气相色谱液相色谱归一法操作

气相、液相色谱仪里常说的面积归一法、内标法、外标法等分别是什么意思？

面积归一化法,以总面积为100%,计算纯度多用;

外标法,需单独用标准品作成一标准曲线,用于分析供试品;

内标法,除标准品外,还需引入一种合适的内标物,以标准品与内标物响应值的比

值作标准曲线,求解供试品与内标物响应值的比值所对应的供试品的量.

气相色谱准归一化法或相对归一化法以及该方法的应用条件

定量测量时，可根据供试品的具体情况采用峰面积法或峰高法，测定杂质含量时

须采用峰面积法。

1、内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量

(1)按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和内标物质，分别配成溶液，

精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量注入仪器，记录色

谱图。测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子：

As／Cs

校正因子（f）＝———————

AR／CR

式中 As—内标物质的峰面积或峰高； AR—对照品的峰面积或峰高；

Cs—内标物质的浓度； CR—对照品的浓度。

再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试

品中待测成分（或其杂质）和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算含量：

Ax

含量（C x）＝f×———————

As内／Cs内

式中 Ax—供试品（或其杂质）峰面积或峰高； C x—供试品（或其杂质）的

浓度；

As内—内标物质的峰面积或峰高； Cs内—内标物质的浓度；

f—较正因子

当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的供试品溶液，使用同一浓度

的内标物质溶液时，则配制内标物质溶液不必精密称（量）取。

(2) 内标物质的选择

① 内标物质应是样品中部含有的组分，否则会使峰重叠而无法准确测量内标物

质的峰面积。

② 内标物质的保留时间应与待测成分接近，并达到完全分离，即分离度R>1.5。

③ 内标物质应是纯度符合要求的化合物，若非纯品，无干扰峰也可使用，已知

含量的较蠢物质也可使用，但须扣除内标物质的重量。

2、外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量

按各品种项下的规定，精密称(量)取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取

一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品待测成分的峰面积（或峰

高）。按下式计算

含量： Ax

含量（C x）＝CR—————

AR 由于微量注射器不易精确控制进样量，当采用外标法测定供试品中某杂质或主成

分含量时，以定量或或自动进样器进样为好。

3、加校正因子的主成分自身对照法

4、不加校正因子的主成分自身对照法

5、面积归一化法

由于峰面积归一化法测定误差大，因此，本法通常只能用于粗略考察供试品中的杂质含量。除另有规定外，一般不宜用于微量杂质的检查。方法是测量各杂质峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积占总峰面积的百分率。

实验十气相色谱归一化定量分析

一、实验目的

1、进一步掌握气相色谱仪的操作要点

2、了解气相色谱各种定量方法的优缺点

3、进一步熟练掌握根据保留值，用已知物对照定性的分析方法

4、掌握用归一化法测定混合物中各组分的含量

二、实验原理

气相色谱的定量分析：峰面积百分比法、归一化法、内标法和外标法等。峰面积百分比法适用于分析响应因子十分接近的组分的含量，要求样品中所有组分均出峰。归一化法定量准确，但它不仅要求样品中所有组分均出峰，而且要求具备所有组分的标准品，以便于测定校正因子。内标法是精密度最高的色谱定量方法，但要选择一个或几个合适的内标物并不总是易事，而且在分析样品前必须将内标物加入样品中。外标法简便易行，定量精密度相对较低，而且对操作条件的重现性要求较严。本实验采用归一化法。

定量分析的依据：被测组分的质量与其色谱峰面积成正比。即

峰面积A的测量：A＝1.06hW1/2；f i为比例常数，是定量校正因子，一般色谱手册中提供有许多物质的相对校正因子，可直接使用。

定量分析的步骤：

第一步，先进行定性分析：化合物在一定的色谱操作条件下，每种物质都有一确定的保留值，故作为定性分析的依据；在相同的色谱条件下对已知样品和待测试样进行色谱分析，分别测量各组分峰的保留值，若某组分峰与已知样品相同，则可认为二者是同一物质。从而确定各个色谱峰代表的组分。

第二步，归一化法测定含量：若试样中含有n个组分，且各组分均能洗出色谱峰，则其中

某个组分i的质量分数为W i可按照下式计算：

归一化法的优点是简便、准确，定量结果与进样量无关，操作条件对结果影响较小；缺点是试样中所有组分必须全部出峰，某些不需要定量的组分也要测出其校正因子和峰面积。

三、仪器和试剂

1、仪器：GC-9790气相色谱仪（温岭福立分析仪器有限公司）；FID；毛细管柱，微量进样器

2、试剂：己烷，庚烷，辛烷，壬烷

四、实验步骤

1、气相色谱仪的基本操作流程

（1）开启：a、开启载气N2钢瓶的阀门；

b、将气体净化器打到“开”的位置；

c、打开色谱仪的电源；

d、打开色谱工作站；

（2）实验条件如下：柱温100℃，汽化室温度：150℃，检测器温度：180℃；

N2流速：45mL/min；H2 40mL/min；空气：450mL/min；纸速：10cm/min

（3）待检测器FID温度达到的时候，开启H2钢瓶的阀门及打开空气源的电源，点燃FID；（4）运行程序一次并用丙酮进样清洗色谱柱；

（5）进样，运行；

（6）结束时，再用丙酮进样清洗色谱柱，设置程序。辅助I：50℃；column：50℃；FID：50℃。

先关闭氢气、空气源。等到温度降至该设置温度时，方可关闭色谱仪电源，最后关闭载气阀门。

2、混合物的分析

（1）纯样保留时间的测定

分别用微量注射器移取纯样（己烷到壬烷）溶液0.2μL，依次进样分析，分别测定出各色谱峰的保留时间t R。

（2）混合物试液的分析

用微量注射器移取0.2μL混合物试液进行分析，连续记录各组分色谱峰的保留时间，记录各色谱峰的峰面积。

五、结果处理

1、将混合物试液各组分色谱峰的调整保留时间与标准样品进行对照，对各色谱峰所代表的组分

作出定性判断。

2、根据峰面积和校正因子，用归一化法计算混合物试液中各组分的质量分数。各组分的f i'值