几种鱼类血液指标及不同器官消化酶活性比较教材
青海湖裸鲤和花斑裸鲤消化酶活力对比
青海湖裸鲤和花斑裸鲤消化酶活力对比作者：孟玉琼，张伦祥，许国倩，李长忠，马睿来源：《河北渔业》 2018年第1期摘要：本实验对比研究青海湖裸鲤（Gymnocypris przewalskii）和花斑裸鲤（Gymnocypris eckloni）消化酶活性差异。
两种鱼各挑选9尾体重100 g左右的鱼作为实验对象，分别检测肝胰脏、前肠、中肠及后肠中的脂肪酶、淀粉酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶活性。
结果表明：作为无胃鱼，两种鱼肠道消化酶活性显著高于肝胰脏，其中前肠是主要的消化器官，后肠具有较高的蛋白质消化能力。
通过对比研究发现青海湖裸鲤具有较高的脂肪和糖类消化能力，而花斑裸鲤具有较高的蛋白质消化能力。
关键词：青海湖裸鲤（Gymnocypris przewalskii）；花斑裸鲤（Gymnocypris eckloni）；消化酶鱼类营养素的利用取决于鱼类消化器官中各种消化酶的活性[1]。
研究鱼类消化酶可为鱼类营养生理学的研究以及人工饲料的研发提供基础数据[2]。
因此，鱼类消化酶的研究成为国内外学者的研究热点。
青海湖裸鲤（Gymnocypris przewalskii）和花斑裸鲤（Gymnocypris eckloni）同属鲤科（Cyprinidae）,裂腹鱼亚科（Schizothoracinae）的裸鲤属（Gymnocypris）。
两者作为青藏高原土著经济鱼类，具有重要的生态和经济价值。
其中，青海湖裸鲤主要分布在全国最大的咸水湖——青海湖中，而花斑裸鲤主要分布于黄河上游的淡水区域。
目前为止，尚未系统开展两种鱼消化酶活性的对比研究。
因此，本研究对比分析青海湖裸鲤和花斑裸鲤各消化器官中脂肪酶、淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性，为两者营养生理学研究、人工饲料的研发以及裸鲤属种群演化提供基础数据。
1材料与方法1.1实验用鱼本实验所用的青海湖裸鲤来自青海湖裸鲤救护中心，花斑裸鲤来自青海省渔业环境监测站。
每种鱼各挑选9尾体重在100 g左右的鱼作为实验对象。
大弹涂鱼仔稚鱼和早期幼鱼的消化酶活性.pdf
4种免疫相关酶在鲟鱼组织内的分布及活性比较_王荻
关键词：鲟； ACP； AKP； CAT； SOD； 活性分布 中图分类号：S917； Q956 文献标志码：A
文章编号：1000 － 2286（ 2011） 06 － 1195 － 07
Comparative Studies on the Activities of Four Immune-related Enzymes from Four Kinds of Sturgeons
但是，鲟养殖因为受到集约化程度越来越高，养殖密度逐渐增大，水质环境日渐恶化等诸多因素的 影响，导致爆发 性 疾 病 日 趋 严 重，给 其 养 殖 业 及 科 研 工 作 带 来 了 巨 大 的 损 失 和 困 扰。酸 性 磷 酸 酶 （ ACP） 、碱性磷酸酶（ AKP） 、超氧化物歧化酶（ SOD） 及过氧化氢酶（ CAT） 作为重要的免疫相关酶类，是 在分子水平上评价外来物对鱼类损伤的重要生物学指标。疾病、药物、污染等因素均会不同程度地影响 这些酶类的活性，且因其分类地位处于软骨鱼类和真骨鱼类之间，兼具了许多软骨鱼类和硬骨鱼类的特 征［6］，而多数硬骨鱼都具有与高等哺乳动物相似的免疫器官、免疫组织和免疫细胞，能产生多种免疫分 子［7］，因此，对鲟鱼免疫相关方面的研究成果对其他高等动物的研究也具有极高的借鉴价值。因而探 讨这几种免疫相关酶在养殖鲟体内的组织分布及活性差异，对选择合适的指示组织尤为重要。本文选 择近年来在国内养殖较多的 4 种鲟鱼作为实验动物，旨在探讨几种免疫相关酶的组织分布及活性比较， 为鲟鱼这一优良养殖品种的推广及健康养殖提供理论支持。
WANG Di，LI Shao-wu，LIU Hong-bai，LU Tong-yan*
（ Heilongjiang River Fisheries Research Institute，Chinese Academy of Fisheries Sciences，Harbin 150070，China）
鱼类常用免疫指标及其检测技术
鱼类常用免疫指标及其检测技术刘青,赵恒寿(山西农业大学动物科技学院,太原030801)摘要:主要介绍攻毒成活率,免疫器官体指数,免疫细胞活性,以及组织、血液、体液中微观的免疫成分等反映机体免疫状况的指标及其检测方法。
在研究鱼类免疫性能时,应采用攻毒成活率作为综合评价指标;免疫器官体指数、免疫细胞活性作为组织、细胞水平的免疫指标,检测方法相对简单易行;而微观的免疫成分检测较为复杂,可根据试验需要选择部分指标。
上述指标与鱼体免疫机能正相关,检测方法在不同试验动物或试验条件下可适当调整。
关键词:鱼类;免疫;检测技术基金项目:山西农业大学青年创新基金(2005009) 近些年来,鱼类免疫学研究受到广泛重视,在鱼病防治、营养添加剂、水域生态环境的研究中,往往会涉及一些免疫指标的检测。
鱼类的免疫状况可由其机体的相应指标变化来反映。
目前很多研究者所采用的免疫指标和指标的检测方法不尽相同,笔者拟对鱼类常用免疫指标及其检测方法作一探讨。
1成活率成活率=(攻毒试验结束存活鱼数/攻毒试验开始鱼总数)×100%相对成活率(RPS )=[1-(免疫组死亡率/对照组死亡率)]×100%选取不同的病原体或者其它物质对试验鱼攻毒,在一定时间内以最终成活率来衡量鱼类机体免疫力,通常成活率越高,其疾病抵抗能力越强。
淡水鱼类多采用危害较大的嗜水气单胞菌[1]注射或者浸泡攻毒[2-6],海水鱼类多采用不同种类弧菌攻毒[7-10]。
除细菌外,还可采用病毒进行攻毒试验[11]。
鱼类免疫后的成活率可以综合反映鱼类的抗病力及免疫力,在试验中采用该指标能够直接而可信地评价鱼体免疫机能。
2 免疫器官重量[6,16]2.1 头肾体指数(Head Kidney Body I ndex,HK 2B I )肾脏是成鱼最重要的淋巴组织,可分为头肾和中肾。
成鱼的头肾失去排泄功能,但保留了造血和内分泌的功能。
受抗原刺激,头肾和中肾细胞出现增生,表现为肾脏重量变化,肾脏也是硬骨鱼类重要的抗体产生器官。
鲤、鲢、鳙、草鱼消化道消化酶种类和活性的比较研究
鲤 、 、 、 鱼消 道 消 酶种 类和活性 的 比较研 究 鲢 鳙 笪 早 草 肖 化 化
毕冰 孙 中武 肖晓文 尹洪滨 。 ， ， ，
（ ．东北林业 大学 生命科学学 院， １ 黑龙江 哈尔滨 １０ ４ ； ５０ ０
２中国水 产科学研究 院黑龙江水产研究所 ， ． 黑龙江 哈尔滨 ，５ ０ ０ １０ ７ ）
其 肉质细 嫩 ， 美 ， 味 营养 丰 者 对鲤 、 、 鱼 、 ４种 鱼类 的研 究 鲢 草 鳙 主 要 在食 性 【、 食 强 度 和摄 食 节 律［ ］ ¨摄 、 食物 的消
ｔ ｈｈｓｍ ｂｌ ）是我 国淡 水 渔业 的重 要 经济 鱼类 ， ｉ ｔｙ ｏｉｓ ｃ ｉ
ｅｚ ｎ ｙｍｅｓ
鲤 （ ｙ ｒ ｕ ａｐｏ 、鲢 （ ｐ ｐ ｔａｍｉ ｔｙ Ｃ ｐ ｉ ｓｃｒｉ） ｎ Ｈｙ ｏ ｈｈ ｌ ｃ ｈ ｓ ｈ ｍ ｌｒ ） 草 鱼 （ ｔ ｏ ｈ ｒｎ ｏ ｏ ｅｌｓ 、 （ ｒ — ｏｉｉ 、 ｔｘ Ｃｅ ｐ ａｙ ｇｄ ｎ ｉ ｌ ）鳙 Ａ ｉ ｎ ｄ ｕ ｓ
２ Ｈｅ ｏ ｇ ａｇＲｖ ｒ ｉ ｅ ｅ ｅｅｒｈＩｓｔｔ， ｈｎ ｓ ａｅ ｆ ｉ ｅ ｃｅｃｓＨａ ｉ １０ ７ ， ｈｎ ） ． ｉ ｎ ｊ ｎ ｉｅ ｓ ｒ ｓ ｓａｃ ｔｕｅ Ｃ ｉｅｅ ｌ ｉ Ｆ ｈｉ Ｒ ｎｉ Ａｃｄｍｙｏ ｓ ｒ Ｓ ｉ ｅ， ｒ ｎ ０ ０ Ｃ ｉａ Ｆ ｈｙ ｎ ｂ ５
中图 分 类 号 ：９ ７ ￥ １ 文献标识码 ： Ａ
Ａｃ ｉ ｅ Ｃｏ ｐ ｉｏ ｆＤｉ ｅ ｔｖ ｔｖ ｍ ａｒｓ ｎ ｏ ｇ ｓｉ ｅ Ｅｎｚ ｍ ｅ ｎ ｇ ｓ ｉ ｅ Ｔｒ ｃ ｓ ｉ ｍ ｍ ｏ Ｃａ ｐ Ｃｙ ｉ ｓ ｙ ｓ ｉ Ｄｉ ｅ ｔｖ ａ ｔ ｎ Ｃｏ ｎ ｒ ｐｒｎｕ ｃ ｐｉ ａｒ ｏ，Ｓ ｌ ｅ ｒ ｐｏ ｉｖ ｒ Ｃａ ｐ Ｈｙ ｐｈｔ ａｌ ｃ ｈ ｓ ｍｏ ｉｒｘ， ａ ｓＣａ ｐ Ｃｔ ｎ ｐｈａ ｙ ｇｏ ｏ ｄｅｌ ｓ ａ ｈ ｍｉ ｈｔ ｙ ｌｔｉ Ｇｒ ｓ ｒ ｅ ｏ ｒ ｎ ｄ ｎ ｉ ｌｕ ｎｄ Ｂｉ ｈ ａ ｒ Ａ￣ｓ ｃ ｔ ｙ ｏ ｉｉ ｇ ｅ ｄ Ｃａ ｐ ｉ ｆ ｈ ｈ ｓｍ ｂ ｌｓ
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第二节 消化液和消化酶
鱼类的口、咽和食道通常都没有消化酶，因此没有消化作用。但它 们能分泌粘液，润滑食物，便于吞咽。一般所说的消化液是指胃液、胰 液、胆汁和肠液，它们在消化过程中起重要作用。
一、胃液和胃消化酶
❖ 除无胃鱼类以外，大多数鱼类能分泌由盐酸、消化酶和粘 液组成的胃液。
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1. 胃液中盐酸的作用：
❖ 多数鱼的胆汁中不含消化酶，但在一些具有肝胰脏的鱼类 也发现胆汁中有少量的胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等。一 般认为这些酶是由胰细胞分泌后混入胆汁的。
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胆汁在消化过程中起重要作用：
❖ 由于胆汁盐的存在，它能沉淀经胃消化而产生的酸性变性蛋白眎等， 使其停留在小肠，让胰液消化作用充分进行；
❖ 肉食性鱼类的肠较短，多为一直管，如鰔鱼的肠仅为体长 的～倍，没有盘曲。
❖ 杂食性鱼类肠管长度介于植食性和肉食性鱼类之间。
肠的后段通常分化为较宽的类似直肠的构造，其粘膜含有大量杯状细胞。 板鳃类还有直肠腺，其作用是分泌Na+和Cl-离子以调节渗透压平衡。肌
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二、消化腺
❖ 消化腺（digestive gland）有两类，一类是埋在消化管 壁内的小型消化腺，如胃腺、肠腺等；另一类是位于消 化管附近的大型消化腺，如肝脏和胰脏，有输出导管连 逾消化管上。
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二、胰液和胰消化酶
由于很难收集到纯的胰液，因此，对大多数鱼类的胰液化 学成分了解得不多。但是，毫无疑问，胰液中含有多种可以 消化蛋白质、糖、脂肪和核苷酸等的酶类。此外，鱼类的胰 液也可能和高等脊椎动物的一样，含有碳酸氢盐以中和进入 肠内的盐酸。
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二、胰液和胰消化酶
1.蛋白酶
❖ 胰蛋白酶(trypsin)：胰蛋白酶为肽链内切酶，其最适pH值为。它作用 的肽键中的碳酰基必须来自精氨酸或赖氨酸。
九种交配组合鳢血液生理生化指标的比较分析
九种交配组合鳢血液生理生化指标的比较分析曾运丁;王超;周爱国;邹记兴【摘要】对来源于乌鳢(Channa argus)、斑鳢(C.maculate)及杂交鳢作为亲鱼彼此之间的交配繁殖得到的九种组合鳢的血液部分生理生化指标做了比较分析.其中G1-G9分别代表斑鳢(♀)×斑鳢(♂)、斑鳢(♀)×乌鳢(♂)、斑鳢(♀)×杂交鳢(♂)、乌鳢(♀)×斑鳢(♂)、乌鳢(♀)×乌鳢(♂)、乌鳢(♀)×杂交鳢(♂)、杂交鳢(♀)×斑鳢(♂)、杂交鳢(♀)×乌鳢(♂)、杂交鳢(♀)×杂交鳢(♂).结果显示:从血液生理指标来看,红细胞计数(RBC)结果为G2 ＞G4 ＞G1 ＞G5 ＞G8 ＞G9 ＞G7 ＞G6 ＞G3,白细胞计数(WBC)结果为G2 ＞G4 ＞G5＞G6＞Gl＞G9 ＞G3 ＞G7 ＞G8,血栓细胞计数(PLT)结果为G2 ＞G1 ＞G4 ＞G5 ＞G8 ＞G9 ＞G7 ＞G6 ＞G3,血细胞压积(HCT)的结果为G2 ＞G1 ＞G4 ＞G5 ＞G8 ＞G9 ＞G7 ＞G3 ＞G6,血红蛋白(HGB)的结果为G2 ＞G1 ＞G4 ＞G5 ＞G8＞G9＞ G6 ＞G7 ＞G3,平均红细胞蛋白含量(MCH)的结果为G4 ＞G5 ＞G2 ＞G1 ＞G6 ＞G8 ＞G9 ＞G7 ＞G3,平均红细胞蛋白浓度(MCHC)的结果为G4 ＞G5＞ G2 ＞G1 ＞G6 ＞G8 ＞G3 ＞G9 ＞G7,红细胞平均体积(MCV)和红细胞分布宽度(RDW-CV)无显著差异.从血液生化指标来看,总蛋白(TP)的大小为G5 ＞G4 ＞G2 ＞G1 ＞G6 ＞G3 ＞G7＞G8＞G9,谷草转氨酶(AST)的大小为G2 ＞G4 ＞Gl ＞G5 ＞G3 ＞G6 ＞G7 ＞G8 ＞G9,甘油三酯(TG)的大小为G5＞G1 ＞G2 ＞G4 ＞G3 ＞G6 ＞G7 ＞G8 ＞G9,胆固醇(CHOL)和谷丙转氨酶(ALT)无显著差异.综合分析九种交配组合鳢的血液生理及生化指标可以看出,G2(斑鳢(♀)×乌鳢(♂))和G4(乌鳢(♀)×斑鳢(♂))相对于其他的组合有明显的“杂种优势”.%The blood physiological and biochemical indexes of nine groups snakehead which came from mating with each other of Channaargus,C.maculate and hybrid snakehead,were determined and comparativestudied.G1-G9 represen-ted C.maculate (♀) × C.maculate (♂),C.maculate (♀) × C.argus (♂),C.maculate (♀) × hybrid snakehead (♂),C.argus(♀) ×C.maculate(♂),C.argus(♀) × C.argus(♂),C.argus (♀) × hybridsnakehead(♂),hy-brid snakehead (♀) × C.Maculate (♂),hybrid snakehead (♀) × C.argus (♂) and hybrid snakehead (♀) × hybrid snakehead(♂).Results from blood physiological indexes were as follows,RBC was G2 ＞ G1 ＞ G4 ＞ G5 ＞ G8 ＞ G9 ＞ G7 ＞G6＞G3,WBCwasG2＞G4＞GS＞G6＞G1 ＞G9＞G3＞G7＞G8,PLTwasG2＞G1 ＞G4＞G5＞G8＞G9＞G7＞G6 ＞G3,HCTwasG2＞G1 ＞G4＞G5＞ G8＞G9＞G7＞G3＞G6,HGB was G2＞G1 ＞G4＞G5＞G8＞G9＞G6＞G7＞ G3,MCHwasG4＞G5＞G2＞G1 ＞G6＞G8＞G9＞G7＞G3,MCHCwas G4＞G5＞G2＞G1 ＞G6＞G8＞G3＞ G9＞ G7,MCV and RDW-CV had no difference.Results from the blood biochemical indexes were as follows,TP was G5 ＞ G4 ＞G2＞G1＞G6＞G3＞G7＞G8＞G9,ASTwasG2＞G4＞G1 ＞G5＞G3＞G6＞G7＞G8＞G9,TGwas G5＞G1 ＞ G2 ＞ G4 ＞ G3 ＞ G6 ＞ G7 ＞ G8 ＞ G9,CHOL and ALT had no prehensive analysis of the blood physiological and biochemical indexes of snakehead with nine mating groups indicated that the G2 (C.maculate (♀) × C.argus (♂)) and G4(C.argus(♀) × C.maculate(♂)) had the “heterosis” comparing to the other groups.【期刊名称】《淡水渔业》【年(卷),期】2013(043)004【总页数】5页(P18-22)【关键词】鳢(Channa);血液;生理指标;生化指标【作者】曾运丁;王超;周爱国;邹记兴【作者单位】华南农业大学动物科学学院,广州510642;华南农业大学动物科学学院,广州510642;清远市北江水产科学研究所,广东清远511510;华南农业大学动物科学学院,广州510642;华南农业大学动物科学学院,广州510642【正文语种】中文【中图分类】S917.4血液在物质运输、生理调节以及生理防御等方面有着重要作用，是动物体内重要的组织［1- 2］。
兴凯湖翘嘴鲌消化道指数及消化酶活性分布的年龄差异
尹海富， 崔中倩， 宋洪建， 等． 兴凯湖翘嘴鱼 白 消化道指数及消化酶活性分布的年龄差异【 Ｊ 】 ＿ 东北农业大学学报， ２ ０ １ ３ ， ４ ４ （ ３ ） ： １ ０ １ － １ ０ ７ ．
Ｙ ｉ ｎ Ｈ ａ ｉ ｆ ｕ ， Ｃ ｕ ｉ Ｚ ｈ ｏ ｎ ｇ ｑ ｉ ａ ｎ ， Ｓ ｏ ｎ ｇ Ｈ ｏ ｎ ｇ ｊ ｉ ａ ｎ ， ｅ ｔ ａ １ ． Ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｏ ｆ ｇ ａ ｓ ｔ ｒ ｏ ｉ ｎ ｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ａ ｌ ｉ ｎ ｄ ｅ ｘ ａ ｎ ｄ ｄ ｉ ｇ ｅ ｓ ｔ ｉ ｖ ｅ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ ｉ ｎ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ －
ｏ ｒ ｇ ａ ｎ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ａ ｇ ｅ ｓ （ １ ｙ ｅ ａ ｒ ， ２ ｙ ｅ ａ ｒ ｓ ， ３ ｙ ｅ ａ ｓ ｒ ａ ｎ ｄ ４ ｙ ｅ ａ ｓ） ｒ ｏ ｆ Ｃ ｕ ｌ ｔ ｅ ｒ ａ ｌ ｂ ｕ ｍｕ ｓ ｉ ｎ Ｋ ｈ ａ ｎ ｋ ａ Ｌ ａ ｋ ｅ ｗ ｅ ｅ ｒ
Ｓ Ｏ Ｎ Ｇ Ｈ ｏ ｎ ｇ ｊ ｉ ａ ｎ ，Ｌ Ｉ Ｌ ｉ ｎ ｌ ｉ ｎ ，ＷＡ Ｎ Ｇ Ｌ ｉ ａ ｎ ｑ ｉ （ Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ａ ｎ ｉ ｍａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ，Ｎ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ａ ｓ ｔ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｈ ａ ｒ ｂ ｉ ｎ １ ５ ０ ０ ３ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
ｉ ｎ Ｋ ｈ ａ ｎ ｋ ａ Ｌ ａ ｋ ｅ ） 消化道指数及各消化 组织的消化酶活力。结果表 明，兴凯湖翘嘴鲐 ４ 个年龄组的脏体指数和肠体指 数１ 龄鱼最低 ，２ ｇ ＂ 至４ 龄呈下降趋势 ，肝体指数 随着年龄增长呈现 出下降趋势 ，肠 长指数 随着年龄增长表现 出上
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二.血液指标的测定
血液生理指标测定： 1.红细胞计数 2.白细胞计数 3.红细胞沉降率 4.红细胞比容
血液生化指标测定：
1.血糖：邻甲苯胺法； 2.血清总脂：香草醛比色法； 3.血清胆固醇：邻苯二甲醛法。（试剂
盒）
三.消化酶指标测定
1.蛋白酶活力测定
对照管
适当稀释酶溶液 去离子水
脂肪酶活力计算方法：U=（A1-A2） /As*3632(单位U/L)
As=0.681
四.结果探讨
1.鱼类食性对消化酶的影响 鱼类的食性一般分为肉食性、草食
性和杂食性，它与消化器官组织结构和 消化机能是相适应的，消化器官组织结 构不同，所承担的消化机能不同，因而 消化酶活性也呈明显差异。
血液生化指标
本试验对四种鱼类血液的一些有机化 学成分，如血糖、血总脂、血胆固醇等 进行了初步的测定，结果可以作为它们 正常生理常数参考值，而且这些指标观 测值的变化指示了它们对环境改变的反 应。
五.实验反思
1.实验材料比较单一 实验只选取了4种常见的肉食性经济
鱼类作为研究对象，由于肉食性鱼类食 物组成相似，导致实验数据差别不大， 可比性不太强。
一般肉食性鱼类的消化道短，蛋白酶活性强， 草食性鱼类的消化道长，淀粉酶活性强。
蛋白酶活性从高到低顺序为：肉食性鱼类> 杂食性鱼类>滤食性鱼类>草食性鱼类；鱼类 淀粉酶活性也明显与食性相关。
有什么样的食性，就有什么样消化酶的组成 状况，而且消化酶活力大小变化程度与食物组 成的变化程度是相关的，这正是鱼类对本身生 态环境的一种适应。
一.血样及酶液制备
血样制备：尾静脉采血，将血液分装于2 支不同的离心管内，一支用肝素抗凝， 4℃保存，用于血液生理指标测定；另一 支不加抗凝剂，血液在室温凝结2h后， 4℃，2000r/min离心10min。取上清于80℃保存，用于血液生化指标测定。
酶液制备：将4种鱼置冰盘脊椎处死，取 出胃、肝脏、肠等，剔除内容物及结缔 组织，用预冷去离子水冲洗干净，于4℃ 下剪碎。按样品重的5倍加入PH7.0的冷 冻去离子水，玻璃匀浆器匀浆，匀浆液 4℃下以3000rpm/min的速率离心30分钟， 收集上清液为消化酶粗酶提取液，置于 4℃冰箱中保存，24h内检测酶活力。
5ml
5ml
淀粉酶活力单位定义：在37℃、30min内， 100ml酶液中的淀粉酶能完全水解淀粉 10mg称为一个淀粉酶活力单位。
淀粉酶活力单位/100ml=（对照管光密度 -测定管光密度）/对照管光密度 ×2/10×30/7.5×100/1=（对照管光密 度-测定管光密度）/对照管光密度×80
3.脂肪酶活力测定
将分光光度计于420nm处以Tris缓冲液调零，1cm光 径玻璃比色皿；然后将底物缓冲液在37℃预温5min以 上。往相应编号试管中加入0.05ml新鲜血清，再用5ml 加样器吸取4ml预温的底物缓冲液冲入试管中，迅速用 冰箱保鲜膜盖住管口，立即颠倒混合5次。然后迅速倒 入比色皿中在420nm处比浊，读取吸光度值（A1）。 再将此比色液倒入原试管中置37℃准确水浴10min， 再用上法比色读取吸光度值（A2）。最后取底物缓冲 液4ml加0.9%氯化钠50μL，420nm比浊，读取吸光度 值（As）。
蛋白酶的活力单位=A/15×F
A为样品测得光密度查曲线得到相应酪氨 酸的µg数；F为酶液最终稀释倍数；15为 反应时间（min）。
2.淀粉酶活力测定
对照管
测定管
0.04%可溶性淀粉
5ml
5ml
将两管在37℃水浴预热2～5分钟
酶液
/
0.1ml
测定管混匀后，再置37℃水浴中反应7.5分钟
0.01N碘应用液
2.实验目的比较简单
实验只是简单测定了4种鱼类的血液指 标和消化酶指标，可以适当增加一些实 验条件，比如增加不同PH或温度梯度下 鱼类的消化酶指标，也可以增加不同饲 料对鱼类消化酶的影响。
六.感言
大学四年时光一晃就要过去了，四年的大 学生活也给我留下了许多的美好回忆，而这篇 论文的完结我需要感谢的人实在是太多了，首 先是我的指导老师齐老师，他一直关心着我论 文的写作进展，并且给我提出了许多重要的建 议，然后还有我的王瑞师兄，是他在百忙中数 次帮我修改论文，最后我还要感谢四年来教过 我的恩师们，是你们把我从一个幼稚的高中生 转变为现在的一名合格的大学生。
0.5酪素（预热过）
10%三氯乙酸
取上清液于另外试管内 0.55M碳酸钠 福林试剂
/ 1ml 37℃水浴预热3～5分钟 2ml 37℃水浴准确反应15分钟 3ml 离心去除沉淀 1ml 5ml 1ml
测定管 1ml /
2ml
3ml
1ml 5ml 1ml
蛋白酶活力单位定义：在37℃下每分钟 水解0.5%酪素产生1µg酪氨酸为一个酶 活力单位U。
2.鱼类自身生长阶段对消化酶的影响
随鱼体的生长，鱼需要营养成分的
质与量也随之变化。消化器官随着生长
相对增大，内分泌机能增强，从而使消
化酶也随之相适应而变化。因而，由于
季节不同、环境水温变化，鱼类表现出
不同的生长速度。3.血液生来自指标鱼类血液性状指标的高低与鱼类活动 性及食性有关，活动性强的鱼类高于活 动性弱的鱼类，肉食性鱼类高于草食性 鱼类，草食性鱼类高于杂食性鱼类。
几种鱼类血液指标及不同器官 消化酶活性比较
引言
鱼类消化酶主要有蛋白酶，脂肪酶和淀 粉酶等几种，鱼类消化酶的活性随种类， 生长阶段和健康状况的不同而有差异， 同时受水体温度，盐度，无机离子以及 饲料等因素的影响，鱼类消化酶研究可 用于指导筛选饲料配方，开发新的饲料 源和确立适宜养殖条件。
而鱼类的血液指标则包括血液生理指标 和血液生化指标，生理指标包含红细胞 数目，白细胞数目，血沉降值；血液生 化指标包含血糖，血脂，血胆固醇。正 常血液指标值能反映物种的属性和动物 的生理状态。鱼类血液与其代谢、营养 及健康状况有着密切的联系。