分析化学之经典液相色谱法_2011

二、液-固吸附色谱（liquid-solid adsorption chromatography）
（一）分离原理 （二）常用吸附剂 （三）吸附剂和流动相的选择
（一）分离原理(separation mechanism)
各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂表面的活性吸附中心对不同组分的 吸附能力差异而实现分离 （二）常用吸附剂(absorbent)：多孔、微粒状物质,吸附 能力与吸附中心的多少及氢键形成能力的大小有关
1. 硅胶 2. 氧化铝 3. 聚酰胺
结构：内部——硅氧交联结构→多孔结构 表面——有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心
1. 硅胶（SiO2·H2O, silica gel）
特性： 1）与极性物质或不饱和化合物形成氢键 物质极性↑，吸附能力↑→强极性吸附中心，不易洗脱 吸附活性次序：活泼型>束缚型>游离型 2）吸水→失活 →105～110OC烘干30分钟(可逆失水)→吸附力最大 →500OC烘干(不可逆失水)→活性丧失，无吸附力
续前
4. 三者关系图示： 组分 极性 非(弱)极性
吸附剂 活性小 活性大
流动相 极性 非极性或弱极性
三、离子交换色谱 Ion-Exchange Chromatography
固定相(solid phase)：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂； 流动相(mobile phase)：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水 溶液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应；组分与离子 交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力 大，保留时间长； 阳离子交换：R—SO3H +M+ = R—SO3 M + H + 阴离子交换：R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。
（一）概述
1 ． 薄 层 色 谱 法 （ Thin Layer Chromatography, TLC ） ： 将 固 定 相 均 匀 涂布在表面光滑的平板 上，形成薄层而进行色 谱分离和分析的方法 2．操作过程： 铺板 →活化 →点样 → 展 开 →定位(定性)/洗脱(定 量)
－
ＣＯ３２－ ＨＣＯ３－
ＨＣＯ３－
＋ ＨＣＯ３ ＋ ＣＯ３２－ ＳＯ４ － ＋ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ＣＯ３２－ ＋ ＋ ＨＣＯ３－ Ｃｌ－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＋ ＣＯ３２－
－
ＣＯ３２－ Ｃｌ－
ＨＣＯ３－
＋ ＨＣＯ３ ＋ ＳＯ４２－ ＋ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＣＯ３２－ ＋ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ Ｃｌ－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＋ ＣＯ３２－
适用：分析酸性或中性物质
续前
2. 氧化铝
碱性氧化铝 pH 9～10 适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝 pH＞7.5 适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝 pH 4～5 适于分析酸性、中性物质
3. 聚酰胺
氢键作用 氢键能力↑强，组分越后出柱
（三）吸附剂和流动相的选择：
依据被测组分、吸附剂和流动相的性质 1. 被测组分性质（极性大小）： 烃＜ - - - - - - - - ＜羧酸，醇 2. 吸附剂的活性： 吸附剂的活性↑大，对被测组分的吸附能力↑强 强极性物质——选择弱吸附剂 弱极性物质——选择强吸附剂 3. 流动相的极性： 流动相极性↑大，对被测组分的洗脱能力↑大 “相似相溶”原则 ：根据组分性质、吸附剂的 活性，选择适当极性的流动相
阳离子交换树脂 (接枝型)
ＣＯＯ－ ＨＰＯ３－ ＣＯＯ－ ＣＯＯ－ ＨＰＯ３－ ＣＯＯ－ ＣＯＯ－ ＨＰＯ３－ ＨＰＯ３－
ＣＯＯ－
ＣＯＯ－ ＨＰＯ３－
－ ＨＰＯ３－ ＣＯＯ
ＣＯＯ－ ＨＰＯ３－
离子交换分离机理
ＣＯ３２－ ＳＯ４２－
＋ ＨＣＯ３ ＋ ＣＯ３２－ Temporal ＋ course ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＣＯ ２－ ３ ＋ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＋ ＣＯ３２－
ＣＯ３２－
ＳＯ４２－ ＨＣＯ３－
ＨＣＯ３－
四、薄层色谱法(TLC, thin layer chromatography)
（一）概述(general describe) （二）定性参数(qualitative parameters ) （三）吸附剂的选择(choice of adsorbent) （四）展开剂的选择 (choice of development) （五）定性与定量分析 (qualitative and quantitative analysis)
阴离子交换树脂 (乳胶型）
ＳＯ３－ Ｎ＋Ｒ３ ＳＯ３－ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３
ＳＯ３－
Ｎ＋Ｒ３
Ｎ＋Ｒ３ ＳＯ３－
Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３
Ｎ＋Ｒ３
＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋ ５μm ＋ ＋＋＋＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋＋＋
分析化学(二)
第十八章 经典液相色谱法
主要内容
一、概述 二、液固色谱法 三、离子交换色谱法 四、薄层色谱法 五、纸层色谱法
一、概述
液相色谱法：以液体为流动相的色谱法称～。 经典液相色谱：固定相颗粒较大且不均匀 classic liquid C 常压下输送流动相 柱效较低 分析周期长 现代液相色谱：固定相颗粒小且均匀 Contemporary 高压下输送流动相 liquid C 柱效较高 分析周期短
－
ＣＯ３２－
ＣＯ３２－ ＨＣＯ３－
ＨＣＯ３－
＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＳＯ４２－ ＋ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＣＯ ２－ ３ ＋ ＋ ＨＣＯ３－ Ｃｌ－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＋ ＣＯ３２－
ＣＯ３２－ ＣＯ３２－ ＨＣＯ３－
Ｃｌ－
＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＣＯ３２－ ＳＯ４２－ ＋ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＣＯ３２－ ＋ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＨＣＯ３－ ＋ ＋ ＣＯ３２－