三七总皂苷提取分离及分析方法研究进展

丞　堡　医　堂　堂　Ｊ０ＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＣＨＥＮＧＤＥ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＣＯＬＬＥＧＥ　

分和生物活性研究进展［Ｊ】．中国民族民间医药，　２００８，（３）：２８－２９．　［４】张耀春，王立为．远志提取物对小鼠学习记忆的影　ＰＩ￣Ｉ［Ｊ】．中国新药杂志，２００６，ｌ５（１５）：１２５４－１２５７．　［５】陈勤，曹炎贵，张传惠．远志皂苷对Ｄ一淀粉样肽和　鹅膏覃氨酸引起胆碱能系统功能降低的影响［Ｊ】．药　学学报，２００２，３７（１２）：９１３－９１７．　［６】Ｉｋｅｙａ　Ｙ，Ｔａｋｅｄａ　Ｓ，Ｔｕｎａｋａｗａ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ　ｉｍｐｒｏｖ—　ｉｎｇ　ａｎｄ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｃｙｌａｔｅｄ　ｏｌｉｇｏｓａｃ—　ｃｈａｒｉｄｅｓ　ｉｎ　ｐｏｌｙｇａｌａ　ｔｅｎｕｉｆｏｌｉａ［Ｊ］．Ｂｉｏｌ　Ｐｈａｒｍ　Ｂｕｌｌ，２００４，２７　（７）：１０８１—１０８５．　［７】陈勤，高晨曦，葛礼浩．远志皂苷对脑定位注射Ａ　ｐ　拟ＡＤ大鼠脑内神经形态病理学变化的影响［Ｊ］．　激光生物学报，２００６，ｌ５（３）：２９４－２９８．　［８】Ｎａｉｔｏ　Ｒ，Ｔｏｈｄａ　Ｃ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉ．　ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉＶｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙｇａｌａ　ｔｅｎｕｉｆｏｌｉａ　ｉｎ　Ａ　Ｂ　（２５—３５）一ｔｒｅａｔｅｄ　ｃｏｒｔｉｃａｌ　ｎｅｕｒｏｎｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｌ　Ｐｈａｒｍ　Ｂｕｌｌ，２００６，　２９（９）：１８　１８９６．　【９】田枫，姜勇，张阔，等．远志总苷对快速老化模型　（ＳＡＭ—Ｐ／８）小鼠学习记忆能力的作用及及其机理　研究［Ｊ】．老年医学与保健，２００４，１０（３）：Ｉ　３７－ｌ３９．　ｆｌ０】马立本，ｉ＝＝Ｅ付田，张晓明．远志提酞物的促智作用研　究［Ｊ］．卫生职业教育，２００８，２６（１２ｊ：１２８－ｌ２９．　【ｌ１］刘屏，王东晓，郭代红，等．远志３，６’一二芥子酰基蔗　糖在药物诱发抑郁模型上的药效评价［Ｊ】．中国药学　杂志，２００８，４３（１８）：１３９１—１３９４．　［１２】王秀卿，黄庆军．下丘脑一垂体一肾上腺轴在抑郁症　发病中的作用［Ｊ】．现代中西医结合杂志，２００４，１　３　（１０）：Ｉ３８３－ｌ３８５．　ｆｌ　３］谢婷婷，孙艳，王东晓，等．远志ＹＺ－５ｏＮ慢性应激　抑郁模型大鼠行为学及血清ＣＲＨ　ＡＣＴＨ￣ＨＣＯＲ的　影响［Ｊ】．解放军药学学报，２００８，２４（２）：９５－９８．　［１４】文莉．远志抗焦虑作用部位的筛选［Ｊ】．中国中医药　科技，２００６，ｌ３（６）：４０ｌ－４０２．　［１５】聂淑琴．草药制剂的药理学特性（２０）：远志中天然　前体药物的筛选［Ｊ］．国外医学一中医中药分册，　ＶＯ１．２７　Ｎｏ．２　２Ｏｌ０　ｌ９９６，ｌ８（６）：３９－４０．　［１　６］Ｋａｗａｓｈｉｍａ　Ｋ，Ｍｉｙａｋｏ　Ｄ，Ｉｓｈｉｎｏ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉ—ｓｔｒｅｓｓ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　３，４，５一ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｃｉｎｎａｍｉｃ　ａｃｉｄ，ａｎ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ　ｏｆｒｏｏｔｓ　ｏｆｐｏｌｙｇａｌａ　ｔｅｎｕｉｆｏｌｉａ［Ｊ］．Ｂｉｏｌ　Ｐｈａｒｍ　Ｂｕｌｌ，２００４，２７　（８）：１３１７—１３１９．　［１　７】Ｃｈｕｎｇ　ＩＷ，Ｍｏｏｒｅ　ＮＡ，Ｏｈ　ＷＫ，ｅｔ　ａ１．Ｂｅｈａｖｉｏｕｒａｌ　ｐｈａｒｍａ－　ｃｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｐＯｌｙｇａ１ａｓａｐＯｎｉｎｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｎｔｉｐｓｙ—　ｃｈｏｔｉｃ　ｅｆｆｉｃａｃｙ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｅｈａｖ，２００２，７１（１—　２１：１９１—１９５．　［１８】孙桂波，邓响潮，李楚华．远志皂苷对Ｈ，０，诱导的　ＰＣｌ２细胞损伤的保护作用［Ｊ】．中药材，２００７，３０（８）：　９９１－９９３．　【ｌ９】Ｉ习明，李萍．远志抗衰老作用的研究【Ｊ】．实用药物与　临床，２００６，９（１）：２２－２３．　［２０】刘晓虹，林冬梅．远志治疗急性乳腺炎［Ｊ】．中国民间　疗法，２００４，１２（９）：６５．　［２ｌ】董抗援．远志栓治疗滴虫性阴道炎４　２例效果观察　［Ｊ】．中国寄生虫病预防杂志，ｌ９９８，ｌ１（２）：１５５－ｌ５６．　【２２］彭汶铎，许实波．四种远志皂苷的镇咳和祛痰作用　［Ｊ】．中国药学杂志，ｌ９９８，３３（８）：４９１．　［２３】Ｈｏｎｇ　Ｔ，Ｊｉｎ　ＧＢ，Ｙｏｓｈｉｎｏ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｐｏ—　ｌｙｇａｌａ　ｒｏｏｔ　ｉｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ＴＮＢＳ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃｏｌｉｔｉｓ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　［Ｊ］．ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００２，７９（３）：３４１—３４６．　［２４】郭娟，王建．生远志及炮制品对小鼠止咳化痰作用　［Ｊ】．中药药理与临床，２００３，１９（４）：２９．　［２５】朱玉琢，庞慧民，高久春，等．中草药远志对实验性　小鼠雄性生殖细胞遗传物质的保护作用ｆＪ】．吉林大　学学报（医学版），２００３，２９（３）：２５８－２６０．　［２６】庞慧民，高久春，朱玉琢，等．中草药远志对醋酸铅　诱发的小鼠精子非程序ＤＮＡ合成的抑制作用【Ｊ】．吉　林大学学报（医学版），２００６，３２（１）：８２－８３．　［２７】彭汶铎．远志皂苷Ｈ对离体平滑肌与心脏的作用　［Ｊ】．中国药学杂志，ｌ９９９，３４（４）：２４１－２４３．　［２８】徐敬东．远志增强大鼠子宫平滑肌峰电活动实验研　究［Ｊ】．中药药理与临床，２００５，２ｌ（４）：４４－４６．　（收稿日期：２００９－ｌ０－２１）　

三七总皂苷提取分离及分析方法研究进展　孟琼，陈治宇△　（承德医学院，河北承德０６７０００）　

【关键词】三七皂苷；提取；分离；分析方法　【中图分类号１Ｒ２８４．２　【文献标识码】Ａ　【文章编号１１００４—６８７９（２０１０）０２－０１９８—０４　

三七总皂苷（ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ，　ＰＮＳ）是五加科人参属植物三七（Ｐａｎａｘ　ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ（Ｂｕｒｋ．）　Ｆ．Ｈ．Ｃｈｅｎ）的主要活性部位，含有多种单体皂苷，具有扩　张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板聚集、降血脂、抗　炎、抗氧化等多种药理作用…。临床上主要用于心脑血管　疾病的治疗。本文针对三七总皂苷的提取、分离、纯化以　及分析方法的发展综述如下：　△通讯作者　ｌ９８·　１三七皂苷类成分的提取方法　大体分为两类，一类是传统方法，如渗漉法、浸渍法、　水煎煮法等［２叫】，成本低廉，但提取效率较低；另外一类是　近年发展起来现代仪器提取方法，提取效率高，提取完　全，如加压溶剂萃取法（ＰＬＥ，ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ　ｌｉｑｕｉｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ）　＿】’１微波萃取法Ｎｏ１、超临界流体萃取法（ＳＦＥ）ｔ。，９】等。　

三七总皂苷中各成分性质不尽相同，如三七二醇皂　苷耐受高温，而三醇皂苷热敏性强，在煎煮温度大于６０℃　丞　堡　医　堂　堂　塑　ＪＯＵＲＮＡＬ　０Ｆ　ＣＨＥＮＧＤＥ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＣＯＬＬＥＧＥ　

时，极易降解失效，因此本文主要介绍低温非加热条件下　的提取方法。　１．１　冷浸法Ｄｏｎｇ等【２ｌ以三七皂苷Ｒｌ、人参皂苷Ｒｇｌ、人　参皂苷Ｒｂｌ、人参皂苷Ｒｄ和黄酮类为指标，用正交设计法　对三个因素做出了优化，得出三七根提取的最优条件：提　取溶剂水，２Ｏ倍量，浸提时间２４ｈ。在此种条件下提取出的　三七总苷抗血小板聚集作用最强。　１．２　酸水解法　滕荣伟等【３ｌ用温和酸（乙酸一乙醇１：１）在　６ｈ、６０℃条件下水解三七药材粗粉，过制备液相色谱柱分　离得到五种新的达玛烷型糖苷。酸水解法可以较为容易　的提取出苷，但是酸水解选择性低，提取效率也低，水解　不均匀，很容易将同一皂苷水解成不同的产物。　１．３　渗漉法　渗漉法是一种较好的提取方法，设备简　单，操作安全，节能降耗，减少成分破坏，有煎煮法不可比　拟的优点。闫光军等【４】用正交试验优化渗漉法提取三七皂　苷的条件：ｌ５倍量的７５％乙醇以５ｍｌ／ｍｉｎ的速度渗漉为最　佳提取方案。可提取出的三七总皂苷含量达ｌ１．０１％，提取　率为９３．１％。认为已基本提尽，但是渗漉法耗时长，不适用　于工业化大生产。　１．４超声波提取法　１．４．１　单频超声：秦枫等【５１以三七总皂苷含量为指标，香　草醛一高氯酸法测定其含量，对超声提取三七总皂苷　（ＰＮＳ）的提取工艺用正交设计优化，得出的最佳提取工艺　为：料液比１：１２，水饱和正Ｔ醇超声提取２次，时间５０ｍｉｎ，温　度４０℃，提取率８％（原药材）。这种方法通过加速药物有效　成分进入溶剂，提高了提取率，避免了高温破坏有效成分；　料液比与回流提取工艺相近，但是提取时间大大缩短。　１．４．２双频超声：贲永光等［６】采用双频超声（４０ｋＨｚ／２５ｋＨｚ）　技术对三七总皂苷提取进行强化，用正交设计得出双频　超声提取最佳工艺条件为：８０％乙醇，提取时间３０ｍｉｎ，料　液比为ｌ：２０，提取温度为４０＂（２。得出提取率为８２．４１％，（有　效部位）提取率高于４０ｋＨｚ或２５ｋＨｚ单频超声。　１．４．３　超声酶法：超声波提取法与生物酶提取法为现代　中药有效成分提取的新方法，操作简便，工艺条件稳定。　周琳等［７】考察了乙醇回流法、超声法、超声纤维素酶法、超　声果胶酶法、超声复合酶法提取三七总皂苷的优劣，并采　用四因素（纤维素酶用量、果胶酶用量、超声时间、加水量）　三水平正交设计法对超声复合酶法提取工艺条件进行优　选。结果得到了最优的提取工艺条件：ｐＨ４．５，酶解温度５０　℃，酶解时间为２ｈ，纤维素酶用量１５Ｕ／ｇ（生药），果胶酶用　量为１４０Ｕ／ｇ（生药），超声时间９０ｒａｉｎ，加水量８倍量。所得三　七提取液中总皂苷的含量为ｌ０．３３，提取物得率为３５．１７，　显著高于乙醇回流法等传统方法。　１．５超，Ｊ各界流体革取　１．５．１　超临界ＣＯ，萃取法：黄雪等［８】通过正交实验对超临　界提取工艺条件进行了优化：粉碎工艺适宜的萃取温度　４５℃，压力３８ＭＰａ，ＣＯ　流：ｍ２３ｋｇ／ｈ，夹带剂３００ｍｌ，萃取时　间３．Ｏｈ，提取率７．９７％｝轧胚工艺适宜的萃取温度４５℃，压　力３５ＭＰａ，ＣＯ　流￣２０ｋｇ／ｈ，夹带剂３５０ｍｌ，萃取时间２．５ｈ，　提取率９．９８％。超临界ＣＯ，萃取技术具有萃取能力强、提取　率高、生产周期短、有效成分不被破坏、工艺简单、操作参　数容易控制、没有溶剂残留、产品质量稳定等优点，已经　Ｖ０１．２７　Ｎｏ．２　２０ｌ０　应用于中药有效成分的工业化大生产中。　１．５．２　超临界ＣＯ，反相微乳萃取：雷羽等【９】将表面活性剂　二一（２一乙基己基）磺基琥珀酸钠（ＡＯＴ）和水引入到超临界　Ｃ　０，中，形成反相微乳体系，从而提高对三七总皂苷的萃　取能力。最高提取率可达１６％以上，适用于工业化大生产。　１．６　微波萃取法　郭子杰等【ｌ。１优化了微波浸提三七皂苷　的工艺条件，得出最佳条件为：微波辐射功率６００Ｗ，微波　辐射时间１０ｍｉｎ，料液比ｌ：４，８０％甲醇。并证明微波处理后　的三七中皂苷物质的浸取速度至少是未经微波处理的４　倍，大大提高了提取效率。此外，微波还会促使三七中的　细胞壁破裂，有利于皂苷成分的溶出。但是，微波萃取也　是因为规模小，目前还未见有用于工业化生产。　１．７加压溶剂提取法（ＰＬＥ）　李鹏等【】Ｉ】以三七总皂苷、人　参皂苷Ｒｂ１和人参皂苷Ｒｇ１含量为指标，用单因素考察法　对影响加速溶剂提取三七皂苷类成分的因素进行优化，得　到的最优条件为：溶剂甲醇，药材粒径为０．３－０．４５ｍｍ，提　取温度１５０℃，提取压力６．８９５ＭＰａ。提取１５ｍｉｎ，提取１次，　提取率与索氏提取相当，但能明显地缩短提取时间和溶　剂用量，同时重现性也有明显的改善。加压溶剂提取是近　年来发展起来的一种新型样品提取技术，具有提取时间　短、溶剂消耗少、提取效率高、操作模式多样化以及操作　过程自动化等诸多优点。尽管如此，由于其提取容量限制　（１１ｍｌ或３３ｍ１），目前还不能用于工业化大生产，只能用于　分析实验的样品制备。　１．８　罐组逆流提取法　陈勇等［】　】以三七皂苷Ｒ１、人参皂　苷Ｒｇ　１、总皂苷和浸出物含量为优化目标，采用正交试验　设计，利用回归分析方法建立了各优化目标与考察因素　间的数学模型，结合方差分析得到三七罐组逆流提取　（ｍｕｌｔｉ－ｓｔａｇｅ　ｃｏｕｎｔｅｒｃｕｒｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ＭＣＣＥ）最佳工艺　参数：体积分数７０％乙醇，８倍药材量溶剂，阶段提取时间　３０ｍｉｎ，提取温度５０￣Ｃ。与其它提取工艺相比，ＭＣＣＥ在保证　较高收率的前提下，温度可以降低５　０％左右，溶剂节省　５０％－７０％，单位时间的处理量增大，使得有效成分最大限　度地溶出，适用于工业化大生产。　１．９水提取法　水提取法是以水为溶剂，应用生物酶、　发酵、组合大孔吸附树脂、脱色树脂、离子交换树脂等现　代科学技术从三七中提取、分离、精制、纯化三七总皂苷。　王兴文等［１　】用水提取法对三七中皂苷类成分提取的工业　化大生产做了探索，建成日处理３０００ｋｇ￣＿．七药材的生产　线，提取率８％，含量９５％以上。这种方法高效、环保，产品质　优、稳定，可用于工业化大生产。　２三七皂苷类成分的分离纯化方法　２．１　大孔吸附树脂法　万建波等［１　１以人参皂苷Ｒｇｌ、Ｒｅ、　Ｒｂｌ、Ｒｇ２、Ｒｃ、Ｒｂ２、Ｒｂ３、Ｒｄ、Ｒｇ３为指标，优化了大孔吸　附树脂分离三七中原人参萜三醇（ＰＴＳ）和原人参二醇（ＰＤＳ）　皂苷的条件，得出最佳分离树脂型号为ＤＳ－４０１，从ＰＬＥ提　取液（含ＰＴＳ２２．５％、ＰＤＳ１６．４％）中的分离出８８．２％ＰＴＳ和　９２．６％ＰＤＳ。大孔树脂由于其成分低廉，可以再生，在皂苷　类成分的分离中较为常用。　２．２　高速逆流色谱法（ＨＳＣＣＣ）　杜琪珍等【１　１用正己烷一　正丁醇一水（３：４：７）作为分离溶剂系统，从２８３ｍｇ＿￣七皂苷　甲醇提取物中分离得到５７、１７、ｌ３和５６ｍｇ的人参皂苷Ｒｂ、