5-羟甲基糠醛(5-HMF)的检测方法
5-羟甲基糠醛的分子动力学直径
5-羟甲基糠醛的分子动力学直径1. 了解5-羟甲基糠醛5-羟甲基糠醛（5-Hydroxymethylfurfural，简称5-HMF）是一种重要的生物质转化产物，常用于食品、医药和化工等领域。
其分子结构中包括5个碳原子、6个氢原子和3个氧原子，其分子式为C6H6O3。
在科研和工业应用中，我们常常需要了解5-HMF的分子动力学直径，即分子在运动状态下所占据的空间大小。
2. 分子动力学直径的重要性分子动力学直径是描述分子在空间中运动状态的重要参数，它能够帮助我们更好地理解分子的空间结构和运动特性。
在化学反应、材料设计等方面，分子动力学直径的了解对于预测和解释分子行为非常关键。
3. 5-羟甲基糠醛的分子动力学直径测定方法目前，常用的测定5-HMF分子动力学直径的方法包括计算化学（量子化学）方法和实验测定方法。
计算化学方法通过理论计算分子的结构和能量，进而获得分子的动力学直径；实验测定方法则通过物理实验手段来直接测量分子的动力学直径。
这两种方法各有优劣，通常需要相互结合以获得更加准确和全面的结果。
4. 分子动力学直径对5-羟甲基糠醛的意义对5-HMF分子动力学直径的研究和了解，不仅有助于我们深入理解其在化学反应和材料性能方面的应用，还能够为其在食品和药品方面的安全性评估提供重要参考。
通过比较不同条件下5-HMF的分子动力学直径，还能够为其生产和应用过程中的工艺优化提供重要依据。
5. 个人观点和总结5-羟甲基糠醛作为一种重要的生物质转化产物，其分子动力学直径的研究对于相关领域的发展具有重要意义。
我们应该致力于深入研究其分子动力学直径的影响因素和测定方法，并利用这些研究成果来推动5-HMF在食品、医药和化工等领域的应用和开发。
通过以上的文章撰写，希望能够帮助你更全面、深入地了解5-羟甲基糠醛的分子动力学直径，并进一步拓展相关主题的知识。
期待你能够通过这篇文章，对5-HMF及其分子动力学直径有更加深刻的理解和认识。
高效液相色谱法测定盐酸氨溴索葡萄糖注射液中5-HMF含量
高效液相色谱法测定盐酸氨溴索葡萄糖注射液中5-HMF含量朱万政
【期刊名称】《武警医学院学报》
【年(卷),期】2012(21)5
【摘要】【目的】建立高效液相色谱法测定盐酸氨溴索葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的含量。
【方法】采用CAPCELL PAK C18色谱柱（250 mm×4.6
mm,5μm）,流动相：甲醇-0.05%磷酸溶液（10：100）,流速1.0 ml/min,检测波长284 nm。
【结果】5-HMF在0.295~3.54μg/ml浓度范围内线性较好
（r=0.9998）,平均加样回收率为99.65%（n=6）,RSD为0.46%。
【结论】本方法准确,重复性好,可用于盐酸氨溴索葡萄糖注射液中的5-HMF的含量控制。
【总页数】2页(P336-337)
【关键词】5-HMF;盐酸氨溴索葡萄糖注射液;高效液相色谱法
【作者】朱万政
【作者单位】武警甘肃总队医院药剂科
【正文语种】中文
【中图分类】R91
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定复方乳酸钠葡萄糖注射液中乳酸钠的含量 [J], 张志英;
2.高效液相色谱法测定莪术油葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量 [J], 陈勇;蒋慧莲;唐登峰;陈碧莲;郑成
3.高效液相色谱法测定替硝唑葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量 [J], 曾令高
4.高效液相色谱法测定莪术油葡萄糖注射液中莪术醇的含量 [J], 田兰;王丽萍;刘红莉
5.高效液相色谱法测定注射用奥沙利铂5％葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的含量[J], 陈学文; 王宁; 徐立伽
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HPLC测定6种蜂蜜中5-羟甲基糠醛的含量
HPLC测定6种蜂蜜中5-羟甲基糠醛的含量
龙光明;裘璐;马丽;郝小燕
【期刊名称】《数理医药学杂志》
【年(卷),期】2012(25)6
【摘要】目的:建立蜂蜜中5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量测定方法.方法:利用高效液相色谱法测定6种蜂蜜中5-HMF的含量.结果:5-HMF在48.64～291.84 ng 范围内呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为100.02%,RSD为1.69 %(n=6);6种蜂蜜中5-HMF的平均含量在 0.0328 ~ 0.0398 mg·g-1.结论:所建立的方法简便,重复性好,可用于检测蜂蜜中5-HMF的含量.
【总页数】3页(P643-645)
【作者】龙光明;裘璐;马丽;郝小燕
【作者单位】贵阳医学院药学院,贵阳550004;贵阳医学院药学院,贵阳550004;贵阳医学院药学院,贵阳550004;贵阳医学院药学院,贵阳550004
【正文语种】中文
【中图分类】R971
【相关文献】
1.HPLC法测定注射用双黄连（冻干）中5-羟甲基糠醛含量 [J], 栾兰;任嘉鹏;王钢力;林瑞超;李先加
2.HPLC法测定五味子不同炮制品中柠檬酸、L-苹果酸和5-羟甲基糠醛的含量 [J], 许金华;苏联麟;王巧晗;毛春芹;王丹丹
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5.中药炮制辅料蜂蜜中5-羟甲基糠醛的含量测定 [J], 钟银燕;毛淑杰;顾雪竹;朱景宁;马志静;李先端
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黑曲霉发酵液中5-HMF含量的测定
黑曲霉发酵液中5-HMF含量的测定作者：陈家祥徐策张素熊德欣代园凤郑泽轩陈雪李祝来源：《山地农业生物学报》2018年第06期摘;要：本实验建立了测定黑曲霉（Aspergillus niger ）发酵液中5-HMF 含量的紫外分光光度法。
对5-HMF 标准溶液进行全波长扫描，确定最大吸收波长为测定波长，并绘制5-HMF 浓度与吸光度之间的标准曲线;用50%乙醇将原发酵液稀释50倍，在测定波长处测定吸光度，对应标准曲线，计算发酵液中的5-HMF 含量。
结果表明，5-HMF 最大吸收波长为283 nm ，R2为0.9995，线性关系良好，发酵液5-HMF平均浓度为171.743 μg/mL，平均回收率105.86%，精密度RSD为0.13%，重复性RSD为0.40%，仪器检出限为0.007 μg/mL。
该方法简便，快速，成本低，准确度较高，为今后研究黑曲霉中5-HMF含量提供了一个可借鉴的方法。
关键词：黑曲霉;5-HMF;紫外分光光度法中图分类号：Q939.96文献标识码：A文章编号：1008-0457（2018）06-0087-05;国际DOI编码：10.15958/ki.sdnyswxb.2018.06.0155-羟甲基糠醛（5-hydroxymethylfurfural，5-HMF），又名5-羟甲基-2-糠醛[1]，由葡萄糖或果糖脱水生成[2]，其分子中含有一个呋喃环，醛基和羟基，性质非常活泼，可通过氧化、氢化和缩合等反应制备多种衍生物，是一种良好的化学平台物质。
5-羟甲基糠醛可用于生产燃料和反应中间体[3]，同时还有抗癌细胞增值活性，降血糖等药理作用[4-5]，近年我国5-羟甲基糠醛产品行业销售收入呈指数增长[6]，应用前景广泛。
黑曲霉为曲霉属的一个常见种[7]，可生产柠檬酸[8]，糖化酶[9]等，也可作为宿主进行外源表达，广泛用于食品原料、药物、酶的生产[10-11]，是发酵工业中的重要菌种。
5-HMF高效液相色谱检测方法的建立及功能糖与不同产地党参、何首乌和熟地中5-HMF含量分析
5-HMF高效液相色谱检测方法的建立及功能糖与不同产地党参、何首乌和熟地中5-HMF含量分析崔宇擎;张华伟;王喜生;史万玉;包永占【期刊名称】《中兽医医药杂志》【年(卷),期】2024(43)1【摘要】本试验旨在建立5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)的高效液相色谱检测方法,检测不同产地党参、制首乌、熟地黄以及5个不同批次功能糖中5-HMF含量。
采用C18(4.6 mm×250.0 mm,5μm)色谱柱分离,流动相为甲醇-水(8∶92),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL,紫外检测器,检测波长为280 nm。
经方法学考察,显示该方法线性关系良好;精密度试验测定峰面积RSD平均值为1.438%;重复性试验显示HPLC重复性良好;稳定性试验峰面积RSD 范围为1.338%~7.307%;加标回收率显示良好。
中药及功能糖5-HMF含量检测结果显示,党参、制首乌和熟地黄相比,熟地黄中5-HMF含量较高,党参中5-HMF含量较低,其中又以河北产熟地黄中5-HMF含量最高。
不同批次功能糖中5-HMF含量无显著性差异,但其含量是河北产熟地黄的90~100倍。
通过现代化技术,用功能糖成功复制了中药中的活性成分5-HMF,降低了其生产成本,具有良好的发展前景。
【总页数】5页(P13-17)【作者】崔宇擎;张华伟;王喜生;史万玉;包永占【作者单位】河北农业大学中兽医学院;安海维(北京)农牧科技有限公司【正文语种】中文【中图分类】S853.7【相关文献】1.巫溪大宁党参不同的炮制方法对5-HMF的含量影响2.替硝唑葡萄糖注射液中5-HMF检测方法的建立3.高效液相色谱法测定盐酸氨溴索葡萄糖注射液中5-HMF 含量4.不同工艺对葡萄糖注射液中5-HMF含量的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
UPLC测定水果制品中5-羟甲基糠醛的含量
5- 羟 甲 基 糠 醛（ 德 国 Dr.Ehrenstorfer， 批 号：
作者简介：郑容（1987—），女，硕士，工程师；研究方向为食品。 210 / 现代食品 XIANDAll Rights Reserved.
分析检测 Analysis and Testing
doi:10.16736/41-1434/ts.2020.17.065
UPLC 测定水果制品中 5- 羟甲基糠醛的含量
Determination of 5-HMF in Fruit Products by UPLC Method
◎ 郑 容，黄文平，程 燕，朱德文 （重庆市万州食品药品检验所，重庆 404000） Zheng Rong, Huang Wenping, Cheng Yan, Zhu Dewen (Chongqing Wanzhou Institute for Food and Drug Control, Chongqing 404000, China)
1.4.1 色谱条件 色谱柱：Waters BEH C18 （1.7 μm，2.1 mm×
100 mm），流动相条件为等度洗脱甲醇 - 水（8 ∶ 92） 溶液，流速为 0.2 mL·min-1，柱温为 30℃，进样量为 1μL。 1.4.2 标准溶液的配制
5-羟甲基糠醛、糠醛、乙酰呋喃、呋喃酮、5-甲基糠醛的高效液相检测方法
食品研究与开发F ood Research And Development圆园19年9月第40卷第18期DOI :10.12161/j.issn.1005-6521.2019.18.029作者简介:刘真(1994—),男(汉),硕士研究生,研究方面:食品加工与贮藏技术。
*通信作者:朱丽霞(1975—),女(汉),教授,研究方向:食品加工与贮藏技术。
5-羟甲基糠醛、糠醛、乙酰呋喃、呋喃酮、5-甲基糠醛的高效液相检测方法刘真，朱丽霞*(塔里木大学生命科学学院南疆特色农产品深加工兵团重点实验室,新疆阿拉尔843300)摘要：在高效液相色谱检测呋喃酮方法的基础上,建立多呋喃物质(5-羟甲基糠醛、糠醛、乙酰呋喃、呋喃酮、5-甲基糠醛)的检测方法。
色谱柱为Ultimate XB-C 18柱(250mm ×4.6mm ,5μm ),柱温为35℃,进样量10μL ,波长285nm ,流速0.8mL/min 。
脱洗梯度条件:0~2min ,甲醇-0.5%甲酸(15∶85,体积比);2min ~24min ,甲醇-0.5%甲酸(50∶50,体积比);24min ~27min ,甲醇-0.5%甲酸(100∶0,体积比);27min ~29min ,甲醇-0.5%甲酸(100∶0,体积比);29min ~33min ,甲醇-0.5%甲酸(15∶85,体积比)。
检测5-羟甲基糠醛、糠醛、呋喃酮、乙酰呋喃、5-甲基糠醛的回收率分别为97.8%~99.6%、95.4%~97.3%、96.3%~97.2%、95.3%~98.3%、94.3%~97.9%,变异系数分别为3.3%、4.3%、0.89%、5.3%、1.4%。
适合检测5-羟甲基糠醛、糠醛、呋喃酮、乙酰呋喃、5-甲基糠醛5种呋喃物质。
关键词：高效液相;呋喃物质;脱洗梯度;检测;回收率High Performance Liquid Phase Method for Determination of Pentahydroxymethylfurfural ,Furfural ,Acetylfuran ,Furanone and PentamethylfurfuralLIU Zhen ,ZHU Li-xia *(Production Construction Group Key Laboratory of Special Agricultural Products Further Processing in Southern Xinjiang ,College of Life Sciences ,Tarim University ,Alar 843300,Xinjiang ,China )Abstract ：Based on the high performance liquid phase method for the determination of furanone ，a method forthe determination of polyfuran （pentahydroxymethylfurfural ，furfural ，acetylfuran ，furanone ，pentamethylfu-rfural ）was established.The column was an Ultimate XB-C 18column （250mm ×4.6mm ，5μm ）with a column temperature of 35℃，an injection volume of 10μL ，a wavelength of 285nm ，and a flow rate of 0.8mL/min.Dewashing gradient conditions ：0-2min ，methanol-0.5%formic acid （15∶85，volume ratio ）；2min-24min ，methanol -0.5%formic acid （50∶50，volume ratio ）；24min-27min ，methanol -0.5%formic acid （100∶0，volume ratio ）；27min-29min ，methanol -0.5%formic acid （100∶0，volume ratio ）；29min-33min ，methanol -0.5%formic acid （15∶85，volume ratio ）.The recovery rates of pentahydroxymethylfurfural ，furfural ，furanone ，acetylfuran and pentamethylfurfural were measured ：97.8%-99.6%，95.4%-97.3%，96.3%-97.2%，95.3%-98.3%，94.3%-97.9%，The coefficient of variation was 3.3%，4.3%，0.89%，5.3%，1.4%.The five furan substances （pentahydroxydroxymethyl -furfural ，furfural ，acetylfuran ，furanone ，pentamethylfurfural ）were suitable for detection.Key words ：high performance liquid phase ；furan substance ；dewashing gradient ；detection ；coefficient ofvariation引文格式:刘真,朱丽霞.5-羟甲基糠醛、糠醛、乙酰呋喃、呋喃酮、5-甲基糠醛的高效液相检测方法[J].食品研究与开发,2019,40(18):166-170LIU Zhen ,ZHU Lixia.High Performance Liquid Phase Method for Determination of Pentahydroxymethylfurfural ,Furfural ,Acetylfuran ,Furanone and Pentamethylfurfural[J].Food Research and Development ,2019,40(18):166-170检测分析1665-羟甲基糠醛、糠醛、乙酰呋喃、呋喃酮、5-甲基糠醛是含氧的呋喃类化合物,作为重要的风味化合物,具有持久的焦糖[1]和水果香味,可使香气丰满、柔和、清润、协调、绵长,广泛存在于食品,姚万欣等[2]研究表明尤其在热加工类食物体系中。
蜂蜜中羟甲基糠醛的测定化学分析方法
蜂蜜中羟甲基糠醛的测定糖及糖产品分光光度法A仪器及试剂A.a分光光度计UV，测定284和336nm处的吸光度A值。
A.bCarrez溶液Ⅰ用水溶解15gK4Fe(CN)6·3H2O，并定容至100ml。
arrez溶液Ⅱ用水溶解30gZn(Ac)2·2H2O，并定容至100ml。
A.dNaHSO3溶液0.20%。
用水溶解0.20gNaHSO3，并稀释至100ml。
必要时参照液可按1+1稀释。
每天新配制。
B测定准确称量约5g蜂蜜到一个小烧杯中，用25ml水分次转移至50ml容量瓶中。
加0.50mlCarrez溶液Ⅰ，混匀，加0.50mlCarrez溶液Ⅱ，混匀，然后再用水稀释至刻度。
可加几滴乙醇以阻止起泡。
过滤，弃去最初10ml滤液。
$$向两个18×150mm的试管中分别加5ml滤液。
向其中一个试管〔样品〕中加5.0ml水，向另一个试管〔参照〕中加5.0mlNaHSO3溶液。
混匀，以参照做对照测样品在284和336nm处的吸光度A值〔1cm液槽〕。
若A>0.6，用水稀释样品，用0.1%的NaHSO3溶液稀释参照样，稀释程度应保持相同，并对稀释引起A值的变化进行校正。
$$羟甲基糠醛〔HMF〕(mg)/100g蜂蜜＝(A^^284^^－A^^336^^)×14.97×5/样品(g)$$因子＝14.97＝(126/16.830)(1000/10)(100/5)$$式中126为HMF的分子量；16.830＝HMF在284nm处的摩尔吸光度；1000＝mg/g；10＝厘升/L；100＝报告蜂蜜的克数；5＝样品重量。
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羟甲基糠醛的检测方法
（IFU）
1 适用范围
本标准适用于果汁加工中半成品、成品的羟甲基糠醛的测定。
2 仪器及试剂
2.1仪器
2.1.1 722S分光光度计：检测波长550nm；
2.1.2 比色管：10ml带有塞子的比色管。
2.2试剂
2.2.1 巴比妥酸溶液：500mg巴比妥酸在温水浴中溶解，冷却后在容量瓶中定容至100ml。
最好在冰箱中保存，保存期为一个月。
2.2.2 对甲苯胺溶液：10.0g的对甲苯胺用10.0ml的冰醋酸溶解，转移至100ml 装有50ml异丙醇的容量瓶中，最后用异丙醇定容至刻度。
最好在冰箱中用棕色瓶保存，保存期为一个月。
3. 检测步骤
3.1浓缩苹果清汁稀释至11.5°Brix，两根25ml比色管中各移取2ml，用新制备的蒸馏水定容至10ml并充分的混合。
在定容后的溶液中加入5ml对甲苯胺，摇匀。
其中一根加入1.0ml的水（空白），另一根试管中加入1.0ml的巴比妥酸溶液，摇匀。
3.2 以空白作为对照，用分光光度计在550nm下用1cm比色皿检测并读取吸光度值。
巴比妥酸添加以后，吸光度通常很快的下降，反应在3-4分钟达到最大值，用最大值计算。
3.3 实验的准备
空白检测
果汁（11.5°Brix） 2.0ml 2.0ml
对甲苯胺 5.0ml 5.0ml
巴比妥酸 - 1.0ml
水 1.0ml -
4.计算
HMF= （ P*V）/（ v*E）
P标准曲线上读取的HMFmg/L
V原被稀释溶液的体积
v被用于显色反应检测的稀释部分的体积
E原始果汁的体积
参考文献：本标准依据IFU检测HMF的方法编制
棒曲霉素、羟甲基糠醛含量的检测方法
(液相色谱法)
1. 适用范围
本标准适用于果汁加工中半成品、成品的棒曲霉素、羟甲基糠醛的测定。
2. 仪器及试剂
除另有规定外,试剂均为分析纯,水为二次蒸馏水。
所用流动相需用0.45μm 水系滤膜过滤。
2.1试剂
2.1.1冰醋酸（分析纯）；
2.1.2乙酸乙酯（分析纯）;
2.1.3乙腈：色谱纯一级品含量>99.9%；
2.1.4棒曲霉素标准品：纯度>99%；
2.1.5醋酸溶液：c（CH3COOH）= 0.2mol/L；
2.1.6醋酸钠溶液：c（CH3COONa）= 0.2mol/L；
2.1.7醋酸盐缓冲溶液（pH=4.00）：醋酸水溶液:醋酸钠水溶液=164:36（v/v）；
2.1.8无水碳酸钠溶液：c（Na
2CO
3
）=14g/L ；
2.1.9流动相: 乙腈：水=10：90（v/v）；
2.2仪器
2.2.1高效液相色谱仪：型号LC2010A、配有紫外检测器；
2.2.2色谱柱：250mm×4.6mm（id）ODS反相不锈钢柱；
2.2.3旋转蒸发器：型号RE52－A
2.2.4 分析检测条件：
流动相：乙腈：水=10：90（v/v）；
流速： 1.0ml/min；
柱温：35℃；
检测波长： 276nm；
进样体积： 10μl；保留时间：羟甲基糠醛5.7min；棒曲霉素7.2min。
上述操作参数是典型的，可根据仪器情况对给定的参数作适当的调整，以期获得最佳效果。
3. 检验步骤
3.1试样溶液的制备
称取试样（4.80―5.20）g，精确至0.01g，置于125ml的心形瓶中，用约25ml蒸溜水稀释,然后加入30ml乙酸乙酯振荡5min，静置分层。
将水层放入另一个心形瓶中，用30ml乙酸乙酯重复萃取两次,弃去水层，合并三次乙酸乙酯萃取液于另一心形瓶中，再加入10ml碳酸钠水溶液(2.1.8)立即振荡，静置分层(此净化操作应在2min内完成)。
再用20ml乙酸乙酯提取碳酸钠水层一次。
弃去碳酸钠水层，合并乙酸乙酯提取液，并加入9滴冰醋酸(2.1.1) ，全部转移至旋转蒸发器内,于（40―45）℃下，蒸至剩余溶液约为（1―2）ml时，卸下心形瓶，在40℃下用氮气吹干，用1ml醋酸盐缓冲溶液(2.1.7)溶解残留物，用带有0.45μm水系滤膜的针头式过滤器滤入样品瓶，作为试样溶液。
如果试样溶液不能及时测试时，应先存放在冰箱中冷藏，但不得超过48小时。
3.2 测定
在上述色谱操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标准溶液，计算各针响应值，待相邻两针的相对响应值变化小于3%，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。
3.3空白试验
除不加样品外,按上述测定步骤进行平行操作。
1.数据分析
将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中的棒曲霉素的峰面积之比进行平均。
按式（1）计算样品中棒曲霉素含量：
(1)
A—样品中棒曲霉素峰面积平均值；
A
S
—标准工作液中棒曲霉素峰面积平均值；
C—标准工作液中棒曲霉素的浓度, mg/L;
V—样液最终定容体积,
m—所用样品重量,g
注：计算结果应扣除空白值。
以上结果为浓汁棒曲霉素含量,结果报告形式为μg/Kg(11.50Brix),可通过下面公式进行换算
X------浓汁中棒曲霉素含量，mg/ Kg；X1-------清汁中棒曲霉素含量，μg/Kg；
B-------样品的糖度
(0Brix)
此方法的检测下限为10ppb。
参考文献: SN 0589-1996
附件
1、标样溶液的配制：
标准储备液（大约10mg/L）：准确称量10mg的棒曲霉素标样于100ml的容量瓶中，用醋酸盐缓冲液溶解，然后用醋酸盐缓冲液定容。
用醋酸盐缓冲液将25ml 棒曲霉素储备液稀释至250毫升。
当新配置储备液和每次使用时（配好的储备液
有效期为1个月，1个月后需重新标定其浓度），应按照下列步骤校正标准溶液。
记录测定的吸光度和棒曲霉素浓度。
当测量出的棒曲霉素含量小于原棒曲霉素含量的90%时，该棒曲霉素标准储备液作废。
将棒曲霉素标准储备液存放于冰箱中。
避光储存于0℃以下。
工作标准液（大约10mg/L）：吸取浓度为10mg/L的标准储备液1.0ml于10ml的容量瓶中，用流动相稀释至刻度，另外配置500ppb,1000ppb,1500ppb,2000ppb 等系列溶液,做标准曲线.此标准曲线正常情况下1月更换一次，当色谱条件发生显著变化时标准曲线需随时更换。
2、标准液的校正：
以水做参比，在276nm下用1cm的比色皿测量工作标准液中棒曲霉素的吸光度。
工作标准液中棒曲霉素的浓度按下列公式计算：
棒曲霉素（毫克/升）=（A x MW x 1000 x CF）/ε
式中MW为154，ε为14600, CF 为分光光度计的校正因子。
分光光度计的校准：
用重铬酸钾溶液在350nm下的吸光度校准分光光度计：溶解78.0mg（准确到0.0001mg）的重铬酸钾于0.018N的硫酸(2000:1)中, 并用0.018N的硫酸定容至1升, 计算重铬酸钾溶液中重铬酸钾的毫摩尔浓度(C) mmo1/L。
C=[mg重铬酸钾]/ 294.2 ( 重铬酸钾的分子量=294.2)
在1厘米的比色皿在350nm下，以0.018N的硫酸溶液做空白测量重铬酸钾溶液的的吸光度(A)，按照下式计算摩尔吸光系数ε:
ε = (A x 1000)/C
按下式计算分光光度计的校正因子(CF):
CF=3160/ε
式中3160假设为重铬酸钾ε的真实值。
CF需周期性检查，但不需要每次校正标准液时计算校正因子。
（前面得出的CF值为0.954）。