移液器使用,校准和管理方案计划的规范标准操作技巧规章新

移液器使用、校准和管理的标准操作规程

【目的】

本规程规定了移液器使用、校准和管理的标准操作规程，使操作人员和移液器的管理人员能够有章可循，保证移液器的使用、校准和管理符合GLP规范的要求。

【规程】

1 移液器的使用

1.1选择量程合适的移液器：移液器只能在特定量程范围内准确移取液体，如超出

最低或最大量程，会损坏移液器并导致计量不准；

1.2 设定容量值

1.2.1 粗调：通过调节旋钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值；

1.2.2 细调，当容量值接近设定值以后，应将移液器刻度显示窗平行放至自己的眼

前，通过调节旋钮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的

影响；

1.2.3 设定容量值时的注意事项：在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则

按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可。但如果要从小体积调为大体积

时，则应先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这

样可以保证量取的最高精确度。在设定容量值的过程中，禁止将按钮旋出量

程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。

1.3吸液嘴（枪头）的装配：把白套筒顶端插入吸液嘴，在轻轻用力下压的同时，

把手中的移液器按逆时针方向旋转至吸液嘴卡紧。切记用力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装。吸液嘴卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。；

1.4预洗吸液嘴：在安装了新的吸液嘴或增大了容量值以后，应该把需要转移的液

体吸取、排放两到三次，确保移液工作的精度和准度；

1.5吸液：先将四指并拢握住移液器上部，用拇指按住塞杆顶端的按钮，向下按到

第一停点，再将吸头垂直浸入液面2~3mm，缓慢平稳松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟（粘性大的溶液可加长停留时间）；

1.6 移液：缓慢抬起移液器取出吸液嘴，确保吸液嘴外壁无残留液体。可用定性滤

纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿触及吸液嘴口；

1.7 目测吸入的液体体积是否合理；

1.8 放液：将吸液嘴贴到容器内壁并保持20°-40°倾斜，平稳地把按钮压到第一停点，

停1-2s（粘性大的液体要加长停留时间）后，继续按压到第二停点，排出残余液体。松开按钮，然后将吸液嘴沿着内壁向上移开；

1.9 按吸头弹射器除去吸头，吸取不同样本液体时必须更换吸头；

2 移液器的校准

2.1 为保证取样的准确性，移液器应定期校准，本中心规定移液器一年校准二次，

二次间隔不超过7个月，由后勤保障部统一完成。最大量程小于10μL的移液器送有资质的单位校准；

2.2 计量性能要求：移液器在标准温度20℃时，其容量允许误差和测量重复性应符

合表1的要求；

2.3 校准条件

2.3.1 校准环境：移液器应在室温为（20±5）℃之间，且室温变化不得大于1℃/h

的条件下进行；

2.3.2 校准介质：使用超纯水，提前24h放入实验室内，使其温度与室温温差不得

大于2℃；

2.3.3 校准设备：主要设备必须经法定技术机构鉴定合格且在鉴定周期内。电子天

平（测量范围200g；分度值0.1mg）；温湿度表；温度计（测量范围（0~50）℃；

分度值0.1℃）；烧杯（50ml）1个；烧杯（100ml）1个；定性滤纸若干小块（经恒温处理）；

2.4 校准方法

2.4.1 打开电子天平，空载调零；将温度计放置在盛放超纯水的器皿内；

2.4.2 放入小烧杯待天平显示稳定后，按下归零键归零。给移液器上安装相应的吸

液嘴，对移液器的枪头进行预洗，在移液器校准记录表上记录当前的环境温湿度；

2.4.3 将移液器的容量调至被检点；

2.4.4 垂直的握住移液器，将按钮旋转至检定位置，此时将吸液嘴侵入装有超纯水

的容器内，并保持在液面下1~3mm处，缓慢放松按钮，等待1s~2s后离开液面，如吸液嘴占有多余液体，则使用定性滤纸吸干（小心勿触及吸液嘴口）；

2.4.5 将吸液嘴流液口靠在天平秤盘上的烧杯内壁，并与其成大约45°角，缓慢地

把按钮按至第一停止点，等待1s~2s后再将按钮快速完全按下，然后将吸液嘴沿着称量杯的内壁向上移开。

2.4.6 待天平显示稳定后，马上读取并在移液器校准记录表上记录此时电子天平显

示出的数值。记录完毕将电子天平复零；

2.4.7 重复5次执行（4）~（6）条。记录完毕，将移液器的容量调至下一被检点继

续。被检点遵循从小到大的原则进行调整； 2.5 数据处理

2.5.1 移液器实际容量计算：将所测得的质量值带入以下公式，求得移液器在标准

温度20℃时的实际容量值；

()t K m V ?=20

式中：V 20 ——标准温度20℃时的移液器的实际容量，mL ；

m ——被检移液器所排出的超纯水质量， g ；

K(t) ——测定值m 和测定时超纯水温度的比例系数，列于附录2中；

2.5.2 移液器的容量相对误差计算：将换算得到的实际容量值带入以下公式，求得

移液器在标准温度20℃时的容量相对误差；

%100?-=

V

V

V E 式中：V ——标称容量，μL ；

V ——5次测量的算数平均值，μL ；

2.5.3 移液器的容量重复性计算：将换算得到的实际容量值带入以下公式，求得移

液器在标准温度20℃时的容量重复性；

%1001

?=

-V

S n σ

式中：σn-1 ——标准偏差；

n ——测量次数； S ——重复性；

2.5.3 将计算结果填写在移液器校准记录表上，并给出校准结论。 2.6 校准结果处理

2.6.1经校准合格的移液器贴上校准合格证标识，注明校准编号、单位、日期及有

效期。校准编号格式由ZJ 年度-移液器编号-本年度校准次数组成，如2009年001号移液器的第一次校准的号为ZJ09-001-01，此标识于每次校准后更换； 2.6.2 如测试的3个量程有1个量程的容量允许误差和测量重复性超出表1要求，

应清洗、修正并重新校准。重新校准仍不合格的，退回厂家修理或作废弃处

理；

2.7 移液器的修正

2.7.1 将移液器调整至最小量程，按照校准方法得到当前的实际容量值，根据与标

示容量值的差值，通过移液器上的调准旋钮进行调整；

2.7.2 当调整后测得的实际容量值与标示容量值符合表1要求时，将移液器容量调

整至中间量程继续测量。中间量程符合要求时，再调整至最大量程继续测量。

2.7.3如果中间量程或者最大量程有一个不符合表1要求时，则需重新调整至最小

量程继续修正。直到3个量程的值都符合表1要求为止。

2.7.4 修正完毕的移液器，需重新进行校准。

2.7.5 最小量程低于10μL的，不进行修正。如果最大量程和中间量程符合校准要

求的，继续使用，否则返厂维修。

3 移液器的使用注意事项

3.1 如长时间不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态

以保护弹簧；

3.2 定期清洁移液枪外壁，可以用95%酒精或60%的异丙醇，再用蒸馏水擦拭，自

然晾干；

3.3 使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看

液面是否下降。如果漏液，则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常；

3.4 当移液器吸嘴内有液体时，严禁将移液器水平或倒置放置，以防液体流入活塞

室腐蚀移液器活塞；

附表1：移液器容量允许误差和测量重复性

附表2：K(t)值