组织切片制作步骤
组织病理切片的制作流程(精品)
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 组织病理切片的制作流程(精品)组织病理切片的制作流程 1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：(1) 材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。
(2) 组织块的大小：所取组织块较理想的体积为 2. 0cm2. 0cm0. 3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取 0. 1～0. 2cm 即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取 0. 3 ～0. 5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3) 勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。
1 / 17夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4) 规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。
(5) 选好组织块的切面: 根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。
(6) 保持材料的清洁: 组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7) 保持组织的原有形态: 新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。
组织病理切片制作流程(完整版)
组织病理切片制作流程(完整版)组织病理切片是一种常规病理学检查方法，用来对病理组织进行形态学观察和病理诊断。
制作一张优质的组织病理切片需要严格按照一定的流程进行。
组织标本采集组织标本的采集是组织病理学检查的第一步。
组织标本的质量直接影响到切片的质量。
因此，采集前需要确保标本来源正确，并与患者信息相符。
对于手术标本，需要注意保护血管、神经、肌肉等结构，避免对组织结构造成不必要的损害。
对于活检标本，需要选择有代表性的组织，避免损伤重要结构和血管。
组织处理组织标本采集后，需要进行组织处理。
对于手术标本，可以直接收取。
对于活检标本，需要迅速固定，避免组织发生变性和坏死。
常用的固定剂包括10%中性缓冲福尔马林、乙醇、甲醛等，选择固定剂需要根据样本的性质和检测需要来确定。
样本包裹固定后的组织标本需要进行包裹以便于切片操作。
包裹材料通常选择的是聚苯乙烯、增韧剂聚苯乙烯等塑料材料，包裹材料必须能够完全包裹组织标本，并保证固定。
切片制备组织标本包裹后，需要进行切片制备。
切片机是用于切割病理标本的设备，其切割面的厚度一般在4-6μm之间。
在切片制备中，需要根据标本要求来选择显微镜下的切面。
切片后，标本必须尽快贴在玻片上进行染色。
组织染色组织染色是组织病理学检测的重要环节。
目前常用的染色包括常规的苏木素-伊红染色和免疫组化染色等。
苏木素-伊红染色是一种常规染色方法，可以显示出组织的基本结构和染色体。
免疫组化染色可以显示出特定的蛋白质和胚间充质细胞等。
组织标签和包装染色后的组织切片需要进行标签和包装。
标签需要包含姓名、性别、年龄和检测日期等基本信息。
组织切片还需要包装防止刮损和振动。
结果解释组织病理切片制备完成后，需要进行结果解释。
结果解释需要根据不同的病理学检测目的进行，一般是通过显微镜进行观察和诊断。
有时候，还需要通过综合分析临床病史和症状等信息来确定诊断结论。
总结组织病理切片制备流程需要严格按照一定的步骤来进行，包括组织标本采集、组织处理、样本包裹、切片制备、组织染色、组织标签和包装以及结果解释。
组织切片制作
一、取 材 取材应注意事项： 取材应注意事项：
1 切取组织应根据需要观察的部位进行选择。 切取组织应根据需要观察的部位进行选择。 所取组织应包括脏器或组织的重要结构或全层， 所取组织应包括脏器或组织的重要结构或全层，同时考虑 好切面方向。 好切面方向。 病理组织除切取病变部位外， 病理组织除切取病变部位外，还要切取病变和正常组织交 界区域，以利观察分析。 界区域，以利观察分析。 2 切取的组织必须新鲜。 切取的组织必须新鲜。 取材后立即投入固定液中，否则组织会收缩变形， 取材后立即投入固定液中，否则组织会收缩变形，发生自 溶现象。 溶现象。
1
固定液的用量 应充足，一般为组织块体积的 倍左右 倍左右。 应充足，一般为组织块体积的10倍左右。
2
固定时间 应根据组织的种类、性质、大小，固定液的种类、性质、 应根据组织的种类、性质、大小，固定液的种类、性质、 种类 渗透力的强弱而定 而定。 渗透力的强弱而定。
一般组织， 左右， 如：一般组织，以10％福尔马林固定 ％福尔马林固定24h左右，波音 左右 波音(Bouin)氏固定液 氏固定液 12至24h，卡诺氏 固定液1h内 至 ，卡诺氏(Carnoy)固定液 内。 固定液
酒精固定液： 酒精固定液： 无水乙醇（纯酒精） 无水乙醇（纯酒精）85ml（或95ml） （ ） 15ml（或5ml） 蒸馏水 （ ） 优点：有固定兼脱水作用，固定后可直接放入 ％－ ％－95 优点：有固定兼脱水作用，固定后可直接放入85％－ 酒精中脱水。对糖原、 ％酒精中脱水。对糖原、纤维蛋白和弹性纤维等固定效 果好。 果好。 缺点：但固定速度较慢，易使组织变脆。一般先用 ％ 缺点：但固定速度较慢，易使组织变脆。一般先用85％ 酒精固定数小时再放入95％酒精继续固定。 酒精固定数小时再放入 ％酒精继续固定。 除此之外，还有重铬酸钾、苦味酸、升汞、醋酸、 除此之外，还有重铬酸钾、苦味酸、升汞、醋酸、丙酮 重铬酸钾 等单纯固定液。 等单纯固定液。
组织切片流程
组织切片流程常规石蜡包埋社团切片（常规切片）制备的操作流程及要求㈠社团块依序进行：①水洗，②脱水，③透明，④浸蜡，⑤包埋和⑥切片。
㈡社团切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为易燃、有毒物，必须专人管理，2m以内不患上有有焰的火，局部环境应有良好的透风和救火设施。
㈢常规切片的手工操作（步骤次序和各步骤的持续时间）1．水洗：用水流冲洗已经固定的社团块30min。
2．脱水（常温下）（1）乙醇－甲醛（AF）液固定60~120min（2）80%乙醇60~120min（3）95%乙醇Ⅰ60~120min（4）95%乙醇Ⅱ60~120min（5）无水乙醇Ⅰ60~120min（6）无水乙醇Ⅱ60~120min（7）无水乙醇Ⅲ60min［注意事项］①未经充分固定的社团不患上进入脱水程序。
②用于脱水的试剂容积应为社团块总体积的5～10倍以上。
③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐级移进脱水。
④脱水试剂应及时过滤、更换（500ml乙醇可用于500个社团块脱水；加入硫酸铜的无水乙醇变蓝时，提示需要更换）。
⑤较大社团块的脱水时间长于较小者，应将两者分隔进行脱水。
⑥社团置于无水乙醇内的时间不宜过长（以免硬化）。
⑦丙酮脱水性能强，会使社团块过缩、硬脆，不宜用以替换无水乙醇。
3．透明（1）二甲苯Ⅰ20min（2）二甲苯Ⅱ20min（3）二甲苯Ⅲ20min［注意事项］①二甲苯的容积应为社团块总体积的5～10倍以上。
②社团块在二甲苯中透明的时间不宜过长（以防社团硬、脆），并依不同品类社团及其大小而异；社团出现棕黄或暗红色透明即可。
③二甲苯应及时过滤、更换。
④社团经二甲苯程度适当处理后不显透明时，常提示该社团的固定或脱水不充分，应查找原因并妥帖处理。
4．浸蜡（1）石蜡Ⅰ（45~50℃）60min（2）石蜡Ⅱ（56~58℃）60min（3）石蜡Ⅲ（56~58℃）60min［注意事项］①熔化石蜡必须有专人负责，必须在熔蜡箱内或水浴中（70℃）进行，不患上用有焰的火加温。
组织切片制作方法
组织切片制作方法
组织切片是制备病理学标本的主要方法之一，以下是其制作步骤：
1. 收集组织样本，并在一定时间内将其放入固定液中进行固定。
2. 将组织样本从水中逐渐转移到酒精中进行脱水。
3. 将样本置于包埋剂中，使其逐渐转移到蜡块中。
4. 用切片机将蜡块切割成极薄的切片，并用染色剂染色，以便在显微镜下进行观察和分析。
5. 将切片封入载玻片中。
此外，为了确保切片的质量，需要注意以下几点：
1. 载玻片应干净无油，如有云雾斑点，则不能使用。
2. 切片制作过程中，应将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上，使蜡块的切面与刀口成平行方向。
刀的倾斜度通常为15℃，转动轮转推进器，调节切片厚度为6μm，切成厚度均匀的切片。
3. 切片贴附后，放在空气中稍晾干，然后进行烤片。
烤片的温度以蜡溶解为准，也可以放置60℃烘箱内烘烤过夜。
血块组织、皮肤组织须及时烤片，但脑组织、脂肪组织待完全晾干后才能进行，这样可防止产生气泡而影响染色。
以上信息仅供参考，建议咨询专业人士获取更准确的信息。
制作肺组织切片的方法有
制作肺组织切片的方法有制作肺组织切片是进行组织学研究和病理诊断的重要步骤之一。
下面我将详细介绍常见的肺组织切片制作方法。
1. 采集样本：首先，需要采集一块含有肺组织的标本，可以通过手术、活检或尸检获得。
在采集之前，应该确保标本的质量和完整性，避免损坏。
2. 保存标本：为了保持组织的完整性和避免变形，标本在采集后应尽快固定。
常用的固定剂有10%中性缓冲福尔马林、2%戊醛或4%多聚甲醛，可以根据实验的需要选择适当的固定剂。
3. 预处理标本：将固定的标本进行去水化处理，目的是将水分逐步取代为蜡质，并使组织获取足够的刚性。
去水化一般是通过经过不同浓度的酒精梯度进行的。
4. 浸泡标本：将去水化的标本用蜡进行浸泡，使组织与蜡充分接触，蜡液逐渐取代组织中的酒精。
蜡浸渍的时间通常为4-6小时，以确保组织充分浸泡。
5. 包埋标本：在将标本浸泡于蜡液之后，需要将标本包埋在蜡中，以便进行切片。
首先，需要将标本置于包埋模具中，并用熔化的蜡填充模具，将组织完全包覆。
然后，待蜡凝固后，可以将标本取出。
6. 准备切片：使用旋转式切片机，将蜡固化的标本切割成薄片，通常厚度为4-6微米。
切片时，要注意刀片的选择和切割速度，以确保切片的质量和完整性。
7. 切片的去蜡：切片后，需要将切片进行去蜡处理，以将切片上的蜡去除。
去蜡可以使用戊醚或苯：醇（2:1）溶液进行，通常需将切片浸泡10-30分钟，直至蜡块完全溶解。
8. 去水处理：去蜡后，需要对切片进行去水处理，以将去蜡剂彻底去除。
去水可以使用浓度递增的乙醇进行，一般是从70%、80%、95%到绝对乙醇。
9. 染色处理：去水后，将切片进行染色处理。
常用的染色方法包括血液学染色法、免疫组织化学染色法和特殊染色法等，可以根据需要选择适当的染色方法。
10. 制作载玻片：完成染色后，将切片放在载玻片上，通过加热将切片与载玻片固定在一起。
加热后，可以用透明胶带固定切片和载玻片的边缘。
11. 封闭载玻片：最后，将固定在一起的切片和载玻片进行封闭处理，以确保切片的保存和长期使用。
病理学中的组织切片技术
病理学中的组织切片技术病理学是医学领域中非常重要的一个学科，研究人体各个器官和组织的疾病变化及其发生、发展机制。
而组织切片技术是病理学中的基础操作，是为了观察和诊断疾病而必要的步骤之一。
本文将详细介绍组织切片技术的相关知识和方法。
一、组织切片技术的概述组织切片技术是指将人体组织切割成薄片并染色，以便于病理学家观察。
这项技术已经存在了很长时间，并且随着技术的发展和改进，已经成为了诊断和治疗疾病的重要手段之一。
组织切片技术可以被广泛应用于疾病的研究、诊断和治疗中。
二、组织切片技术的步骤组织切片技术的主要步骤包括取样、固定、脱水、包埋、切片和染色。
下面将对这些步骤进行详细的介绍：1. 取样组织切片的第一步是取样，即从人体组织中取出一小块，以便于后续的操作。
取样的方法根据不同的情况会有所不同，比如在手术中取样，就需要根据病变的部位和特点来选择取样点，而在活检中取样，就需要根据患者的症状和体征来确定取样点。
2. 固定取样后，需要用一种方法把组织中的细胞和结构固定住，以便于后续处理。
目前常用的固定剂是福尔马林，它可以迅速把组织中的蛋白质交联，使其不易变性，从而保持组织形态的完整。
3. 脱水在固定后，需要将组织逐渐从水中转移到酒精、乙醇等脱水剂中，以便于把组织中的水去除，使其硬化。
这是组织切片的关键步骤之一，如果脱水不彻底，切出的组织切片会变形或破损。
4. 包埋将脱水的组织置于熔蜡中，使其被包覆在蜡中。
这么做可以保持组织的形态，并使其更易于切割。
5. 切片蜡包埋后，组织需要被切成薄片。
切片可以使用手工或自动切片机完成，手工切片需要技巧和经验，而自动切片机可以更好地保证切片的厚度和质量。
6. 染色切片完成后，需要对组织进行染色，以便于病理学家对其进行观察。
目前常用的染色剂有血液学染色剂、组织学染色剂以及免疫组化染色剂等。
三、组织切片技术的应用组织切片技术在病理学中有广泛的应用，其中包括：1. 诊断和治疗疾病组织切片技术是病理学家进行诊断和治疗疾病的重要手段之一。
组织切片制作步骤
如何做出一张合格的组织切片？一般要先取材→固定→透明→包埋→切片，最后进行染色组化等操作。
本文着重叙述取材以后如何进行包埋和切片。
包埋可分为OCT包埋（冰冻切片）与石蜡包埋。
.冰冻切片对于组织的抗原性保留比较好，但是形态保留比较差，一般用来做原位杂交ISH，免疫荧光IF。
冰冻切片较厚一般厚度8~15μm。
冰冻包埋步骤较为简洁，固定之后，直接用镊子将样品放置到样品托上，挤压OCT完全包裹组织，放入冷冻机待OCT凝固即可。
凝固后就可以直接切片。
如果不能及时切片，用锡箔纸包装好，放入-80℃存放。
.石蜡切片，一般用来做HE染色或者免疫组织化学IHC。
厚度更薄，一般为4um，工艺较为复杂并且制作样本的好坏取决于不同组织的种类和组成，更加依赖制作者的经验，需要在实验过程中不断优化才能得到最佳的实验条件。
下面是石蜡包埋和切片的具体步骤：一、实验材料动物组织，4%多聚甲醛（PFA），PBS，ddH2O，二甲苯，梯度乙醇，石蜡，石蜡包埋机。
二、实验步骤1、取材：针对各组织部位规范化取新鲜组织，并用刀片单向切割成约3-4mm大小组织块，不要超过5mm。
2、固定：将切好的组织块放入4%多聚甲醛（PFA）中固定，以组织块与4%多聚甲醛体积比1：7为宜。
PFA最好现用现配，一般在4度固定24~48h即可，固定时间因组织而异。
冰冻切片可以直接用丙酮固定。
其他固定液比如缓冲福尔马林PBS配的福尔马林含有K+和Na+，PH=7.4。
固定的原理是采用蛋白质凝固剂，使细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构、位置和除水以外的物质的过程。
固定的目的是为了防止组织细胞自溶与腐败，防止细胞内的酶对蛋白质的分解作用，使细胞内的各种成分如蛋白质、脂肪、碳水化合物、酶类转变为不溶性物质，以保持原有的结构和生活时相仿。
关于固定液的选择可以参考这篇文章[1]。
3、洗去PFA：固定完毕后，流水冲洗3次，每次5分钟。
4、脱水透明：此步骤应根据不同组织设置合适时间，基本流程如下脱水：30%乙醇→50%乙醇→70%乙醇（关键步骤：可当日2H也可过夜）→95%乙醇1→95%乙醇2→无水乙醇根据不同组织大小和类型调整脱水时间，对于小鼠肝组织95%乙醇控制在30min-1H，100%乙醇5min-30min。
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：组织病理学是一门研究疾病的科学，通过对组织和细胞的形态结构进行分析，可以帮助医生做出正确的诊断和治疗方案。
而组织病理切片是组织病理学的重要步骤之一，通过切割组织标本并染色，可以观察组织和细胞的形态结构，进而帮助医生做出诊断。
组织病理切片的步骤是一个繁琐而精细的过程，需要经过多个环节的处理才能得到准确的结果。
下面我们就来了解一下组织病理切片的具体步骤。
1. 标本获取：组织病理学的切片首先需要获得病理标本，这通常通过组织活检或手术取材来完成。
医生会根据患者的病情和需要进行相应的标本获取。
2. 组织固定：标本获取后，需要立即将组织标本放入10%的甲醛或其他固定剂中进行固定，以保持组织形态的完整性。
固定后的组织标本可以长期保存，并且能够在病理切片的过程中保持组织的形态结构。
3. 组织处理：固定后的组织标本需要进行脱水、清洁和浸蜡等处理，以使组织标本透明并且易于切割。
这一步通常需要用到甲醇和乙醇等有机溶剂，以及蜡浸渍处理。
4. 组织包埋：处理完的组织标本需要放入蜡液中进行包埋，以便于切割。
在包埋过程中，需要正确定位组织标本，并使其固定在蜡块中。
5. 组织切割：包埋后的组织标本需要用微切片机切成薄片，厚度通常在3-5微米左右。
切片时需要保持切割的准确性和统一性，以便后续的染色和观察。
6. 组织染色：切割后的组织标本需要进行染色，以显示组织和细胞的形态结构。
常用的染色方法包括赖氏染色、简单染色和特异性染色等。
7. 组织固定：染色后的组织切片需要进行固定，以保持染色的效果。
通常用乙醇和甲醇进行脱水和抗褪色处理。
8. 组织观察：固定后的组织切片可以放入显微镜下进行观察，医生可以通过观察组织和细胞的形态结构来做出诊断。
组织病理切片是一项非常重要的组织病理学技术，通过对组织标本的切割和染色，可以帮助医生做出准确的诊断，并为治疗提供参考。
希望通过以上介绍，您对组织病理切片的步骤有更深入的了解。
组织病理切片制作流程(完整版)
组织病理切片的制作流程1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。
为此可将组织展平，以尽可能维持原形。
2．固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
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组织切片制作步骤
组织病理切片的制作过程
组织取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→组织包埋→组织切片→展片附贴→切片脱蜡→染色→脱水→染片透明→封固。
一、取材
切取组织块大小，以1.5×1.5×0.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。
切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定
固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后，应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。
因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90毫升配成。
三、冲洗
固定后的组织块，应将固定液洗去。
一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色
四、脱水
经过固定的组织，冲洗后要进行脱水。
脱水的目的在于将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，为石蜡等其他包埋剂浸入组织创造条件。
五、透明
透明的目的是将组织内的酒精用矿物油或植物油置换出来，并溶解石蜡，帮助石蜡浸透组织。
由于经过透明剂处理的组织块用肉眼观察呈透明状，故称这一过程为透明。
六、浸蜡
浸蜡是指组织经过透明作用以后，放入溶化的石蜡中浸渗，使石蜡浸入组织块中，冷却后，才能进行切片。
七、包埋
包埋就是将已浸渗好的组织包埋于浸渗剂中。
根据需要，包埋的方法常有石蜡包埋法和火棉胶包埋法。
石蜡包埋法：
八、组织切片
不同的切片制备方法，其切片方法也有较大差别，组织切片法包括石蜡切片法、冰冻切片法、火棉胶切片法、石蜡包埋半薄切片法、树脂包埋薄切片法和大组织石蜡切片法等。
常用的切片工具包括组织切片机、切片刀和自动磨刀仪器等。
九、苏木精－伊红染色方法
苏木精-伊红染色方法，简称HE染色方法，是生物学和医学的
细胞与组织学最广泛应用的染色方法。
在病理学实验室中称为常规染色方法。
病理细胞和组织学的诊断，教学和研究都是用HE染色方法观察正常和病变组织的形态结构。