肺炎支原体培养及药敏检测的临床意义
肺炎支原体培养及药敏试验结果分析
肺炎支原体培养及药敏试验结果分析摘要：目的对咽拭子标本进行肺炎支原体（MP）培养，分析阳性率及药敏情况，为临床诊治提供依据。
方法随机选取2018年11月至2019年12月医院2186例呼吸科呼吸道感染患者送检的咽拭子标本，将这些标本进行肺炎支原体培养和药敏试验，分析患者MP感染情况，以及采用何种药物治疗效果最好。
结果经肺炎支原体培养和药敏试验，我们发现2186例标本中，肺炎支原体培养结果显示阳性的有303例，阳性检出率为13.9%。
结论经过肺炎支原体培养和药敏试验可以得出，治疗药物中大环内酯类（依托红霉素、红霉素、罗红霉素、阿奇霉素）、克林霉素、克拉霉素对肺炎支原体有较强的抗菌性，喹诺酮类抗菌药物（环丙沙星、左氧氟沙星）耐药性有所增加，而四环素类抗菌药物（强力霉素、美满霉素）耐药情况较为严峻，耐药性逐渐增加，因此临床应根据药敏结果调整用药，首选大环内酯类抗菌药物，加大针对肺炎支原体感染的防控力度。
关键词：肺炎支原体；药敏试验；耐药性肺炎支原体（MP）为临床常见的病原体之一，主要侵犯呼吸系统，导致患者发生肺炎支原体感染，是我国社区获得性肺炎（CAP）的首位致病菌。
MP感染的主要治疗药物为大环内酯类、四环素类等抗菌药物，但随着抗菌药物的滥用及临床用药不规范，逐渐导致MP感染患者出现相应的耐药性。
近年来多名国内外相关学者针对MP感染的耐药性做出多方面的探究，并在临床分离出对大环内酯类抗菌药物耐药的MP耐药菌株，但仍然存在不同地区的耐药菌株具有差异性[2]。
本文通过肺炎支原体培养和药敏试验，分析引起成人呼吸道感染的主要病原体和针对性用药，作以下分析。
1资料与方法1.1标本来源选取2018年11月至2019年12月医院2186例呼吸科下呼吸道感染患者送检的咽拭子标本。
1.2标本采集在患者进行治疗前，采集患者呼吸道咽拭子。
在采集标本前，用生理盐水漱口，用无菌拭子来回擦拭悬雍垂附近数次。
所采集标本应尽快接种，室温放置不得超过4个小时。
肺炎支原体的实验室检测结果及药敏情况
体， 取 出棉 拭 子 弃 之 ， 用 加 样 器 或 振 荡 器 震 荡 混 匀
后， 吸取 ５ ０ Ｌ加 入各 药敏 孔 中。最 后 ， 在每个 药 敏 孔 中滴 加一 滴石 蜡 油 封 口 ， 加盖 ， 置于 ３ ５。 【 ＝ 孵 箱 培 养， ２ ４ ｈ后 观察结 果 。 １ ． ３ 结果 判 断 培养 基 由原 来 的红 色 变 成 清 亮 的 淡 黄色 判别 为 阳性 ； 保 持 原 来 红 色 不 变 或颜 色不 是 清亮 的黄色 判断 为 阴性 ； 培养 基变 成 浑浊或 有 絮状 、 片状 物 存在 的黄 色无 效 。
率 比较 差异无 统计学意 义 （ ： ０ ． ２ ３ ， Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） ； 其 中 ＜ ３岁患儿 占 ２ ２ ． ４ ％（ ２ ２ ／ ９ ８ ） ， ３— ６岁患 儿 占 ４ ７ ． ０ ％
完全 溶 解 至 澄 清 后 ， 在 药 敏 板 阴性 孔 中加 入 ５ ０ Ｌ
阳性 病例 的主 要实 验 室检 测结 果特 点及 对抗 菌 药物
的药 敏情 况 ， 指 导 临床 正确 诊断 及合 理 治疗 。
１ 材 料 与 方 法
应蛋白、 肝 肾功 能 、 心肌 酶谱 等 。 １ ． ５ 统计 学分析 应用统计软件 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ７ ． ０处理数据 ；
（ ４ ６ ／ ９ ８ ） ， ７～１ ４岁 患儿 占 ３ ０ ． ６ ％（ ３ ０ ／ ９ ８ ） ； ３～ ６岁 患 儿培养 阳性率 显 著 高 于 ＜３岁患 儿 及 ７～１ ４岁 患儿
摘要 ： 目的
分 析 肺 炎 支 原体 （ Ｍ ｙ ｃ ｏ ｐ ｌ ａ ｓ ｍ ａ Ｐ ｎ ｅ ｕ ｍ ｏ ｎ ｉ ａ ｅ ， ＭＰ ） 快 速 鉴 定 培 养 阳 性 病 例 的 实 验 室 检 测 结 果 特 点 及 对 抗 菌
支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨
支原体药敏检测的实验药物浓度和报告方式探讨支原体药敏检测是一种用于检测支原体感染的常用方法。
在药敏检测中，实验药物浓度和报告方式都扮演着重要角色，因为它们直接影响着检测结果的准确性和临床应用的指导性。
本文将探讨支原体药敏检测中实验药物浓度和报告方式的问题。
实验药物浓度是支原体药敏检测中的一个重要参数。
实验药物浓度的选择应该考虑到支原体对药物的敏感性和耐药性情况。
通常情况下，实验药物浓度应该是逐步递增的，以确定支原体对药物的最低抑菌浓度（MIC）。
MIC是指药物能够抑制支原体生长的最低浓度，它能够指导临床上如何选择合适的抗生素进行治疗。
实验药物浓度的选择需要谨慎，避免过高或过低的浓度导致检测结果的不准确。
报告方式是支原体药敏检测中的另一个关键问题。
支原体药敏检测的报告方式通常包括定性报告和定量报告两种方式。
定性报告是指根据药物的最低抑菌浓度（MIC）来判断支原体对药物的敏感性。
如果支原体的MIC低于临床敏感标准，就认为支原体对该药物敏感；如果支原体的MIC高于临床敏感标准，就认为支原体对该药物耐药。
定性报告能够简单直观地反映药物的敏感性和耐药性情况，但是它不能精确地描述支原体对药物的抗菌效果。
定量报告是指根据药物的MIC值来评估药物对支原体的抑菌效果。
定量报告能够提供更加精确的药物抗菌效果评估，但是它需要更加复杂的数据分析和解释。
在支原体药敏检测中，实验药物浓度和报告方式是相互关联的。
实验药物浓度的选择会直接影响到检测结果的准确性，从而影响到最终的报告方式。
实验药物浓度过高或过低都可能导致结果的不准确，不能够准确评估药物的抗菌效果。
而报告方式的选择则需要根据实验药物浓度和临床应用需求来决定，以提供最有价值的信息。
肺炎支原体感染的实验室检查
• 20 •中国小儿急救医学 2021 年1月第 28 卷第1期Chin Pediatr Emerg Med，Jan 2021，Vol. 28，No. 1•专家笔谈•儿童重症支原体感染•肺炎支原体感染的实验室检查杨春凤李玉梅吉林大学第一医院小儿IC U科，长春130021通信作者：李玉梅，Email:liyumeil988@ 126_ com【摘要】肺炎支原体感染的实验室检查对于诊断并开始抗感染治疗十分必要。
肺炎支原体的实验室检测方法包括:培养、直接抗原检测、分子生物学检测（D N A和RN A检测）、血清学检测和其他一些新方法。
本文就这些实验室检查的方法、优势、局限性和临床应用进行了总结。
【关键词】肺炎支原体；实验室检查；诊断DOI ： 10. 3760/cma. j. issn. 1673-4912. 2021.01.005Laboratory detection of mycoplasma pneumoniae infectionsYang Chunfeng ,Li YumeiDepartment of PICU, the First Hospital o f Jilin University .Changchun 130021, ChinaCorresponding author：Li Yumei, Email ：liyumeil988@ 126. com【A bstract】Detection of mycoplasma pneumoniae infections is essential to diagnosis and initiateappropriate antibiotic therapy. Laboratory detection of mycoplasma pneumoniae includes culture, nonamplifiedantigen detection,molecular-based methods(detection of DNA and RNA) ,serology and other new diagnosticmethods. These relative methods, advantages, limitations and clinical utility are summarized in this review.【Key w ords】Mycoplasma pneumoniae; Laboratory detection；DiagnosisDOI ： 10. 3760/cma. j. issn. 1673-4912. 2021.01.005肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，M P)属于支原体属支原体科支原体目柔膜体纲，是能够 进行自我复制的、有能力在体外不依靠活体细胞 而生存的最小微生物。
支原体培养及药敏报告
支原体培养及药敏报告
支原体是一种革兰氏阴性细菌，是引起人类和动物呼吸道感染的主要病原体之一。
支原体感染可引起多种临床症状，包括咳嗽、咽痛、发热、头痛等，严重者可引起肺炎、支气管炎等疾病。
因此，对支原体的培养及药敏报告具有重要的临床意义。
支原体的培养是诊断支原体感染的重要手段之一。
通常采用细胞培养法或鸡胚培养法进行培养。
细胞培养法是将患者样本接种到细胞培养物中，通过观察细胞内外的支原体形态和数量来判断是否感染支原体。
鸡胚培养法则是将患者样本接种到鸡胚腔内，观察鸡胚的发育情况和病变表现，从而判断是否感染支原体。
培养的结果可以为临床医生提供重要的诊断依据，有助于制定合理的治疗方案。
除了培养外，药敏报告也是支原体感染诊断的重要内容之一。
药敏报告可以帮助临床医生选择最合适的抗生素治疗方案，提高治疗效果，减少药物滥用和耐药菌株的产生。
药敏报告通常包括对多种抗生素的敏感性测试结果，根据测试结果可以确定哪种抗生素对支原体的杀菌作用更好，从而指导临床治疗。
在进行支原体培养及药敏报告时，需要严格遵守操作规程，保证实验操作的准确性和可靠性。
同时，还需要注意对培养基、试剂和仪器的选择和使用，以确保培养和药敏测试的准确性和可靠性。
此外，对于培养和药敏测试结果的解读也需要具备专业的知识和经验，以避免误诊和漏诊的情况发生。
总之，支原体培养及药敏报告在支原体感染的诊断和治疗中具有重要的作用。
通过准确的培养和药敏测试，可以为临床医生提供重要的诊断和治疗依据，帮助患者尽快恢复健康。
因此，对支原体培养及药敏报告的研究和应用具有重要的临床意义，值得进一步深入研究和推广应用。
肺炎支原体培养药敏试剂介绍
结果判断图示：
支原体药敏试剂结果判定
四、阳性率
• 这均说明不同区域，人群，季节均会有一定差异，不能说肺 炎临床阳性率是一定的。根据临床文献，临床跟踪，实验情 况，临床阳性率一般在20%—40%。
五、常见问题
1.采样部位： 咽喉部位（舌腭弓、 悬雍垂、扁桃体）
2.采样方法： 1）采样可以使用无菌棉签、棉拭子或 生殖道拭子，采样可以将棉签直接伸 入咽喉部取样，亦可先将棉签浸润无 菌生理盐水后采样更佳； 2）采样时在咽部应捻转数次，粘取尽 量多的分泌液，亦可将棉签压住舌根 部，放置30秒后再取出更佳； 3）如果是所取样本为痰标本，可以用 棉签直接粘取； 4）当待取样者刚进食，或口腔或咽喉 部有残留食物时，应先彻底漱口并停 留30分钟后再行取样。 3.标本接种： 所采样本应尽快接种，如不能及时接 种，则室温保存不超过四个小时。
试剂盒操作方法：
1.取出培养液及药敏试验板，使其在接种标本前接 近室温，旋开培养液瓶盖，用吸咀吸取100 μl培养 液加入C-对照孔；
• 2.直接接种标本于剩余的培养液中， • 加盖摇匀； • 3.将含标本的培养液加入其余的微孔中，每孔100 μl， 轻轻震荡药敏试验板，使包被上的物质溶解；
4.所有微孔滴加1滴试剂盒所附矿物油（使矿物油覆盖 液面，否则培养液蒸发，结果不准）； 5.将药敏试验板加盖后，置培养箱中，35℃～37℃培 养，观察结果。
肺炎支原体培养药敏试剂盒
• 1.传统培养法
• 支原体培养法是确诊支原体感染的唯一一种方 法，是流行病学调查、新的方法评价的金标准，也 是WHO推荐的支原体实验室诊断的唯一一种方法。 肺炎支原体可在人工合成培养基上培养生长， 由于不具甾醇合成能力，培养系统应添加含甾醇等 长链不饱和脂肪醇丰富的物质，一般采用SP-4培养 基加马血清。培养法诊断肺炎支原体感染不能快速 诊断，一般需3-7d才能出结果，不过随着实验水平 的提高，市面上已出现一些2-3d可出结果的试剂， 一定程度上弥补了这一缺点。
小儿肺炎支原体的分离培养及其药敏试验分析
， M P ) 是中
对红霉素 ( E R Y ) � 罗红霉素 ( R O X) � 克拉霉素 ( CLA) � 阿奇霉素 ( AZI ) � 乙酰螺旋霉素 ( ACE ) � 克 林 霉 素 ( CLI ) � 左 氧 氟 沙 星 ( LE V ) � 加 替沙 星 ( GAT) � 司帕沙星( SPA) 9 种药物进行药敏试验 ， 操 作及结果判读严格按试剂说明书进行 �
摘 6 例小儿肺炎患者的咽拭子进行肺炎支 原体 ( M P ) 分离 培养并对 9 种抗 生素进 行药敏 试验�结果 显 要: 对 35
M P 阳性 5 5例 ， .4 % ， 4 .5 % ) > 克拉 霉 素 ( 32 .7% ) = 阿 奇 霉 素 示， 阳性 率 为 1 5 耐药 性 由 高 到低 为 罗 红霉 素 ( 5 ( 32 .7% ) > 红霉素( 2 1 .8 % ) = 加 替 沙星 ( 2 1 .8 % ) > 克 林 霉素 ( 2 0 .0 % ) > 乙 酰 螺 旋 霉素 ( 9.1 % ) > 司 帕 沙 星 ( 1 .8 % ) > 左氧氟沙星( 0 ) �分离培养能对 M P 引起 的肺炎 进行确 诊， 临床治疗 M P 选择药 物时， 其耐药 性不容 忽 视， 应该根据药敏试验结果选用药物， 使病患者能得到及时的治疗， 并减缓耐药株出现� 关键词: 肺炎支原体; 培养; 抗生素; 耐药性 中图分类号: R 375+ .2 文献标识码: A 文章编号 : 1 00 5-5 6 73 ( 2 0 1 1 ) 01 -0 037 -02 � � � � � � � � � T � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � LI J - ， � � � � � � � � � C � � H� EN � � � S� � � � � � ， � Q� � I U � � � � � � � � � � � ( � � D � � � � � � C L ， H ， A H S M U A ， J : M ， 5 2 91 0 0 ， C )
肺炎支原体培养法应用-精品文档
接种与培养过程
01
02
03
接种
将待检样本接种于培养基 上，注意无菌操作，避免 污染。
培养
将接种后的培养基置于恒 温培养箱内，保持适宜温 度（如37℃），观察支原 体生长情况。
观察记录
定期观察并记录支原体生 长情况，如形成“荷包蛋 ”样菌落，即可判定为阳 性结果。
03
结果观察与判定标准
观察时间设置
培养后观察时间
肺炎支原体培养后，一般需要在24h、48h、72h分别观察一次，以确保准确判 定结果。
延迟观察时间
若72h内未观察到明显菌落生长，可适当延迟观察时间至5-7天，因为肺炎支原 体生长较慢。
菌落形态观察要点
菌落大小
肺炎支原体菌落较小，直 径通常在0.5-1.0mm之间 。
菌落颜色
菌落颜色呈灰白色或淡黄 色，表面光滑且湿润。
培养原理
利用肺炎支原体对特定培养基和 生长条件的需求，通过调节温度 、湿度、pH值等因素，促进其生 长繁殖。
肺炎支原体简介
生物学特性
肺炎支原体是一种介于细菌和病 毒之间的微生物，无细胞壁，具 有多种表面蛋白，可引起呼吸道
感染。
致病性
肺炎支原体主要侵犯呼吸系统，引 起支气管炎、肺炎等疾病，严重时 可导致死亡。
支原体生长缓慢
肺炎支原体生长缓慢，培养时间较长。为解决这一问题，可采用快速培 养法或分子生物学方法进行检测，以缩短检测时间。
03
药物干扰
某些抗生素或抑菌剂可能抑制肺炎支原体的生长。在采样前，应了解患
者的用药情况，避免药物干扰。对于疑似药物干扰的样本，可进行药物
敏感性试验，以确定合适的抗生素治疗方案。
培养法在临床诊断中价值
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肺炎支原体培养及药敏检测的临床意义
一、支原体
支原体：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物。
支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。
支原体对热的抵抗力与细菌相似。
对环境渗透压敏感，渗透压的突变可致细胞破裂。
对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感，但对醋酸铊、结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。
对影响壁合成的抗生素如青霉素不敏感，但红霉素、四环素、链霉素及氯霉素等作用于支原体核蛋白体的抗生素，可抑制或影响蛋白质合成，有杀灭支原体的作用。
二、肺炎支原体
肺炎支原体（M.Pneumonia），MP,是支原体的一种，是人类支原体肺炎的病原体。
支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主，有时并发支气管肺炎，称为原发性非典型性肺炎。
主要经飞沫传染，潜伏期2～3周，发病率以青少年最高。
MP感染的临床表现常无特异性，临床的实际工作中，容易与一般病毒性感冒相混淆。
在临床上患儿有下列症状：（1）发热呈弛张热或不规则热。
刺激性咳嗽非脓性痰，偶带血丝。
（2）可有咽痛、头痛、胸痛，全身症状比体征明显。
（3）肺部体征不典型而胸片炎症显著，可见云雾状大片阴影。
（4）WBC正常或升高。
（5）青霉素类、磺胺类抗生素治疗无效，改用或一开始用大环内酯类抗生素有效。
（6）实验室MP检验有1项或1项以上阳性具备以上2个条件或以上者可初步诊断为MP感染。
更多时候，临床医生为了尽快缓解患儿的症状，需根据患儿的症状、体征和病史做MP感染的诊断性治疗，但应与肺结核相互鉴别。
三、肺炎支原体的诊断方法比较及临床意义
1、PCR法
咽拭子PCR法检测质粒核酸，该法快速、敏感和特异，通过这一技术可从患儿痰中检测MP-DNA。
由于此方法相当敏感，易受污染，故实验室操作时应特别小心。
统计结果显示，该法的阳性率为67.76%（103/152），高于快速培养法。
此法弥补了极微量的和被药物杀死的MP不能通过快速培养法检出的病例。
但是此法操作复杂，对设备及标本要求比较高。
2、血清MP-Ab法
血清MP-Ab法是检测患儿血清中的MP抗体，而非直截了当检测MP本身，因而阳性结果并不能确诊是MP感染。
对患儿状态的综合评估应包括对患者临床症状和试验结果的严谨分析。
极低量的抗体可能不被此试验检测出来。
另外还有些MP感染的患者不产生抗体或只产生少量的抗体，高抗体滴度的样品要出现前带现象。
3、MP培养及药敏法
MP培养及药敏法是利用MP生长代谢产物使培养基液体中指示剂颜色发生改变来判断MP生长；标本中的其他支原体和细菌则因培养基中加入了青霉素和醋酸陀均被抑制。
24~48小时培养+鉴定+药敏实验一步到位，操作方便，结果易判断，虽然并非直截了当检测MP本身，阳性结果并不能确诊是MP感染。
但是药敏结果可以直接为临床医生提供用药指导，为患者的治疗争取宝贵的时间，培养及药敏法越来越受到患者及临床医生的欢迎。
五、小结
肺炎支原体引起支原体肺炎，四季均可发生，早期诊断及合理用药能大大减轻患者的痛苦，临床上检测肺炎支原体的方法很多，支原体培养及药敏实验能快速为临床提供可靠的诊断及药敏依据，在临床运用上有重要的临床意义。