HPLC流动相的注意事项
HPLC流动相的注意事项
>> 流动相的作用
流动相具有运载样品分子的作用。
流动相还具有选择性分离的作用。
当固定相一定时，流动相的种类、配比和流动速度都严重影响分离效果。>> 流动相的种类
液相色谱所用流动相根据分析目的可分为单一或混合流动相。
混合流动相还可分为比例固定和比例可变流动相。
梯度洗脱就是使用比例可变流动相。
>> 流动相使用的注意事项
流动相的级别
流动相的处理
——过滤和脱气
流动相的置换
>> 流动相的级别-水
水是最常见的极性溶剂
HPLC用水的要求：纯化水（重蒸水）
因为不纯物的存在，去离子水的吸光率较高。
纯化水中去除了无机和有机的污染物，因此吸光率降低。
>> 流动相的级别-有机试剂
采用“HPLC”级溶剂
溶剂级别
–HPLC级
–优级纯
–分析纯
1、都经过蒸馏和0.45um滤膜的过滤(除纤维毛、未溶解的机械颗粒等）。
2、优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有极微量的防腐剂和抗氧化剂，这些添加剂往往有紫外吸收。
3、HPLC级经过0.2um滤膜的过滤,且除去有紫外吸收的杂质。
>> 分析纯级和HPLC级溶剂的吸光度比较图
>> 流动相的处理——过滤
?使用0.45um或更小孔径滤膜过滤，注意滤膜的种类。
?目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞管路和色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液时。
>> 滤膜类型
1、聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐。
2、醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。
3、尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适用于二甲基甲酰胺。
4、再生纤维素滤膜：蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂。
>> 过滤的注意事项
?不同的试剂分别过滤，过滤后再混合。
?注意滤膜的选择，不要混用。
?要现用现处理，尤其是水和缓冲液。
?要注意操作过程中的防尘。
?试样也必须过滤，可用一次性针头式过滤器。
>> 流动相的处理——脱气
?目的：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡。
?使用梯度洗脱时要有在线脱气装置。
?气泡对测定的影响：
1、造成压力波动，影响保留时间。
2、色谱柱中的气泡会造成峰变形。
3、检测池中的气泡会造成基线波动。
>> 脱气的方法
?1、超声波振荡脱气
?2、氦气置换清除法
?3、使用树脂膜的减压脱气法
?应根据实际的使用情况选择合适的脱气方法。单一流动相或配合好的混合流动相可以采用超声振荡脱气，梯度洗脱最好使用在线减压脱气。
>> 氦气置换清除法
>> 使用树脂膜的减压脱气法
>> 流动相的置换
?极性相似的试剂可以直接置换。
?极性不同的试剂，应用中间试剂作过渡。
例如：甲醇置换为正己烷时，可以考虑选择异丙醇作为中间试剂。
?缓冲液的置换应先用水冲洗，再用有机试剂置换水。直接使用有机试剂会造成盐的结晶，堵塞管路和色谱柱。
伴热带安装注意事项
伴热带安装中注意事项 每隔约1250px将电热带用玻璃纤维压敏胶带或铝胶带固定在干管道上，平时尽可能 将电热带附在管道下45度下方;在线路的第一供电点和尾端各预留lm长的电热带;在所有 散热体如支架、阀门、法兰等处应预留一定长度电热带，以便随时拆除、维修、更换等。 在使用二通或三通配件处电热带各端端应预留1000px长，多根电热带应注意合理选择电 源点，要便于维修。保温层材料必须干燥，应加防水外罩，在保温层外加警示标签注明“内有电热带”。 另外注意事项： 1.安装前 防锈防腐涂层要干透、管道上毛刺和利角，电热带表面无破损，电热带绝缘电阻应 ≥20MΩ(1000VDC)。不要强力拉扯电热带，避免脚踏或重物放置电热带上;电热带与所有配件的型号应与设计要求一致。 2.安装后的检查及测试 检查电热带表面是否损坏，用摇表2500VDC测试每一独立线路一端，绝缘电阻应在 20MΩ以上。应保证电源部分过载保护、漏电保护和防爆安全装置良好。 3.特别注意事项 严禁蒸汽伴热和电伴热混用于一体，加热带安装时不得破坏绝缘层，应紧贴于被加热 体以提高热效率。若被伴热体为非金属体，应用黏胶带增大接触传热面积，以尼龙扎带固定，严禁用金属丝绑扎。法兰处介质易泄漏，缠绕电热带时应避开其正下方。电热带一端 接入电源，另一端线芯严禁短接或与导电物质接触并剪切为“V型，必须使用配套的封头严密套封;防水防爆场合应有配套的防爆接线盒和终端子。接线后应用硅橡胶密封（使用屏蔽层的电热带终端处须将屏蔽层剥离250px，以防短路);安装时应逐一测量伴热点的绝缘， 屏蔽层必须接地，绝缘阻值小能低于20MΩ}(1OOOVDC)o按电伴热各路的电压、电流等 参数选定双极性断电和漏电保护断路器，凡需蒸汽清扫管线除垢时，应注意先清扫后安装 电热带，如需每年例行扫线检修应按特殊情况,设计安装。 4.自控电伴热长线专用于长输管线的防冻和保温。最高维持温度为65℃。单一电源线路可达3660m(双向供电可达7320m）。伴热线适用于普通区、危险区或腐蚀区。 5.自控电伴热长线专用于长输管线的防冻和保温。它有较高的维持温度(最高150℃)，并能承受较高的暴露温度最高215℃)。单一电源长度可达1830m。伴热线适用于普遍区、危险区，防腐区。 1、施工前必须了解所用电伴热带的结构、性能和安装要求。 2、电伴热带的安装调试和运行必须遵循国家颁布的GB50254-96《爆炸和火灾危险环境电气装置施工及验收规范》和GB50257—96《低压电器施工及验收规范》等有关条文。 3、各种电伴热带安装敷设时均有最小弯曲半径要求，如果过度弯曲将会损坏电伴热带。 4、沿管道平行敷设的电伴热带一般安装在管道下方，且与管道横截面的水平轴线呈45。角，若用2根电伴热带要对称敷设。 5、在容器上安装时，电伴热带应缠绕在容器中下部，通常不超过容器高度的2/3，一
伴热带使用管理规定培训讲学
平阴山水水泥有限公司伴热带使用管理规定为节约能源，降低电耗，并结合平阴山水实际情况，为保障设备长期连续运转，减少设备损坏率，响应国家节能减排政策，加强对公司伴热带的管理，特制订本伴热带使用管理规定： 1、伴热带使用时间严格按照公司下发停送电通知进行开启使用。 1.1 严禁提前或超出规定时间发生通电现象，发现一次考核100 元或按提前、超出规 定时间的耗费电量原价进行考核。 1.2 在规定时间内未通电或不能使用的每次考核100 元。 1.3 特殊岗位如需要提前或超出规定时间使用伴热带须向监控中心提交书 面申请，申请批复以后才能使用，否则按照以上规定进行考核。 2、车间内部必须建立伴热带使用台账，包括使用位置、数量、能否全部发热，安 装时间、老化程度、计划更换时间，台账必须做到及时更新。发现不更新或无台账的一次考核50 元。 2.1 车间内部做好伴热带的日常维护巡检工作，及时发现处理伴热带运行故障，如自行跳闸、发热温度达不到、电源线老化等，车间内部及时发现恢复，一经被公司统一查到每次每处考核车间50 元。 3、伴热带必须按照设备的实际情况进行安装，必须做好保温层和防水层，尤其是室 外，一旦雨水侵入层内，保温能力将大大下降，如遇护套破损，可能造成电击穿，发生火花或暗火。因此要加强现场管理，防止施工人员无意损坏伴热电缆，在绝缘测试合格应尽快安装保温层和防水层，安装时应防止金属薄板割破伴热电缆护套，固定设 施牢固严禁拉划 伤伴热带防护层。
3.1 伴热带必须设立单独控制电源、并做好控制电源的防水。发现和其它用电设备混用串联的一次考核50 元。 3.2 伴热带安装后严禁外露，外露接线长度不能超过20 厘米，如有超出的考核50 元。 3.3 伴热带使用中被保温物体两物体之间距离距离超过50 厘米以上严禁用伴热带直接串联 4、注意事项： 4.1 电热带在安装及使用时不许扭曲，不许反复弯折，严禁损坏外护套，破坏绝缘。4.2 安装时要避开易燃易爆介质可能积聚的沟坑暗角等部位。 4.3 选用电热带时注意其防爆温度组别，不得超过易燃介质闪点或自燃温度的75% 。 4.4 施放电热带时不要打硬折或长距离的在地面拖拉。 4.5 电热带的安装必须在介质管路系统全部安装结束，并经水压或气密试验合格后进行。保温层的施工必须在电热带全部安装、调试结束，送电正常后进行。 4.6 电热带安装时遇到锐利的边棱、锐角应打磨光滑或垫上铝胶带，以防破坏外绝缘层。 4.7 电热带安装时最小弯曲半径原则上应不小于其厚度的5 倍。 4.8 电热带安装时应紧贴在管道上，尽可能采用铝胶带粘贴，途径处的油污和水分，应处理干净，每隔0. 5?0. 8 m，用耐热胶带将电热带沿径向固 4.9 安装电热带附件时，应留一定余量，以备检修使用，对于PTC 并联式电热带，因其是由许多段发热节并联组合而成, 所以其首尾各有几十厘米的冷端, 安装时应从发热的部位开始，首尾两端的发热体（尤其是并联式的发热丝）应尽可能剪短，严禁外露，严禁与外编织网或管道接触。 4.10 除了自控温电热带外其它规格电热带安装时不允许交叉、重叠。
液相色谱流动相的选择经验
一．关于液相色谱仪紫外检测器中分析波长的选择一般来说应该遵循以下原则： 1、你的分析目的，也就是你的目标组分是什么，是主要组分还是杂质组分。 2、确定目标组分之后，一般选择目标组分的特征波长。按照朗伯-比尔定律来说只有在特征波长处的吸光度才可以和浓度成正比关系。 3、确定了特征吸收波长之后，根据灵敏度的不同来选择是选择最灵敏度线还是选择次灵敏度线。有时有的组分灵敏度过高，会造成标准曲线的弯曲，所以要选择次灵敏度线。 4、确定了吸收波长之后，根据样品的实际情况来选择定量方法。 二．最好是246nm，甲醇，乙腈等吸收都在190左右了，210距离太近，仪器平衡时间常是当然的了，如果选用210，环境一定要稳定才行啊。 不知道你是怎样定量，其他物质在246处是否都出峰呢？ 三．最大吸收波长处的干扰过大，选择肩峰位置的吸收波长是可行的，很多文献就是这么处理的。 四．不知道你使用的流动相有哪些成分,经常使用的甲醇乙腈和水在此波长下是没有紫外吸收的,我经常使用210nm这个波长测定物质含量.在低波长基线不大稳,干扰比较大的情况我也遇到过,在低波长下好多物质都有吸收,经常出现很多未知峰.有的检测器氘灯使用一段时间后,在低波长下检测也会出现上述情况,换到高波长基线就好许多.我觉得你应该再去系统的尝试一下. 五．要求最佳吸收波长做，但不一定是最大吸收波长，最适合的才是最好的六．DAD收集200-400（700）nm全部数据，分别进空白和标准样品，三维谱图可以清晰地帮助你选择吸收波长。原则是：干扰物吸收尽量小，目标物尽量吸收尽量大！ 推荐 326nm 276nm 同时采集不就可以啦，分别能得到分辨率高的色谱图！只要标准样品和试样在同样的采集参数下测试，对于结果的测定没有什么影响！
电伴热带使用说明书
电伴热带使用说明书 目录 第一章概述 (1) 第二章电伴热产品 (2) 型恒功率并联电热带 (2) 一、HC-BL-J 3 二、HC-BL-J 型单相、三相恒功率高温电热带 (5) 4 三、HC-XW系列自限温电伴热带 (6) 四、HC-CL型串联式电热带 (8) 五、HC-CR船用型电热带 (10) 六、集肤效应加热电缆 (11) 七、MI加热电缆 (12) 第三章电伴热带配套附件与安装附件 (15) 第四章控制系统 (20) 一、电源控制箱（柜） (20) 二、远程监控系统 (22) 第五章电伴热产品的设计计算方法及选型 (22) 一、管道及附件散热量的计算 (23) 二、罐体容器散热量的计算 (26) 三、有关公式介绍 (28) 四、选型方法 (28) 第六章安装与运行 (29) 第七章典型安装方式示意图…………………………………………………………
第一章概述 所谓电伴热是用电热来补偿被伴热体（容器、管道等）在工艺生产过程中的热量损失，以维持最合适的介质工艺温度，其温度高低以介质流动阻力最小、生产效率最高、耗电最少和综合费用最低为目的，以最佳传热分布及低功耗为原则，发热形式是沿长度方向或大面积均匀放热、温度梯度小、温度稳定，适合长期使用。产品是高新技术产品，是传统的热水伴热、蒸汽伴热的取代品，是绿色无污染的环保产品。 一、电伴热特点 ●节能显著、能耗低； ●体积小、可靠性高、寿命长、适用范围广； ●设计、安装、维护简单； ●无“跑”、“冒”、“滴”、“漏”等现象，无任何污染； ●伴热温度不受季节、介质等因素影响，根据要求自动调整； ●工程投资回收周期短； ●易于实现集中自动化控制。 二、节能效果 ●电伴热体积小、接触面积大、传输损失小，而蒸汽伴热和热水伴热需加伴热管线 接触传递热量，传输热损失大。 ●电伴热能保证首尾端发热均匀，而蒸汽和热水伴热为了保证尾端的热值，必须提 高首端的发热量，会使首端和沿途的热量出现过补偿，浪费大量热能。 ●电伴热能进行自动控制，而蒸汽和热水伴热难以按管道温度变化自动跟踪调节伴 热发热量，以适应季节和昼夜环境温度变化以及首尾端和沿途各处温度变化引起的过量热补偿。 ●电伴热综合热效率很高，据全国十大电厂统计，从电厂到用户（管道、容器等） 的综合效率为29.4-35%，电伴热器材的发热效率接近100%。 三、经济费用
伴热带使用管理规定
平阴山水水泥有限公司 伴热带使用管理规定 为节约能源，降低电耗，并结合平阴山水实际情况，为保障设备长期连续运转，减少设备损坏率，响应国家节能减排政策，加强对公司伴热带的管理，特制订本伴热带使用管理规定： 1、伴热带使用时间严格按照公司下发停送电通知进行开启使用。 1.1严禁提前或超出规定时间发生通电现象，发现一次考核100元或按提前、超出规定时间的耗费电量原价进行考核。 1.2在规定时间内未通电或不能使用的每次考核100元。 1.3特殊岗位如需要提前或超出规定时间使用伴热带须向监控中心提交书面申请，申请批复以后才能使用，否则按照以上规定进行考核。 2、车间内部必须建立伴热带使用台账，包括使用位置、数量、能否 全部发热，安装时间、老化程度、计划更换时间，台账必须做到及时更新。发现不更新或无台账的一次考核50元。 2.1车间内部做好伴热带的日常维护巡检工作，及时发现处理伴热带运行故障，如自行跳闸、发热温度达不到、电源线老化等，车间内部及时发现恢复，一经被公司统一查到每次每处考核车间50元。 3、伴热带必须按照设备的实际情况进行安装，必须做好保温层和防 水层，尤其是室外，一旦雨水侵入层内，保温能力将大大下降，如遇护套破损，可能造成电击穿，发生火花或暗火。因此要加强现场管理，防止施工人员无意损坏伴热电缆，在绝缘测试合格应尽快安装保温层和防
水层，安装时应防止金属薄板割破伴热电缆护套，固定设施牢固严禁拉划伤伴热带防护层。 3.1伴热带必须设立单独控制电源、并做好控制电源的防水。发现和其它用电设备混用串联的一次考核50元。 3.2伴热带安装后严禁外露，外露接线长度不能超过20厘米，如有超出的考核50元。 3.3伴热带使用中被保温物体两物体之间距离距离超过50厘米以上严禁用伴热带直接串联 4、注意事项： 4.1电热带在安装及使用时不许扭曲，不许反复弯折，严禁损坏外护套，破坏绝缘。 4.2安装时要避开易燃易爆介质可能积聚的沟坑暗角等部位。 4.3 选用电热带时注意其防爆温度组别，不得超过易燃介质闪点或自燃温度的75%。 4.4施放电热带时不要打硬折或长距离的在地面拖拉。 4.5电热带的安装必须在介质管路系统全部安装结束，并经水压或气密试验合格后进行。保温层的施工必须在电热带全部安装、调试结束，送电正常后进行。 4.6电热带安装时遇到锐利的边棱、锐角应打磨光滑或垫上铝胶带，以防破坏外绝缘层。 4.7 电热带安装时最小弯曲半径原则上应不小于其厚度的5 倍。 4.8电热带安装时应紧贴在管道上，尽可能采用铝胶带粘贴，途径处的油
液相色谱流动相基础知识-扫盲篇
液相色谱流动相基础知识-扫盲篇 一、液相色谱流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在SPME填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流动相的粘度成反比。所以选择流动相时应考虑以下几个方面： ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料会计考试有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧 化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。 ②纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。 ③必须与检测器匹配。使用UV检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收，或吸收很小。当使用示差 折光检测器时，应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相溶剂瓶，以提高灵敏度。 ④粘度要低（应<2cp）。高粘度溶剂溶剂瓶会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压降增加，使 分离时间延长。最好选择沸点在100℃以下的流动相。 二、液相色谱流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸会计考试的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；对弱碱，情况相反。分析弱酸经济师样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L 三乙胺溶液。 注：流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的相互网上培训作用，减轻或消除峰拖尾现象。 所以在这种情况下有机胺（如三乙胺）又称为减尾剂或除尾剂。 三、液相色谱流动相的选择 在化学键合相色谱法中，溶剂的洗脱能力直接与它的极性相关。在正相色谱中，溶剂的强度随极性的增强而增加；BR>正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。
高效液相色谱流动相选择
高效液相色谱流动相选择 流动相 流动相的性质要求：一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。2：三倍规则：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。 3：粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂10%的改变量调整为5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不再改变。 选择流动相时应考虑以下几个方面： ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。②纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。③必须与检测器匹配。使用UV检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收，或吸收很小。当使用示差折光检测器时，应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相，以提高灵敏度。④粘度要低(应<2cp)。高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压降增加，使分离时间延长。最好选择沸点在100℃以下的流动相。⑤对样品的溶解度要适宜。如果溶解度欠佳，样品会在柱头沉淀，不但影响了纯化分离，且会使柱子恶化。⑥样品易于回收。应选用挥发性溶剂。 流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在;对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液;分析弱碱样品
电伴热安装运行维护注意事项
电伴热运行可靠性性能分析及应用
一、电伴热应用情况介绍： 电伴热作为给设备过冬提供保障的保温材料得到了广泛应用，个别作业区的冬防保温全部依赖电伴热带。 二、电伴热平稳运行的重要性： 随着电伴热带的大量使用，电伴热带的安全平稳运行是冬季能否安全平稳运行的重要保障。而电伴热出现了一系列问题，，也给冬季安全运行带来了极大的隐患。运行时间越长出现的问题就越多，一方面要保障冬季安全运行就必须保障电伴热带的安全运行；另一方面电伴热带价格昂贵，增加了昂贵的成本。如何确保电伴热带的安全平稳运行，已成为迫不及待的问题。 三、电伴热带运行中出现的问题： 电伴热系统经过几年的运行后都会或多或少的出现下列问题： 1）、安装不规所造成的各种问题: (1)、安装的电伴热带没有紧贴保温设备管壁安装，以及没有按规定方法缠绕(图1,图2)，导致这些电伴热带没有起到伴热效果，无法达到需求的伴热效果。 图1
图2 （2）、安装人员装保温层时,在打孔时,将伴热带打穿(图3)，导致开关跳闸。 钻头打穿 图3 （3）、制做电伴热首头不合规范(图4)，导致开短路跳闸。 不合规范 图4 （4）、电伴热安装未考虑防水，尾端进水(图5)短路，导致开关跳闸。
尾端进水短 路 图5 （5）、施工人员在安装电伴热接线盒时，没考虑接线盒进水的进水的可能，造成接线盒进水结冰(图6)，最终造成端子排短路。 进水接冰短 路 图6 （6）、在包保温铁皮时，电伴热没有完全固定好，造成伴热带与保温铁皮相互磨损，最终造成伴热带破损(图7)短路。 破损
图7 2）、同一根电伴热带出现一段热一段不热等现象。 3）、弯曲的电伴热出现了不热的现象。 4）、电伴热老化速度快。 5）、电伴热短路造成着火。 6）、使用时间长的电伴热带发热效果降低。 7）、电伴热接线盒容易进水，造成伴热工作不正常。 8）、安装时将绝缘层损坏。 四、问题分析 1、自限式电伴热带工作原理： 图8 自限式电伴热带内部都是相当于无数个发热电阻的并联回路（图8）组成自调控发热内芯。从下图中的“冷、暖、热”区域可以看出在低温时导通路径增多，从而允许更大的电流流经母线，在高温时聚合物扩张，导通路径减少，从而减少了伴热线的功率输出（图9）。 图9
如何选择流动相
流动相的调节是搞液相分析最重要的环节，也是液相水平高低的度量，每一种液相都有影响它的主要因素，抓住主要因素，问题就容易解决。欢迎大家讨论。一则可以为新手传播知识，二则大家相互学习共同提高！先开个头：常用的是化学键合相色谱，分离 中性化合较简单，主要是调节溶剂强度，可从有机相的比例合种类两个方面入手，例如：有机相占的比例大，出峰就早。分离酸碱化合物就就复杂一点，增加了添加剂，明白了添加剂的作用，然后从溶剂，酸碱性，添加剂等方面入手。问题就容易解决。 液相色谱采用键合硅胶可以分离绝大多数的分析物质，针对不同化学性质的单体采用不同的键合硅胶，现在有什么十八烷、氨基柱、氰基、苯基太多了，再加上不同流动相也就是加入不同的抑制剂可以测许多成分，比如：酸性的可以用十八烷加入酸，加缓冲盐；碱性物质可以加缓冲盐，以个人来讲用离子对的形式较多，并且效果也很好，现在分析生物碱是比较难做的，我现在就有一个难题，就说盐酸水苏碱吧，在低波长的吸收，UV是不行了，用蒸发光检测器，但是分离又成了问题，我试了十八烷，氨基柱、氰基、都不理想，并且用过日本的shodex（C18）柱PH9-10不好。不好做呀，在郁闷中………………… 如用反相色谱柱时，一般先改变有机相与水相的比例；再考虑改变pH值，酸 性物质将pH值调低，碱性物质将pH值调高；如两者都无效，可考虑加入离子 对试剂，如庚烷磺酸钠用于（碱性药物） 我觉得溶剂过滤器抽滤时抽走一部分有机相使保留时间相差较大。 其实流动相的调节也是很难的，一个条件下来是非常的不易呀，从查文献到，条件成熟，有一次我做麻黄就是二个月呀，最后才定下来，现在的水苏碱又是一个大头，现在为什么生物碱这样的难做呢，柱前衍生我是考虑过，但对柱子是有影响的，同时处理也麻烦。对于流动相的抽滤对测定是没什么影响的，一个稳定的条件，是不计较那一点损失的，如果抽滤对于测定的影响非常之大这个条件是不稳的。现在的流动相在检验所比例是可调的，但酸碱不变，所以我个人认为在一定的比例范围内，耐用性一定要好。有高手的话对我的水苏碱给一点意见 一. 反相HPLC中的溶剂优化：1.首先应调整k’值：强溶剂→20％递减→选择合适的溶液强度，使得k’在1～20（tR：3～35min）。一种方法是首先试用一种可能过强的流动相，在后面的试验中逐渐减小溶剂强度以增大k’。当所有谱峰符合1＜k’＜20的范围时，从溶剂强度的观点来说，其流动相已接近最佳了。(观察待分离组分的分离度)。（反相色谱——溶剂极性弱洗脱能力强，组分k’减小）。另一种方法是首次用梯度洗脱试验。通过这一实验，有可能估计出使样品的k’值符合1＜k’＜20范围的大概溶剂成分。2.改变选择性(á)：根据分子间作用力将溶剂分组。不同组的溶剂选择性不同，根据溶剂分组改变溶剂种类即可改变选择性。二. 离子对HPLC中的溶剂优化: 离子对色谱法是分离离子，或可电离的分子的一种色谱技术。关于离子对色谱的机理，至今仍不
高效液相色谱的色谱柱的类型和流动相的选择方法_徐红
高效液相色谱的色谱柱的类型和流动相的选择方法The Choicing W ays of Chromatographic Colum n and Mobil Phase about HPLC 徐 红 侯 健 (新疆昌吉州产品质量检验所,新疆昌吉831100) 摘 要:高效液相色谱仪的核心是色谱柱。另外,流动相对改善分离效果也有重要的辅助效应。色谱柱的关键内容是制备出高效的填料。现代高效液相色谱填料多使用键合固定相。色谱柱的填充技术直接影响柱效的发挥。在研究制定一个高效液相色谱方法时,选择适宜的流动相也很重要。 关键词:高效液相色谱;色谱柱;填料;流动相;溶剂 色谱柱的关键内容是制备出高效的填料。这些填料装成的色谱柱既要有好的选择性,又要有高的柱效。要提高柱效是现代高效液相色谱的又一重要问题。所以填料和装柱技术是关键问题。 现代高效液相色谱填料多使用键合固定相,其固定相膜很薄,因而大大提高了柱效。高效液相色谱填料的基质有以下几种:(1)全多孔硅胶。现代高效液相色谱填料绝大多数用键合的方法把活性基团接枝到基质上,全多孔硅胶是使用最为普遍的基质。全多孔硅胶的孔径有三种类型:①微孔全多孔硅胶,孔径<2nm;(2)中孔全多孔硅胶,孔径<50nm,>2nm;(3)大孔全多孔硅胶,孔径>50nm。高效液相色谱填料使用中孔和大孔全多孔硅胶,在分离低分子量的混合物时,选择(6～15)nm孔径的全多孔硅胶,其比表面相当于(500～200)m2/g。在分离合成聚合物或生物大分子时,要使用(15～100)nm的全多孔硅胶。如果使用<2nm的全多孔硅胶,色谱峰就会拖尾。(2)其他金属氧化物基质。由于硅胶有一些缺点:在碱性介质中(pH>8)不稳定;在孔隙中大分子扩散困难,降低柱效;硅胶表面上的剩余硅羟基有离子交换作用。为此近年来用氧化铝、氧化锆、氧化钍和氧化钛作为高效液相色谱填料的基质有很大的H PLC应用前景。高效液相色谱固定相有以下几种:(1)硅胶表面键合或涂渍各种聚合物。(2)其他氧化物表面上涂渍聚合物。(3)无孔单分散填料。(4)有机高聚填料。(5)灌注色谱填料。(6)手性固定相填料。 色谱柱的填充技术直接影响柱效的发挥。如果色谱柱填充不好,如填料颗粒之间不均匀、不密实,就会使涡流扩散项增加,导致柱效下降。高效液相色谱柱的性能主要决定于固定相填料,但是色谱柱的填充好坏也有很大的影响。填充色谱柱的方法有干法和湿法两种,一般大颗粒的(如外径>20nm)可以用干法填充;一般小粒径的填料宜用湿法填充。湿法填充也称作匀浆法,即用密度和填料相近的液体或混合液作分散介质,用超声波处理此浆液,然后用高压泵快速压入色谱柱管中,这样就可以制备出高效的色谱柱。 在研究制定一个高效液相色谱方法时,选择适宜的流动相也很重要。在选择流动相溶剂时,首先要考虑的是溶剂的物理性质,其次要考虑溶剂对所要分离样品的容量因子,最后是所使用的溶剂要有分离能力。用作高效液相色谱流动相溶剂,首先要满足以下几点要求:(1)容易得到;(2)适合于所用的检测器;(3)纯净、有一定的惰性;(4)无毒、使用安全;(5)对所分离的样品有一定的溶解性能。 下面介绍选择流动相的要点: (1)首先要考虑溶剂对检测器的适应性。 高效液相色谱在多数情况下要使用紫外检测器,所以必须考虑所用溶剂在紫外波段的吸收。如使用示差折光检测器,要考虑溶剂的折光率。 (2)溶剂的活性 有许多溶剂可能与样品发生反应,或在某些固定相的存在下产生聚合,他们就不能作为流动相使用。 (3)溶剂的沸点和粘度 溶剂的沸点和粘度密切相关,低沸点的溶剂通常其粘度也低。通常选用沸点高于柱温(20～50)℃、粘度不大于5×10-4Pa.S的流动相。 (4)高效液相色谱流动相溶剂的极性 在分配色谱和吸附色谱中,溶剂的极性是用混合溶剂的比例来调节的,一个极性强的溶剂和一个极性弱的溶剂经过适当的混合可以得到一定极性的混合溶剂。 (5)溶剂的选择性和溶剂的分类 选择流动相的极性能使被分离样品的分配容量在1～5之间,这时如果有两个或几个色谱峰重叠,可以通过调节溶剂的选择性来解决。 选择合适的色谱柱和流动相是高效液相色谱的关键。 参考文献 [1]富玉,陈能武.高温液相色谱的原理及研究进展.中国测试技术, 2006(3)36. 作者简介:徐红,女,副高级工程师,所长。工作单位:新疆昌吉州产品质量检验所。通讯地址:831100新疆昌吉市健康西路17号。 侯健,新疆昌吉州产品质量检验所(昌吉831100)。 收稿时间:2009-10-16 10 《计量与测试技术》2010年第37卷第2期
电伴热带如何连接,电伴热带使用注意事项
电伴热带如何连接，电伴热带使用注意事项 电伴热带是由导电聚合物和两根平行金属导线及绝缘护层构成。其特点是导电聚合物具有很高的正温度系数特性，且互相并联，能随被加热体系的温度变化自动调节输出功率，自动限制加热的温度，可以任意截短或在一定范围内接长使用，并允许多次交叉重叠而无高温热点及烧毁之虑。今天小编为大家介绍一下关于电伴热带如何连接以及电伴热带使用注意事项的相关信息。电伴热带如何连接1、直线缠绕：将一根或多根电热带沿管道一边直线放置，用铝箔胶带或安装铝带将电伴热带固定，在管道的下半端，固定间距不大于50CM。2、波浪缠绕：将电热带以波浪式与管道符合在一起，按设计每米所需负荷确定每米管道所需电把那热带长度，然后再确定波浪曲率半径R，铺设时应尽量使波幅均匀，以保证电缆系统的均匀散热，用铝箔带沿波浪曲线黏贴伴热带，或用铝胶带粘贴弯曲处。3、螺旋缠绕：将电伴热按每米管道所需长度均匀地以螺旋状缠绕在管道上，用铝胶带沿螺旋方向固定，或用铝胶带固定电伴热带与管子上端处。4、多根平行直线缠绕：将多根电伴热带平行直铺与管道外壁，一般使用于长距离，大管径的管道，或者是材质比较硬的电伴热带（例如：MI加热电缆）确保均匀散热。此种方式便于安装，降低成本费用。例如长输管道上的电伴热
比较多。5、其他安装方式：例如管道吊装、管道附件（阀门，仪表等）详细安装方式可登陆芜湖佳宏官网了解。6、一般电伴热带安装辅材需要：铝箔胶带，热敏胶带，不锈钢扎带（用于固定温控器，接线盒等），防爆胶，支架等。安装完成后，需要做外保温（自限温电伴热带，恒功率电热带）露天场合，则必须要有防水罩。电伴热带使用注意事项1、电伴热带在铺设时切忌不要强压力冲击，很容易破坏带内的材质结构，如果带内的材质什么的已经发生了变化，不仅是很大的影响了它的工作效率还容易产生灾难。电伴热带切忌不要多重的折叠，尤其是折叠的直径大于带直径的六倍，很容易使得带内结构巨变，产生无法预料的灾害。2、在电伴热带的附近不要放置容易产生电火花的东西，有些厂家在周围放置很多电焊材质，很容易灼烧带表面的绝缘层，产生意想不到的麻烦。电伴热带有长度限制和其他要求，使用时要仔细地阅读要求细则，避免低级错误产生的灾难。3、在日常使用时因为电伴热带长期置于空气中，很容易产生潮湿和积水的现象，在使用一段时间后排查工作也显得尤为重要。有些不易察觉的地方，表皮有破损，人力必须仔细地勘察，这也要求工人的细心，所以电伴热带在日常生活中也应该很注意一些小的地方。电伴热带是新一代带状恒温电加热器。关于电伴热带如何连接以及电伴热带使用注意事项的相关 信息小编就为大家介绍到这里了，如果您也对电伴热带感兴
电伴热带施工
自控电伴热带的施工方法 1、电伴热带的选型 在实际工程中选择电伴热带，要具体情况具体分析，选择恒功率电伴热带或者自控温电伴热带，要从技术经济角度综合考虑，参照以下选型原则。 对控制温度较严格，采用恒功率电伴热带； 温度控制要求不高，采用自控温电伴热带，可以省去电伴热配件如配电箱、温控器等； 在阀门弯头较多区域，可能出现交叉重叠式安装，因而不宜安装恒功率电伴热带（有单独的电加热丝层），宜选用自控温电伴热带； 从设计、安装角度讲，恒功率电伴热带一般受节长限制，若切割时未能找准一个节长，则该部分伴热带不起作用，若切割时未能找准一个节长，则该部分伴热带不起作用，这不仅影响管道的伴热效果，同时也造成浪费；而自控温电伴热带可以随意切割，能确保电伴热完成。 废水处理工艺管道宜选用并联自控温低温通用型电伴热带（DXW型），根据环境温度、许用电流值、单根敷设长度来确定伴热带的功率。 常用伴热带带规格型号和参数： 2、电伴热施工要点 电热带在储存、搬运、安装及使用时不许扭曲、打结、反复弯折、严禁损坏外护套、坏绝缘。
电热带在敷设前应进行外观和绝缘检查。绝缘电阻值应符合产品说明书的规定。施放电热带时不要打硬折或长距离在地面拖拉。 电热带接入电压应与其工作电压相符。 电热带应紧贴于管道下方，或缠绕于管道上。采用铝胶带粘贴每隔~0.8m用耐热胶带将电热带沿径向固定。沿管道平行敷设的电伴热带一般安装在管道下方，且与管道横截面的水平轴线呈45。角，若用2根电伴热带要对称敷设。 电热带安装时的最小弯曲半径不得小于其直径的5 倍。 接线时，电热带与附件要正确可靠连接，谨防短路。同时将编织网连接起来可靠接地。 仪表管路蒸汽吹扫时，必须在停电2h后进行，吹扫温度不宜长期超过200℃。如温度过高，可预先在管路外敷一层保温毯，再敷设电热带，以防高温将电热带烫坏。 电热带的安装必须在管路系统全部安装结束，并经水压试验合格后进行。保温层的施工必须在电热带全部安装、调试结束、试送电正常后进行。 完成上述安装后，应对其进行绝缘测试，测试电热带线芯与编织网或金属管道之间的电阻应符合产品说明书的要求。 管道或容器的表面应去毛刺和锐角，避免安装过程中对伴热电缆造成损坏。防锈防腐涂层要干透，电热带绝缘电阻应≥20MΩ(1000VDC)。不要强力拉扯电热带，避免脚踏或重物放置电热带上；电热带与所有配件的型号应与设计要求一致。每隔约50cm将电热带用玻璃纤维压敏胶带或铝胶带固定在干管道上，平时尽可能将电热带附在管道下45度下方。 在线路的第一供电点和尾端各预留lm长的电热带;在所有散热体如支架、阀门、法兰等处应预留一定长度电热带，以便随时拆除、维修、更换等。 在使用二通或三通配件处电热带各端端应预留40cm长，多根电热带应注意合理选择电源点，要便于维修。 保温层材料必须干燥，且要保证材料的质量和厚度，应加防水外罩，在保温层外加警示标签注明“内有电热带”。 在容器上安装时，电伴热带应缠绕在容器中下部，通常不超过容器高度的2/3，一般为1/3。
流动相的选择
本人最近在做三甲基－喹噁啉二羧酸，但在用甲醇和水（水分别含5％和10％的甲酸），乙肼水做流动相，都没有分开，峰形呈严重拖尾，都是这样，各位大侠能否给点建议，最好应有点依据。谢谢！ 分析一个样品，不是一拿来就试着用各种流动相来分离，而是首先要分析样品着手。是否为高分子化合物、粘度大、具有生物活性的生物分子、有些或全部的样品成分是否可电离(根据这样条件可选择色谱柱、流动相、柱温、流速、离子对试剂、是否需要预处理等等)...... 具体分析：首先应了解样品的溶解性质，判断样品分子量的大小以及可能存在的分子结构及分析特性，最后再选择HPLC的分离模式，以完成对样品的分析。 样品的溶解度，由样品在有机溶剂中溶解度的大小，初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物，进而推断用非极性溶剂戊烷、己烷、庚烷等，还是极性溶剂二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品，并通过实验判断。 若样品溶于非极性溶剂，表明样品为非极性化合物，通常可以选吸附色谱法或正相分配色谱法、正相健合色谱法进行分析。苦样品溶于极性溶剂或相混溶的极性溶剂，表明样品为极性化合物，通常选用反相分配色谱法或更为广泛应用的反相键合相色谱法进行分析。 若样品溶于水相，可首先检查水溶液的pH值，若呈中性为非离子型组分，常可用反相（或正相）键合相色谱法进行分析。若pH呈弱酸性，可采用抑制样品电离的方法，在流动相中加入硫酸、磷酸调节pH=2～3，再用反相键合相色谱法进行分析。若pH呈弱碱性，则可向流动相中加入阳离子型反离子，再用离子对色谱法进行分析。若pH呈强酸性或强碱性，则可用离子色谱法进行分析。由于除去固定相中的离子对试剂较慢，当改变流动相时，有时需要长时间的平衡；再由于离子对试剂纯度问题，使离子对中的基线波动问题和干扰问题现象比较常见。 优化条件在于最终色谱图中能产生出最多可分开的谱峰。了解化合物的化学结构，知道是否存在酸或碱，当流动相的pH值=混合物的平均pKa值或接近时,可能会使分离较好。先优化K；随着容量因子的增加，谱峰会展宽，峰形变矮。(当所有谱峰符合1＜K；＜20的范围时，其流动相已接近最佳了；再α(≥1.05)；最后优化N，不同微粒的柱子均有一个最佳流速，流速再高会降低N值；如果降低流速，则会增加工作时间，但分离度会更好。当流动相粘度增加时，N值也将降低；因此尽可能使用低粘度的溶剂。用最小RS法，另加常识(数一下峰！)，在大多数情况下将是最佳方案。 至于谱峰拖尾影响因素是很多的，可解决的办法有： 在缓冲不好或离子强度过低的分离中，也会出现保留值重现性差和峰拖尾。增加缓冲浓度（与样品大小相匹配）能大大改善此情况。 柱子变得严重拖尾，甚至出现双峰，通常是进口滤板发生了部分堵塞或柱进口处出现塌陷(可将空隙填满接着反相冲洗柱子)。柱子出现峰展宽、拖尾则标志着样品中有保留性极强的“污物”在柱子的进口处堆集起来。样品在柱子上超载能引起峰展宽、拖尾（或伸舌）。通常减少进样量或提高检测器灵敏度。 早出的峰拖尾最甚是仪器存在柱外效应的最好佐证。要排除柱外效应，这不用我来说了吧！ 分析酸性或碱性组分，一般必须采用缓冲液流动相。流动相中无缓冲液，样品组分在柱内形成谱带的哪一部分会引起流动相pH增加或降低，样品组分改变了电离程度，产生峰拖尾。缓冲液除了能改变峰形外，还能改变峰的保留。一般用中等偏高的浓度有利于减少峰拖尾(0.05～0.1mol/L)。 可加适量的修正剂！
HPLC流动相选择
液相色谱的柱子通常正相柱和反相柱。正相柱以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。本文重点介绍反相色谱柱的选择和使用： 一、反相色谱柱的选择 1．柱子的PH值使用范围 反相柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解；当PH值大于7时硅胶易溶解；经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况，色谱柱人口处会塌陷。同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时，建议选择PH范围大的柱子，例如戴安公司的Acclaim 柱PH 2-9或Zorbax的PH 2-11. 5的柱子。 2．填料的端基封尾（或称封口） 把填料的残余硅羟基采用封口技术进行端基封尾，可改善对极性化合物的吸附或拖尾；含碳量增高了，有利于不易保留化合物的分离；填料稳定性好了，组分的保留时间重现性就好。如果待分析的样品属酸性或碱性的化合物，最好选用填料经端基封尾的色谱柱。 3．戴安公司Acclaim柱子介绍—极性封尾C16固定相柱 戴安公司有28种类型的柱子，Acclaim反相柱填料高纯，金属含量极低，完全封尾。PH 2-9范围内兼容，低流失，高柱效。尤其是2003年推出的Acclaim极性封尾C16柱，是最先商品化的磺酰氨-O链接键的色谱柱，具极低的硅羟基活性，能在极性溶剂甚至100%水的条件下长期使用。对酸性和碱性化合物有极为尖锐的好的色谱峰形，与现有的一流色谱柱相比有好的立体选择性。（下图是Acclaim极性封尾C16柱和市售极性封尾一流色谱柱分离酸性化合物谱图的比较） 二、液相色谱柱的使用 色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有样，测得的结果才有可比性。 但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。 1、样品的前处理 a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
伴热带知识
第四章伴热带 电伴热带是为解决北方天气温度低，管道冻堵的问题而诞生的，目前大多数伴热带都带有自控 温功能，一般情况下，伴热带的温度达到70度时，伴热带就会自动减少加热电流，使伴热带自动 恒温。 一、工作原理：伴热带主要材料是半导电的高分子复合PTC，在其外面包裹一层绝缘材料作为护套。 当通电时，电流由一根线芯经过导电的PTC材料到另一根线芯形成回路，导电材料升温，电阻随之 增加。当温度升到一定程度，阻值大到几乎可以将电流阻断，伴热带便停止加热，向管道散热。自 限温伴热带每米功率大约25瓦（宽度不同功率也不同），随着温度升高，功率会随之降低，安装时
可随意剪断，取其不同长度。 二、伴热带安装注意事项： （一）、伴热带安装时遵循四原则： 1、长度足够：按照需要保温的管道，取足够的长度，中间不得接头。 2、线头错开：接头和盲头的两根线芯错开至少2cm ，不得平行。 3、注意防水：用防水胶布和防水密封胶按要求密封接头。 4、放在中间：将伴热带的接线端和盲端放在两层保温的中间。 （二）、伴热带五注意事项： 1、电伴热带的功率要同主控制器的功率相匹配，尽量最长敷设不超过50m 。 2、电伴热带敷设时必须紧贴管道，以减少热量丢失。 3、防冻感温探头不得与伴热带直接接触，感温探头应和伴热带分别
放在管道两侧，以免造成感温不准确。 4、施工过程中，伴热带表层不得划伤，破皮或有裂痕等。一旦发现，立即更换。 5、不得过度弯曲或折弯伴热带，其最小弯曲半径应大于五倍带宽。 三、故障检修： 故障迹象 可能原因 校正方法 线路断路器跳闸 1）断路器选型太小 2）线路需电量超过断路器所能提供 3）断路器在低于设计起动温度下起动 4）断路器故障 5）接线盒或其他配件有短路 6）电热带收到机械损坏 7）尾端处误将电热带两导线连接
流动相的选择技巧
流动相的选择技巧 常用做反相流动相的溶剂是甲醇和乙腈，甲醇有其性价比的优势，但是甲醇活性高，可能与某些样品发生反应，而且甲醇在低波长下有紫外吸收，会降低分析方法的灵敏度;乙腈虽然价格很高，毒性比甲醇大，但是洗脱能力比甲醇强，很少与样品发生反应，用作流动相系统常用做反相流动相的溶剂是甲醇和乙腈，甲醇有其性价比的优势，但是甲醇活性高，可能与某些样品发生反应，而且甲醇在低波长下有紫外吸收，会降低分析方法的灵敏度;乙腈虽然价格很高，毒性比甲醇大，但是洗脱能力比甲醇强，很少与样品发生反应，用作流动相系统压力要比甲醇低很多，且截止波长比甲醇低20nm，增加了检测出在低波长下才有吸收的杂质的可能性，所以我们一般倾向于多用乙腈，少用甲醇。但是有时候样品峰形不好或者分离不好，更换溶剂试试是一个很好的选择，毕竟不同的溶剂提供不同的选择性。 对流动相的优化主要在水相上下功夫，水里可以加酸、加碱、加盐，从而改善峰形、提高分离度。流动相里加碱的情况比较少，主要还是加酸，常用的酸有磷酸、三氟乙酸、甲酸、乙酸、高氯酸、甲基磺酸等，其中最常用的是磷酸和三氟乙酸，磷酸在低波长下没有紫外吸收，而三氟乙酸在低波长下有，但是三氟乙酸易挥发而磷酸不行，所以单纯做液相，低波长下磷酸最合适，三氟乙酸有吸收，运行梯度时基线漂移很严重，而做液质就要考虑首选三氟乙酸了，近些年还比较流行加甲酸或乙酸。一般情况下这几种酸没有太大区别，我们更多的是考虑通过加酸改变流动相的pH值，从而改善样品的分离度和峰形。 相同进样量样品峰越高则意味着峰形越好，从图中可以看出多数样品在低pH值下峰形都比中性要好，这个主要是由色谱柱本身的性质所决定的。色谱柱主要都是硅胶基质，现有的填料处理工艺无法将硅胶上残余的硅羟基全部去除，硅羟基会造成样品峰拖尾，一般认为硅羟基的pKa在3.5到4.5之间，低pH值能帮助抑制硅羟基的活性，减小拖尾，从而改善峰形，提高分离度。水溶液中添加0.1%(体积)的磷酸或者三氟乙酸其pH值大概在2左右，用作流动相正好抑制硅羟基的活性，所以开发液相分析方法时流动相首选水加01.%的磷酸，然后再以此为基础做优化。 在单独用酸不行的时候就要考虑使用缓冲盐，缓冲盐的选择原则是：简单、稳定、缓冲能力强、配制简单，需要调pH值时要有相应的酸或碱。常用的缓冲盐是磷酸盐，主要是钾盐和钠盐，再有就是醋酸盐，常用的盐浓度在10~20mM 左右。以前因为色谱柱填料生产工艺的问题，往往需要在流动相里添加三乙胺来减少拖尾，但是三乙胺对色谱柱的寿命有很大影响，现在新的色谱柱都不再需要了。流动相里有时会需要调节pH值到碱性，具体pH要视色谱柱的耐受范围而定，常用 NaOH、KOH溶液或氨水做为调节缓冲盐溶液碱性pH的试剂，也可以往水里单独添加氨水做碱性流动相。 在缓冲盐做流动相时，出峰太早、峰形很差、相似结构的化合物峰因为拖尾或峰型太宽而不能达到基线分离时，可以考虑使用离子对试剂，常用的离子对试剂主要是各种烷基磺酸钠和四丁基铵盐，但是流动相里使用离子对试剂时，系统