广州大学生物工程酶工程作业2
<酶工程>作业3
年级:生工121班学号:1214200010姓名:何玉仪
回答以下问题:
1．试述固定化酶活力发生变化的原因。质量传递效应在其中所起的作用。
原因:①固定化过程中,酶分子空间构象会有所变化;②固定化后,酶分子空间自由度受到限制;③内扩散阻力使底物分子与活性中心接近受阻;④包埋时酶被高分子物质半透膜包围,大分子底物不能透过膜与酶接触.在大多数情况下酶经过固定化后其稳定性都有所提高,表现在热稳定性提高;对各种有机试剂及酶抑制剂的稳定性提高;对不同pH稳定性、蛋白酶稳定性、贮存稳定性和操作稳定性都有影响.作用是:控制着反应速度. 2．试述固定化酶稳定性一般升高的原因。
固定化后酶分子与载体多点连接,可防止酶分子伸展变形;酶活力的释放是缓慢的;当酶与固态载体结合后,失去了分子间相互作用的机会,从而抑制酶的自降解,提高了酶稳定性.
3．什么是纤维素酶？从作用的形式看纤维素酶可以分为哪几类？试举二个例子说明纤维素酶的应用领域。
纤维素酶是将纤维素水解成葡萄糖的一组酶的总称.分类:①内切葡聚糖苷酶,即Cx酶
②外切葡聚糖苷酶,即C1酶③β一葡萄糖苷酶.应用:在酱油的酿造过程中添加纤维
素酶,既可提高酱油浓度,改善酱油质量,又可缩短生产周期,提高产率.
4．固定化酶活力概念，表示方法和测量方法与一般天然酶有何显著差别？
概念：催化某一特定化学反应的能力.表现方法:偶联率,相对活力,活力回收,半衰期.
测量方法:间歇测定和连续测定.差别:固定化酶的活力一般比天然酶小,专一性也有所变化
5．举例分析为什么要进行酶的化学修饰．
适当的化学修饰是提高酶稳定性、解除其抗原性、改变酶学性质的一种重要手段6．试述ＰＥＧ表面化学修饰的优点是什么？
提高酶的抗蛋白水解能力,增加稳定性,延长半衰期;降低免疫原性和抗原性;毒副作用低
7．简述酶的主要功能基团的修饰方法。
氨基:卤代乙酸/磷酸吡哆醛/三硝基苯磺酸.羧基:碳二亚胺类特定修饰酶的羧基;巯基:有机汞试剂;对氯汞苯甲酸;5,5’-二硫-2-硝基苯甲酸;咪唑基:组氨酸咪唑基的修饰;
酚基:四硝基甲烷在温和条件下对硝化酪氨酸酚基的修饰;吲哚基:色氨酸吲哚基的修饰;
胍基:具有二个邻位羰基的化合物的精氨酸残基的修饰;甲硫基:经过氧化氢、过甲酸等可将硫醚氧化成甲硫氨酸桠枫.
8．进行羧基的化学修饰的最普遍方法是什么？写出其基本反应化学通式。从化学反应通式看，如果要改变修饰的效果，可以通过改变哪个基本来实现？常见的蛋白质氨基末端修饰剂包括哪些,写出其常见三种的化学通式。
水溶性的碳二亚胺类特定修饰酶的羧基成为最普遍的标准方法
9．衡量固定化酶及固定化技术优劣的主要指标是什么？
相对酶活力;酶的活力回收率;固定化酶的半衰期
10．固定化酶方法的主要种类及其相互比较的特点是什么？
特性物理吸附法离子结合法包埋法共价结合法交联法
制备易易易难难
结合力中弱强强强
酶活力高高高中中
底物专一性无变化无变化无变化有变化有变化
再生可能可能不可能不可能不可能
固定化费用低低中中高
11．胰蛋白酶在人体胰脏中合成的时候有没有活力?这种刚刚合成时的酶的叫什么?它到了小肠后将发生什么变化才能起到消化食物的作用?这种变化的化学本质是什么？
没有活力;胰蛋白酶原;在十二指肠部位接受肠激酶或胰蛋白酶的激活作用才能起到消化食物的作用;胰蛋白酶原受肠激酶或胰蛋白酶的激活作用从氨基端去掉一个酸性六肽后才具有活性.
12．植酸酶用在饲料中的主要作用是什么？为什么其用在饲料中还同时具有环境保护领域的意义？
主要作用:植酸酶可使植酸磷降解成肌醇和磷酸,从而减少饲料中磷酸氢钙等无机磷的添加量,提高磷的利用率.此外能够提高饲料中矿物质、蛋白质和能量的利用率.原因:由于植酸酶能催化植酸及其盐类的水解,提高牲畜对磷的利用率因而在一定的程度上减少磷资源的浪费、降低磷排放所带来的污染,特别是对鱼类养殖中水环境的污染13．影响蛋白质稳定性的主要因素有哪些?如何理解疏水性与蛋白质稳定性的关系?
1金属离子、底物、辅因子和其他相对低分子质量配体的结合作用;
2蛋白质-蛋白质和蛋白质-脂的作用;
3盐桥和氢键;
4二硫键;
5对氧化修饰敏感的氨基酸含量较低;
6氨基酸残基的坚实装配;
7疏水相互作用.
关系:二者之间没有必然的联系
14．蛋白质稳定性的指标?热稳定性的衡量标准和稳定性的最有效指标是什么?
熔化温度;蛋白质伸展一半时的变性剂浓度/蛋白质自由能;最大稳定性温度;在特定温度下蛋白质功能活性维持时间.其中,熔化温度和蛋白质伸展一半时的变性剂浓度是预测酶稳定性的最有用参数
15．蛋白质失活有哪些可能的原因?
蛋白质水解酶和自溶作用、聚合作用、极端Ph、氧化作用、表面活性剂和去污剂、变性剂、重金属离子和疏基试剂、热、机械力、冷冻和脱水
16．试介绍核酸生物催化剂与蛋白质酶类的相对特点。试举出一到二个你所知道的核酶。
相对特点:核酸生物催化剂缺乏化学多样性;缺乏更多的催化基团;因而催化活力低,催化种类单一;但核酸类生物催化剂也有其明显优点:没有免疫反应;定位准确;容易通过分子技术人工设计和合成.核酶:小分子核酶:HDV;大分子核酶:RNAse P
17．共价固定化与非共价固定化酶的方法有何优劣之处？
共价固定化酶的方法:1)共价结合法:优点:与酶结合牢固,不容易脱落;缺点:反应条件苛刻,操作复杂,容易引起酶失活,酶活回收率低,甚至底物的专一性等也会发生变化.2)交联法:优点:操作简便缺点:反应条件比较激烈,固定化的酶活回收率一般较低.非共价固定酶法:1)结晶法:优点:提供了非常高的酶浓度,从而提高了效率.刚性强,结构稳定.缺点:在不断的重复循环中,酶会有所损耗.2)分散法:优点:提高水不溶溶剂中酶反应速率;缺点:目前还没有完善的酶粉末的保存条件和体系.3)物理吸附法:优点:酶活性中心不易被破坏,酶高级结构变化少,因而酶活力损失很少.缺点:酶与载体相互作用力弱,酶易脱落等
18．在进行酶的化学修饰时如何控制酶修饰反应的专一性？
适当的化学修饰是提高酶稳定性、解除其抗原性、改变酶学性质的一种重要手段19．乳糖酶能够水解什么糖苷键？举例说明乳糖酶的应用领域。
能水解β-D-半乳糖苷键;应用:在乳品工业中,经过乳糖酶水解的牛奶适宜乳糖不耐受症婴儿饮用.另外乳糖酶通过转糖苷作用生成低聚糖,是一种低分子质量、不粘稠的水溶性膳食纤维,有清理肠道的效果
20．葡萄糖氧化酶用于食品保鲜领域的主要技术原理是什么?葡萄糖氧化酶在医疗领域有什么应用，其原理是什么？
保鲜:酶法保鲜的原理是利用酶的催化作用,防止或消除外界因素对食品的不良影响,从而保持食品原有的优良品性.如葡萄糖氧化酶用在鱼类冷藏制品的保鲜方面利用其氧化葡萄糖产生葡萄糖酸,使鱼制品表面pH降低,抑制了细菌的生长.医药应用:血浆中葡萄糖测定.用于生化研究,临床上常用作诊断酶,用于葡萄糖的分析,制备尿糖和血糖试纸,制药工业中用做维生素C及B12制剂的稳定剂等.原理:利用了葡萄糖氧化酶能专一性氧化葡萄糖和去除氧、抗氧化的作用
21．脂肪酶作为水解酶为什么可以应用于生物柴油的生产?其应用的基本原理是什么?
在有机介质中,脂肪酶或酯酶可以催化油脂与小分子醇类进行酯交换反应,制备相应的脂肪酸甲酯或脂肪酸乙酯.由于缔合作用和具有油-水界面的亲和力所以能应用于生物柴油的生产.基本原理:缔合作用导致“盖子”张开,活性部位暴露,使底物与脂肪酶结合能力增强,底物较容易地进入疏水性的通道而与活性部位结合生成酶-底物复合物;能在水油界面上高速率催化水解不溶于水的脂类物质
22．试述离子结合法固定化酶的概念及其优缺点。
是指在适宜的pH和离子强度的条件下,酶的侧链基团通过离子键结合于具有离子交换基的水不溶性载体上的一种固定化方法.离子结合法的操作简单,处理条件吻温和,酶的高级结构和酶活性中心的氨基酸残基不易被破坏,能得到酶活回收率较高的固定化酶.
但是载体和酶的结合能力比较弱,容易受缓冲液种类或pH的影响,在离子强度高的条件下进行反应时,酶会从载体上脱落,而且静电作用限制了酶在发生反应时构象的改变23．从固定化和修饰的角度讨论酶的稳定化策略.
固定化通过空间障碍,机械方式两个因素来达到酶的稳定化;空间障碍即由于空间障碍可以防止蛋白水解酶的作用,阻挡酶与化学失活剂的接触,同时阻碍氧向酶的扩散可以保护对氧不稳定的酶.机械方式使酶发生交联或包埋在载体紧密的孔中可以使酶的构象更加坚牢,从而阻止酶构象从折叠态向伸展态过渡.修饰使酶构象坚固化,修饰可增加、中和或改变酶分子上的带电残基,可溶性大分子的连接抑制与其他溶质的相互作用,从而达到酶
的稳定化
24．酶在非水介质中酶结构及功能变化的关系如何?
酶的结构的改变使酶功能发生相应的改变.①酶分子结构动态变化:酶分子在水溶液中以其紧密的空间结构和一定的柔性发挥催化功能;在含微量水的有机溶剂中,与蛋白质分子形成分子间氢键的水极少,蛋白质分子内氢键起主导作用.导致:酶的活力发生改变
②由于有机溶剂中缺少使酶失活的水分子,由水引起天冬氨酸肽键水解,二硫键破坏,蛋
白质热失活过程全都难以进行.导致:有机溶剂中酶的热稳定性和储存性都比水溶液中高.③酶在有机溶剂中对底物的化学结构和立体结构均有严格的选择性;酶与底物的结合受溶剂的影响,底物专一性在有机溶剂中将发生改变;在非水介质中疏水作用已不重要.主要决定于自由能的变化.导致:对生产有利的改变,如底物特异性提高
25．酶在有机介质中具有更高稳定性的原因是什么?
有机溶剂中酶的热稳定性和储存性都比水溶液中高.主要原因在于脱水状态下酶构象的刚性增强,也没有水溶液中普遍存在的导致酶不可逆失活的共价反应.同时,有机溶剂中也缺少使酶失活的水分子以及水溶液中发生的蛋白酶解过程
26．试总结分析酶在有机溶剂中表现催化作用中水的关键作用.
与酶结合的水量是影响酶活力稳定性以及专一性的决定因素;水对于酶催化活性构象的获得是必须的,但水也与许多酶的失活过程有关;在有机溶剂中,含水量的微小差别会导致酶催化活性的较大改变;当酶周围的水化层受到破坏时,酶基本上是没有活力的,随着水化程度的增加,酶活力将得到恢复;酶需要水维持其活性三维结构,水影响蛋白质结构的完整性、活性位点的极性和稳定性,酶周围水的存在,能降低酶分子的极性氨基酸的相互作用,防止产生不正确的构象;含水量太高时,酶结构的柔性过大,酶的构象将向疏水环境热力学稳定状态变化,引起酶结构的改变和失活
27．试述非水介质中酶的催化作用与溶剂的关系?
有机溶剂通过对水、酶、底物和产物相互作用的影响来影响酶的性质.1)对酶结合水的影响:①ε越大,lgP越小,对酶结合水的争夺能力越强,酶越容易失水;②增加酶表面的亲水性可以抑制酶在有机溶剂中的脱水作用.2)对酶的本身的影响:①动态影响:溶剂介电常数明显影响酶分子活动中心区域的活动性,但酶活性中心的活动性与酶活性并没有必然的联系;②酶结构:虽然酶整体结构和活性中心结构保持完整,但酶分子表面结构和动态结构却发生了变化,一些侧链也发生了显著的重排;④活性中心:主要是通过减少整个活性中心的数量,活性中心丧失的数量取决于有机溶剂的极性,非极性溶剂的影响更明显;
⑤活性与溶剂属性:酶活性与溶剂属性之间可能存在某种定量关系,研究最多的是活力
与极性参数lgP的关系.3)溶剂对酶底物和产物的影响:使底物和产物溶剂化从而影响酶的活性
28．试述酶在非水介质中主要酶学性质的变化。
1)有机溶剂中酶的热稳定性和储存性都比水溶液中高.2)底物特异性变化及其原因:①
酶在有机溶剂中对底物的化学结构和立体结构均有严格的选择性;酶与底物的结合受溶剂的影响,底物专一性在有机溶剂中将发生改变.②在水中酶和底物主要靠疏水作用,而在非水介质中疏水作用已不重要.主要决定于自由能的变化.3)对映体选择性:一般情况下,酶的立体选择性随介质疏水性的增加而降低.4)位置选择性:有机溶剂中的酶催化具有位置选择性,即酶能够选择性地催化底物中某个区域的基团发生反应.5)化学键选择性:非水介质中酶的催化反应具有一定的化学键选择性,即在某种有机溶剂中酶对某种化学基团或化学键的反应性特别强,这种选择性与传统的水介质中的情况可能完全相反
酶工程 试题及答案
共三套 《酶工程》试题一： 一、是非题（每题1分，共10分） 1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。（） 2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。（） 3、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。（） 4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。（） 5、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。（） 6、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。（） 7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。（） 8、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。（） 9、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。（） 10、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。（） 二、填空题（每空1分，共28分） 1、日本称为“酵素”的东西，中文称为__________,英文则为__________,是库尼（Kuhne）于1878年首先使用的。其实它存在于生物体的__________与__________。 2、1926年，萨姆纳（Sumner）首先制得__________酶结晶，并指出__________是蛋白质。他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。
3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为__________,高产液化酶优良菌株菌号为___________。在微生物分类上，前者属于__________菌，后者属于__________菌。 4、1960年，查柯柏（Jacob）和莫洛德（Monod）提出了操纵子学说，认为DNA分子中，与酶生物合成有关的基因有四种，即操纵基因、调节基因、__________基因和__________基因。 5、1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（25oC，PH及底物浓度为最适宜）__________,催化__________的底物转化为产物的__________为一个国际单位，即1IU。 6、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的__________、减少__________，增加__________。 7、酶的生产方法有___________，___________和____________。 8、借助__________使__________发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 9、酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有__________法，__________法和__________法三种。 10、由于各种分子形成结晶条件的不同，也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶，因此酶结晶既是__________，也是__________。 三、名词术语的解释与区别（每组6分，共30分） 1、酶生物合成中的转录与翻译 2、诱导与阻遏 3、酶回收率与酶纯化比（纯度提高比） 4、酶的变性与酶的失活
广州大学生物工程设备试题(选择题).doc
选择题 1、机械搅拌通风发酵罐扱常用的搅拌叶轮型式是：B A.平奖叶式 B.圆盘涡轮式 C.螺旋浆式 D.刮板式 2、发酵罐的公称体积是指：C A.上下封头体积和罐筒身（圆柱）体积之和。 B.上封头体积和罐筒身（圆柱）体积之和。 C.下封头体积和罐筒身（圆柱）体积之和。 D.罐筒身（圆柱）体积。 3、机械搅拌发酵罐中最下面一档搅拌器离罐底距离一般C A.小于一个搅拌器直径的高度 B.大于一个小于两个搅拌器直径的高度 C.等于一个搅拌器直径的高度 D.等于两个 4、下列因素均可提高氧的传质速率，但与提高&.&无关的是：C A.提高通风量 B.提高搅拌转速 C.提高罐压 D.捉高高径比 5、通用式机械搅拌发酵罐中挡板的作用是A A.改变液流方叫，巾轴叫流改变为径向流 B.增加发酵罐罐壁的机械强度 C.改变液流方向，由径向流改变为轴向流 D.在没备维修时供维修人员攀登，起安全防护作用 6、在相同转速和桨叶直径等情况下比较，输出功率最大的搅拌器的叶型是B A.螺旋奖叶 B.涡轮平叶 C.涡轮弯叶 1）.涡轮箭叶 7、对于相同材料、尺寸和体积的发酵罐来说，其罐壁的厚度设计应该是：C
A.受内压的厚度大于受外压的厚度 B.受内压的厚度等于受外压的厚度 C.受内压的厚度小于受外压的厚度 I）.与受内压和外压无关 8、对于气升环流式反应器：C A.导流筒区的混合较还隙区好和溶氧较还隙区差 B.导流筒区的混合较还隙区差和溶氧较还隙区好 C.导流筒区的混合和溶氧均较还隙区好 D.导流筒区的混合和溶氧均较还隙区差 9、在设计啤酒发酵罐时，当发酵罐的工作压力为2kg/cm2时，则设计压力为B A. 2 kg/cm2 B. 2. 2 kg/cm2 C. 2. 5 kg/cm2 D. 3 kg/cm2 10、同样容积的啤酒发酵罐造价最便宜的是B A.锥形罐 B.联合罐 C?朝日罐 D.塔式罐 11、在塔式啤酒连续发酵中，酵母生长主要在八 A.底部稳定区域 B.小稳定区 C.搅动区 I).静止区 12、圆筒锥底啤洒发酵罐中发酵液的对流主要依靠：D A.搅拌 B.空气 C.温度变化 D.CO， 13、与啤酒发酵醪进行热交换时，圆筒锥底啤酒发酵罐的夹套内不宜采用的冷媒是：C A.乙二醇 B.乙醇 C.冷冻水 D.M
《酶工程》期末复习题整理#(精选.)
第一章 1.酶工程：是生物工程的重要组成部分，是随着酶学研究迅速发展，特别是酶的推广应用，使酶学和工程学相互渗透、结合、发展而成的一门新的技术科学，是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学技术。 2.化学酶工程：指自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用 3.生物酶工程：是酶学和以基因重组技术为主的现代分子生物学技术结合的产物，亦称高级酶工程。 4.酶工程的组成部分？ 答：酶工程主要指自然酶和工程酶（经化学修饰、基因工程、蛋白质工程改造的酶）在国民经济各个领域中的应用。内容包括：酶的产生；酶的分离纯化；酶的改造；生物反应器。5.酶的结构特点？ 答：虽然少数有催化活性的RNA分子已经鉴定，但几乎所有的酶都是蛋白质，因而酶必然具有蛋白质四级结构形式。其中一级结构是指具有一定氨基酸顺序的多肽链的共价骨架；二级结构为在一级结构中相近的氨基酸残基间由氢键的相互作用而形成的带有螺旋、折叠、转角、卷曲等细微结构；三级结构系在二级结构基础上进一步进行分子盘区以形成包括主侧链的专一性三维排列；四级结构是指低聚蛋白中各折叠多肽链在空间的专一性三维排列。具有低聚蛋白结构的酶（寡聚酶）必须具有正确的四级结构才有活性。具有活性的酶都是球蛋白，即被广泛折叠、结构紧密的多肽链，其氨基酸亲水基团在外表，而疏水基团向内。 6.酶活性中心：是酶结合底物和将底物转化为产物的区域，通常是整个酶分子中相当小的一部分，它是由在线性多肽链中可能相隔很远的氨基酸残基形成的三维实体。 7.酶作用机制有哪几种学说？ 答：锁和钥匙模型、诱导契合模型 8.酶催化活力的影响因素？ 答：底物浓度、酶浓度、温度、pH等。 9.酶的分离纯化的初步分离纯化的步骤？ 答：（一）材料的选择和细胞抽提液的制备 1.材料的选择：目的蛋白含量要高，而且容易获得 2.细胞破碎方法及细胞抽提液的制备。为了确保可溶性细胞成分全部抽提出来，应当使用类似于生理条件下的缓冲液。动物组织和器官要尽可能除去结缔组织和脂肪、切碎后放人捣碎机中。完全破碎酵母和细菌细胞。 3.膜蛋白的释放:膜蛋白存在于细胞膜或有关细胞器的膜上。按其所在位置大体可分为外周 蛋白和固有蛋白两种类型 4.胞外酶的分离:胞外酶是在微生物发酵时分泌到发酵液中的。发酵后可通过离心或过滤将菌体从发酵液中分离弃去，所得发酵清液通常要适当浓缩，然后再作进一步纯化。目前常用的浓缩方法是超滤法。 （二）蛋白质的浓缩和脱盐 浓缩方法主要有：沉淀法、吸附法、干胶吸附法、渗透浓缩法、超滤浓缩法
哈工大酶工程试题答案
年级2001 专业生物技术 一名词解释（每题3分，共计30分） 1.酶工程 2.自杀性底物 3.别构酶 4.诱导酶 5.Mol催化活性 6.离子交换层析 7.固定化酶 8.修饰酶 9.非水酶学 10.模拟酶 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是，二是 。 2.求Km最常用的方法是。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是，另一类是 。 4.可逆抑制作用可分为，，， 。 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是，二是能够利用廉价原料，发酵周期，产酶量，三是菌种不易，四是最好选用能产生酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用反应法和反应法。 7.酶制剂有四种类型即酶制剂，酶制剂，酶制剂和 酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 9.酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 10.模拟酶的两种类型是酶和酶。 11.抗体酶的制备方法有法和法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料 4.下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。
10-6 10-6 10-5 10-5 10-5 10-4 10-4 10-2 酶工程试题（B） 一名词解释 1.抗体酶 2.酶反应器 3.模拟酶 4.产物抑制 5.稳定pH 6.产酶动力学 7.凝胶过滤 8.固定化酶 9.非水酶学 10.液体发酵法 二填空题(每空1分,共计30分) 值增加，其抑制剂属于抑制剂，Km不变，其抑制剂属于抑制剂，Km 减小，其抑制剂属于抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有培养法和培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括，，，， 和等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有，，。 5.酶生物合成的模式分是，，， 。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有法，法和 法 7. 通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 8. 酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的，从而降低了底物分子的，而抗体结合的抗原只是一个态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化 倍数。
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广告学文科本科583 591 网络与新媒体文科本科585 593 历史学文科本科579 585 地理科学文科本科582 587 自然地理与资源环境文科本科578 582 人文地理与城乡规划文科本科579 587 地理信息科学文科本科577 579 心理学文科本科576 578 应用心理学文科本科579 586 工程管理文科本科581 588 房地产开发与管理文科本科577 580 工商管理文科本科582 592 市场营销文科本科579 586 会计学文科本科587 593 人力资源管理文科本科582 590 公共事业管理文科本科579 594 行政管理文科本科577 580 物流管理文科本科579 594 电子商务文科本科580 589 旅游管理类文科本科580 588 旅游管理文科本科578 586 会展经济与管理文科本科579 584 经济学理科本科598 607 金融学理科本科607 611 金融工程理科本科601 605 国际经济与贸易理科本科600 606 法学理科本科593 606 社会工作理科本科587 594
酶工程复习题
酶工程复习题 一、选择题： 1.下面关于酶的描述，哪一项不正确( ) （A）（答案）所有的蛋白质都是酶 （B）酶是在细胞内合成的，但也可以在细胞外发挥催化功能 （C）酶具有专一性 （D）酶是生物催化剂 2.下列哪一项不是辅酶的功能( ) （A）转移基团 （B）传递氢 （C）传递电子 （D）（答案）决定酶的专一性 3.下列对酶活力的测定的描述哪项是错误的( ) （A）酶的反应速度可通过测定产物的生成量或测定底物的减少量来完成 （B）需在最适pH条件下进行 （C）（答案）按国际酶学会统一标准温度都采用25℃ （D）要求[S]远远小于[E] 4.下列关于酶活性部位的描述，哪一项是错误的 （A）活性部位是酶分子中直接与底物结合，并发挥催化功能的部位 （B）活性部位的基因按功能可分为两大类：一类是结合基团，一类是催化基团（C）酶活性部位的集团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的集团（D）（答案）不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位 5.酶的高效率在于 （A）增加活化能 （B）降低反应物的能量水平 （C）增加反应物的能量水平 （D）（答案）降低活化能
6.作为催化剂的酶分子，具有下列哪一种能量效应 （A）增高反应活化能 （B）（答案）降低反应活化能 （C）增高产物能量水平 （D）降低产物能量水平 二、填空题 1.酶和菌体固定化的方法很多。主要可分为吸附法、结合法、交联法和热处理法 2.系统命名法根据酶所催化的反应类型，将酶分为6大类。即1、氧化还原酶；2、转移酶； 3、水解酶； 4、裂合酶； 5、异构酶； 6、合成酶（或称连接酶）。 3.酶分子修饰中，经过修饰的酶的特性会改变，即可提高酶活力，增加稳定性或降低抗原性。 4.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 5.酶的特点酶是生物催化剂；其反应条件温和、催化效率高；酶具有高的作用专一性；其化学本质具有蛋白质性质。 6.常用产酶菌有细菌（大肠杆菌）；霉菌（黑曲酶；青酶；木酶；根酶）；放线菌（链酶菌）；酵母等。 7.通常酶的固定化方法有吸附法共价键结合法交联法包埋法 8.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 9. 酶的生产方法有提取法，发酵法和化学合成法。 10. 借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 11. 酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有凝胶过滤法，超滤法和超离心法三种。 12.酶的特点酶是生物催化剂；其反应条件温和、催化效率高；酶具有高的作用专一性；其化学本质具有蛋白质性质。 13.在酶的发酵生产中，培养基要从营养的角度考虑碳源、氮源、无机盐、生长因素的调
《工程制图》在线作业二
北交《工程制图》在线作业二 一、单选题（共15 道试题，共30 分。） 1. 点的侧面投影反映（）坐标。 A. x、y B. y、z C. x、z D. Y、z 正确答案： 2. 1:2是（）比例。 A. 放大 B. 缩小 C. 优先选用 D. 尽量不用 正确答案： 3. 空间直线与投影面的相对位置关系有（）种。 A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 正确答案： 4. （）基本体的特征是每个表面都是平面。 A. 圆锥 B. 圆柱 C. 平面 D. 多边形 正确答案： 5. 图样中汉字应写成（）体，采用国家正式公布的简化字。 A. 宋体 B. 长仿宋 C. 隶书 D. 楷体 正确答案： 6. 画正等轴测图的步骤是，先在投影图中画出物体的（）。 A. 直角坐标系 B. 坐标点 C. 轴测轴
D. 大致外形 正确答案： 7. 获得投影的要素有投射线、（）、投影面。 A. 光源 B. 物体 C. 投射中心 D. 画面 正确答案： 8. 平行投影中的投射线与投影面垂直时，称为（）。 A. 垂直投影法 B. 正投影法 C. 斜投影法 D. 中心投影法 正确答案： 9. （）一个投影面同时倾斜于另外两个投影面的平面称为投影面垂直面。 A. 平行于 B. 垂直于 C. 倾斜于 D. 相交于 正确答案： 10. 工程上常用的（）有中心投影法和平行投影法。 A. 作图法 B. 技术法 C. 投影法 D. 图解法 正确答案： 11. （）一个投影面直线称为投影面垂直线。 A. 平行于 B. 垂直于 C. 倾斜于 D. 相交于 正确答案： 12. （）分为正投影法和斜投影法两种。 A. 平行投影法 B. 中心投影法 C. 投影面法 D. 辅助投影法 正确答案： 13. 3个轴测轴的轴向变形系数都相等的正轴测图称为（）轴测图。 A. 正二等 B. 正三等 C. 斜二等 D. 正等 正确答案：
广州大学生物工程设备试题(问答题)
问答题 1、画出机械搅拌式生物反应器的结构简图,标出各部件的名称,并分别阐述其作用。 a)主要部件：1.罐体，盛发酵液，发酵场所；2.搅拌器：混合液体和传质；3.挡板： 防治液面中央形成漩涡流动，增强其湍动和溶氧传质；4.轴封：防止染菌和泄露； 5.空气分布器：分布空气； 6.消泡装置：防止发酵液随气泡外溢 7.夹套：冷却 图见p23 2、根据气液传质理论，提出机械搅拌通风发酵罐增加氧传递速率的措施。★ 答：由OTR=K l a(C＊-C)可知增大K l a或增大(C＊-C)来增加氧传递速率 增大(C＊-C)的方法：1.提高罐压2.富集氧气 由K l a=K(Pg/V L)^0.4Vs n^0.5可知增大K l a的方法：1.提高转速或增大搅拌叶轮直径，从而提高搅拌功率Pg；2.提高通气量；3.提高发酵罐的高径比，对提高溶氧速率和降低单位溶解氧功耗均有利，所以在设计时，应尽可能选择较大的高径比。 3、气升式发酵罐的工作原理。 工作原理：把无菌空气通过喷嘴或喷孔射进发酵液中，通过气液混合物的湍流作用而使空气泡分割细碎，同时由于形成的气液混合物密度降低，故向上运动，而含气率小的发酵液则下沉，形成循环流动，实现混合与溶氧传质 4、机械搅拌自吸式的工作原理。 工作原理：自吸式机械搅拌发酵罐的主要构件是吸气搅拌叶轮及导轮，简称转子及定子，当转子转动时，其框内液体被甩出而形成真空而吸入空气。通过导向叶轮而使气液均匀分布甩出，并使空气在循环的发酵液中分裂成细微的气泡，在湍流状态下混合、湍动和扩散 5、判断下图为何种生物反应器并标明图中6的名称，以及请简述该生物反应器工作原理。
文氏管自吸式发酵罐见p48 1-排管2-罐体3-换热夹套4-循环泵5-压力表6-文氏管 工作原理：用泵使发酵液通过文氏管吸气装置，由于液体在文氏管的收缩段中流速增加，形成真空而将空气吸入，并使气泡分散，与液体均匀混合，实现溶氧传质 6、下图为一啤酒发酵生产系统，请指出图中1、3、5各为何设备，并简述该生产工艺的特点。 1-薄板换热器3-酵母离心机5-朝日罐 特点：1.三种设备互相组合，解决了前、后发酵温度控制和酵母浓度的控制问题，加速了啤酒的成熟。 2.使用酵母离心机分离发酵液的酵母，可以解决酵母沉淀慢的缺点 3.利用凝聚性弱的酵母进行发酵，增加酵母与发酵液接触时间，促进发酵液中乙醛和双乙酰的还原，减少其含量。
酶工程考试复习题及答案定稿版
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酶工程考试复习题及答案 一、名词解释题 1.酶活力: 是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可用在一定条件下，酶催化 某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高，反之活力愈低。2.酶的专一性:是指一种酶只能对一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化 作用的性质，一般又可分为绝对专一性和相对专一性。 3.酶的转换数:是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数，即是每摩尔酶每分钟催化 底物转变为产物的摩尔数，是酶的一个指标。 4.酶的发酵生产:是指通过对某些特定微生物进行发酵培养后，利用微生物生长发酵过程 中特定的代谢反应生成生产所需要的酶，最后通过提取纯化过程得到酶制剂的过程称为酶的发酵生产。 5.酶的反馈阻遏: 6.细胞破碎:是指利用机械、物理、化学、酶解等方法，使目标细胞的细胞膜或细胞壁得 以破坏，细胞中的目标产物得以选择性或全部释放便于后续收集和分离的过程称为细胞破碎。 7.酶的提取: 是指在一定的条件下，用适当的溶剂处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂 中的过程，也称作酶的抽提，是酶分离纯化过程常用的手段之一。 8.沉淀分离:是通过改变某些条件，使溶液中某种溶质的溶解度降低，从溶液中沉淀析 出，而与其他溶质分离的方法，常用语酶的初步提取与分离。
9.层析分离: 亦称色谱分离，是一种利用混合物中各组分的物理化学性质的差别，使各 组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相为固定的(称为固定相)，另一个相则流过此固定相(称为流动相)并使各组分由于与固定相和流动相作用力的不同以不同速度移动，从而达到分离的物理分离方法。 10.凝胶层析: 又称为凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等。是指以各种多孔凝胶为 固定相，在流动相冲洗过程中混合物中所含各种组分的相对分子质量和分子大小不同，在固定相凝胶微孔中移动的距离不同，从而依次从层析柱中分离出来，达到物质分离的一种层析技术。 11.亲和层析: 是利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力，将混合物装 入层析柱中利用流动相的冲洗作用和目标分子与固定相配基亲和作用力不同而使生物分子分离纯化的技术。 12.离心分离: 借助于离心机旋转所产生的离心力，使不同大小、不同密度的物质分离的 技术过程。 13.电泳:带电粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的过程称为电泳。利 用不同的物质其带电性质及其颗粒大小和形状不同，在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，故此可使它们分离，电泳技术是常用的分离技术之一。 14.萃取:是利用物质在两相中的溶解度不同而使其分离的技术。 15.双水相萃取:双水相是指某些高聚物之间或者高聚物与无机盐之间在水中以一定的浓度 混合而形各种不相溶的两水溶液相。由于溶质在这两相的分配系数的差异进行萃取的方法称为双水相萃取。
酶工程复习题及答案(1)
《酶工程》复习 一、名词解释…………………………………………… 1 酶工程：又称酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术，包括化学酶工程和生物酶工程。 2酶的诱导：由于加进某种物质，使酶的生物合成开始或者加速进行，称为酶的生物合成的诱导作用。 3 微滤：以压力差为推动力，截留水中粒径在0.02~ 10m之间的颗粒物的膜分离技术。 4固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶固定在载体上，能使酶发挥催化作用的酶。 5酶的非水相催化：通过改变反应介质，影响酶的表面结构和活性中心，从而改变酶的催化特性。 6 原生质体：脱去细胞壁的植物、真菌或细菌细胞。 7超滤：超滤是采用中空纤维过滤新技术，配合三级预处理过滤清除自来水中杂质；超滤微孔小于0.01微米，能彻底滤除水中的细菌、铁锈、胶体等有害物质，保留水中原有的微量元素和矿物质。 8 固体发酵：固态发酵是指没有或几乎没有自由水存在下，在有一定湿度的水下溶性固态基质中，用一种或多种微生物的一个生物反应过程。 二、填空题………………………………………………. 1酶的分类（氧化还原酶）、（转移酶）、（水解酶）、（裂合酶）、（异构酶）、（合成酶）。 2酶活力是（酶催化速度）的量度指标，酶的比活力是（酶纯度）的量度指标，酶转换数是（酶催化效率）的量度指标。 3微生物产酶模式可以分为同步合成型，（延续合成型），中期合成型，（滞后合成型）四种。 4动物细胞培养主要用于生产疫苗、激素、单克隆抗体、多肽因子、酶等（功能性蛋白质）。 5细胞破碎的主要方法有机械破碎法、物理破碎法、（化学破碎法）、（酶促破碎法）。 6有机溶剂的极性系数lgP越小，表明其极性（越强），对酶活性的影响（越大）。 7通常酶的固定化方法有：吸附法、包埋法、结合法、交联法、热处理法。
酶工程思考题(附答案)
酶工程思考题汇总 第一章P25 1．何谓酶工程?试述其主要内容和任务. 酶的生产，改性与应用的技术过程称为酶工程。 主要内容：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等。 主要任务：经过预先设计，通过人工操作获得人们所需的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。 2．酶有哪些显著的催化特性？ 专一性强（绝对专一性——钥匙学说、相对专一性——诱导契合学说）、催化效率高、作用条件温和 3．简述影响酶催化作用的主要因素. 底物浓度、酶浓度、温度、pH、激活剂浓度、抑制剂浓度等诸多因素 第二章P63 5．酶的生物合成有哪几种模式？ 生长偶联型（同步合成型、中期合成型）、 部分生长偶联型（延续合成型） 非生长偶联型（滞后合成型） 7．提高酶产量的措施主要有哪些？ a.添加诱导物（酶的作用底物、酶的催化反应物、作用底物的类似物） b.控制阻遏物的浓度 c.添加表面活性剂 d.添加产酶促进剂 11．固定化微生物原生质体发酵产酶有何特点？ 1.提高产酶率 2.可以反复使用或连续使用较长时间 3.基因工程菌的质粒稳定，不易丢失 4.发酵稳定性好 5.缩短发酵周期，提高设备利用率 6.产品容易分离纯化 7.适用于胞外酶等细胞产物的生产 第三章P84 3．植物细胞培养产酶有何特点？ 1.提高产率 2.缩短周期 3.易于管理，减轻劳动强度 4.提高产品质量 5.其他 4．简述植物细胞培养产酶的工艺过程。 外植体细胞的获取细胞培养分离纯化产物 6．动物细胞培养过程中要注意控制哪些工艺条件？ 1.培养基的组成成分 2.培养基的配制 3.温度的控制 4.ph的控制 5.渗透压的控制 6.溶解氧的控制
[广州大学优势与劣势]广州大学优势学科 广州大学特色专业.doc
广州大学，简称“广大”，是广东省和广州市重点建设的综合性大学，教育部、财政部“国培计划”9所实施高校之一，全国首批12所“CDIO工程教育模式改革研究与实践”试点高校，也是“卓越法律人才教育培养计划”、“卓越工程师教育培养计划”、“国家级大学生创新创业训练计划”重点建设高校。学校已发展成为一所拥有哲学、经济学、法学、教育学、文学、历史学、理学、工学、管理学、艺术学等十大学科门类，在国内外具有一定知名度的综合性研究教学型大学。下面是小学作文网整理的广州培正大学学费，供大家参考! 广州大学优势学科广州大学特色专业 1、土木工程推荐指数: 7(222人推荐) 2、建筑学推荐指数: 6(96人推荐) 3、播音与主持艺术推荐指数: 5(77人推荐) 4、数学与应用数学推荐指数: 4(67人推荐) 5、工程管理推荐指数: 5(65人推荐)
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17、信息与计算科学推荐指数: 5(20人推荐) 18、体育教育推荐指数: 8(20人推荐) 19、旅游管理推荐指数: 6(19人推荐) 20、人力资源管理推荐指数: 4(19人推荐) 2016广州大学专业排名及分数线【理科】 专业名称 年份 平均分 考生类别 录取批次 建筑学
酶工程习题及答案
酶工程试题(A) 一名词解释（每题3分，共计30分） 1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。 2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。 3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶 4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶 5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目 6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。 7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶 8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶 9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学 10模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制。 4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性； 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。 7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有吸附法，包埋法，交联法， 共价键结合法。 9.酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 10.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。 11.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？ 解：优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺 （2）可以在较长的时间内连续使用（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化（4）提高了酶的稳定性 （5）较能适于多酶反应 （6）酶的使用效率高产率高成本低 缺点 （1）固定化时酶的活力有损失 （2）比较适应于水溶性底物 （3）与完整的细胞相比，不适于多酶反应。 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 解：.方法:透析与超虑离心分离凝胶过滤盐析等电点沉淀共沉淀吸附层析电泳亲和层析热变性酸碱变性表面变性等（原理略） 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？ 解：（1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样 （2）微生物生长繁殖快，酶易提取，特别是胞外酶 （3）来源广泛，价格便宜 （4）微生物易得，生长周期短 （5）可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高 （6）可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种 4 下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数 [S](mol/L) V0(umol/min) 0.5?10-628 4.0?10-640 1.0?10-570 2.0?10-595 4.0?10-5112 1.0?10-4128 2.0?10-4139 1.0?10-2140 解：最大反应速度140 ，Km: 1.0?10-5 酶工程试题（B） 一名词解释 1抗体酶：是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶 2酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。 3模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 4底物抑制：在酶促反应中，高底物浓度使反应速度降低的现象。 5稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH 6产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。 7凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。 8固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶 9非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学 10液体发酵法：以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法，根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。 二填空题(每空1分,共计30分) 1.Km值增加，其抑制剂属于竞争性抑制剂，Km不变，其抑制剂属于非竞争性抑制剂，Km减小，其抑制剂属于反竞争性抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有固体培养法和液体培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括温度，PH ，氧气，搅拌，湿度和泡沫等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有控制条件，遗传控制，其它方法。 5.酶生物合成的模式分是同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法，酸碱变性法和表面变性法 7. 通常酶的固定化方法有交联法、包埋法，吸附法、共价结合法 8. 酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的过滤态，从而降低了底物分子的能障，而抗体结合的抗原只是一个基态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求？ 一般必须符合下列条件： a)不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关 b)能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高 c)菌种不易变异退化，不易感染噬菌体 d)最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高 在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？ 解：（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性 （2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰剂的比例等 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 解：（1）酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基 （2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基 （3）半胱氨酸的巯基1分 （7）丝氨酸骆氨酸苏氨酸上的羟基 （8）苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环 （9）组氨酸上的咪唑基 色氨酸上的吲哚基 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化倍数。 体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml） 初提取液120 200 2.5 硫酸铵沉淀 5 810 1.5 解：（1）起始总活力：200?120＝24000（单位） （2）起始比活力：200÷2.5＝80（单位/毫克蛋白氮） （3）纯化后总活力810?5＝4050（单位）2 （4）纯化后比活力810÷1.5＝540（单位/毫克蛋白氮） （5）产率（百分产量）：4050÷24000＝17％ （6）纯化倍数：540÷80=6.75
酶工程考试重点(第三版)
1、酶工程的定义，研究的主要内容 酶的生产、改性与应用的技术过程称为酶工程 研究的主要内容包括：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等 酶工程的主要任务是经过预先设计，通过人工操作获得人们所需的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。 2、酶的基本特征，酶命名的方法有哪些，蛋白类酶的分类方法 基本特征：专一性强，催化效率高，作用条件温和等 每一种具体的酶都有其具体的推荐名和系统命名。推荐名是在惯用名称的基础上，加以选择和修改而成的。酶的推荐名由两部分组成，第一部分为底物名称，第二部分为催化反应的类型，后面加一个酶字，不管酶的催化是正反应还是逆反应，都用同一个名，如葡萄糖氧化酶，表明该酶的作用底物是葡萄糖催化反应类型是氧化反应。 酶的系统命名更加详细更准确地反映出该酶所催化的反应。系统命名包括了酶的作用底物酶作用的基团及催化反应的类型，如上述葡萄糖氧化酶的系统命名“β－D－葡萄糖：氧1-氧化还原酶”，表明该酶所催化的反应以β－D－葡萄糖为脱氢的供体，氧为氢受体，催化作用在第一个碳原子基团上进行，所催化反应属于氧化还原反应。 蛋白酶类的分类 1、按照酶催化作用的类型，将蛋白酶类分为六大类，氧化还原酶，转移酶，水 解酶裂合酶，异构酶，合成酶 2、每个大类中，按照酶作用的底物、化学键或者基团的不同，分为若干亚类 3、每一亚类再分为若干小类 4、每一小类包含若干个具体的酶、 3、酶的生产方法有哪些 酶的生产是指通过人工操作而获得所需的酶的技术过程 酶的生产方法分为提取分离法、生物合成法、化学合成法3种，其中提取分离法是最早采用并沿用至今的方法，生物合成法是20世纪50年代以来酶生产的主要方法，而化学合成法至今仍停留在实验室阶段 4、酶的生产合成调节理论，包括操纵子，诱导作用，阻遏作用 1、操纵子在原核基因组中,由几个功能相关的结构基因及其调控区组成的一个基因表达的协同单位. ①结构基因是决定某一多肽的DNA 模板，可根据其上的碱基顺序转录出相应的mRNA，然后再可通过核糖体转译出相应的酶 ②启动子：能被依赖于DNA的RNA聚合酶所识别的碱基顺序，是RNA聚合酶的结合部位和转录起点 ③操纵基因：位于启动基因和结构基因之间的一段碱基顺序，是阻遏蛋白的结合位点，能通过与阻遏物相结合来决定结构基因的转录是否能进行 ④调节基因：用于编码组成型调节蛋白的基因，一般远离操纵子,但在原核生物中,可以位于操纵子旁边,编码调节蛋白。 2、酶合成调节的类型：诱导和阻遏
酶工程作业题及答案
?为什么滞后合成型的酶要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期以后才开始合成？ 滞后合成型的酶之所以要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期以后才开始合成，主要原因是由于受到培养基中存在的阻遏物的阻遏作用。只有随着细胞的生长，阻遏物几乎被细胞用完而使阻遏解除后，酶才开始大量合成。若培养基中不存在阻遏物，该酶的合成可以转为延续合成型。该类型酶所对应的mRNA稳定性很好，可以在细胞生长进入平衡期后的相当长的一段时间内，继续进行酶的生物合成。 ?酶的发酵生产过程中，要使酶的产率提高，可以采取哪些措施？ 使用优良的产酶细胞；使用优良的发酵生产设备；采用先进的分离纯化技术和设备；控制好工艺条件；采取某些行之有效的措施。添加诱导物对于诱导酶的发酵生产，在发酵过程中的某个适宜的时机，添加适宜的诱导物，可以显著提高酶的产量。例如，乳糖诱导β-半乳糖苷酶，纤维二糖诱导纤维素酶，蔗糖甘油单棕榈酸诱导蔗糖酶的生物合成等。诱导物一般可以分为3类:酶的作用底物,作用底物的类似物 ,酶的催化反应产物.控制阻遏物的浓度阻遏作用根据机理不同，可分为：产物阻遏和分解代谢物阻遏两种。1.产物阻遏作用是由酶催化作用的产物或者代谢途径的末端产物引起的阻遏作用。为了减少或者解除分解代谢物阻遏作用，应当控制培养基中葡萄糖等容易利用的碳源的浓度。 2.分解代谢物阻遏作用是由分解代谢物（葡萄糖等和其它容易利用的碳源等物质经过分解代谢而产生的物质）引起的阻遏作用。较采用其他难利用的碳源，如淀粉等采用补料、分次流加碳源添加一定量的环腺苷酸（cAMP） 对于受代谢途径末端产物阻遏的酶，可以通过控制末端产物的浓度的方法使阻遏解除。 添加表面活性剂表面活性剂可以与细胞膜相互作用，增加细胞的透过性，有利于胞外酶的分泌，从而提高酶的产量。将适量的非离子型表面活性剂，如吐温（Tween）、特里顿(Triton)等添加到培养基中，可以加速胞外酶的分泌，而使酶的产量增加。由于离子型表面活性剂对细胞有毒害作用，尤其是季胺型表面活性剂（如‘新洁而灭’等）是消毒剂，对细胞的毒性较大，不能在酶的发酵生产中添加到培养基中。 添加产酶促进剂产酶促进剂是指可以促进产酶、但是作用机理未阐明清楚的物质。例如，添加一定量的植酸钙镁，可使霉菌蛋白酶或者桔青霉磷酸二酯酶的产量提高1～20倍；添加聚乙烯醇（Polyvinyl alcohol）可以提高糖化酶的产量。产酶促进剂对不同细胞、不同酶的作用效果各不相同，现在还没有规律可循，要通过试验确定所添加的产酶促进剂的种类和浓度 酶发酵动力学研究的内容包括哪些？ 1.细胞生长动力学主要研究细胞生长速度以及外界环境因素对细胞生长速度影响的规律。 2.产酶动力学主要研究细胞产酶速率以及各种环境因素对产酶速率的影响规律。 3.基质消耗动力学主要研究发酵过程中基质消耗速率以及各种环境因素对基质消耗速率的影响规律。 ?简述酶沉淀的主要方法及其原理。 沉淀分离是通过改变某些条件或添加某种物质，使酶或杂质的溶解度降低，而从溶液中沉淀析出，与其它溶质分离的技术过程。
酶工程期末考试重点
酶:是由活细胞产生的，在细胞内、外一定条件下都能起催化作用的具有高效率和高度专一性的一类特殊蛋白质或核酸，酶能在机体内十分温和的条件下高效率地起催化作用，使得生物体内的各种物质处于不断的新陈代谢中。 酶工程:酶的生产与应用的技术过程,是酶学基本原理与化学工程相结合而形成的一门新兴的技术科学.研究酶制剂大规模生产及应用所涉及的理论与技术方法. 酶的应用:通过酶的催化作用获得人们所需的物质或除去不良物质,或许所需信息的技术过程. 酶的提取:又称酶的抽提,指在一定的条件下用适当的溶剂或溶液处理含酶物料,使酶充分溶解到溶剂或溶液中的技术过程. 膜分离:又称膜过滤.采用各种高分子膜为过滤介质,将不同大小,不同形状的物质分离的技术过程. 凝胶层析:又称凝胶过滤,分子筛层析等.指以各种多孔凝胶为固定相,利用流动相中所含各种组分的相对分子质量的不同而达到物质分离的一种层析技术. 超临界萃取:又称超临界流体萃取,是利用预分离物质与杂志在超临界流体中的溶解度不同而达到的分离的一种萃取技术. 酶固定化:采用各种方法,将酶与水不溶性的载体结合,制备固定化酶的过程. 固定化酶:用物理,化学等方法将水溶性的酶固定到特定的载体上使之成为水不溶性的酶. 非水相催化:酶在非水介质中的催化作用称为酶的非水相催化. 水活度:用体系中水的蒸汽压和相同条件下纯水的蒸汽压之比表示.水活度与溶剂的极性大小关系不大，所以采用水活度作为参数来研究有机介质中水对酶催化作用的影响更为准确. 必需水:紧紧吸附在酶分子表面维持酶活化性所必需的最少水量. 反胶束体系:反胶束是在大量水不相混溶的有机溶剂中,含有少量的水溶液,加入表面活性剂后形成油包水的微小液滴. 胶束体系:胶束是在大量水溶液中含有少量与水相不相混溶的有机溶剂,加入便面活性剂后形成水包油的微小液滴. 酶分子修饰:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰. 酶反应器:酶作为催化剂进行反应所需的装置称为酶反应器. 喷射式反应器：利用高压蒸汽的喷射作用实现酶与底物的混合是进行高温短时催化反应的一种反应器. 酶活力单位:是表示酶活力大小的尺度;1个酶活力单位是指在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量.