缓细胞的老化速度。
通过抑制细胞衰老,黄芪可以改善皮肤质地,使皮肤更加光滑和紧致。
二、黄芪对皮肤的益处1. 保湿滋润黄芪中富含的多糖类化合物具有强大的保湿能力,能够帮助皮肤吸收和保持水分。
这对于干燥的皮肤来说尤为重要,能够缓解皮肤干燥和瘙痒等不适症状,使皮肤保持滋润和柔软。
2. 改善肤色黄芪中的活性成分能够促进皮肤细胞的新陈代谢,增强血液循环,并帮助排除体内的毒素。
这些作用有助于改善肤色,使肤色更加均匀、透亮。
3. 减轻皮肤炎症和过敏黄芪具有抗炎和抗过敏的特性,能够缓解皮肤炎症和过敏反应。
它可以减少炎症引起的红肿和痒痛,并增强皮肤的自我修复能力。
三、黄芪的应用前景随着人们对美容和抗衰老需求的不断增加,黄芪作为一种天然的抗衰老成分,逐渐受到关注。
目前,黄芪已被广泛应用于护肤品和美容产品中。
例如,黄芪萃取物可作为面霜、精华液和面膜等产品的原料,用于改善皮肤质量、减少皱纹和紧致松弛的皮肤。
此外,黄芪的口服补充剂也逐渐受到欢迎。
人们可以通过口服黄芪补剂来增强免疫力、改善睡眠质量,从而提高整体的身体健康状况。
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中药成分对延边黄牛耳成纤维细胞氧化修复的作用
摘要:利用h2o2建立延边黄牛耳成纤维细胞氧化损伤模型,在耳成纤维细胞培养液中分别添加不同浓度的小蘗碱、川芎嗪和淫羊藿苷培养24、48、72和96 h,对延边黄牛耳成纤维细胞氧化损伤进行修复。
结果表明,1 μmol/l小蘗碱、50 μg/ml川芎嗪及0.001 μg/ml淫羊藿苷培养72 h后细胞活力均显著高于对照组,其对氧化损伤的修复作用显著高于自我修复组。
关键词:小蘗碱;川芎嗪;淫羊藿苷;延边黄牛;耳成纤维细胞;氧化修复
中图分类号:q813.1+1 文献标识码:a 文章编号:0439-8114(2013)02-0381-03
延边黄牛是我国的珍贵家畜品种之一,具有优良的品种特征和肉品特性。
在延边黄牛体细胞克隆中,氧化损伤是不可忽略的因素。
以往研究者主要针对卵母细胞和胚胎抗氧化方面进行了很多研究。
韩岩等[1]研究表明添加一些抗氧化剂可以降低ros对卵母细胞ivm 发育过程中的损伤,提高卵母细胞ivm的效率,例如1.0 mmol/l
的谷氨酰胺能够显著提高卵母细胞的成熟率,同时也能提高囊胚率,表明谷氨酰胺能够提高延边黄牛卵母细胞的体外成熟率,并能促进囊胚发育。
中药是中华民族五千年文化的瑰宝,小蘗碱、川芎嗪及淫羊藿苷在抑制癌细胞生长及抗氧化中发挥着重要的作用。
该研究通过在延边黄牛耳成纤维细胞培养液中添加小蘗碱、川芎嗪和淫羊藿苷,提
高延边黄牛耳成纤维细胞的细胞活力,以增强其对氧化损伤的修复能力,以期提高核供体的质量和克隆效果。
1 材料与方法
1.1 材料
dmem培养液、30%h2o2、edta、胰蛋白酶、mtt、二甲基亚砜、氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、磷酸氢二钠及hoechst 33342均购自sigma公司;新生胎牛血清购自浙江天杭生物科技有限公司;小蘗碱、川芎嗪和淫羊藿苷由中国药品生物制品检定所提供。
1.2 方法
1.2.1 延边黄牛耳成纤维细胞的培养耳组织块剪切1 mm3左右的小块,加入等体积的0.25%胰蛋白酶,4 ℃消化过夜,将消化下来的液体接种于培养瓶中,24 h后换液。
待细胞生长至85%以上,用0.25%胰蛋白酶消化,然后按1∶3进行细胞传代。
1.2.2 用小蘗碱、川芎嗪和淫羊藿苷处理细胞检测其对细胞活力的影响将生长至85%左右的第五代耳成纤维细胞以0.25%胰蛋白酶消化,然后用10%血清的dmem培养液终止消化,细胞计数后以1.5×105 ~2×105 个细胞的密度接种于96孔板,每孔补培养液至200 μl,培养24 h后吸弃培养液,分别加入10、1、0.1、0.01μmol/l 的小蘗碱,100、50、25 μg/ml川芎嗪和1、0.1、0.01、0.001 μg/ml的淫羊藿苷各200 μl,培养24、48、72和96 h。
空白对照中的细胞添加10%血清的培养液,用mtt法测定细胞在波长492 nm 处的吸光值,筛选出最适浓度和时间。
每个浓度重复4次,试验重
复3次。
1.2.3 氧化损伤细胞模型的建立细胞按照“1.2.2”方法铺板后,置于37 ℃、5% co2培养箱内培养24 h,吸去培养液,添加0.5 mmol/l h2o2培养液,再放入37 ℃、5% co2培养箱内培养30 min。
1.2.4 氧化损伤细胞活力的测定细胞加入0.5 mmol/l h2o2的培养液培养30 min后,用mtt法测定细胞在波长492 nm处的吸光值。
1.2.5 自我氧化修复细胞活力的测定细胞按照“1.2.2”方法铺板后,加入0.5 mmol/l h2o2的培养液培养30 min后,吸去氧化损伤细胞的培养液,加入适量dmem培养液洗3遍,将孔内h2o2的培养液洗干净,再添加200 μl 10%血清的dmem培养液进行培养。
培养到待测时间后,用mtt法测定细胞在波长492 nm处的吸光值。
1.2.6 小蘗碱、川芎嗪和淫羊藿苷氧化修复后细胞活力的测定
细胞按照“1.2.2”方法铺板后,加入0.5 mmol/l h2o2的培养液培养30 min后,吸去氧化损伤细胞的培养液,加入适量dmem培养液洗3遍,将孔内h2o2的培养液洗干净,再添加含有最适浓度中药的10%血清的dmem培养液200 μl进行培养,培养到筛选出的时间后,用mtt法测定细胞在波长492 nm处的吸光值。
1.2.7 数据统计所有数据均用x±s表示,用spss 17.0统计分析软件处理,p2.4 小蘗碱、川芎嗪和淫羊藿苷对延边黄牛耳成纤维细胞的氧化修复作用
小蘗碱对延边黄牛耳成纤维细胞的氧化修复作用见表4。
由表4
可知,0.5 mmol/l h2o2能够抑制延边黄牛耳成纤维细胞生长,1 μmol/l小蘗碱培养72 h后的细胞活力比自我修复组和对照组高且差异性显著,表明小蘗碱能够有效地修复延边黄牛耳成纤维细胞的氧化损伤。
川芎嗪对延边黄牛耳成纤维细胞的氧化修复作用见表4。
由表4可见,0.5 mmol/l h2o2能够抑制延边黄牛耳成纤维细胞生长,50 μg/ml川芎嗪培养72 h后细胞活力比自我修复组和对照组高且差异性显著,表明川芎嗪能够有效地修复延边黄牛耳成纤维细胞的氧化损伤。
淫羊藿对延边黄牛耳成纤维细胞的氧化修复作用见表4。
由表4可见,0.5 mmol/l h2o2能够抑制延边黄牛耳成纤维细胞生长,0.001 μg/ml淫羊藿苷培养72 h后细胞活力比自我修复组和对照组高且差异性显著,表明淫羊藿苷能够有效地修复延边黄牛耳成纤维细胞的氧化损伤。
3 小结与讨论
中药成分在胚胎发育方面的抗氧化作用逐渐引起人们的注意。
李玉芳等[2]证实肉苁蓉和黄芪均能够显著促进早期胚胎发育。
张建芳等[3]也证实了黄芪多糖能提高体外受精胚胎发育率和孵化率。
小剂量的淫羊藿苷能明显促进猪体外孤雌激活胚胎的发育。
中药成分促进胚胎发育与它在一定程度上清除氧自由基有关[4]。
在核移植实验中,将活力好的细胞冷冻供核前解冻。
延边黄牛耳成纤维细胞虽然是体细胞核移植中的供体细胞,但是对其细胞特性
的研究较少,在培养的过程中细胞老化是一个很严重的问题。
在冷冻、解冻和消化等操作中,细胞会不可避免地暴露在比体内氧浓度高的环境中,因此会受到氧化应激的损伤,并且随着细胞的传代,细胞逐渐衰老,抵抗氧化损伤以及修复的能力逐渐下降。
该试验在体外研究了最佳浓度的淫羊藿苷、小蘗碱和川芎嗪对氧化损伤的延边黄牛耳成纤维细胞的修复能力的影响。
结果表明,淫羊藿苷、小蘗碱和川芎嗪能对氧化损伤的延边黄牛耳成纤维细胞的修复能力比自我修复能力显著增高。
因此,小蘗碱、川芎嗪和淫羊藿苷具有较好的氧化修复能力,对细胞起到保护作用。
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