细菌对药物的敏感试验考点总结
细菌药物敏感试验实验报告
细菌药物敏感试验实验报告药物敏感性试验的基本原则1药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药：天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药。
天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。
部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。
常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。
实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。
2药敏试验测试的前提条件：实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。
标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。
临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。
错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。
3测试结果应准确：实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理体系。
质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。
建议保留菌株，以便复核。
具体的专业要求1标本类型临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。
标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。
在规范临床送检的前提下，实验室进行药敏试验和报告药敏结果时，应首先考虑标本的特殊性。
实际工作中需重点考虑的标本如下。
1．脑脊髓液：正常和疾病状态不能穿透血脑屏障的药物，常规不应报告。
报告审核时，对于分离自脑脊髓液的菌，下列药物不能报告：仅有口服剂型的抗菌药物、一、二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、头霉素类、克林霉素、大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。
2．尿液：有些药物如呋喃妥因，仅限于测试和报告尿分离株，其他标本的分离株，不应报告此药；尿道标本常规不应报告氯霉素。
药物敏感试验判断标准 mic
药物敏感试验判断标准 mic药物敏感性试验判断标准Mic是药物敏感性试验中常用的标准之一。
它代表着最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration），即能抑制菌株生长的最低浓度。
药物敏感性试验是评估细菌、真菌或其他微生物对某种抗生素或抗真菌药物的敏感性的常用方法之一，用于指导临床上的抗感染治疗。
本文将详细介绍Mic的定义、测定方法以及其在药物治疗中的意义。
一、Mic的定义Mic是指药物在试验条件下能够抑制细菌生长的最低浓度。
在药物敏感性试验中，通常使用微量稀释法来测定Mic。
微量稀释法是一种常用的半定量方法，通过逐渐稀释药物溶液来确定能够抑制菌株生长的最小药物浓度。
Mic的值越小，意味着细菌对药物的敏感性越高。
二、Mic的测定方法1. 罗氏法（Broth dilution method）：将不同浓度的药物加入含有培养基的试管中，接种细菌，培养一定时间后观察细菌生长情况。
通过观察菌落的形成与否来确定Mic。
2. 珠光法（E-test）：将含有药物梯度的试纸片放置在含有细菌的琼脂平板上，培养一定时间后观察试纸片上的菌落生长与否。
根据试纸片上药物浓度梯度的一侧出现菌落的最后一个点，结合标尺上的数值，确定Mic。
3. 剂量杯法（Cup method）：将不同浓度的药物加入含有琼脂基质的杯中，接种细菌，培养一定时间后观察细菌生长情况。
通过观察药物浓度对细菌生长的抑制效果来确定Mic。
以上三种Mic测定方法各有优缺点，临床上根据具体情况选择合适的方法进行药物敏感性试验。
三、Mic的临床意义Mic值是临床上选择合适药物进行治疗的重要指标之一。
根据Mic值的不同，通常将药物分为以下几个分类：1. 敏感：当Mic值较低时，说明细菌对药物敏感，拟合适的治疗药物。
2. 中介：当Mic值介于敏感和耐药之间时，表示细菌对药物的敏感性较差，治疗时需慎重考虑。
3. 耐药：当Mic值较高时，说明细菌对药物耐药，该药物对细菌已失去或极低的抑菌作用，应避免使用。
细菌药物敏感试验执行标准和典型报告解读
细菌药物敏感试验执行标准和典型报告解读1. 引言细菌药物敏感试验，也称细菌药物敏感性试验或细菌敏感度试验，是临床微生物学中的一项重要内容。
它通过对细菌感染的病人样本进行试验，评估不同抗生素对细菌的敏感性，以确定最佳的抗生素治疗方案。
本文将全面评估细菌药物敏感试验的执行标准和典型报告解读，帮助大家更深入地了解这一重要的临床实验。
2. 细菌药物敏感试验执行标准在进行细菌药物敏感试验时，有一系列执行标准的要求需要满足。
必须采集来自病人临床样本的细菌，并在无菌条件下进行培养。
培养后，需要对细菌进行纯化和鉴定，以确保获得的细菌纯种。
接下来，根据临床样本中的细菌培养液，制备不同抗生素的浓度梯度，利用扩散法或微量培养法进行敏感性试验。
试验中必须包括阳性和阴性对照，确保实验结果的准确性。
3. 典型报告解读细菌药物敏感试验的典型报告通常包括细菌菌株的鉴定信息、不同抗生素的敏感性结果以及解释说明。
在报告中，每种抗生素都会根据细菌对其的敏感性被划分为敏感、中介和耐药三个等级。
解释说明部分将说明每种抗生素的敏感性结果，并结合临床数据，提供建议的治疗方案。
通过典型报告的解读，临床医生可以更好地选择最有效的抗生素治疗方案，提高治疗效果。
4. 个人观点和理解细菌药物敏感试验是临床微生物学中至关重要的一环，对于临床治疗具有重要的指导意义。
在执行标准要求和报告解读中，需要严格遵守规范，确保实验结果的准确性和可靠性。
在个人看来，细菌药物敏感试验不仅需要有严格的技术操作，还需要理解临床背景和病人情况，结合临床实际制定治疗方案，才能更好地发挥其作用。
5. 总结和回顾细菌药物敏感试验的执行标准和典型报告解读对于临床治疗非常重要。
在执行标准中，关键是保证细菌培养的纯化和鉴定准确无误，以及抗生素敏感性试验的准确进行。
而在典型报告解读中，医生需要结合临床情况，选择最佳的抗生素治疗方案。
细菌药物敏感试验是临床微生物学中的一项重要内容，其准确性和可靠性直接关系到病人的治疗效果，因此需要高度重视。
第6章 细菌对抗菌药物敏感性与耐药性
★药敏试验的临床意义 3
甘 肃 医 学 院
第一节 临床常用抗菌药物 4
GANSU MEDICAL COLLEGE
一、β-内酰胺类
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作用机制
甘
肃
通过抑制细菌细胞壁的合成抑制和杀死细。细菌 医
学
细胞壁的合成是通过青霉素结合蛋白（PBP）催化完 院
成的。各种细菌都有青霉素结合蛋白，按分子量可
分为PBP1,PBP2,PBP3等，PBP1分子量最大。
青霉素结合蛋白-转糖基酶、转肽酶、D-羧肽酶、
内肽酶。
5
一、β-内酰胺类
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（一）青霉素类
甘
肃
青霉素类抗生素主要包括天然青霉素、耐青霉素 医
学
酶青霉素、广谱青霉素、青霉素+β-内酰胺酶抑制 院
剂 （二）头孢菌素类
学
院
A组：包括对特定菌群的常规试验并常规报告的药物；
B组：只在A组药物耐药、过敏、无效时选择性报告; C组：在A、B组药物过敏或耐药时选用；
U组：仅用于治疗泌尿道感染的药物。
18
一、药敏试验的抗菌药物选择
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药敏试验的折点遵照每年最新公布的CLSI标准进行。敏感
7
二、氨基糖苷类
GANSU MEDICAL COLLEGE
甘
按其来源分为：①由链霉菌属发酵滤液提取获 肃
医
得,有链霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴 学 院
龙霉素、新霉素；②由小单胞菌属发酵滤液中提取,
有庆大霉素、阿司米星；③半合成氨基糖苷类，有阿
米卡星、奈替米星、地贝卡星(dibecacin)等。氨基
实验抗菌药物敏感性试验(课件)
实验抗菌药物敏感性试验
15
联合药敏试验
实验抗菌药物敏感性试验
16
联合药敏试验
实验抗菌药物敏感性试验
17
实验抗菌药物敏感性试验
18
抗菌药物敏感试验的意义
• 可预测抗菌治疗的效果; • 指导抗菌药物的临床应用; • 监测细菌耐药性,分析耐药菌的变迁,掌握耐药菌感染
的流行病学,以控制和预防耐药菌感染的发生和流行。
实验抗菌药物敏感性试验
Dr.Feng
实验抗菌药物敏感性试验
1
药敏试验常用方法
1. 纸片扩散法 2. 稀释法 3. E试验 4 .联合药敏实验
实验抗菌药物敏感性试验
2
目的要求
• 了解：
• 1．稀释法、E-TEST的原理、方法 • 2．联合药敏试验的结果判读和临床意义
• 理解：
难点
• 纸片扩散法（K-B法）原理和注意事项
30ug
≤14
常规剂量的抗
15~17
≥18
抗菌药物对被 该抗菌药物在
庆大霉素
10ug 微生物药≤物1通2
测1菌3M~1IC4接近 ≥常15规给药剂量
环丙沙星
50ug
常达到的全身 浓度不能≤抑1制5 杀灭被测菌， 临床治疗无效
于血液和组织 中1可6达~2到0的水 平，高于正常 给药量进行治
≥时浓21达度到能的抑体制内或 杀灭被测菌
• 掌握：
重点
• 纸片扩散法（K-B法）的操作方法、结果的判读和临床 意义
实验抗菌药物敏感性试验
3
实验材料
菌株
大肠埃希菌
培养基
水解酪蛋白琼脂（MH琼脂）
纸片
环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素
药物敏感试验分解
稀释法测MIC确证
应注意磺胺类药物的结果阅读
培养基可能含有拮抗物如胸腺嘧啶、核苷 类物质，允许有轻微生长的薄菌苔
忽略20%或更低生长的薄菌苔，测量抑菌圈 直径较为明显的细菌生长界限
下列细菌均注意：肠杆科、不动、伯克、 葡萄、嗜血、肺链、弧菌属、脑膜炎奈瑟 菌
挤去，在琼脂表面均匀涂布3次，最后沿着 平板内缘涂抹一周 -室温或35度干燥5—10分钟 -将纸片紧贴于表面 -纸片间距20厘米，离平板内缘15厘米
如何阅读结果（纸片法）
工具：游标卡尺、尺子 光源：反射光、透射光 阅读：背衬不反光的黑色背景用肉眼观察，
也可用BIOMIC机器阅读
纸片法结果的正确阅读
好
• 不同种抗菌药物之间MIC无可比性 • 目前很多仪器报告的是检测折点，而不
是真正的MIC
与临床沟通中常见问题
5、培养阳性的细菌都需要用抗菌药 物治疗吗？
• 不是的 • 培养阳性感染，可能为污染（血培养），可能为
定植（痰培养）
• 任何结果必须结合临床情况进行评价（很重要） • 感染部位的清创、引流、换药比使用抗菌药物更加
6、有些药物不适用于单独使用，仅用 于联合用药，如利福平。
7、因为是体外药敏试验，有些药体外 试验敏感，可能临床治疗无效。
8、同一菌株可能出现亚种，导致连续 药敏结果不吻合。
细菌耐药概念
多重耐药（MDR）: 指细菌同时对三种以上结构
不同（作用机制不同）抗菌药物耐药，如头孢菌 素、喹诺酮类、氨基糖苷类；
泛耐药（ PDR）:细菌对本身敏感的所有药物耐
药； 超级细菌:并非科学概念，一般指PDR与部分MDR，
细菌药物敏感试验实验报告
药物敏感试验又称药敏。
目的是指导临床针对性使用抗生素，减少细菌耐药的产生。
使感染能够及时控制，做到有的放矢。
测定细菌在体外抗菌药物敏感性（以下称药敏试验）的试验方法很多。
绝大多数临床实验室以琼脂扩散法作为常规方法测定常见的快速生长的病原菌。
本文介绍的是标准纸片扩散法。
本文提出的一系列建议有助于药敏试验的标准化。
具体地叙述了现行推荐方法的操作步骤，及其适应性和局限性。
本文还重温了国际协作研究会（ics）的有关建议和食品药物管理局（fda）的有关规定，并采纳了其中的有关章节。
只根据是否出现抑菌环而不考虑其大小来判断细菌对抗菌药物敏感性的试验方法，结果是不准确的。
纸片扩散法试验必须遵循标准的方法学原理，并根据抑菌环与最低抑菌浓度的相关性，并结合临床上已知敏感或耐药菌株的状况进行标准化，结果才能可靠。
要得到可靠结果，必须严格地按照本文的方法进行操作。
美国临床实验室标准化委员会（nccls）下设的纸片扩散法药敏试验分委员会推荐的标准方法，以bauer等介绍的方法为基础，是目前叙述最完整的试验方法。
其中的解释标准是综合临床和实验室的数据发展而来，并得到证实。
要测定和报告给哪些药物，须与感染科医生、医院的药品委员会及感染控制委员会协商，然后由实验室制定最合适的方案。
表1和表1a列出了治疗各类细菌感染有效的药物，其体外药敏试验结果也有助于感染的控制及流行病学研究。
做药敏试验，应从分离平板上挑选各种疑为致病菌的单个菌落，同时做菌种鉴定。
不同菌种不可在同一平板上做混合细菌药敏试验。
一般避免用临床标本（如无菌体液和尿液）直接做药敏，除非临床上急需且革兰氏染色只见到单一菌种，但随后应再以标准方法重做。
对感染性质不同，标本中混有浑浊细菌或正常菌群的情况，其中的细菌也许与感染治疗关系不大，常不必做药敏，不然反会招致错误的引导。
抗菌药物的敏感试验
最 低 杀 菌 浓 度 （ minimal bactericidal concentration,MBC）： 某 抗 菌 药 物 能 杀 灭 99.9%以上测试菌时的最低药物浓度。
7. 质量控制 采用标准菌株：金黄色葡萄球ATCC25923，
大肠埃希菌ATCC25922，和铜绿假单胞菌
ATCC27853
2）直接纸片药敏法 由确证感染部位采集到的一些重要临
床标本直接涂布接种MH琼脂或5%羊血 MH琼脂，然后放置药敏纸片。不仅可 提早24h得出初步药敏结果供临床用药参 考，还有助于发现混合感染中的不同菌
（2）方法
菌液、平板接种等同纸片琼脂扩散 法,待琼脂平板完全干燥，用E试验加样 器或镊子将试条放在已接种细菌的平板 表面，试条全长应与琼脂平板紧密接触， 试条MIC刻度面朝上，浓度最大处靠平 板边缘。
采用NCCLS2002 AST执行标准推荐 孵育条件。
（3）结果判读：读取椭圆环与E试验试 条的交界点IC值。
(2) 方法 试管编号： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
抗生素： 1ml 2ml
(512µg/ml)
不加抗生素
MH肉汤 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml
对倍稀释： 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml1ml(弃去 ) 抗生素含量 256 128 64 32 16 8 4 2 1---
B.拮抗作用： 甲+乙＜甲单或乙单
细菌对甲药耐 药，对乙药敏 感，甲药对乙 药发生切割状 拮抗现象。
体外抗菌药物抑菌试验(亦称细菌对药物的敏感试验-简称药...
❖ 敏感(S)：表示细菌可被常规剂量的药物在体内达到 的浓度所抑制或杀灭。
❖ 中度敏感(MS)：表示细菌可被该药物大剂量的浓度 所抑制或在药物生理性浓集的部位被抑制。
只有少数药物可报告中度敏感，如氨苄青霉素测肠 球菌。
❖ 中介度(1)：是为防止因技术因素失控导致结果误差 而设置的“缓冲域”因其临床意义难以确定，故不 应向临床医师报告。而应重做稀释法根据MIC结果 做出判断。
优缺点
❖ 稀释法是直接定量地检测抗菌药物在体 外对病原菌的抑制或杀灭浓度，有利于 临床根据MIC、药物代谢等拟定合理的 治疗方案，是目前厌氧菌的最佳测定方 法，琼脂稀释法还易于发现污染或耐药 突变菌。稀释法是新药开发，体外药敏 试验常用的经典参照标准，但操作相对 比较烦琐。
❖ 标准菌株的抑菌圈应落在表中所示的预期范 围内。如果超出该范围，应视为失控，须及 时查找原因，予以纠正。
❖ 培养基的质量、药敏纸片的质量、接种菌量、 试验操作质量、孵育条件、抑菌圈测量工具 的精度、质控菌株的药敏特性等均能影响结 果的准确性。
（二）肉汤稀释法 及琼脂稀释法
❖ 原理 是用水解酪蛋白肉汤(MH)或水解酪 蛋白琼脂（MHA）培养基作为稀释剂。 按《美国委员会临床实验室标准》作分 步倍比稀释抗菌药物，定量加入被检菌 株。经培养后观察抗菌药物的最小抑菌 浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。
❖ 根据本国国情，卫生部临床检验中心还制订了关于 临床微生物实验室室内质控要求。临床具体工作须 参照遵守。
❖ 原理 是将定量抗菌药物纸片贴在涂有细菌的 琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散， 其浓度逐渐递减，使纸片周围的敏感细菌受 到抑制生长，形成抑菌圈，测量抑菌圈的直 径来判定细菌对药物的敏感程度。此法简单 易行、价格便宜、药物选择灵活，适用对生 长快的细菌进行药敏试验。
细菌对抗菌药物的敏感介绍
细菌对抗菌药物的敏感介绍
最常用的药敏试验是WHO推荐的Kirby-Bauer纸片扩散法(K-B法)。
该法将药敏试验抑菌环大小分为四个等级，即：敏感、中度敏感、中介度、耐药。
由于中介度介于敏感和耐药之间，所以不予报告，故化验单上只报告敏感、中度敏感或耐药。
此外药敏试验还可采用琼脂稀释法、液体稀释法和微量稀释法，以定量测定抗生素对细菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。
通常化验单报告MIC。
临床意义：
1．敏感：表示被测菌株所引起的感染可以用常用剂量的该抗菌药物治愈，禁忌症除外。
2．中度敏感：表示被测菌株可以通过提高剂量被抑制或在药物被生理性浓集的部位被抑制，如β-内酰胺类药物。
3．中介度：这一范围只是抑菌环直径介于敏感和耐药之间的“缓冲域”，以防止由微小的技术因素失控所导致的较大的结果解释错误。
抑菌环落入中介度范围，意义不明确，如果没有其他可替代的药物，应重复做药敏试验，或以稀释法测定MIC。
4．耐药：被测菌不能被常用剂量所达到组织内或血液中的抗生素所抑制。
5．最低抑菌浓度：抑制被测菌的最低药物浓度。
6．最低杀菌浓度：抗菌药物杀灭细菌所需的最低浓度。
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细菌对药物的敏感试验考点总结第一节临床常用抗菌药物简介抗菌药物的种类及作用机制：1.青霉素类青霉素与青霉素结合蛋白（PBP）结合，抑制细菌细胞壁合成。
（1）天然青霉素种类：青霉素G、青霉素V。
作用于不产青霉素酶G＋球菌、G-球菌、厌氧菌。
（2）耐青霉素酶青霉素种类：甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、氯唑西林、双氯西林、氟氯西林。
作用于产青霉素酶的葡萄球菌。
（3）广谱青霉素1）氨基组青霉素：氨苄西林、阿莫西林。
作用于青霉素敏感的细菌、大部分大肠埃希菌、奇异变形杆菌、流感嗜血杆菌等G-杆菌。
2）羧基组青霉素：羧苄西林、替卡西林。
作用于产β-内酰胺酶肠杆菌科细菌和假单胞菌。
3）脲基组青霉素：美洛西林、阿洛西林、哌拉西林。
作用于产β-内酰胺酶肠杆菌科细菌和假单胞菌。
2.头孢菌素类头孢菌素与青霉素结合蛋白结合，发挥抑菌和杀菌效果。
G＋球菌：一代＞二代＞三代G－杆菌：三代＞二代＞一代第四代头孢菌素作用几乎相同，具有抗假单胞菌的作用。
（1）第一代头孢菌素：有头孢噻啶、头孢噻吩、头孢氨苄、头孢唑林、头孢拉定、头孢吡硫、头孢羟氨苄。
（2）第二代头孢菌素：有头孢孟多、头孢呋辛、头孢尼西、头孢雷特、头孢克洛、头孢丙烯、氯碳头孢。
（3）第三代头孢菌素：有头孢噻肟、头孢曲松、头孢唑肟、头孢哌酮、头孢克肟、头孢布烯、头孢地尼、头孢泊肟酯。
（4）第四代头孢菌素：有头孢匹罗、头孢噻利、头孢吡肟和头孢吡普。
3.其他β-内酰胺类单环类：氨曲南和卡芦莫南。
对G－作用强，如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌。
对G＋和厌氧菌无作用。
拉氧头孢类：抗菌谱广，杀菌作用强，对产β-内酰胺的G－菌有很强的抗菌作用，对产酶的金黄色葡萄球菌也具有一定的抗菌活性。
头孢西丁、头孢替坦、头孢美唑。
对G＋菌有较好的抗菌活性，对厌氧菌有高度抗菌活性，但对非发酵菌无效。
碳青霉素类：目前抗菌谱最广的抗菌药物，具有快速杀菌作用。
嗜麦芽窄食单胞菌、耐甲氧西林葡萄球菌、尿肠球菌和某些脆弱类杆菌耐药。
亚胺培南、美罗培南、比阿培南、帕尼培南、多利培南。
β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂：与β-内酰胺类抗菌药物联用能增强后者的抗菌活性。
1）克拉维酸：对产β-内酰胺酶（2a、2b、2c、2d、2e型）的细菌有抑菌活性。
2）舒巴坦：常与氨苄西林或头孢哌酮联合应用于肠道感染；对不动杆菌属的作用强。
3）他唑巴坦：抑酶作用范围广，几乎包括所有β-内酰胺酶。
酶抑制作用优于克拉维酸和舒巴坦。
4）复合制剂种类：加酶抑制剂的复合制剂用于产β-内酰胺酶的革兰阴性和阳性细菌。
包括氨苄西林-舒巴坦、替卡西林-克拉维酸、阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林-他唑巴坦及头孢哌酮-舒巴坦。
4.氨基苷类作用机制：①依靠离子的吸附作用，吸附在菌体表面，造成膜的损伤。
②和细菌核糖体30S小亚基发生不可逆结合，抑制mRNA的转录和蛋白质的合成，造成遗传密码的错读，产生无意义的蛋白质。
种类：①链霉菌属：如链霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龙霉素、新霉素；②小单胞菌属：如庆大霉素、福提霉素；③半合成氨基苷类：阿米卡星、奈替米星、地贝卡星等，氨基苷类抗菌药物对需氧G－杆菌有较强的抗菌活性，对G＋球菌有一定的活性。
5.喹诺酮类作用机制：①通过外膜孔蛋白和磷脂渗透进入细菌细胞。
②作用于DNA旋转酶，干扰细菌DNA复制、修复和重组。
（1）第一代：为窄谱抗菌药物，对G＋球菌无作用；主要作用于大肠埃希菌，且迅速出现耐药，较少应用于临床。
（2）第二代：对G－和G＋细菌均有作用；比较这类药的抗菌活性强度依次为环丙沙星、氧氟沙星、罗美沙星、氟罗沙星、培氟沙星、诺氟沙星。
（3）第三代：对G＋菌作用高于第二代的4～8倍，对厌氧菌亦有作用；司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。
6.大环内酯类作用特点和机制：①可逆结合细菌核糖体50S大亚基的23S单位，抑制细菌蛋白质合成和肽链延伸；②肺部浓度较血清浓度高；③新一代大环内酯类具有免疫调节功能，能增强单核-巨噬细胞吞噬功能。
国内常用的有红霉素、吉他霉素、麦迪霉素、乙酰螺旋霉素。
新一代大环内酯类有克拉霉素、罗红霉素、地红霉素、氟红霉素、阿奇霉素和乙酰麦迪霉素。
对流感嗜血杆菌、军团菌、支原体、衣原体等具有强大的抗菌作用。
第二节细菌对药物的敏感试验概念：指在体外测定药物杀死细菌能力的试验。
药敏试验主要用于：①帮助临床医师选择效果最佳的药物进行感染性疾病的治疗，以避免由于抗菌药物使用不当造成的许多不良后果；②进行流行病学调查；③药敏试验结果还可以用来做某些细菌的鉴定；④指导有关部门制定流行耐药菌的防治措施。
一、扩散法（K-B法）目前常用的方法，是一种半定量的方法。
美国NCCLS纸片扩散法敏感试验分委会所推荐的标准方法是以Bauer-Kirby建立的K-B法，是目前公认的标准实验方法。
（一）原理抑菌圈的大小可以反映待检菌对测定药物的敏感程度，与该药对待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。
（二）材料1.培养基：水解酪蛋白（M-H）琼脂，pH7.2，琼脂厚度为4mm。
2.抗菌药物纸片：选择直径6.35mm，吸水量20μl的专用药敏纸片。
3.接种菌液的准备：形态相同的菌落4～5个，接种于3～5ml水解酪蛋白（M-H）肉汤中，35℃培养2～8h。
用生理盐水或肉汤校正菌液浓度至0.5麦氏比浊标准（1.5×108/ml的含菌量），校正后的菌液应在15min内接种。
（三）实验步骤以无菌棉拭蘸取已制备好的菌液，均匀涂布接种于M-H琼脂表面。
置室温干燥3～5min后用无菌镊子或贴纸片机将含药纸片贴于含菌琼脂表面。
各纸片中心距离不小于24mm，纸片距平板内缘应大于15mm。
平板经室温放置15min再倒放于35℃培养箱中培养16～18小时后阅读结果。
（四）结果判读抑菌圈的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。
每批试验都应做标准菌株对照，只有对照菌株的敏感度符合标准，实验结果才是可靠的。
试验结果解释分为三级：敏感（S）：表示常规剂量的测定药物在体内所达到的浓度能抑制或杀灭待测菌。
中介度（I）：不是敏感性的度量，作为“缓冲域”，其临床意义是不确定的，故不应作临床报告。
耐药（R）：表示常规剂量的测定药物在体内达到有效浓度时不能抑制检测菌生长。
（五）影响结果的因素1.培养基培养基的成分、酸碱度、琼脂含量等。
2.抗菌药物纸片纸片含药量是影响抑菌圈大小的主要因素，保存条件以低温干燥为佳。
3.菌量加大菌量可使抑菌圈减小，相反可使抑菌圈扩大。
4.操作质量（1）培养基的厚度。
（2）接种细菌后应在室温放置片刻。
（3）培养温度为35℃为宜。
堆放试验平板不超过两个，使其受热均匀。
（4）测量抑菌量应仔细、精确，从生长刺激带测量。
（六）质量控制1.质控菌株采用标准菌株是进行质控的主要措施。
金黄色葡萄球菌ATCC25923，大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853，粪肠球菌ATCC29212或ATCC33186。
2.抑菌圈质控范围每种抗菌药物对四个质控菌株的抑菌圈允许范围，为95%的可信限，即实验室日间质控得到的抑菌圈直径在连续20个数值中，仅允许有一个超出这个范围。
二、稀释法体外定量测定抗菌药物抑制待测菌生长活性的方法。
根据稀释培养基的不同，分为肉汤稀释法和琼脂稀释法。
琼脂稀释法是细菌药敏试验的金标准。
稀释法所测得的某抗菌药物抑制待测菌生长的最低浓度为最低（或最小）抑菌浓度（MIC），稀释法也可测定最小杀菌浓度（MBC）。
（一）肉汤稀释法1.原理以水解酪蛋白（M-H）液体培养基将抗菌药作不同浓度的稀释，然后接种待测菌，定量测定抗菌药物抑制该菌的最低浓度（MIC）或杀死该菌的最低（或最小）杀菌浓度（MBC）。
2.材料（1）抗菌药物原液的配制：溶剂一般为蒸馏水、磷酸盐缓冲液或乙醇等，稀释剂多为蒸馏水。
原液以过滤法除菌，小量分装使用。
大部分抗菌药物原液在-20℃以下可保存三个月，而在4℃以下只能保存一周。
（2）培养基：一般细菌采用M-H液体培养基。
（3）接种菌液的制备：在已分纯的待测菌平板上挑取4～5个形态相同的菌落接种于3～5ml M-H液体培养基内，35℃培养4～6h；校正菌液浓度，使其相当于0.5麦氏比浊标准，再用M-H液体培养基按1：200稀释后备用。
稀释后的菌液应在15min内接种。
3.试验步骤（1）试管10～15支。
（2）各管倍比稀释抗菌药物，含量依次为512、256、128、64…0.03μg/ml。
另设培养液对照，检测菌生长对照和质控菌生长对照管各一支，每管1ml。
（3）将已校正浓度的待测菌悬液依次加入含药管内，每管0.05ml，混匀。
各试管置35℃培养后观察结果。
结果判读：凡无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该待测菌最低抑菌浓度（MIC）。
再以0.01ml容量接种环取肉眼观察认为无菌生长的试管移种一环于血琼脂平板作次代培养，经35℃培养过夜后观察最低药物浓度能杀死99.9%原始种入的细菌即为该菌的最低杀菌浓度（MBC）。
影响结果的因素：（1）培养基：培养基的pH、渗透压及电解质。
（2）抗菌药物：抗菌药物必须采用标准粉剂。
配好的药物原液应在有效期内使用。
（3）结果观察时间质量控制：金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、粪肠球菌ATCC29212、铜绿假单胞菌ATCC27853。
超过或低于预期值范围一个稀释度以上，不应向临床发出报告，应检查出现差错的原因以及标准菌株被污染和变异的可能性。
（二）琼脂稀释法将待测菌接种于含不同浓度药物的琼脂平板上，经培养后观察菌落的生长情况，以能抑制细菌生长的最低药物浓度为该菌的最低抑菌浓度。
（三）E-test稀释法与扩散法相结合的一种方法，直接定量试验。
把含有干燥的稳定的药物塑料条贴在琼脂平板的表面，经培养在一定范围抑制细菌生成，形成抑菌环。
三、杀菌试验1.最低杀菌浓度最低杀菌浓度是某抗菌药物能杀灭99.9%以上的测试菌量的最低药物浓度。
测定方法就是稀释法MIC测定的基础上通过再转种、再孵育，最终测得某种抗菌药物对被测菌的MBC。
2.时间-杀菌曲线主要用于评价一种抗菌药物对测试菌的杀菌速率，以及两种或两种以上抗菌药物对测试菌的联合杀菌活性。
操作时培养基和测试菌的准备等与测定MIC的肉汤稀释法相同，设定不同培养时间进行细菌计数。
最后将各时间点测得的平均菌落计数在半对数坐标纸上绘制杀菌曲线。
四、体外联合药物敏感试验（一）联合抑菌试验1.试管棋盘（方阵）稀释法根据A药和B药的MIC确定药物联合测定的稀释度。
一般选择6～8个稀释度左右，每种药的最高浓度为其MIC的2倍。
根据测定结果按下列公式计算部分抑菌浓度指数（FIC）：FIC=A药联合时的MIC/A药单测的MIC＋B药联合时的MIC/B药单测的MIC判断标准：FIC指数＜0.5协同作用；FIC指数0.5～1相加作用。