支原体(UUMH)药敏测定方法

合集下载

支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨

支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨

支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨支原体药敏检测是一种用于检测支原体感染的常用方法。

在药敏检测中,实验药物浓度和报告方式都扮演着重要角色,因为它们直接影响着检测结果的准确性和临床应用的指导性。

本文将探讨支原体药敏检测中实验药物浓度和报告方式的问题。

实验药物浓度是支原体药敏检测中的一个重要参数。

实验药物浓度的选择应该考虑到支原体对药物的敏感性和耐药性情况。

通常情况下,实验药物浓度应该是逐步递增的,以确定支原体对药物的最低抑菌浓度(MIC)。

MIC是指药物能够抑制支原体生长的最低浓度,它能够指导临床上如何选择合适的抗生素进行治疗。

实验药物浓度的选择需要谨慎,避免过高或过低的浓度导致检测结果的不准确。

报告方式是支原体药敏检测中的另一个关键问题。

支原体药敏检测的报告方式通常包括定性报告和定量报告两种方式。

定性报告是指根据药物的最低抑菌浓度(MIC)来判断支原体对药物的敏感性。

如果支原体的MIC低于临床敏感标准,就认为支原体对该药物敏感;如果支原体的MIC高于临床敏感标准,就认为支原体对该药物耐药。

定性报告能够简单直观地反映药物的敏感性和耐药性情况,但是它不能精确地描述支原体对药物的抗菌效果。

定量报告是指根据药物的MIC值来评估药物对支原体的抑菌效果。

定量报告能够提供更加精确的药物抗菌效果评估,但是它需要更加复杂的数据分析和解释。

在支原体药敏检测中,实验药物浓度和报告方式是相互关联的。

实验药物浓度的选择会直接影响到检测结果的准确性,从而影响到最终的报告方式。

实验药物浓度过高或过低都可能导致结果的不准确,不能够准确评估药物的抗菌效果。

而报告方式的选择则需要根据实验药物浓度和临床应用需求来决定,以提供最有价值的信息。

细菌室支原体培养鉴定及药敏操作规程

细菌室支原体培养鉴定及药敏操作规程

细菌室支原体培养鉴定及药敏操作规程
1.原理及依据标准:
支原体分离鉴定培养基用于泌尿生殖道支原体(解脲支原体Uu和人型支原体Mh)的检测与诊断。

当有Uu和Mh生长,分解尿素和精氨酸引起PH上升,使以酚红为指示剂的培养基由黄转红。

依据珠海迪尔生物工程有限公司生产的试剂盒说明书。

2.标本的采集:
2.1、男性:用特别细的无菌棉拭子沾取无菌生理盐水少许深入尿道口内2~2.5cm处取分泌物,前列腺液亦可用沾取无菌生理盐水的无菌棉拭子尽量多的沾取。

2.2、女性:用沾取少许无菌生理盐水的棉拭子取宫颈内口1~2cm处单层柱状上皮细胞,取样拭子不可碰阴道壁。

2.3、支原体对干、热抵抗力差,标本采集后应立即送检。

整个采样过程应注意无菌操作。

3、标本接种:(本实验应注意无菌操作,避免污染杂菌)
3.1、取出培养基,放置接近室温,并在瓶盖上编号。

3.2、将采集的标本拭子插入培养瓶中,在靠近液面上方的瓶壁挤示压旋转拭子数次,使拭子中标本渗入到肉汤中:若为液体标本,取200 u 1加入培养基中;若为中段尿,经3000转/分离心15分钟取沉渣100ul 加入培养基中。

3.3、盖上瓶盖,置35~37℃孵箱,在24~48小时分别观察结果。

4、结果判读:
培养基变红,判断阳性,培养基黄色并清亮,判断阴性。

5、已检标本处理:密闭容器高压灭菌后,按医用垃圾处理。

支原体药敏试验操作方法

支原体药敏试验操作方法

支原体药敏试验操作方法
支原体药敏试验是对支原体细菌进行敏感性测试,以确定它们对不同抗生素的敏感程度。

操作方法如下:
1. 支原体细菌的筛选:首先选择纯化的支原体细菌株,应当检查其纯度和生长状态。

2. 制备试验用平板:使用Mycoplasma agar制备支原体药敏试验的平板,其中包含需要测试的抗生素。

将平板温度调节在35~37之间。

3. 制备菌液:从培养基中收集支原体细菌并转入到PBS缓冲溶液中,用垫头过滤以去除未破裂的细胞。

4. 稀释菌液:将菌液根据需要的浓度逐渐稀释,通常为10^5~10^6 CFU /ml,以便于试验处理。

5. 接种平板:将菌液滴入含有抗生素的药敏试验平板中,用琼脂种培养。

6. 培养:将培养皿放入条件恰当的恒温孵化箱或培养箱中,恒温为35~37,将培养皿培养约3~5天。

7. 判断:在生长完全的区域观察菌落数量、生长状态等信息,根据指南判断其
敏感性和耐药性。

8. 结论:根据支原体所产生的菌落数量和生长状态,分析支原体对药物的敏感性或耐药性。

注意事项:
1. 操作过程中应保证操作环境的无菌性。

2. 需要严格按照试剂及培养基的说明书进行操作。

3. 在菌液制备及接种过程中要严格注意细菌的数量及浓度。

4. 抗生素在试验过程中的使用必须符合相关法律法规。

支原体(UUMH)药敏测定方法

支原体(UUMH)药敏测定方法

支原体(UUMH)药敏测定方法支原体(UU/MH)药敏测定方法近来在zyh43所在的医院检验科做支原体检测中,遇到一些问题:用支原体(UU/MH)培养、药敏、定量检测试剂盒测得阳性的病人,用这种试剂盒测定的药敏中敏感的抗生素进行临床治疗,但是经过几个疗程的治疗,没有任何效果,支原体感染仍为阳性,因此对他的药敏检测结果产生怀疑,想用一种方法检测这种试剂盒的药敏是否可靠,但是苦于不知用什么方法进行检测最为科学,因此在这里向各位同仁请教一二,望各位大侠不吝指教,谢谢!!threengshaw认为有两种可能:1、体外药物敏感试验与体内药物对病原体的作用不完全一样2、检查方法及实验试剂问题综上所述,尽管可能可以用一种标准试剂及方法来与另一种进行对照,但不能说明体外药物敏感试验得出的药物对该病原体一定有效。

人体内的肠道,药敏板的微孔可以模拟得到吗?关于药敏的问题,由于支原体和普通细菌不一样,因此,支原体药敏试验的意义就比不上细菌的药敏试验。

即使是国内使用公认效果最好的生物-梅里埃支原体药敏试剂盒,其药敏也只是企业标准。

因为到目前为止,还未有一个国际标准。

为什么?因为国外对支原体的致病性还不像衣原体、梅毒那样得到广泛的确认,一些国家对支原体根本不检测,如英联邦国家。

只有中国这样的国情,才可以将其爆炒成一个如此严重的STD!支原体培养容易,但诊断因支原体感染所引起的NGU就比较复杂,就不是我们平时做的这么简单——单做一个液体培养基变红就可以了!UU难治,可能并不是药物,也不是方法问题,而是对支原体的认识问题。

1、如果培养基的质量可靠,念珠菌是不会生长的。

2、支原体阳性一定要治疗到其阴性为止吗?以下几句摘自《支原体与支原体病》:- UU的致病机制尚不十分清楚;- 下生殖道UU的存在不说明其有感染或疾病存在;- 国内流行病学调查,UU感染在人群中广泛传播,据报道,居民中的携带率为10%-40,存在无症状的支原体携带者。

支原体培养检验操作程序

支原体培养检验操作程序

支原体培养检验操作程序一、接收标本:标本与检验单查对正确,标本质量合格。

二、标本处理:接种Uu、Mh培养药敏一体试剂盒:操作前将所需试剂取出置室温30分钟。

1、A排第一孔加入培养液100μL作为阴性对照;2、将标本拭子直接放入培养液中充分振荡并在瓶壁挤干拭子,若为男性尿液取离心沉淀物150μL或阳性标本取50μL于培养液中混匀。

3、将混有标本的培养液各100μL 加入A排余下及B排各孔中;4、各孔加矿物油覆盖,置于37℃温箱培养。

第24、48小时分别观察记录结果。

结果判断原理:培养基含有相应支原体生长所需的蛋白质、马血清、生长因子、底物及酚红指示剂,当有支原体生长时,底物被分解,使PH值升高,培养基由橙黄色变成红色,且清亮为阳性。

培养基不变色为阴性。

B1孔阳性为解脲支原体阳性;B2孔阳性为人型支原体阳性。

药敏孔A排为高浓度,B排为低浓度,变红则耐药,不变红示敏感而不生长。

当高浓度与低浓度两孔均不生长(不变色)为该药敏感;高浓度不变色低浓度变红为该药物中介;高浓度与低浓度均变红为该药物耐药。

结果一:第24小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性,药敏看结果判断;第24小时、48小时观察B2孔均不变色,示无人型支原体生长或浓度极低,报告培养出解脲支原体,未培养出人型支原体。

结果二:第24小时B1孔不变色示解脲支原体阴性;第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性,药敏看结果判断。

报告未培养出解脲支原体,培养出人型支原体附药敏结果。

结果三:第24小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性,药敏看结果判断;第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性,药敏看结果判断,报告培养出解脲支原体与人型支原体附药敏结果。

结果四:阳性对照孔由橙黄色变成红色示支原体阳性,药敏看结果判断;第24小时、48小时观察B1孔、B2孔均不变色,示无解脲、人型支原体生长或浓度极低,报告培养出非解脲、人型支原体或嘱病人重留标本复查。

支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨

支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨

支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨支原体药敏检测是临床药物治疗合理用药的重要工具之一。

它可以帮助医生选择最优药物治疗方案,减少耐药菌株的出现,提高治疗效果。

实验药物浓度和报告方式是支原体药敏检测的两个关键因素。

本文将对这两个因素进行探讨。

一、实验药物浓度实验药物浓度是支原体药敏检测的基础。

实验药物浓度太低将导致结果误判,实验药物浓度太高则会增加误差。

因此,在进行支原体药敏检测时,需要选择合适的实验药物浓度。

目前,国内外主流的支原体药敏检测实验药物浓度大多采用国际标准MIC浓度。

在国际标准MIC浓度下,药物对大多数标准细菌株的最小抑菌浓度(MIC)一般集中在一个窄的范围内,因此检测结果更加准确。

同时,在国际标准MIC浓度下,各种药物间的比较也更加客观。

在选择实验药物浓度时,需要考虑到以下因素:1.药物类型:不同类型的药物需要选择不同的实验药物浓度。

例如,对于大环内酯类药物,建议选择1mg/L的浓度;而对于氟喹诺酮类药物,建议选择0.125mg/L的浓度。

2.临床应用:实验药物浓度还应考虑药物在临床上的使用情况。

例如,对于一些进口药物,在中国的临床应用较少,因此需要在实验中选择较高的实验药物浓度。

3.实验平台:实验药物浓度也受到实验平台的影响。

不同的实验平台具有不同的药物检测灵敏度和可靠性,因此需要在选择实验药物浓度时考虑实验平台的特点。

二、报告方式支原体药敏检测的报告方式是指将检测结果转化为文字或图表等可视化信息的方式。

目前,主要的报告方式有三类:定性、半定量和定量。

1.定性报告:定性报告是指将检测结果以阳性或阴性的方式呈现。

阳性表示对某种药物敏感,阴性表示对某种药物不敏感。

这种方式简单明了,容易理解,是支原体药敏检测报告方式中最常用的一种。

2.半定量报告:半定量报告是指将检测结果以数字形式呈现,但数字不能直接与MIC 值相对应。

例如,将检测结果表达为“中度敏感”、“高度敏感”等等。

这种报告方式比定性报告更加细致,也更能反映细菌对药物的灵敏度。

泌尿生殖系支原体检测及药物敏感试验结果分析

泌尿生殖系支原体检测及药物敏感试验结果分析目的:了解非淋菌性尿道(宫颈)炎患者泌尿生殖道解脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)感染状况以及对抗生素的敏感率。

方法:采用Uu-Mh液体培养基、支原体确证琼脂培养基培养鉴定,药敏微孔板条进行药物敏感试验。

结果:365例患者支原体总检出率61.9%,其中Uu检出率49.3%、Mh检出率1.4%、(Uu+Mh)混合型支原体检出率11.2%。

女性支原体总检出率67.9%,其中Uu 54.1%、Mh 1.5%、(Uu+Mh)12.3%;男性支原体总检出率21.3%,Uu 17.0%、Mh为0、(Uu+Mh)4.2%。

男性、女性检出率有非常显著性差异(P<0.01)。

支原体体外药物敏感率大于80%的抗生素有交沙霉素、多西环素、盐酸米诺环素、环酯红霉素、阿奇霉素和克拉霉素。

结论:非淋菌性尿道(宫颈)炎患者泌尿生殖道有较高的支原体感染率,Uu检出率高且女性检出率高于男性。

支原体体外药物敏感试验对临床泌尿生殖系支原体感染的抗生素治疗具有指导性意义。

标签:支原体;解脲支原体;人型支原体;药物敏感试验支原体(Mycoplasma)是一种缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,也是目前所知能在人工培养基中生长繁殖的最小微生物,对作用于细胞壁的抗生素不敏感[1]。

从人体分离出的支原体至少有16种,和人体有关并可引起非淋菌性尿道(宫颈)炎(nongonococcal uretheritis,NGU)的支原体主要有解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)和人型支原体(Mycoplasma hominis,Mh)。

近年来支原体感染率和耐药率有逐年上升趋势。

为了解我院非淋菌性尿道(宫颈)炎患者支原体感染及药物敏感状况,我们观察了365例NGU患者的支原体培养和体外药敏试验情况,现报道如下:1 资料与方法1.1 标本来源365例标本均取自我院2005年2月-2006年6月妇科、皮肤科、泌尿外科就诊的非淋菌性尿道(宫颈)炎患者,其中女性318例,男性47例,年龄18-60岁。

支原体、衣原体病原体与药敏检测方法现状、局限性及相关问题分析

支原体、衣原体病原体与药敏检测方法现状、局限性及相关问题分析解脲脲原体(UU)、人型支原体(MH)、生殖支原体(MG)和沙眼衣原体(CT)都是寄生在泌尿生殖道的病原体,常引起泌尿生殖道疾患。

支原体和衣原体感染不但是非淋菌性尿道炎(NGU)的最主要病因(90%以上),且已成为发病率最高的性传播疾病,已越来越受到重视。

但由于技术局限,目前对其检测仍存在不少局限性。

本文就这一问题进行简单的分析。

1、直接培养法:这样可检测到病原体存在的直接证据,此方法为标准的方法,支原体可用人工合成培养基培养,或作为新诊断试剂方法学评价的金标准。

局限性:虽然为标准的方法,但是缺点也是很明显的,就是需要的时间长。

培养法不能快速检测支原体感染,一般解脲脲原体(UU)、人型支原体(MH)需2~3天才能出结果。

生殖支原体(MG)生长所需的营养成分复杂,生长极缓慢,一般需2周~3月。

沙眼衣原体(CT)必须采用细胞培养,但细胞培养需专业化技术、试剂和设备,要求较高,周期也较长。

目前临床一般不采用,仅在科研单位进行科研活动。

2、间接培养法:也就是不一定要直接培养到肉眼或普通显微镜所能看到的菌落,而是根据加入其它试剂,间接判断病原体的存在,另外在培养的同时也进行药敏试验,这样可大大缩短检测的时间。

如目前临床培养法检测解脲脲原体(UU)、人型支原体(MH)多采用液体培养基,加样培养变色判断结果,在检测病原体的同时药敏结果也同时可以检测出。

局限性:由于是间接的证据,因此,理论上这种变色也可能由于其它微生物如某些细菌代谢而发生,造成结果出现假阳性,如果造成结果假阳性的细菌为致病菌的话,药敏结果也能在一定程度上反映出该菌对抗生素的耐药性,此时的药敏结果有一定的临床应用价值。

但是如果为非致病菌所致如标本受到污染,就有可能使结果产生错误,误导临床用药。

3、免疫法:采用此法检测的试剂目前临床较常用。

一般为间接法(ELISA法或金标法)检测抗体。

此类试剂理论上灵敏度和特异性都较高。

支原体

1.目的规范支原体药物敏感试验标准操作规程,确保药敏结果的准确。

2.适用范围本操作规程适用于泌尿生殖道系统解脲支原体(UU)、人型支原体(MH)。

3.检验原理试剂盒由液体药敏培养基和药敏测试板组成。

培养基中含有蛋白胨、酵母提取物、血清、生长因子等营养物,并加有尿素、精氨酸被分解生成的碱性物质引起PH值上升,培养基由黄色变成红色。

培养基内加有抑菌剂,可抑制泌尿生殖道中细菌和真菌的生长。

测试板的个孔分别用于质控对照以及UU和MH的鉴定、计数要药物敏感性试验。

4.试验材料和仪器支原体鉴定药敏试剂盒,加样器,35℃孵育箱。

5.样本要求5.1 男性:可取尿道分泌物、前列腺液、精液或中段尿培养(中段尿需取尿10mL,经2000r/min离心10min,取沉渣接种)5.2 女性:用扩阴器扩阴后,取宫颈口分泌物培养,也可用羊水培养;阳性培养液(普通支原体培养基获得)用无菌吸嘴吸取30~50μL。

6.操作步骤6.1空白对照:取出测试板,用无菌吸嘴吸取100μL培养液加入A1-空白对照孔。

6.2接种标本:将标本棉签伸入小瓶,靠近液面上方的瓶壁挤压棉签,使标本渗入,丢弃棉签,或直接加入30~50μL的阳性培养液。

标本加入后充分摇匀使之混合。

6.3加样至测试板:吸取100μL含菌培养液加入其余的微孔中。

6.4 矿物油封盖:所有微孔滴加1~2滴试剂盒所附的矿物油。

(注意:一定要使矿物油覆盖液面,否则培养液蒸发,结果不准)6.5 培养:将测试板加盖后置培养箱中,35~37°C培养24~48h,观察结果。

7.判断结果清亮的黄色为阳性,淡红色或红色者为阴性,浑浊或有絮状为无效。

8.注意事项8.1先兆流产、月经期妇女禁用;阴道用药或灌洗后禁用;8.2支原体鉴定药敏试剂盒仅供体外诊断用;8.3支原体鉴定药敏试剂盒仅供一次性使用;8.4废弃物应彻底消毒后丢弃。

9.结果解释9.1如果标本所含支原体滴度很低,试剂条微孔可能不改变颜色或颜色改变不均匀。

支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨

支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨1. 引言1.1 研究背景支原体药敏检测是一种用于确定支原体对不同抗生素的敏感性的重要实验方法。

支原体是一类病原体,可以导致多种疾病,包括呼吸道感染和性传播疾病。

由于支原体对抗生素的敏感性有所不同,因此药敏检测可以帮助医生选择最有效的治疗方案,减少治疗失败和药物抗性的发展。

在过去的几十年中,支原体药敏检测已经成为临床诊断中不可或缺的一部分。

随着抗生素的广泛使用和药物抗性的增加,对支原体药敏检测的需求也越来越迫切。

不断改进支原体药敏检测的实验药物浓度确定方法和报告方式对于提高诊断准确性和治疗效果至关重要。

本文旨在探讨支原体药敏检测的实验药物浓度确定方法和报告方式,旨在为临床实践提供更加准确和可靠的支原体感染诊断方法。

通过研究支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式,我们可以更好地指导抗生素的使用,减少抗生素的滥用,提高治疗效果,保护公共健康。

1.2 研究目的支原体药敏检测是一种重要的实验室检测方法,可以帮助医生确定支原体对不同抗生素的药敏情况,从而指导临床治疗方案的选择。

这项研究的目的在于探讨支原体药敏检测中实验药物浓度的确定方法和报告方式,以便提高检测结果的准确性和临床应用的有效性。

通过研究支原体药敏检测中药物浓度的确定方法,可以帮助医生更准确地评估抗生素的抗菌活性,从而更精准地选择最有效的治疗方案。

通过探讨支原体药敏检测的报告方式,可以提高医生对检测结果的理解和应用能力,从而更好地指导临床治疗。

本研究旨在探讨支原体药敏检测中实验药物浓度和报告方式的相关问题,为临床治疗提供更为可靠的依据。

1.3 意义支原体药敏检测是指通过检测支原体对不同药物的敏感性,为临床治疗提供药物选择的依据。

随着抗生素的广泛使用,支原体对抗生素的耐药性不断增加,因此药敏检测显得尤为重要。

通过药敏检测,可以了解支原体对不同药物的敏感性,从而选择最有效的治疗方案,避免药物的滥用和耐药性的进一步恶化。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

支原体(UU/MH)药敏测定方法
近来在zyh43所在的医院检验科做支原体检测中,遇到一些问题:用支原体(UU/MH)培养、药敏、定量检测试剂盒测得阳性的病人,用这种试剂盒测定的药敏中敏感的抗生素进行临床治疗,但是经过几个疗程的治疗,没有任何效果,支原体感染仍为阳性,因此对他的药敏检测结果产生怀疑,想用一种方法检测这种试剂盒的药敏是否可靠,但是苦于不知用什么方法进行检测最为科学,因此在这里向各位同仁请教一二,望各位大侠不吝指教,谢谢!!
threengshaw认为有两种可能:
1、体外药物敏感试验与体内药物对病原体的作用不完全一样
2、检查方法及实验试剂问题
综上所述,尽管可能可以用一种标准试剂及方法来与另一种进行对照,但不能说明体外药物敏感试验得出的药物对该病原体一定有效。

人体内的肠道,药敏板的微孔可以模拟得到吗?
关于药敏的问题,由于支原体和普通细菌不一样,因此,支原体药敏试验的意义就比不上细菌的药敏试验。

即使是国内使用公认效果最好的生物-梅里埃支原体药敏试剂盒,其药敏也只是企业标准。

因为到目前为止,还未有一个国际标准。

为什么?因为国外对支原体的致病性还不像衣原体、梅毒那样得到广泛的确认,一些国家对支原体根本不检测,如英联邦国家。

只有中国这样的国情,才可以将其爆炒成一个如此严重的STD!
支原体培养容易,但诊断因支原体感染所引起的NGU就比较复杂,就不是我们平时做的这么简单——单做一个液体培养基变红就可以了!
UU难治,可能并不是药物,也不是方法问题,而是对支原体的认识问题。

1、如果培养基的质量可靠,念珠菌是不会生长的。

2、支原体阳性一定要治疗到其阴性为止吗?
以下几句摘自《支原体与支原体病》:
- UU的致病机制尚不十分清楚;
- 下生殖道UU的存在不说明其有感染或疾病存在;
- 国内流行病学调查,UU感染在人群中广泛传播,据报道,居民中的携带率为10%-40,存在无症状的支原体携带者。

相关文档
最新文档