一般细菌培养及鉴定 仪器法
微生物培养方法
微生物培养方法微生物培养是一种用于研究微生物生理生化特性、生长繁殖规律及其与环境条件的关系等的重要技术手段。
以下是一些常见的微生物培养方法：1、固体培养基培养法固体培养基是在培养液中加入凝固剂，使培养基成为凝固状态的培养基。
这种培养基具有良好的稳定性，可以防止培养液中的微生物在培养过程中流失，同时也可以使微生物在固体表面生长繁殖，方便观察和检测。
固体培养基一般用于细菌、放线菌、酵母菌等微生物的培养。
2、液体培养基培养法液体培养基是一种不添加凝固剂的培养基，使培养基呈液体状态。
液体培养基中，微生物在培养液中自由悬浮生长繁殖，可以充分接触培养液中的营养物质，有利于微生物的生长繁殖。
液体培养基一般用于工业生产中的微生物培养，如发酵工业中制备各种发酵产品。
3、半固体培养基培养法半固体培养基是在液体培养基中加入少量凝固剂，使培养基成为半凝固状态的培养基。
这种培养基可以固定培养液中的微生物，同时也可以使微生物在半固体表面生长繁殖。
半固体培养基一般用于观察微生物的运动和生长情况。
4、厌氧培养法有些微生物需要在无氧或低氧分压条件下生长繁殖，因此需要采用厌氧培养法。
厌氧培养法一般采用密闭容器或厌氧手套箱中进行，可以提供无氧或低氧环境。
在厌氧培养法中，需要使用专门的厌氧培养基和厌氧菌株，以保证微生物的生长繁殖。
5、富集培养法富集培养法是一种常用的分离高浓度微生物的方法。
该方法是通过在培养基中添加一些特殊成分，如高浓度营养物质、抑制剂等，以抑制其他微生物的生长繁殖，从而增加目标微生物的数量和浓度。
富集培养法一般用于从自然界或工业生产中分离特定种类的微生物。
微生物培养方法有很多种，每种方法都有其特定的适用范围和特点。
在实际操作中，需要根据具体情况选择合适的培养方法，以达到最佳的培养效果。
还需要注意无菌操作、环境控制等方面的技术细节，以保证微生物生长繁殖的良好环境和条件。
微生物的分离培养方法微生物的分离培养是微生物研究中常用的技术之一，它能够将目标微生物从复杂的微生物群体中分离出来，并进行纯培养。
皮肤细菌检测实验报告
一、实验目的1. 了解皮肤表面细菌的种类和数量。
2. 掌握皮肤细菌检测的基本方法。
3. 分析皮肤细菌与人体健康的关系。
二、实验原理皮肤是人体最大的器官，其表面寄居着大量的微生物，包括细菌、真菌和病毒等。
这些微生物在正常情况下对人体并无害，甚至有益于人体健康。
然而，当皮肤表面细菌失衡时，可能导致皮肤疾病或感染。
本实验采用平板计数法检测皮肤表面细菌的数量，通过观察菌落形态，对细菌进行初步鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 新鲜的人体皮肤样本- 灭菌生理盐水- 牛肉膏蛋白胨培养基- 无菌棉签- 无菌培养皿- 移液器- 显微镜- 酒精灯- 高压蒸汽灭菌器2. 实验仪器：- 恒温培养箱- 灭菌操作台- 移液器- 显微镜四、实验步骤1. 采集皮肤样本：取新鲜的人体皮肤样本，用无菌棉签轻轻擦拭皮肤表面。
2. 制备样品：将采集到的皮肤样本放入无菌生理盐水中，充分振荡，制成悬液。
3. 稀释样品：将悬液用无菌生理盐水进行一系列稀释，以获得适宜的菌落数量。
4. 接种培养：将稀释后的样品涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上，用无菌镊子将培养皿放置于恒温培养箱中培养。
5. 观察菌落：培养一段时间后，观察培养基上的菌落形态，对细菌进行初步鉴定。
6. 计算菌落数量：根据培养皿上的菌落数量，计算原始样品中的细菌数量。
五、实验结果与分析1. 菌落形态：观察到的菌落形态多样，包括球形、杆形、螺旋形等。
2. 细菌鉴定：根据菌落形态，对细菌进行初步鉴定，如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、链球菌等。
3. 细菌数量：根据实验结果，计算出原始样品中的细菌数量。
六、实验结论1. 皮肤表面存在多种细菌，对人体健康具有重要作用。
2. 皮肤细菌数量与个体差异、环境因素等有关。
3. 通过皮肤细菌检测，可以了解人体健康状况，为预防和治疗皮肤疾病提供依据。
七、实验注意事项1. 实验操作过程中，严格遵循无菌操作原则，避免污染。
2. 注意观察菌落形态，准确进行细菌鉴定。
军团菌的分离培养与鉴定福建省疾病预防控制中心
1990
Legionella gresilensis
2001
Legionella cherrii
1985
Legionella adelaidensis
1991
Legionella rowbothamii
2001
Legionella erythra
运输包装分类
学名
中文名
大量活菌操作
动物感染实验
样本 检测
非感染性材料实验
A/B
UN 编号
Legionella pneumophila
嗜肺军团菌
第三类
BSL-2
ABSL-2
BSL-2
BSL-1
B
UN 3373
样本的采集和运输
〔一〕标本的种类 〔二〕标本的运输和相关生物平安要求
标本的种类
环境水标本：空调冷却塔水、冷凝水,温泉水,淋浴水, 加湿器水； 病人组织标本:如痰,支气管灌洗液,胸水,血液等标本。 1983年新疆从一瘫患羔羊后肢中别离到军团菌。
样品浓缩
离心 过滤
接种
酸处理 热处理
水样的正压膜过滤法
安放滤膜； 过滤； 取膜； 洗膜。
水样的离心
将200ml左右样品倒入容积为300～500ml的无菌离心瓶中； 6000g离心10min，或者3000g离心30min，离心温度在15～25℃之间； 无菌操作去除上清； 用5～20ml溶液或无菌蒸馏水将沉淀重悬。
标本的运输和相关生物平安要求
在周围环境温度下运送水样标本,不必冷冻,但要防止受热和阳光,标本要尽可能快或最好在两天内送到实验室,室温下(21+3℃)贮藏在实验室或其他地方。 对于临床标本，最好立即做预期实验，如不能马上进行，应放在-20℃冻存备用。
TDR-300系列操作规程
1 目的制定标准化的天地人TDR-300系列自动细菌鉴定及药敏测试仪操作规程，保证仪器的正常使用2 仪器简介天地人TDR-300系列自动细菌鉴定及药敏测试仪可用于细菌的鉴定和体外抗生素的药敏监测，测定采用天地人试验用的微量检测板，该板内含有培养基、生化试验及相应抗生素。
天地人TDR-300系列自动细菌鉴定及药敏测试仪重复性好、节省操作时间、结果稳定可靠，使实验室的操作达到标准化。
3 原理3.1、细菌鉴定原理TDR鉴定系统运用TDR专利（ZL97 107902.1）“双歧—矩阵法”精选试验组成最佳鉴定性状组合，采用新颖的不确定试验方法计算百分概率鉴定细菌结果，可鉴定葡萄球菌、肠球菌、链球菌、奈瑟菌/嗜血杆菌、肠杆菌科、弧菌科、芽孢杆菌、棒状杆菌、非发酵菌、酵母样真菌及厌氧菌在内的细菌。
3.2、药敏试验原理采用CLSI推荐的“微量肉汤稀释法”进行药敏试验，分别检测药物的敏感性及MIC值，并通过智能专家分析软件处理后得出报告结果，并提出合理的专家评价。
4 试剂4.1 生化反应试剂包括吲哚试剂、PD试剂、VP试剂、硝酸盐试剂、马尿酸盐试剂、淀粉酶试剂、糖氧化催化剂、同化试验稳定剂，均为天地人公司配套辅助试剂，0-4℃保存，有效期内使用4.2 试验卡及其配套试剂各类试验卡及其生化.药敏培养液等均为天地人公司辅助试剂，0-4℃保存，有效期内使用5 仪器操作步骤5.1 开机前检查5.1.1 电源是否连接好，主机、显示器电源是否连接。
5.1.2 检查打印机是否连接好，打印纸是否安装好。
5.1.3 仪器台面干净、无污物。
5.2 开机5.2.1 打开主机电源，启动操作系统；在显示器上打开显示器电源；5.2.2 打开仪器面板的分析判读电源开关；使判读装置自检复位。
5.2.3 打开打印机电源。
5.2.4 双击桌面“天地人微生物分析系统”，进入微生物分析系统。
6 患者信息录入6.1 在启动选择界面选择“细菌.酵母样真菌鉴定”进入“被检者资料”，点击“增加”，录入患者资料，输完后点“保存”；6.2如保存患者资料后，发现输入有误，可点“修改”，修改资料；6.3 注意送检日期以化验单上日期为准；6.4 如需查询以前患者的资料，在“被检者资料”的“搜索”处，可以任一条件查询。
医院临床检验手册2016版(一)
目录
一、**医院检验科开展检验项目组合一览表 (2)
二、临床采血管具体选择明细 (12)
三、** 医院检验科临床检验项目 (15)
一、**医院检验科开展检验项目组合一览表一、生化系列
**医院检验科开展检验项目组合一览表二、微生物系列
**医院检验科开展检验项目组合一览表三、免疫系列
**医院检验科开展检验项目组合一览表四、化学发光方法学检测
**医院检验科开展检验项目组合一览表五、常规系列
二、临床采血管具体选择明细
注：血沉专用管（黑帽）为备用采血管，用于手工血沉实验检测。
三、** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目
验科临床检验项目
** 医院检
** 医院检验科临床检验项目
** 医院检验科临床检验项目。
观察细菌实验报告
一、实验目的1. 了解细菌的基本形态和结构。
2. 掌握显微镜观察细菌的方法。
3. 学习细菌的培养和分离技术。
二、实验原理细菌是一类微小的单细胞生物，广泛分布于自然界中。
细菌的形态多样，有球形、杆形、螺旋形等。
本实验通过显微镜观察细菌的形态和结构，学习细菌的培养和分离技术。
三、实验材料与仪器1. 仪器：显微镜、培养皿、酒精灯、接种环、无菌生理盐水、牛肉膏蛋白胨培养基、滤纸片等。
2. 材料：细菌培养物、无菌水、无菌生理盐水、牛肉膏蛋白胨培养基等。
四、实验方法1. 细菌的形态观察（1）制备细菌涂片：取少量细菌培养物，滴加无菌水稀释，用接种环均匀涂布在载玻片上，待干燥后，滴加少量苯酚复红染色液，染色约1分钟，用无菌水冲洗，待干燥后进行观察。
（2）显微镜观察：将制备好的细菌涂片置于显微镜下，先用低倍镜观察，找到细菌的群体，再转换高倍镜观察细菌的形态和结构。
2. 细菌的培养和分离（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基：按比例称取牛肉膏、蛋白胨和琼脂，加入适量蒸馏水溶解，加热煮沸，过滤，冷却至50℃左右，加入无菌水稀释至适当浓度。
（2）接种：用无菌接种环取少量细菌培养物，接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，放入恒温培养箱中培养。
（3）观察和分离：在适宜的培养条件下，细菌会在培养基上形成菌落。
观察菌落特征，如大小、形状、颜色等，进行细菌的分离和鉴定。
五、实验结果与分析1. 细菌的形态观察通过显微镜观察，发现细菌的形态有球形、杆形、螺旋形等。
其中，球形细菌的直径约为0.5-1.0微米，杆形细菌的长度约为1-5微米，直径约为0.5-1.0微米，螺旋形细菌的长度约为5-10微米，直径约为0.5-1.0微米。
2. 细菌的培养和分离在恒温培养箱中培养一段时间后，牛肉膏蛋白胨培养基平板上出现了菌落。
观察菌落特征，发现菌落有大小、形状、颜色等差异。
通过分离和鉴定，成功分离出不同形态和特征的细菌。
六、实验结论1. 通过显微镜观察，掌握了细菌的基本形态和结构。
第12章 临床微生物检测仪器与技术
第二节 自动化微生物鉴定与药敏分析系统
一、自动化微生物鉴定与药敏分析系统的检测原理 CO2 CO2
H2O H2CO3 H2O H2CO3
一、自动化血培养仪的检测原理
ESP系统检测原理示意图
一、自动化血培养仪的检测原理
（二）以测压为基础的血培养系统
2．自动化菌血测试系统 自动化菌血测试系统（oxoid automated septicaemia
investigation system，OASIS）是通过激光扫描而测得 气体压力的变化。 在培养瓶的顶部有一激光探测器，每5分钟对培养瓶顶部 的隔膜扫描一次，隔膜位置的升降可反映瓶内压力的改变 。 在OASIS培养瓶内有一个磁珠，通过磁珠搅拌可达到振荡 培养的目的，使瓶内培养物与培养基作用得更为充分。
一、自动化血培养仪的检测原理
（二）以测压为基础的血培养系统 许多细菌在生长过程中常伴有吸收或产生气体的现象，因
此可利用培养瓶内气体压力的改变检测微生物的生长情况 。 1．ESP系列 ESP（extra sending power）系列培养瓶顶部的连接装 置与仪器的感压探测器相接，探测器每12分钟监测一次 需氧瓶，每24分钟监测一次厌氧瓶，并将气体压力数据 传输到计算机。 计算机软件以气体压力对时间的变化绘制成生长曲线图， 按照特有的方法处理曲线。 当培养瓶顶部压力改变达到一定值时，判断为阳性，即有 细菌生长；否则为阴性，即无细菌生长。
与培养基结合的荧光分子在最初具有一定荧光值，当有微 生物存在时，其生长代谢过程中或产生CO2，或发生pH 改变，或发生氧化还原使电位改变等，均可导致液体培养 基内的荧光分子结构发生改变而成为无荧光的化合物，即 发生荧光衰减。
细菌真菌形态实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 通过显微镜观察，了解细菌和真菌的基本形态结构。
2. 学习细菌和真菌的分离、培养及鉴定方法。
3. 掌握显微镜的使用技巧。
二、实验原理细菌和真菌是微生物中两种重要的生物，它们在自然界中广泛分布，与人类的生活密切相关。
细菌和真菌的形态结构是其分类和鉴定的重要依据。
通过显微镜观察，可以清晰地看到细菌和真菌的形态、大小、排列方式等特征。
三、实验材料与仪器1. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、镊子、无菌棉签、无菌培养皿、无菌培养基等。
2. 试剂：生理盐水、结晶紫、孔雀绿、革兰氏碘液、酒精、蒸馏水等。
3. 样品：土壤、水、空气、食品等。
四、实验方法1. 细菌的分离与培养（1）样品采集：取适量土壤、水、空气、食品等样品，分别放入无菌培养皿中。
（2）样品稀释：用无菌棉签蘸取样品，在生理盐水中进行10-10^6倍稀释。
（3）涂布培养：将稀释后的样品涂布在牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，37℃恒温培养24小时。
（4）挑取菌落：用接种环挑取单个菌落，在平板上进行划线分离，重复操作，直至获得纯培养。
2. 真菌的分离与培养（1）样品采集：取适量土壤、水、空气、食品等样品，分别放入无菌培养皿中。
（2）样品处理：将样品进行充分搅拌，取适量悬浮液涂布在马铃薯葡萄糖琼脂平板上。
（3）恒温培养：将平板置于25℃恒温培养箱中，培养7-10天。
（4）挑取菌落：用接种环挑取单个菌落，在平板上进行划线分离，重复操作，直至获得纯培养。
3. 细菌和真菌的形态观察（1）制备临时玻片：将纯培养的细菌和真菌分别接种于载玻片上，滴加适量结晶紫或孔雀绿染色，盖上盖玻片。
（2）显微镜观察：用显微镜观察细菌和真菌的形态、大小、排列方式等特征。
五、实验结果与分析1. 细菌的形态观察（1）细菌呈球形、杆形、螺旋形等，大小一般为0.5-5μm。
（2）细菌排列方式有单排、双排、链状、簇状等。
（3）革兰氏染色结果显示，细菌可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
细菌鉴定流程
无乳链球菌-CLSI
• 血平板上常表现为边缘光滑的窄的"溶血环" • 革兰阳性球菌成对或成链,触酶阴性; • 快速马尿酸盐水解试验阳性或快速CAMP因子
斑点试验阳性均可准确鉴定无乳链球菌 • 商用凝集试验鉴定该菌准确性接近100%
肠球菌
• 触酶试验阴性 • 七叶苷试验阳性 • 6.5%NaCl肉汤生长（高盐+）
矛盾实验
革兰阳性细菌鉴定卡GP -VITEK-2
• 局限性:VITEK-2 GP卡不能直接用于临床标本或含有
混合菌的样本，对过程的改变或修改都可能影响结果。 新的说明或罕见菌株不包含在GP数据库中，
当所选菌株可获得时可加入数据库，但对没有记录的种类 进行检测时可能导致不被识别或错误鉴定
• 质控：每月以及更换批号时用相应的质控菌株（依说 明书，可选铅黄肠球菌ATCC700327或金葡ATCC29213 等）在仪器的质控通道下进行操作。
脑膜炎奈瑟氏菌
淋病奈瑟氏菌
卡他莫拉菌
• 葡萄糖+。 • 硝酸盐还原-。 • DNA酶或丁酸甘油酯酶+
卡他莫拉菌-CLSI
• 菌落光滑、圆形、不透明的灰白色或米黄色 • 特征性的“冰球” 试验阳性。即用接种环轻推菌落
可将整个菌落在平板表面移动。
• 本菌为革兰阴性双球菌，氧化酶、触酶均阳性。 • 在血平板和巧克力平板上都能生长. • 快速丁酸酯酶(三丁酸甘油酯水解)试验阳性可用
革兰阴性杆菌
肠杆菌科细菌主要生化反应
• 发酵葡萄糖（产酸或产酸产气） ： KIA（克
氏双糖铁试验）或三糖铁试验
• H2O2 （触酶）+ • OX （氧化酶）-
细菌的生理生化鉴定
竭诚为您提供优质文档/双击可除细菌的生理生化鉴定篇一：细菌生理生化鉴定实验九细菌的生理生化试验[日期：20XX-5-30]来源：作者：孔庆学[字体：大中小]实验九细菌的生理生化试验1目的1.1了解细菌鉴定中常用的生理生化试验反应原理1.2掌握测定细菌生理生化反应的技术和方法2原理各种微生物在代谢类型上表现了很大的差异。
由于细菌特有的单细胞原核生物的特性，这种差异就表现的更加明显。
不同细菌分解、利用糖类、脂肪类和蛋白类物质的能力不同，所以其发酵的类型和产物也不相同，也就是说，不同微生物具有不同的酶系统。
即使在分子生物学技术和手段不断发展的今天，细菌的生理生化反应在菌株的分类鉴定中仍有很大作用。
3材料3.1菌种大肠埃希氏菌（escherichiacoli）、产气肠杆菌（enterobacteraerogenes）、普通变形杆菌（proteus vulgaris）、枯草芽孢杆菌（bacillussubtilis）的斜面菌种3.2培养基葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）3.3试剂40％naoh溶液、肌酸、甲基红试剂、吲哚试剂、乙醚、1.6%溴甲基酚紫指示剂。
3.4器具超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液管、杜氏小套管。
4流程糖发酵试验→V-p试验→甲基红试验→吲哚试验5步骤(一)糖类发酵试验1目的了解不同细菌分解利用糖的能力及实验原理，并掌握其操作方法．2原理可根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。
是否产酸，可在糖发酵培养基中加入指示剂溴甲酚紫（即b.c.p指示剂，其ph在5.2以下呈黄色，ph在6.8以上呈紫色），经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。
是否产气，可在发酵培养基中放入倒置杜氏小管观察。
3材料3.2菌种大肠埃希氏菌（escherichiacoli）、产气肠杆菌（enterobacteraerogenes）、普通变形杆菌（proteus vulgaris）的斜面菌种3.３培养基葡萄糖、蔗糖和乳糖发酵培养液试管４流程发酵液试管→标记→接种→培养→观察→记录5步骤5.1试管标记图9-1糖发酵产气取分别装有葡萄糖、蔗糖和乳糖发酵培养液试管各Ａ不产气；Ｂ产气4支，每种糖发酵试管中均分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌和空白对照。
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一般细菌培养及鉴定仪器法
《一般细菌培养及鉴定仪器法》
细菌培养及鉴定是微生物学研究中非常重要的一部分，通过对细菌进行培养和鉴定，可以了解其形态、生长特性、代谢途径等，从而为疾病诊断、药物研发以及环境监测等方面提供支持。
在传统的细菌培养与鉴定方法中，一些基础实验仍然采用手工操作，但随着科技的进步，仪器法在细菌培养和鉴定中的应用也越来越广泛。
一般细菌培养仪器法主要包括自动化培养设备、自动化鉴定系统以及基因测序技术等。
自动化培养设备可以帮助研究人员自动进行菌种的筛选、分离和培养。
这些设备可以在一定条件下模拟出合适的培养环境，从而提高培养的效率和成功率，缩短培养时间。
自动化鉴定系统则能够通过检测细菌的生理特征、代谢产物以及遗传物质等，来鉴定细菌的种属和特性。
这些系统可以根据事先设定的鉴定标准，快速准确地完成对细菌的鉴定工作，并且可以进行数据的自动处理和记录，大大提高了鉴定的精确性和效率。
基因测序技术则是一种新兴的细菌鉴定方法，通过对细菌的基因组进行测序和分析，可以准确地确定细菌的种属、亚种、基因型以及与其他细菌的关系等。
这种方法不仅可以提供更为详细的细菌鉴定信息，还可以帮助研究人员深入了解细菌的遗传特征和进化关系。
细菌培养及鉴定仪器法的应用在许多领域都得到了广泛的推广和应用。
在临床医学中，自动化培养设备和自动化鉴定系统可以帮助医院快速准确地鉴定出导致感染或疾病的致病菌，从而指导临床治疗。
在食品与农业领域，细菌培养及鉴定仪器法可以用于食品卫生监测和农产品质量检测，以保障食品安全和农产品的质量。
此外，细菌培养及鉴定仪器法还可以用于环境监测、生物兵器防御、药物研发等领域。
总之，细菌培养及鉴定仪器法在微生物学研究和实际应用中起着重要的作用。
随着科学技术的不断进步，人们对细菌培养及鉴定仪器法的需求也在不断增加，相信在未来的发展中，细菌培养及鉴定仪器法会变得更加高效、准确和智能化。