食品安全国家标准食品中苯并(a)芘的测定编制说明
食用油中苯并(a)芘的快速检测 胶体金免疫层析法(KJ201910)
附件10食用油中苯并（a）芘的快速检测胶体金免疫层析法(KJ201910)1 范围本方法规定了食用油中苯并（a）芘的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于食用油中苯并（a）芘的快速测定。
2 原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。
样品中的苯并（a）芘经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。
通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中苯并（a）芘进行定性判定。
3 试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 试剂3.1.1正己烷：色谱纯。
3.1.2乙腈：色谱纯。
3.1.3二甲基亚砜（DMSO）。
3.1.4NaH2PO4•2H2O。
3.1.5Na2HPO4•12H2O。
3.1.6氯化钠。
3.1.7吐温-20。
3.1.8氢氧化钠溶液（2 mol/L）：称取80g氢氧化钠用水溶解，并定容至1L。
3.1.9PBST溶液：称取0.2965 g NaH2PO4•2H2O、2.9 g Na2HPO4•12H2O、8.76 g氯化钠与0.55 g 吐温-20用水溶解并定容至1 L。
3.2 参考物质苯并（a）芘参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度均≥95%。
表1 苯并（a）芘参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量注：或等同可溯源物质。
3.3 标准溶液的配制苯并（a）芘标准储备液（0.1mg/mL）：精密称取适量苯并（a）芘标准品（3.2），置于10 mL 容量瓶中，用乙腈（3.1.2）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为0.1mg/mL的苯并（a）芘标准储备液；或可直接购买苯并（a）芘标准储备液。
0 ℃~5 ℃避光保存备用，有效期1年。
3.4 材料苯并（a）芘胶体金免疫层析试剂盒，适用基质为食用油。
3.4.1金标微孔（含胶体金标记的特异性抗体）。
苯并[α]芘危害性及其检测技术
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最 为 常 见和 广 泛 ＂ 。小 剂 量 苯 并 ［ 芘 就 有 可 能 引起 ｃ ｃ 】
起 胃癌 ， 并可经 胎盘使 子代发 生肿瘤 ， 造成 胚胎死亡
或畸形及 免疫功 能下 降 。Ｂ Ｐ是 许多短 期致 突
ｈ ｍａ ｅ ｌ ． ｎ ｔ ｉ ｐ ｐ ｒ ｔ ｅ ｈ ｚ ｒ ｓ ｆ ｅ ｚ ｐ ｒ ｎ ｎ ｓｒ ｃ ｎ ｒ ｃ ｅ ｉ ｇ ｄ ｔ ｃｉ ｎ ｔ ｃ ｎ ｑ ｅ ｕ ｎ ｈ ａｔ Ｉ ｓ ａ ｅ ， ｈ ａ ａ ｄ ｎ ｏ ｙ ｅ ｅ ａ ｓ ｈ ｈ ｏ ｂ ｔ ｅ ｐ ｏ
４ ８
粮 食 与 油脂
２ １ 年 第 ３期 ０ １
苯 并 【ｃ 芘 害 性 及 其 测 技 术 Ｏ】 危 检
王 欣 。 智慧 ， 晓联 周 赵 （ 无锡 市金 坤 生物 工程 有限公 司， 江 苏无锡 摘 ２ ４３ ） １ ｌ１ 要： 苯并 芘是一 种 常见 高活性 间接 致癌 物 ， 可通过食 品加 工 、 品 贮存等 途径进 入食 品 ， 食 被
其 污染食 品对人 体健 康具有很 大威 胁 ； 文主要对 苯并 芘危 害及 其检 测技 术作 一综述 。 该 关键词 ： 苯并 ［ 芘 ； 癌物 ； 品安全 伽 致 食
Ｔｈｅｈａ ｍ ｎｄ ｉｓｄｅ ｅ ｔｏ ｅ ｈｎｉ ｕｅ ｆｂｅ ｏ ｒ ｎｅ ｒ ａ ｔ ｔ ｃ ｉ ｎ ｔ ｃ ｑ ｓｏ ｎｚ ｐｙ ｅ
１１致 癌 性 ．
苯并 ［ 棚芘（ ｅｚ ０ ｐｒｎ ） ｂｎｏ（【 ｙｅｅ 是一种公认强致癌 ） 物质， 简称 ＢＭ ， Ｐ 又称 ３ ４ ，一苯并芘 …， 是一种含五个 环多环芳香烃（ ２ Ｈ ２ 图 １ 。常温下呈浅黄色晶状 Ｃ Ｏ １）（ ）
苯芘的介绍 文档
目前，世界公认的三大强致癌物质是黄曲霉毒素、苯并芘和亚硝胺。
研究表明，食品本身并不含或很少含上述三种致癌物，但在种植、加工、运输、贮存和烹调过程中，往往受到污染，尤其对于苯并芘的污染最为严重。
美国科学家皮埃特教授指出：人类癌症65％以上是因食物被污染所引起的。
因此，了解苯并芘的结构性质，控制食品苯并芘的污染，减少污染食品的摄入量，掌握食品中苯并芘的检测方法是十分重要的，从而可以减少癌症的发生机率。
1.苯并[a]芘的结构与性质苯并Le]芘，又称3，4—苯并芘。
它是一种由5个苯环构成的多环芳烃,分子式为C20H12，分子量为252。
结构式如下图所示。
常温下苯并[a]芘为浅黄色针状结晶，可分为单斜晶或斜方晶，性质稳定，沸点310～320℃(10mm汞柱)，熔点179～180℃，在水中溶解度为0．004—0．012mg／L，易溶于环己烷、己烷、苯、甲苯、二甲苯、丙酮等有机溶剂，微溶于乙醇、甲醇。
在常温下不与浓硫酸作用，但能溶于浓硫酸，能与硝酸、过氯酸、氯磺酸起化学反应，人们可利用这一性质来消除苯并[a]芘。
苯并[a]芘在碱性条件下较稳定。
苯并（a）芘在有机溶剂中，用波长360nm紫外线照射时，可产生典型的紫色荧光。
2、食品中苯并[a]芘的来源苯并[a]芘是已发现的，200多种多环芳烃中最主要的环境和食品污染物。
它是含碳燃料及有机物热解的产物，煤、石油、天然气、木材等不完全燃烧都会产生。
而这些物质在工农业生产、交通运输和人民生活等方面的大量应用，导致了苯并[a]芘的广泛污染。
可以说各种动植物性食品都可能受到苯并[a]芘的污染。
大多数加工食品(如熏制食品、烘烤食品和煎炸食品等)中的苯并[a]芘主要来源于食品加工过程。
2.1在熏烤、烘烤过程中形成熏烤制品有熏鱼片、熏红肠、熏鸡及火腿等动物性食品。
烘烤制品有月饼、面包、糕点、烤肉、烤鸡、烤鸭及烤羊肉串等食品。
熏烤、烘烤常用的燃料有煤、木炭、焦炭、煤气和电热等。
由于燃烧产物与食品直接接触，烟尘中的苯并[a]芘直接接触食品而污染。
CSTM植物油 苯并a芘测定 超临界流体色谱在线净化反相高效液相色谱法编制说明
《植物油苯并（a）花测定超临界流体色谱在线净化-反相高效液相色谱法》标准编制说明书1工作简况1.1任务来源根据CSTM标准委员会2021年7月30日材试标字[2021] 180号文件关于CSTM标准签发的立项通告，批准CSTM标准《植物油中苯并（a）花快速自动化测定法-超临界流体色谱在线净化法》立项，立项编号为：CSTMLX 9900 00754-2021,英文版立项编号为：CSTM LX 9900 00754-2021 E,标准项目由CSTM/FC99综合标准领域委员会归口管理，由岛津企业管理（中国）有限公司负责牵头起草。
1.2主编单位协作单位标准计划中的负责起草单位为岛津企业管理（中国）有限公司，由岛津企业管理（中国）有限公司具体承担标准起草工作。
主编单位：岛津企业管理（中国）有限公司、国家粮食和物资储备局科学研究院、钢研纳克检测技术股份有限公司、中粮集团。
1.3主要工作过程2021年6月8日由岛津企业管理（中国）有限公司组织粮食和物资储备局科学研究院、钢研纳克检测技术股份有限公司等单位成员成立了标准编写工作组暨第一次工作组会议，开始进行标准草稿的编写工作，确定了标准制定方案和时间安排，并进行了工作划分，岛津企业管理（中国）有限公司、国家粮食和物资储备局科学研究院主要负责国内外苯并（a）花测试方法及相关标准制修订情况的调研工作，完成植物油中苯并（a）在快速自动化测定法-超临界流体色谱在线净化法标准草案起草工作，钢研纳克检测技术股份有限公司负责制定试验方案、准备试验样品。
2021年7月13日标准编写工作组在钢研纳克检测技术股份有限公司召开了第二次工作组会议，首先对标准文本草案进行了讨论和修改，初步确立了标准草案，然后根据标准草案对试验方案进行了讨论和完善，决定开始进行试验验证工作。
2021年7月13日-2021年11月1日由岛津企业管理（中国）有限公司、国家粮食和物资储备局科学研究院、钢研纳克检测技术股份有限公司等单位进行了试验验证工作。
空气质量 苯并[a]芘测定 高效液相色谱法
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2 3
(如图所示) 将采集到固体颗粒物用滤纸包住，置于提取器 3 中，提取器的下端勺 盛有溶剂的圆底烧瓶相连，上面接回流冷凝管 1。园底烧瓶置于恒温水浴 中，使溶剂沸腾，蒸气通过提取器的支管上升，被冷凝后滴入提取器 3 中，溶剂和固体接触进行萃取，当溶剂面超过虹吸管 2 的最高处时，含有 萃取物的溶剂虹吸回烧瓶，因而萃取出一部分物质。 实验时能够观察到,随着回流的进行,当提取筒中回流下的溶剂的液 面稍高于索氏提取器的虹吸管顶端时,提取筒中的溶剂发生虹吸并全部流
4
本标准样品处理采用了索氏提取的方法。被测样品通过有机溶剂在恒 温的条件下反复浓缩提取，被测样品被充分的抽提浓缩出来，提高了分析 的灵敏度和精密度。
四、国内外相关标准现状
目前国内外研究测定B[a]P含量的方法很多，我国大气中B[a]P的方 法有荧光分光光度法、气相色谱法、液相色谱法。荧光法灵敏度高，但是 需要纸层析，分离能力差。气相色谱法使用毛细管进行分离，具有很高的 分离度，尤其是使用色质联用仪可以同时进行定性和和定量分析，适合测 定复杂样品中PAHs的分析，HPLC法由于使用紫外检测器，具有高的灵敏度 和检测限，已成为B[a]P的首选方法。
烧或使用的地方都有可能产生 B[a]P, B[a]P 污染物已成为环境污染物中
极其重要的物质。由于环境标准及对检测方法的要求，我们对环境空气中
3
B[a]P 的检测尤其重要。 因为B[a]P的测定结果的准确性受到样品采集和样品的处理过程诸多
因素的影响，而目前我国现行的标准《环境空气 苯并[a]芘测定 高效液 相色谱法》（GB/T 15439-1995）因为样品处理方法有一定的局限性，一些 条款表述不清等因素，开展《环境空气 苯并[a]芘测定 高效液相色谱法》 （GB/T 15439-1995）的修订工作，将对环境空气污染调查和控制研究提 供基础数据，对保护环境、保障人民健康都具有重大意义。
gb36600-2018
苯并(a)芘：苯并a芘（Benzoapyrene），化学式：C20H12，英文表示BaP，是一种五环多环芳香烃类。
结晶为黄色固体。
这种物质是在300到600°C之间的不完全燃烧状态下产生。
苯并芘存在于煤焦油中，而煤焦油可见于汽车废气（尤其是柴油引擎）、烟草与木材燃烧产生的烟，以及炭烤食物中。
苯并芘为一种突变原和致癌物质，从18世纪以来，便发现与许多癌症有关。
其在体内的代谢物二羟环氧苯并芘，产生致癌性的物质。
影响危害：一、健康危害侵入途径：吸入、食入、经皮吸收。
健康危害：对眼睛、皮肤有刺激作用。
是致癌物、致畸原及诱变剂。
二、毒理学资料及环境行为毒性：是多环芳烃中毒性最大的一种强烈致癌物。
急性毒性：LD50500mg/kg(小鼠腹腔)；50mg/kg(大鼠皮下)慢性毒性：长期生活在含BaP的空气环境中，会造成慢性中毒，空气中的BaP是导致肺癌的最重要的因素之一。
水生生物毒性：5μg/L，12天，微生物，阻碍作用；5mg/L，13小时，软体动物卵，阻碍作用，结构变化。
致癌：BaP被认为是高活性致癌剂，但并非直接致癌物，必须经细胞微粒体中的混合功能氧化酶激活才具有致癌性。
BaP进入机体后，除少部分以原形随粪便排出外，一部分经肝、肺细胞微粒体中混合功能氧化酶激活而转化为数十种代谢产物，其中转化为羟基化合物或醌类者，是一种解毒反应；转化为环氧化物者，特别是转化成7，8-环氧化物，则是一种活化反应，7，8-环氧化物再代谢产生7，8-二氢二羟基-9，10-环氧化物，便可能是最终致癌物。
这种最终致癌物有四种异构体，其中的(+)-BP-7β，8α-二醇体-9α，10α-环氧化物-苯并[a]芘，已证明致癌性最强，它与DNA形成共价键结合，造成DNA损伤，如果DNA不能修复或修而不复，细胞就可能发生癌变。
其它三种异构体也有致癌作用。
动物试验包括经口、经皮、吸入，经腹膜皮下注射、均出现致癌。
许多国家相继用9种动物进行实验，采用多种给药途径，结果都得到诱发癌的阳性报告。
电化学分析法快速测定烧烤类食品中的苯并(a)芘
电化学分析法快速测定烧烤类食品中的苯并（a ）芘冯亚净，张志业，李书国*（河北科技大学生物科学与工程学院，河北 石家庄 050018）摘 要：基于苯并（a ）芘（benzo(a )pyrene ，BaP ）的电化学氧化还原特征，建立一种快速测定烧烤类食品中BaP 含量的电化学分析方法，优化测定条件为乙腈-水（1∶3，V /V ）作为溶剂、电解质LiClO 4浓度0.15 mol /L 、硫酸浓度0.1 mol /L 、富集时间10 min ，在此条件下，BaP 的氧化峰电流随其浓度的增大而增大，而且浓度在0～100 nmol /L 范围内呈线性关系，检测限为0.187 nmol /L （R SN =3）。
该方法的稳定性和重复性较好，检测时间短，利用该法对烤羊肉串样品中的BaP 进行检测，回收率为96.67%～101.56%，检测结果与高效液相色谱法基本一致，可用于烧烤类食品中BaP 的快速检测。
关键词：苯并（a ）芘；电化学分析方法；食品安全；烧烤类食品Electrochemical Analysis for Rapid Determination of Benzo(a )pyrene in Barbecued FoodsFENG Yajing, ZHANG Zhiye, LI Shuguo *(College of Bioscience and Bioengineering, Hebei University of Science and Technology, Shijiazhuang050018, China)Abstract: Based on the electrochemical redox properties of benzo(a )pyrene (BaP), a rapid electrochemical method for the determination of BaP in barbecued foods was established. The optimum conditions for the method were established as follows: using acetonitrile-water (1:3, V /V ) as solvent, LiClO 4 concentration (as electrolyte) 0.15 mol /L, sulfuric acid concentration 0.1 mol /L, and enrichment time 10 min, where the response current linearly increased with increasing BaP concentration in the range of 0–100 nmol /L. The limit of detection (LOD) of the proposed method was 0.187 nmol /L (R SN = 3). Excellent stability and reproducibility of the method were observed. The recovery of the analyte added to shish kebab was in the range of 96.67%–101.56%. The results were in agreement with those obtained by high performance liquid chromatography (HPLC). Consequently, the electrochemical method was useful for rapid determination of BaP in barbecued foods.Key words: benzo(a )pyrene (BaP); electrochemical analysis method; food safety; barbecued food DOI:10.7506/spkx1002-6630-201716032中图分类号：TS225.1 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2017）16-0205-05引文格式：冯亚净, 张志业, 李书国. 电化学分析法快速测定烧烤类食品中的苯并(a )芘[J]. 食品科学, 2017, 38(16): 205-209. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201716032. FENG Yajing, ZHANG Zhiye, LI Shuguo. Electrochemical analysis for rapid determination of benzo(a )pyrene in barbecued foods[J]. Food Science, 2017, 38(16): 205-209. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201716032. 收稿日期：2016-09-12基金项目：国家自然科学基金面上项目（20876165）；河北省食品药品安全科技项目计划项目（ZD2014011）作者简介：冯亚净（1993—），女，硕士研究生，研究方向为食品安全技术。
食用油中苯并芘的分析（紫外分光光度法）
食用油中苯并[a]芘的分析（紫外分光光度法）一、原理将食用油样品的环己烷溶解液与DMSO进行液-液分配，借助PAH与BaP 共轭体系π-键系统与DMSO分子中的S原子相互作用，使PAH与BaP富集于DMSO中，BaP在DMSO-环己烷中的分配系数为5.1，两次分配即达90%以上的富集效率。
而脂肪烃和其他脂溶性化合物仍留在环己烷中，从而达到PAH与脂肪烃的分离。
当DMSO液加水或加稀盐酸，立即使DMSO-π键离析，再用环己烷反提取PAH或BaP，制备成BaP的环己烷溶解液，部分极性化合物或非烃杂质仍留在稀的DMSO中。
用乙酰化纸层分离BaP，在紫外分光光度计上进行测定。
紫外分光光度法测定BaP的原理是由于BaP或PAH分子存在着共轭双键π-电子系统，所有的π轭系统均对紫外光有不同程度的吸收。
BaP对紫外特征吸收峰为385nm，以此作为BaP的定性测定的依据。
（为进一步除去烷烃和极性较强的杂质，将BaP或PAH的环己烷液通过氧化铝柱，借助PAH与BaP分子中存在着较多的共轭双键，致使它们在氧化铝上的吸附保留特性比烷烃强。
从而换用不同的溶剂进行洗脱，使烷烃、芳烃与极性化合物再度分离。
）紫外分光光度法适用于BaP含量在76-30000μg/kg的样品。
附：◆二甲基亚砜(dimethylsulfoxide，DMSO)是一种强吸湿性液体，无色无臭，相对密度为1.100，熔点为18．45℃，沸点为189℃，折射率为1.4795。
它是一种既溶于水又溶于很多有机溶剂的非质子极性溶剂。
DMSO在芳烃抽提中作为萃取溶剂，具有对芳烃的选择性高，常温下对芳烃无限制混溶，萃取温度低，且不与烷烃、烯烃、水反应、无腐蚀、无毒，萃取工艺简单、设备少、节能，不溶于烯烃，适合含烯烃高的油料，溶剂回收可用反萃取等优点。
DMSO对烷烃不溶，因此可用于食品蜡、食用白油的精制和治癌物的检测中。
DMSO对乙炔易熔，用于石油气中乙炔回收和溶解乙炔生产中。
全自动固相萃取-高效液相色谱法测定熏烤肉制品中苯并(a)芘含量
全自动固相萃取-高效液相色谱法测定熏烤肉制品中苯并(a)芘含
量
摘要：苯并(a)芘是一种强致癌物质，常常存在于烟熏、烤肉等烹饪方式中。
本研究
利用全自动固相萃取-高效液相色谱法对熏烤肉制品中的苯并(a)芘含量进行了测定。
结果
表明，该分析方法具有较高的准确性和灵敏度，可为监管机构对熏烤肉制品的质量安全提
供重要参考依据。
引言
熏烤肉制品是人们日常饮食中常见的一种食品，其特殊的烹饪方式赋予了独特的香味
和口感。
烟熏、烤制过程中产生的烟熏物质和多环芳烃等物质可能对人体健康造成潜在的
危害。
苯并(a)芘是一种典型的多环芳烃化合物，被世界卫生组织确定为一种强致癌物质，长期摄入可能导致癌症等健康问题。
监测熏烤肉制品中苯并(a)芘的含量具有重要的意
义。
目前，国内外已有一些关于苯并(a)芘含量测定的研究，常用的分析方法包括气相色
谱法、液相色谱法等。
这些方法存在着分析时间长、操作复杂、需要较多有机溶剂等缺点。
我们需要进一步探索一种简便、准确、快速的分析方法对熏烤肉制品中的苯并(a)芘含量
进行测定。
实验部分
1. 仪器和试剂
实验采用的仪器为Agilent 1200高效液相色谱仪，固相萃取柱为C18色谱柱；试剂包括甲醇、乙腈、乙酸乙酯等。
2. 样品处理
将熏烤肉制品样品加工成适当大小的颗粒状，取适量样品称重，并使用乙腈进行提取，得到待测物质。
3. 全自动固相萃取-高效液相色谱法测定
将待测物质经过固相萃取柱进行富集，然后使用高效液相色谱法进行分离和检测，最
终得到苯并(a)芘的含量。
高效液相色谱法测定煎炸油中的苯并(a)_芘含量
分析检测高效液相色谱法测定煎炸油中的苯并(a)芘含量倪 涵（云南省红河州质量技术监督综合检测中心，云南红河 661100）摘 要：采用液相色谱法测定煎炸油中苯并(a)芘（BaP）的含量，优化了样品前处理方法。
样品用正己烷提取，经SPE小柱净化，荧光检测器检测。
结果表明，苯并(a)芘含量在0.5～20.0 ng·mL-1线性关系良好，相关系数R2为0.999 8，检出限为0.15 μg·kg-1，定量限为0.5 μg·kg-1，3个不同加标浓度下的平均回收率为89.1%～97.8%，相对标准偏差为0.8%～2.1%，方法灵敏度高，稳定性好。
采集21份小吃店里油炸过油条、土豆、肉制品的煎炸油样品进行检测，苯并(a)芘的检出率为100%，含量为2.82～9.23 μg·kg-1。
关键词：高效液相色谱；苯并(a)芘；固相萃取Determination of Benzo(a)pyrene Content in Frying Oil byHPLCNI Han(Comprehensive Quality and Technical Supervision and Testing Center of Honghe Prefecture, Yunnan Province,Honghe 661100, China)Abstract: The content of benzo(a)pyrene (BaP) in frying oil was determined by HPLC, and the sample pretreatment method was optimized. The sample was extracted with n-hexane, purified by an SPE column, and detected by fluorescence detector. The results showed that the linear relationship of BaP was good within the mass concentration range of 0.5～20.0 μg·kg-1, with a correlation coefficient of R2=0.999 8 and a detection limit of 0.15 μg·kg-1 with a quantitative limit of 0.5 μg·kg-1. The average recoveries under three different spiking gradients at 89.1%～97.8%, respectively, RSD ranging from 0.8% to 2.1%. The method has high sensitivity and good stability.21 fried oil samples of deep-fried dough sticks, potatoes and meat products from snack bars were collected for detection. The detection rate of BaP was 100%, and the content range was 2.82～9.23 μg·kg-1.Keywords: high performance liquid chromatography; benzo(a)pyrene; solid phase extraction苯并(a)芘（Benzo(a)pyrene，BaP）是毒性最强的多环芳烃类物质[1-2]，食品在油炸、煎烤、熏制等烹调加工过程中，其脂肪、蛋白质、胆固醇、碳水化合物等营养成分会在高温条件下发生热裂解反应，再经过环化和聚合反应生成包括BaP在内的多环芳烃类物质。
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围 植物油 油脂
玉米、玉米面、玉米渣、玉米片）
鱼、肉
肉及肉制品（熏、烧、烤肉类）
蔬菜
水产动物及其制品（熏、烤水产品）
饮料
油脂及其制品
糕点
2、原理
被整合的 4 个标准中的原理各不相同，见表 4。
本着节约溶剂、技术稳定可靠、充分取用成熟的商品化产品、技术能覆盖所有食品基质的原则，
起草了方法原理，详见标准征求意见稿。
35℃
35℃
6 进样溶剂
乙腈+四氢呋喃 =90+10
甲醇
乙腈
乙腈
进样前定容
7 体积
0.1ml
0.4ml（油脂）
1ml
1ml
1ml（其他 3 种）
8
流速
1.0 mL/min
1.2mL/min
1.0 mL/min
1.0 mL/min
9
进样量
10μL
10μL
20μL
20μL
5
文档来源为:从网络收集整理.word 版本可编辑.欢迎下载支持.
采用 0 ng/mL、0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL。曲线浓度最低点是
方法的定量限，曲线最高点是卫生限量的 2 倍，最高浓度点是最低点的 40 倍，可以覆盖大部分样品 的含量范围。
关于材料，采用了中性氧化铝柱（22 g）与苯并（a）芘分子印迹柱（500 mg）。前者来源于 GB/T 22509，其商品化产品在国内已经销售 5 年以上。后者在被整合的 4 个标准中是没有的，属于 新采用的技术。分子印迹柱在国内市场上已经有售 2 年以上，国外与国内品牌的产品都有，价格与 普通 SPE 柱价格相当。
C18
C18
2
流动相
乙腈+水 （88+12）
乙腈+水（88+12） 乙腈+水（75+25） 乙腈+水（88+12）
3
保留
13.4min
13.4min
26.8min
13.4min
4
波长
384nm/ 406nm
384nm/ 406nm 297nm/ 405nm 384nm/ 406nm
5
柱温
35℃
30℃
准。整合后与 GB/T 22509 相比主要变化处有 3 个方面：
色谱柱：采用 C18，未采用多环芳香烃分析柱。前者是常用柱，能够满足分析需要，日本的检
测方法、NY/T 1666 及 SC/T 3041 也是采用 C18 柱。
进样前定容体积：0.1ml 的定容体积不容易操作，溶剂蒸发更会造成检测结果偏高。把 0.1ml 改
整合后
标准储备液 苯
溶剂
甲苯
甲醇
乙腈
甲苯
标准储备液
0.1
0.5
0.15
0.1
0.5
浓度 mg/ml
保存时间
-
6 个月
-
3 个月
6 个月
标准曲线工
作液浓度
-
0.4
30
0.5
0.5
0.8
60
5
1
4
90
10
5
ng/ml
20
120
50
10
40
150
100Leabharlann 20被整合 4 个标准中，储备液的溶剂、浓度都不相同。仅部分提供了可以稳定保存的时间。征求 意见稿采用了 GB/T 22509 的方法，该方法与国家化标准组织的方法 ISO 15302 是一致的。
4、仪器和设备 检测仪器采用高效液相色谱仪，配有荧光检测器。该设备在食品检测实验室是通用设备。 5、分析步骤 5.1 试样制备
4
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把 4 种食品分成三类撰写。分别是植物性产品、动物性产品、液体油脂。
根据 GB 2760 附录 F《食品分类系统》，油脂及其制品分成不含水的油脂与水油状脂肪乳化制
二、国内和国际标准情况
包括国内与欧盟的限量标准、检测方法标准。
1 国内标准
GB 2762-2012《食品安全国家标准 食品中污染物限量》对食品中苯并（a）芘的污染限量进行
了规定，见表 1。按 GB/T 5009.27 规定的方法测定。
表 1 GB 2762-2012 食品中苯并（a）芘限量指标
食品类别（名称）
精密度、其他（检出限与定量限）分别进行说明。
1、范围
对原来 4 个标准进行修订，使与 GB 2762-2012《食品安全国家标准 食品中污染物限量》一致。
整合前后内容详见表 3。
表 3 检测范围的整合
章 GB/T GB/T
NY/T SC/T 整合后
节 1 5009
22509 1666
3041
范 粮食 动 植 物 肉制品 水产品 谷物及其制品（稻谷、糙米、大米、小麦、小麦粉、
限量，μg/kg
谷物及其制品
5.0 稻谷 a、糙米、大米、小麦、小麦粉、玉米、玉米面（渣、片）
1
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肉及肉制品
5.0 熏、烧、烤肉类
水产动物及其制品
5.0 熏、烤水产品
油脂及其制品
10
a 稻谷以糙米计。
2 国际标准
日本：《日本卫生试验法方法》，采用液相色谱法测定。
次独立测试
次 独 立 测 试 差＜15%
次独立测试
结果的绝对
结果的绝对
结果的绝对
差值不大于
差值不大于
差值不大于
两个测定值
两个测定值
两个测定值
的算术平均
的算术平均
的算术平均
值 20%。
值 20%。
值 20%。
8、定量限
最低检测浓度 依据 GBT 27404-2008 对测定低限的计算公式
计算：标准曲线最低点
表 4 检测原理的整合
章节 2 GB/T 5009 GB/T 22509 NY/T 1666 SC/T 3041 整合后
原理 皂化提取 溶解
超声提取 皂化提取 超声提取
液液萃取 柱层析
反萃取
柱层析
柱层析
柱层析
HPLC 测定 反萃取
HPLC 测定 HPLC 测定
薄层色谱
HPLC 测定
分光光度法
目视法
3
检出限 1.0
0.1
0.5
-
0.15
定量限 -
-
-
0.5
0.5
6
0.5ng/mL 标准溶液连续进样 20 次，求出待测物峰面积的标准偏差( Sb=77603),乘以 3 倍的信噪比，
再除以校准曲线的斜率（b=3297000），得到检出限为 0.07 ng/ml；同法，用 10 倍的信噪比计算得到
定量限为 0.23 ng/ml。本着留有一定的余量的原则，标准文本里把检出限定位 0.15ng/ml，定量限确
6、分析结果的表述
与一般的液相色谱法结果计算方法一致。
7、精密度
被整合 4 项标准的精密度表述见表 7。
表 7 精密度整合表
章节 7
GB/T 5009 GB/T 22509 NY/T 1666 SC/T 3041 整合后
精密度
在重复性条 无
在重复性条 批内和批间 在重复性条
件下获得的 2
件下获得的 2 相 对 标 准 偏 件下获得的 2
品（如黄油）。本次修订增加了水油状脂肪乳化制品（如黄油）的测定步骤。
样品净化方面：中性氧化铝属于经典方法，作为净化方法 1。分子印迹是新技术，作为净化方
法 2。
5.2 仪器参考条件
被整合标准的仪器条件被细分成 9 个参数，汇总见表 6。
整合的原则是以 GB/T 22509 为主。因为该标准是 GB，规格高，也是等同采用 ISO15302 的标
检测原理的整合章节2gbt5009gbt22509nyt1666sct3041整合后原理皂化提取液液萃取柱层析薄层色谱分光光度法目视法溶解柱层析hplc测定超声提取反萃取反萃取hplc测定皂化提取柱层析hplc测定超声提取柱层析hplc测定编制说明3试剂和材料因为苯并a芘是强致癌物质为了保护试验操作者的健康安全增加了安全防护等警告内容
定为 0.5ng/mL。
由于对样品处理过程中没有稀释与富集，所以，整个方法的检出限为 0.15μg/kg，定量限为
0.5μg/kg。可以满国内市场执法监督的需要，也可满足风险监测、进出口检测的需要。
方法检出限与定量限的整合见表 8。
表 8 方法检出限与定量限的整合（单位 μg/kg）
章节 8 GB/T 5009 GB/T 22509 NY/T 1666 SC/T 3041 整合后
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《食品安全国家标准 食品中苯并（a）芘的测定》
(征求意见稿)编制说明
一、标准起草的基本情况 1 任务来源、起草单位、起草人 2014 年食品安全国家标准整合项目委托协议书，《食品安全国家标准 食品中苯并（a）芘的测
定》（项目编号：ZHENGHE-2014-369）。 新标准整合了 4 个标准： GB/T 5009.27-2003《食品中苯并(a)芘的测定》； GB/T 22509-2008《动植物油脂 苯并(a)芘的测定 反相高效液相色谱法》； SC/T 3041-2008《水产品中苯并(a)芘的测定 高效液相色谱法》； NY/T 1666-2008《肉制品中苯并(a)芘的测定 高效液相色谱法》。 主要起草单位：江苏省疾病预防控制中心， 主要起草人：刘华良 2 简要起草过程 2013 年 12 月，撰写立项建议书。 2014 年 4 月，签署委托协议书。 2014 年 5-12 月，实验室实验，完成标准草案起草，编制说明撰写，实验室验证，书面征求意见。 2015 年 1-4 月，上网征求意见。