红细胞裂解液使用说明书
裂解液配制方法
裂解液配制方法 The document was finally revised on 20211、红细胞裂解液（去除红细胞）配制试剂所需材料：1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solutiona) NH4Cl (1.5 M) 80 gb) KHCO3 (100 nM) 10 gc) Na4EDTA (10 nM) 3.7 gd) Distilled H2O 1000 mL2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用）配制步骤：1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中；2.调节溶液pH值到，加去离子水定容到1000ml；3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。
保存：储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）；2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。
2、ripa裂解液NP-40 or Triton-100 1%TrisHCl (pH 50mmol/LNaCl 150mmol/LPMSF（苯甲基磺酰氟） L(100μg/ml)Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/Lμg/ml)Leupeptin（亮抑制肽） mlAprotinin（抑蛋白酶肽）μmol/L(1μg/ml)（注：PMSF 贮存液：100mmol/L即ml于异丙醇中；Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于LHEPES；Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中；Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存）3、细胞裂解液（Tris－HCL）1．1M Tris 溶液的配置取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。
2．1M Tris－HCL Ph=溶液的配置取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=（需浓盐酸约），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。
gentleMACS实验操作步骤中文
gentleMACS™操作步骤1.背景信息在许多实验中，需要用到单细胞悬液，如用MACS®技术分选细胞时，要想获得高纯度和回收率的话，单细胞悬液就很重要。
德国美天旎生物技术有限公司开发的gentleMACS™分离器能够提供优化的程序，用于从不同的组织中获取单细胞悬液。
这些组织包括小鼠脾脏，肝脏，肺脏，脑组织等。
使用C管，能够在一个密闭的系统中进行全自动的组织分离，可以保证组织操作的无菌，以及能够同时处理2个组织样本。
2. 分离小鼠脾脏的操作步骤2.1 需要的试剂和仪器●gentleMACS 分离器●gentleMACS C 管(# 130-093-237)●细胞滤器，如30 μm n尼龙滤网（Pre-Separation Filters# 130-041-407)●缓冲液: PBS缓冲液, pH 7.2,含0.5% 牛血清白蛋白(BSA), 和2 mMEDTA (不推荐使用含Ca2+ or Mg2+的缓冲液)2.2 步骤▲如制备的单细胞悬液用于细胞培养，所有的步骤必须在无菌条件下获得。
▲一只小鼠脾脏的重量约为80–120 mg (BALB母鼠, 6–7 周龄).1. 将小鼠脾脏转移到gentleMACS C 管中，按照脾脏的数量加入缓冲液:1–2 个小鼠脾脏: 3 mL3–4个小鼠脾脏: 6 mL5–6 个小鼠脾脏: 9 mL2. 拧紧C管盖子，倒置在gentleMACS 分离器上▲注意: 必须确保组织块在转子区域3. 开机，选择合适的分离程序：1–2 个小鼠脾脏: m_spleen_01.3–6个小鼠脾脏: m_spleen_04.4. 运行gentleMACS 程序m_spleen_01. 或m_spleen_04.5. 程序结束后，从gentleMACS 分离器中取出C管6. (可选) 以300×g 室温下离心2分钟。
7. 去除分离的组织块，将细胞悬液通过一个预分选滤器（1-2个脾脏），该预分选滤器放置于15mL管子中。
三氯化铁水溶液(30%)
北京雷根生物技术有限公司
三氯化铁水溶液(30%)
简介：
氯化铁(Ferric chloride)又称三氯化铁，化学式为FeCl3，分子量为162.2，CAS 号为7705-08-0，可用于金属蚀刻、污水处理、氧化剂等。
三氯化铁水溶液(30%)由无水氯化铁、去离子水组成。
该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 按实验具体要求操作。
注意事项：
1、 注意密闭保存，避免挥发和腐蚀物品。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：
编号 名称 R00624 Storage 三氯化铁水溶液(30%) 100ml RT 避光 使用说明书 1份
编号 名称
CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)
CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DF0111 中性福尔马林固定液(10%)
DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液
IH0143 PBS 磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH7.2-7.4)
PW0111 Super ECL Plus 超敏发光液
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
红细胞裂解液的配方
红细胞裂解液的配方红细胞裂解液是一种可以用于制备单细胞悬液的液体，是用于培养细胞、测定细胞特性或进行免疫学和细胞生物学分析时必不可少的。
红细胞裂解液的配方可能会随着应用不同而有所不同，一般来说，红细胞裂解液应该包含两种主要成分：溶剂和除去红细胞壁的酶。
第一步，选择溶剂。
红细胞裂解液的溶剂有多种，如水、生理盐水、PBS(phosphate buffered saline)、Tris-HCl（tris hydrochloric acid）及EDTA （ethylenediaminetetraacetic acid）等。
其中，生理盐水和PBS是最常用的，因为它们能够保持细胞环境的稳定性，PBS也是大多数细胞生物学实验中最常用的溶剂之一，而EDTA是一种有助于去除红细胞壁的溶剂。
第二步，选择酶。
红细胞裂解液中的酶一般是由trypsin或RNase组成，这两种酶都有助于去除红细胞壁，以便使细胞可以被溶解。
有些研究者会添加DNAse （deoxyribonuclease），这种酶可以帮助降解DNA，从而减少胎牛血清白蛋白对细胞的污染。
第三步，添加抗凝剂。
抗凝剂可以防止细胞在悬液中凝结，常用的抗凝剂有EDTA、heparin、citrate等。
抗凝剂的用量一般以0.1%~0.5%的浓度添加到溶剂中。
第四步，添加抗生素。
抗生素可以有效预防致病微生物的污染，常用的抗生素有penicillin/streptomycin、gentamicin、amphotericin B等，一般以100U/ml的浓度添加到溶剂中，以防止污染。
最后，将上述所有成分添加到一定的比例中，并搅拌均匀，就可以制备出一种完整的红细胞裂解液了。
通常情况下，红细胞裂解液的配方可以根据具体的实验要求而有所不同，可根据实验的具体要求调整添加的各种成分的比例，以满足实验的要求。
总之，红细胞裂解液的配方应当包括溶剂、除去红细胞壁的酶、抗凝剂和抗生素，经过调整添加各种成分的比例，即可制备出一种完整的红细胞裂解液。
北京四正柏生物 Mouse Anti-Human CD64 PE标记抗体 说明书
储存条件： 2-8℃避光保存,勿冰冻。
克隆名称： CT101抗体亚型: Mouse IgG1标记荧光： PE使用规格： 10μl / Test 用于100 μl 外周血或者106个细胞缓 冲 液： 0.01M PBS, pH 7.4, 0.2%(w/v) BSA, 0.09%(w/v) NaN 3应用范围： FCM实验方法（全血样本流式检测）1. 取100 μl EDTA 抗凝的人外周血加入5 ml 流式管底;2. 取10 μl 标记抗体加入流式管底与全血混匀,室温避光孵育20分钟;3. 加入2ml 1×红细胞裂解液混匀后避光放置10分钟,溶解红细胞(推荐:4A Biotech LysingSolution[10×],Cat. :FXP001);4. 将样品管置离心机中以1000 rpm 离心5分钟后弃上清;5. 加入2 ml PBS 洗液(Cat.:FXP005)重悬细胞，1000 rpm 离心5分钟,弃上清;6. 加入0.5 ml PBS 洗液重悬细胞,待流式细胞仪检测(样品应在当天上机测定,也可加固定液4℃保存过夜测定).[PBS 洗液:PBS+1%FBS+0.1%NaN 3；Cat.:FXP005][细胞固定液:2%甲醛溶液]注意事项1. 加入外周血时勿将血液触及到流式管壁，否则请用棉棒擦干净;2. 红细胞裂解液使用前应平衡至室温后方可使用(见红细胞裂解液说明书);3. 若样品不能及时上机分析,请及时固定;6. 此产品仅供研究，不用于临床诊断流式参考图Mouse Anti-Human CD64PE 标记抗体目录号 规格FHP0641-100 100 TestsFHP0641-050 50 Tests正常人外周血单核细胞用CT101-PE标记抗体染色后的流式参考图（蓝色为小鼠IgG1同型对照）参考资料1. Ledbetter, J et al. (1981) J Exp Med 153:310-323.2. Haynes , B et al. (1986) Leukocyte Typing II: Human T lymphocytes. New York: Sprimger-V erlag; 3-30.3. Clevers H et al. (1988). Ann Rev Immunol 6 : 629-662.4. Barclay, N et al. (1993). The Leucocyte Factsbook. Academic Press. San Diego.相关产品：目录号产品名称应用范围FHU0641 Mouse Anti-Human CD64，纯化抗体FCM IFFHF0641 Mouse Anti-Human CD64/FITC标记抗体FCM IF。
线粒体 裂解液
技术背景
线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。线粒体中含有丰富 的细胞色素氧化酶系统、细胞凋亡相关蛋白和独立的核外 DNA。通过线粒体溶解，可以进行相关蛋白的独 立分析。
产品内容
GENMED 裂解液（Reagent A） 产品说明书
毫升 1份
保存方式
保存在 4℃冰箱里，有效保证 6 月
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A
GMS12055 v.A
GENMED 裂解液 VI：线粒体裂解液产品说明书（中文版）
主要用途
GENMED 裂解液 VI：线粒体裂解液是一种旨在通过非离子性化学裂解处理，使线粒体膜结构破坏而获得 线粒体内的活性蛋白酶系统的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。 其适用于各种线粒体（动物、人体、植物、昆虫等）的内容物预制备。可以被用于细胞凋亡、信号传递、 古生物、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
1
8． 转移到 1.5 毫升离心管
9． 放进微型台式离心机离心 2 分钟，速度为 16000g（或 13000RPM，例如 eppendorf 5415）
10．小心移取上清液到新的
毫升离心管――此为所有可溶性线粒体蛋白系统
11．若暂时不予后续处理，保存在－20℃冰箱里
12．继续进行下列操作：
操作一、可溶性线粒体蛋白电泳
2． （选择步骤）如果线粒体样品不是颗粒状态，而是液体状态且容积过大，置入 4℃超速离心机离心 20
分钟，离心速度为 10000g
3． （选择步骤）小心抽去上清液
4． 加入
微升 GENMED 裂解液（Reagent A）到线粒体颗粒样品中
ELISA终止液
北京雷根生物技术有限公司
ELISA 终止液
简介：
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
Leagene ELISA 终止液呈酸性，主要用于终止ELISA 反应。
该试剂为1×工作液，直接使用。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 洗涤后，每孔加入底物溶液，室温反应恰当的时间。
2、 每孔加入 ELISA 终止液，终止反应。
3、 测定OD 值。
注意事项：
1、 注意密闭保存，避免挥发。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关：
编号 名称 IT0024 IT0024 Storage ELISA 终止液 100ml 500ml RT 使用说明书 1份
编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DF0111 中性福尔马林固定液(10%)
DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液
IH0143 PBS 磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH7.2-7.4)
PE0080 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8)
TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
昊鑫生物 EASYspin 全血RNA快速提取试剂盒使用说明书
室温 吸附柱 RA 和收集管
20 套
50 套
本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。 储存事项： 1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直 接使用，可在 37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。 2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此 运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。 3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及 时盖紧盖子。
1.
在适合大小的 RNase free 离心管中加入 1 体积（<1.5 ml）加入各种抗凝剂新鲜血 液 (颠倒混匀后)和 3 体积的红细胞裂解液 RLB， 颠倒混匀， 可轻弹管壁,确保混匀。
2.
室温放置 10 分钟（期间应该颠倒轻弹混匀数次帮助裂解红细胞） 。 如果 RNA 降解严重，可在冰上裂解，但是时间可长一些以充分裂解。 -2-
产品介绍： 红细胞裂解液选择性裂解红细胞 , 然后独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解白细胞
和灭活细胞 RNA 酶，然后用乙醇调节结合条件后,RNA 在高离序盐状态下选择性吸附 于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将 细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的 RNase free H20 将纯净 RNA 从硅基质膜 上洗脱。 1. 2. 3. 4. 产品特点： 不需要使用有毒的苯酚/氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 反复优化的红细胞裂解液配方，裂解效果快速完全。 快速，简捷，单个样品操作一般可在 40 分钟内完成。 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达 1.9～2.1，基本无 DNA 残 留，可用于 RT-PCR，Northern-blot 和各种实验。 1. 注意事项 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到 13，000 rpm 的传统台式离心 机，如 Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 3. 需要自备乙醇，β-巯基乙醇。 裂解液 RLT 和去蛋白液 RW1 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免 沾染皮肤， 眼睛和衣服。 若沾染皮肤、 眼睛时， 要用大量清水或者生理盐水冲洗。 4. 关于 DNA 的微量残留： 一般说来任何总 RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免 DNA 的微量残留,本 公司的 EASYspin 系列 RNA 提取产品， 由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择 了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数 RT-PCR 扩增过程中极其微量的 DNA 残留 影响不是很大，如果要进行严格的 mRNA 表达量分析如荧光定量 PCR，我们建 议在进行模板和引物的选择时： (1) 选用跨内含子的引物，以穿过 mRNA 中的连接区，这样 DNA 就不能作为模板参 与扩增反应。 或者选择基因组 DNA 和 cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。 缩短延伸时间，使 DNA 来源模板无法参与扩增反应。 -1-
Taq稀释缓冲液
北京雷根生物技术有限公司
Taq 稀释缓冲液
简介：
Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱，分子式为C 4H 11NO 3，相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为，Tris 缓冲液的有效缓冲范围，用来作为各种缓冲液的基础成分，调节酸碱度。
Taq 稀释缓冲液由Tris-HCl 缓冲液(pH8.0)、NP40以及微量EDTA 等组成，经高压灭菌处理，用于稀释T aq 酶。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 按实验具体要求操作。
注意事项：
1、 注意避免反复冻融，否则效率容易下降。
2、 并且避免微生物污染。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关：
编号 名称 NP0034 Storage Taq 稀释缓冲液 100ml -20℃ 使用说明书 1份
编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DF0111
中性福尔马林固定液(10%) DM0007
瑞氏-姬姆萨复合染色液 PE0080
Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PW0040
Western blot 一抗稀释液 TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。
氯化钙溶液(1molL)
北京雷根生物技术有限公司
氯化钙溶液(1mol/L)
简介：
氯化钙(Calcium chloride)分子量为110.98，分子式为CaCl ，CAS 号为25094-02-4，是典型的离子型卤化物，是多种科研试剂的基础成分，亦可用作干燥剂等。
氯化钙溶液(1mol/L)由氯化钙、去离子水组成。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 按实验具体要求操作。
注意事项：
1、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：
编号 名称 R00446 Storage 氯化钙溶液(1mol/L) 500ml 4℃ 使用说明书 1份
编号 名称 CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DF0111 中性福尔马林固定液(10%) DM0007
瑞氏-姬姆萨复合染色液 PT0013
考马斯亮蓝快速染色液 PW0040
Western blot 一抗稀释液 TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。
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红细胞裂解液使用说明书
产品简介红细胞裂解液是一种专门设计用来裂解红细胞的新型试剂。
它是一种经过精心制备的化学试剂，能有效地溶解红细胞，以便进一步进行血液样本的处理和分析。
本产品具有使用方便、裂解效果好、安全性高等优点。
使用目的使用红细胞裂解液的主要目的是裂解红细胞，释放其中的血红蛋白和其他细胞内成分，以便进行后续的生化、免疫或分子生物学分析。
同时，该试剂也可以用于分离和纯化血红蛋白，以进行更深入的研究。
成分与特性红细胞裂解液的主要成分包括溶血剂、稳定剂、防腐剂等。
其中溶血剂可以破坏红细胞的细胞膜，使细胞内物质释放出来。
稳定剂和防腐剂则可以保持试剂的稳定性和延长保存时间。
本试剂具有高效率、高纯度、低毒性的特点。
操作流程使用红细胞裂解液的操作流程如下：
(1)准备实验样品：将需要裂解的红细胞悬液准备好。
(2)加入红细胞裂解液：按照样品与红细胞裂解液的比例加入适量的红细胞裂解液。
(3)充分混合：轻轻旋转或摇动混合器，使红细胞裂解液与样品充分混合。
(4)静置：将混合物静置一段时间，让红细胞充分裂解。
(5)离心：将混合物离心，分离出上清液和沉淀物。
(6)处理上清液：根据后续分析的需要，处理上清液，如进行蛋白质沉淀、蒸发、纯化等。
安全性及注意事项(1)请在实验前仔细阅读说明书并穿戴实验服和手套。
(2)请在通风良好的实验环境中进行实验操作。
(3)避免皮肤接触试剂，如不慎接触，请立即用清水冲洗。
(4)请将试剂存放在儿童触及不到的地方，并放在通风、干燥、避光的地方保存。
(5)请勿将试剂与其他物质混合使用。