大肠菌群检测方法

一.检验范围

本标准适用于出口食品及其原料。

二.设备和材料

1.超净工作台：琼脂平板在工作台上暴露15min,每平板不得超过15个菌落。

2.恒温培养箱：36±1℃。

3.恒温水浴箱：45±1℃。

4.吸管：1mL、10mL，具0.1mL刻度。

5.稀释瓶：300 mL三角锥形瓶。

6.显微镜。

7.试管：150x150，18 x 180mm

三.培养基和试剂

1.月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）

2.煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）

3.8.5‰生理盐水

四.样品制备（以上述平板菌落制备的样品为测定大肠菌群的样品匀液）

五.大肠菌群的测定

1.大肠菌群MPN值的测定

（1）对每个样品，选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。1：10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。

（2）将接种管置于36±1℃培养48±2h。

（3）观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性；如有产气者，则进一步作证实试验。

2. 大肠菌群的证实试验

（1）将所有产气管用直径为3mm的接种环移种到煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中。

（2）置BGLB肉汤管于36±1℃培养48±2h。

（3）记录所有BGLB肉汤管的产气管数。

（4）结果报告：按BGLB肉汤管产气管数，查MPN表报告每克（毫升）样品大肠菌群的MPN值。

注：1.本表采用3个稀释度1ml（g），0.1ml（g），0.01ml（g），每稀释度3管。

2.表内所列检样量如改用10 ml（g），1ml（g），0.1ml（g）时，表内数字应

相应降低10倍；如改用0.1ml（g），0.01ml（g），0.001ml（g）时，表内数字应相应增加10倍；其余可类推。