人热休克蛋白40HSP40科研科研elisa试剂盒说明书
大鼠热休克蛋白70elisa检测试剂盒实验试剂准和操作步骤
大鼠热休克蛋白70elisa检测试剂盒实验试剂准和操作步
骤
大鼠热休克蛋白70(HSP-70)elisa检测试剂盒试剂准备：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。
实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20乘以洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20乘以洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
大鼠热休克蛋白70(HSP-70)elisa检测试剂盒操作步骤：1. 从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃; 2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品50μL； 3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL； 4. 随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD 值。
热休克蛋白与疾病
3、HSF家族
酵母——HSF（为存活所必须） 果蝇——HSF（与存活及生长无关，但为卵 细胞发生及幼虫发育所必须）
鸡
——HSF1~3 ——HSF1～2，HSF4
小鼠——HSF1～2, HSF4
人
脊椎动物HSF家族的主要功能
HSF1——调控HSR，受精卵早期发育、胎盘发育等 HSF2——胚胎发育? HSF3——仅在禽类发现，与HSF1有协同作用 HSF4——(4a, 4b)功能不明，与白内障的发生密切相关
胞浆 胞浆 内质网
～70000 胞浆 胞浆,核 线粒体 内质网
与类固醇激素受体结合,热耐受 与类固醇激素受体结合,热耐受 分泌蛋白质的折叠
蛋白质折叠及移位 蛋白质折叠,细胞保护作用 蛋白质折叠及移位 新生蛋白质折叠 蛋白质的折叠 蛋白质的折叠 胶原合成的质量控制 蛋白质折叠
～60000
～47000 20000～30000 线粒体 胞浆 内质网 胞浆 胞浆 胞浆,核 胞浆 线粒体 胞浆,核
Contents
I. Introduction of HSPs
1. Definition of HSPs 2. Characteristic 3. Classfication and distribution within cell 4. Functions 5. Regulation of expression
二、HSP的特点
1、广泛存在 2、结构保守
3、在细胞正常生命活动中发挥重要作用
4、应激状态下表达增多，发挥细胞保护作用
三、HSP的分类及细胞内分布
主要HSP家族成员 HSP110亚家族 HSP110 HSP105 HSP90亚家族 HSP90α(HSP86) HSP90β(HSP84) Grp94 HSP70亚家族 HSC70(组成型) HSP70(诱导型) HSP75 GRP78(Bip) HSP60亚家族 HSP60 TriC HSP47 HSP40( hdj-1) 小分子HSP亚家族 HSP32(HO-1) HSP27 α B-晶状体蛋白 HSP10 泛素(ubiquitin) 分子量 ～110000 核仁,胞浆 胞浆 ～90000 热耐受,交叉耐受 蛋白质折叠 细胞内定位 可能的生物学功能
人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书
产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒（Human VEGF ELISA KIT）产品货号：H6139S, H6139M, H6139L产品规格：24T, 48T, 96T产品内容：注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。
开封后，保存温度详见说明书。
产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。
人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白，基因定位于第6号染色体长臂，由8个外显子和7个内含子交替构成，约14 kb。
由于mRNA剪接方式不同，产生了单链分别含121，145，165，183，189和206个氨基酸的不同变异体。
VEGF 121分子量约为34-46 kDa，是可溶性分泌型蛋白质，以游离状态存在，不能与肝素结合；VEGF 165分子量为45 kDa，30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质，其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。
VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。
VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。
骨骼肌，心肌，肝细胞，成骨细胞，中性粒细胞，巨噬细胞，角质形成细胞，血小板，褐色脂肪组织，CD34+细胞，星形细胞，神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。
血清和血浆样本均可检测到VEGF，由于血小板可释放VEGF，因此血清中VEGF含量较高。
VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。
人TSA试剂盒-人肿瘤特异性抗原(TSA)分析检测ELISA试剂盒使用说明书
人肿瘤特异性抗原（TSA）分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：含量。
试验原理：TSA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知TSA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将TSA和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中TSA的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
人(Human)组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、12.5、25、50、100、200ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
人钙卫蛋白(Calprotectin)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）钙卫蛋白（Calprotectin）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被钙卫蛋白（Calprotectin）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的钙卫蛋白（Calprotectin）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、50、100、200、400、800ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
高迁移率族蛋白B1HMGB1ELISA试剂盒说明书
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
人促红细胞生成素(EPO)-酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
仅供科研使用，不得用于临床检验。
人促红细胞生成素（EPO ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称：人促红细胞生成素（EPO ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）英文名称：Human Erythropoietin（EPO ）ELISA KIT【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度。
【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。
在预包被抗人促红细胞生成素（EPO ）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人促红细胞生成素（EPO ）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗人促红细胞生成素（EPO ）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度正相关。
拟合校准品曲线，可以计算出样本中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度。
【主要组成成分】主要成分校准品检测范围：47-3000pg/ml。
校准品已经通过测试，结果表明HBs抗原阴性，HIV1、HIV2和HCV抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。
2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
人雌激素(E)elisa试剂盒使用说明书
人雌激素(E)elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）【人雌激素(E) elisa试剂盒elisa试剂盒elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人雌激素(E) elisa试剂盒elisa试剂盒水平。
用纯化的人雌激素(E) elisa试剂盒elisa试剂盒抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入类雌激素(E) elisa试剂盒elisa试剂盒，再与HRP标记的类雌激素(E) elisa试剂盒elisa试剂盒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
人免疫球蛋白G4(IgG4)说明书
人免疫球蛋白G4(IgG4)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G4(IgG4)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G4(IgG4)水平。
用纯化的IgG4抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G4(IgG4)，再与HRP标记的IgG4抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G4呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人免疫球蛋白G4(IgG4)浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
产品名称：人热休克蛋白40(HSP-40)科研科研e1isa试剂盒
检测样本：血清血浆细胞上清液组织匀浆尿液等
标记物：参考说明书
适应物种：人、大鼠、小鼠、兔子、鸡、鱼、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
应用：本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断
检测方法：醐联免疫法
检测限：参考说明书
数量：部分产品现货充足
规格：48T/96T
人热休克蛋白40(HSP-40)科研科研e1isa试剂盒性能：
1、准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2^灵敏度:最低检测浓度小于0.1ng/m1o
3、特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4、重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5、贮藏：2-8C,避光防潮保存。
6、有效期：6个月
人热休克蛋白40(HSP-40)科研科研e1isa试剂盒操作方法：
1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2、设置标准品孔和样木孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50u1；
3、样本孔先加待测样本IOU1,再加样本稀释液40u1；空白孔不加。
4、除空白孔外，标准品孔和样木孔中每孔加入辣根过氧化物酹(HRP)标记的检测抗体100P1,用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min.
5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置Imin,甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50U1,37C避光孵育15min.
7、每孔加入终止液50U1,15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
大鼠活化素A(ACV-A)酶联免疫试剂盒
人热休克蛋白40(HSP-40)科研科研e1isa试剂盒样品收集、处理及保存方法：
1、血清——操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆——EDTA,柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
100OXg离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液--IOOOxg离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆——将组织加入适量生理盐水捣碎。
IOoOXg离心10分钟，取上清液
5、保存----- 如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。
尽可
能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人热休克蛋白40(IISP-40)科研科研e1isa试剂盒注意事项：
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（XnX5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。