生物技术课程设计

江汉大学文理学院College of Science & Arts of Jianghan University

课程设计任务书

部（系）：生物与环境工程学部

班级：生物技术

姓名：蔡鑫玥胡博

学号：201204010115 201204010109

指导教师：李威

时间： 2014年12月20日

说明

一．课程设计的目的

课程设计是培养学生综合运用所学知识与技能，初步训练学生获得分析和解决实际问题的能力的实践性教学环节之一；是生物技术专业学生在毕业论文前进行的一次综合训练。通过本课程设计培养学生运用所学知识设计课题的能力，为毕业论文的开展，及今后从事生产、教学、科研等相关工作打下坚实基础。

二、课程设计的要求

1、以小组为单位，提出与生物技术有关的课程设计题目。命题要求既有代表性，又有实际意义。

2、设计应包括以下几个部分构成：

（1）研究（或设计）的目的与意义。应说明此项研究（或设计）在生产实践

上或对某些技术进行改革带来的经济、生态与社会效益。有的课题过去曾进行过，

但缺乏研究，现在可以在理论上做些探讨，说明其对科学发展的意义。

（2）国内外同类研究（或同类设计）的概况综述。在广泛查阅有关文献后，

对该类课题研究（或设计）已取得的成就与尚存在的问题进行简要综述，只对本

人所承担的课题或设计部分的已有成果与存在问题有条理地进行阐述，并提出自

己对一些问题的看法。

（3）课题研究（或设计）方案：包括研究内容、研究方法和技术路线。研究

内容要重点突出；研究方法要具有科学性、先进性；技术路线要清晰。

（4）研究（设计）的预期结果和创新性。

3、格式要求

（1）表格内容，字号用小4号，中文字体用宋体，英文字体用Times New Roman;

（2）正文字数3000字左右。

三、课程设计题目

正文：

一．设计实验室

1.实验室设计要求:

实验室设计需要考虑两方面要求：一是从事的实验性质，即生产性质还是实验性质，是基本层次还是较高层次；二是规模，规模主要取决于实验经费和实验性质。

无论实验室的性质和规模如何，实验室的设置及本原则是：科学.实用.经济.

高效。一个组培实验室必须满足三个基本要求：实验准备（培养基的制备.器皿的洗涤.器材和材料的灭菌），二无菌操作和控制培养，三是根据实验的要求来考虑实验的各种设施，使实验室更加完善！

2实验室组成

①准备室

功能：

进行一切与实验有关的准备工作：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。

②无菌操作室

功能：

主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序，是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。一般新建实验室的无菌室在使用之前应进行灭菌处理，处理方法是甲醛和高锰酸钾熏蒸，并需定期灭菌处理，还可用紫外线照射1-2h/周，或每次使用前照射10-30min。

③培养室

功能：

对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养，无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的场所。要求：约需 10-20m2右，培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定，其设计以充分利用空间和节省能源为原则。基本要求是能够控制光照和温度，并保持相对的无菌环境，因此，培养室应保持清洁和适度干燥；为满足植物培养材料生长对气体的需要，还应安装排风窗和换气扇等培养室的换气装置；为节省能源和空间，应配置适宜的培养架，并安装日光灯照明

④缓冲区

功能：

是进入无菌室前的一个缓冲场地，减少人体从外界带入的尘埃等污染物。

工作人员在此换上工作服、拖鞋，戴上口罩，才能进入无菌室和培养室。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌

二.蝴蝶兰组培工艺

1.组培流程确定

1.1.组培流程

外植体选择——消毒及灭菌——诱导形成原球茎——原球茎的增殖——生根及壮苗——驯化——移植

1.2.流程图

2.材料和方法

2.1 材料

3-4月龄蝴蝶兰幼苗

2.2 组培流程

2.2.1 外植体消毒。从蝴蝶兰植株上取下幼叶（以3-4月龄的植株最好），放在自来水下冲洗干净，然后放入烧杯内待用。在超净工作台上，将烧杯内的叶片用75%酒精消毒30s（秒），然后用无菌水清洗2-3遍，再用0.1%升汞溶液浸泡11min（分钟），最后用无菌水冲洗4-5遍待用。

2.2.2 培养条件。诱导培养基：MS+BA

3.0+NAA0.2。继代培养基:MS+BA2.0+NAA0.5。在上述培养基中均加入蔗糖20g/L（克/升），琼脂12g/L（克/升），椰汁200mL/L （毫升/升）。育苗培养基:1/2MS+IBA1.5+NAA0.05，并加入蔗糖20g/L（克/升），琼脂12g/L（克/升），活性炭5g/L（克/升），椰汁200mL/L（毫升/升）。培养温度25℃-28℃，每日光照10h-12h（小时），光照强度1600lx-2000lx（勒克斯）

2.2.3 原球茎的诱导。用无菌手术刀将叶片切成5mmx5mm见方的小块，平放或按极性接种在诱导培养基上，近轴面向上，每瓶不宜接种太多。

2.2.4 原球茎的增殖。幼叶切块在诱导培养基上培养1-2月后，从每个叶片组织块上产生1-7个不等的原球茎，此时，在无菌条件下,将原球茎取出切割成几小块，转入继代培养基中，进行增殖培养。培养一段时间（60天左右）后，再进行分割转移，通过这种方式，原球茎可成倍增长。

2.2.5生根及壮苗。将不需继代的原球茎转移到育苗培养基上分化出芽，并逐渐发育成丛生小植株。在无菌条件下，切开丛生小植株，将小植株转入育苗培养基上培养。不久，小植株生根，当小植株长到一定大小时，移入温室。切离丛生小植株时，基部未分化的原球茎及刚分化的小芽应接入诱导培养基中，作为种苗。一段时间后，将长大的种苗移出，种植，小苗及原球茎可继续增殖与分化。

2.2.6 炼苗驯化。当小植株长至4cm左右，叶3-4片，根2-3条时，即可移栽。将小植株带瓶移入温室2周左右，然后打开瓶塞炼苗3-5d（天），取出苗后，用水冲洗掉植株根部的培养基，将根部放于70%甲基托布津溶液中消毒4h（小时），药液浓度为1500倍。将苗吸干水分后阴晾1h（小时），然后定植于水苔育苗盘中。刚定植的植株应遮光50%左右，温度控制在18℃-28℃，湿度以80%-90%为宜，以后逐渐保持在70%左右。缓苗后（两周左右）逐步提高光照强度至6000lx-8000lx（勒克斯）。蝴蝶兰根部忌积水，喜通风和干燥，水分过多，易引起根系腐烂。刚出瓶的小苗应勤补水，中苗或大苗根据干湿程度浇水，一般7d(天)-10d（天）左右，基质变干，盆面发白时，宜浇水，浇水时要让整个植料湿透。