动物细胞培养和核移植技术
人教版选修三生物课件：2.2.1动物细胞培养和核移植
有机物：糖、氨基酸、促生长因子
(2)营养
动物血清、血浆：P补46充旁培栏养题液及中小没有知完识全搞清
楚的补成充分合成培养基中所缺乏的营养物质及激素等。
36.5±0.5℃
细胞代谢
7.2~7.4
培养液的PH7
5.应用: 连线表示动物细胞培养的应用及实例
可根据变异细胞占细胞总数的比 例来判断毒性的大小。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动 物进行了100%的复制吗？为什么？
不是。克隆动物的DNA绝大部分来自供体细胞核，但还有少 量DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞的细胞质。此外， 生物的性状还受环境的影响。
17Biblioteka 思考题1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操 理由：______________________________ 作过程的不同点？ 胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性较容易。
5胚)体胎细细胞胞是核分移化使植程技度细术低得，胞到恢的复克从其隆全牛瓶能从性生壁较殖容胰方上易式。蛋上脱看白属落于酶下来，便于分装后继续培养。
2、克隆动物遗传物质的来源？
10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。
归纳：克隆动物的基因型、性别、主要性状、染色体组成均与供核个体相同。
10~50 5)体细胞核移植技术得到的克隆牛从生殖方式上看属于
2.相关概念: (1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞_贴__附__在__瓶__壁__上。 (2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_表__面__相__互__接__触__时, 细胞_停__止__分__裂__增__殖__的现象。 (3)原代培养:指动物组织消化后的_初__次__培__养__。 (4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现_接__触__抑__制__后,需要重新用 _胰__蛋__白__酶__等处理,然后分瓶继续培养,让细胞_继__续__增__殖__的培 养过程。
动物细胞培养和核移植技术
吗？为什么？受体内
妊娠、分娩 ◆遗传物质 基本相同
体细体胞细核胞移核植移的植原的理过：程动
物细胞核具有全能性 受精
供体细胞 （供核）
细胞
体细胞
卵
培养
注入
细胞 重组
卵巢卵母细 胞（MⅡ中期：
供质）
去
去核卵 融合 细胞
2.原理：动物细胞核具有全能性
胚胎细胞分化程 度低，恢复其全 能性相对容易
动物体细胞分化 程度高，恢复其 全能性十分困难
3.分类：胚胎细胞核移植、体细胞核移植
4.体细胞核移植的过程
供体：优质高产奶牛
◆为何取供体细 胞传代培养10代
以内的细胞？
10代以内的细胞 一般保持正常二 倍体的核型，未
发生突变。
治疗人类疾病，作为组织器官移植的供体
主要的优 点是？
不发生免疫 排斥反应
◆研究克隆动物和克隆细胞更了解 胚胎发育及细胞衰老过程；克隆动 物做疾病模型，更好追踪研究疾病
的发展过程和治疗疾病。
6.体细胞核移植技术存在的问题
（1）成功率仍然非常低，产下的活 克隆动物比率平均不到10%。
（2）绝大多数克隆动物还存在健康 问题，许多克隆动物表现出遗传和生 理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发
因为在这个时候去核的话对 卵细胞损伤最小，距离很近，
便于去核。
◆为什么不是取供体 细胞核进行核移植操 作，而是直接将供体 细胞整个注入去核卵
母细胞中？
保证供核不被破坏， 使所得个体的性状
更符合供体。
◆激活 方法：
◆激活 目的：
◆促融方法： 电刺激
动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术原创
（三）体细胞核移植的过程（以高产奶牛为例）
无性生殖
甲牛
乙牛
体细胞
MⅡ卵 母细胞
克隆牛
培养 体细胞群
取出核
细胞核移植
去除核 显微操作法
去核卵 母细胞
核植入
代孕母牛丙
移植
胚胎移植
重组 卵细胞
物理或化学方法激活
卵裂
早期 胚胎
供体细胞（供核）
细胞培养
卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质）
去核
体细胞
注入
无核卵母细胞
• 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
根据动物细胞核仍具有全能性 的特点,怎样将动物细胞的全能性 表达?
利用动物体细胞核移植技术
（一）概念
动物细胞核移植技术是将动物的一个细胞的 细胞核，移入到一个已经 去掉细胞核的中卵，母细使胞其 重组并发育成一个新的胚胎，该胚胎最终发育 成完整的动物个体。 利用核移植技术得到的动物称为 克隆动物。
遗传物质未改变
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生 长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改 变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种 传代细胞为细胞系。
遗传物质改变 具癌细胞特点
培养器皿
一动物细胞培养
3、条件：
1、无菌、无毒的环境
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等
从动物机体中取出相关的 组织 ，将
它分散成 单个细胞 ，然后，放在适宜
的培养基中，让这些细胞 生长和增殖。
原理：细胞增殖
动物细胞培养和核移植技术教案人教版
教学目标：
1. 理解动物细胞培养的概念和过程，掌握动物细胞培养的条件。
2. 理解核移植技术的原理和过程，掌握核移植技术的应用。
3. 培养学生的实验操作能力，提高学生的科学探究能力。
教学重点：
1. 动物细胞培养的概念、过程、条件及应用。
2. 核移植技术的原理、过程及应用。
- 视频资源：推荐学生观看BBC纪录片《细胞故事》和《克隆技术：生命的复制》。
2. 拓展要求：
- 请学生在阅读上述推荐书籍后，撰写读书笔记，总结所学知识，并思考动物细胞培养和核移植技术在现实生活中的应用。
- 请学生在观看上述推荐视频后，撰写观后感，分析动物细胞培养和核移植技术的原理、过程及应用。
- 鼓励学生针对本节课内容，开展小组讨论，分享自己的学习心得和疑问，共同探讨动物细胞培养和核移植技术的未来发展。
2. 对于核移植技术的原理、过程及应用，可以通过案例分析、实验模拟、小组讨论等方式，帮助学生理解和掌握。
3. 对于动物细胞培养的技术操作，可以安排实验课，让学生亲自动手操作，教师进行指导，通过实践提高学生的操作技能。
4. 对于核移植技术的原理及操作，可以通过视频讲解、实验演示、小组讨论等方式，帮助学生理解和掌握。
- 设计预习问题：围绕动物细胞培养和核移植技术课题，设计一系列具有启发性和探究性的问题，引导学生自主思考。
- 监控预习进度：利用平台功能或学生反馈，监控学生的预习进度，确保预习效果。
学生活动：
- 自主阅读预习资料：按照预习要求，自主阅读预习资料，理解动物细胞培养和核移植技术知识点。
- 思考预习问题：针对预习问题，进行独立思考，记录自己的理解和疑问。
- 请学生在拓展学习过程中，遇到问题时及时向老师提问，老师将提供必要的指导和帮助。
动物细胞培养和核移植技术
2.2 动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术在治疗烧伤病人时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。
但对一个大面积烧伤的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源不足，而且会产生排异反应。
那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢?许多动物的细胞能够分泌蛋自质，如抗体等。
但是，单个细胞产生的蛋白质量是很少的，怎样才能获得大量的分泌蛋白呢?细胞工程中的动物细胞培养技术为解决这些问题找到了出路（图2-15）。
动物细胞培养动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
那么，动物细胞培养的过程是怎样的?培养时又需要提供哪些必要的条件呢?动物细胞培养的过程成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖，因此，进行细胞培养时(图2-16)，首先将组织分散成许多单个细胞。
方法是从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞。
然后，用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜环境中培养。
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖(图2-17)，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附。
以后，细胞进行有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。
贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。
这样的培养过程通常被称为传代培养。
传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。
动物细胞培养和核移植技术
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术学习目标1、了解动物细胞培养的过程条件及应用2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用重难热点1、动物细胞培养的过程2、动物细胞培养与植物组织培养的区别。
3、动物体细胞移植技术与克隆自主预习一、动物细胞工程的常用手段动物细胞工程的常用技术手段有_______________、_____________、______________、______________、单克隆抗体生产，其中________________是动物细胞工程的基础。
二、动物细胞培养1、概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成___________然后放在适宜的培养的____________中，让这些细胞生长和增殖。
2、动物细胞培养的过程：动物胚胎或幼龄动物的器官、组织剪碎、___________处理→单个细胞（分离细胞）→制成，加培养液→细胞悬浮液→原代培养（_________培养）→细胞株→____________培养（遗传物质改变）→细胞系3、相关概念：原代培养：将组织取出，用___________等处理，散成单个细胞，然后在细胞悬浮液中__________培养的过程。
传代培养：把_____________培养增殖的细胞定期用胰蛋白酶从瓶壁上脱离下来，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养的过程。
细胞株：传代培养的细胞能传到10—50代，这种传代细胞叫做___________。
细胞系：50代后，有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且有癌变的特点，能无限地传代下去，这种传代细胞叫做___________。
4、特点：贴壁生长，_____________。
5、条件：（1）无菌、无毒的环境：培养液就进行___________处理。
（2）营养：合成培养基的成分为糖、____________、促生长因子、无机盐、微量元素、_____________、血浆等。
（3）适宜的温度为________±5℃,pH为______________。
高中生物 2.1《动物细胞培养和核移植技术》教学设计 新人教版选修3-新人教版高二选修3生物教案
动物细胞培养和核移植教学设计〔第一课时〕一、概述本节是人教版普通高中课程标准实验教科书生物选修三第二章第三节《动物细胞培养和核移植》第一课时。
普通高中《生物课程标准》〔实验〕指出，高中生物课程目的之一是帮助学生理解生物科学、技术和社会的相互关系，增强学生对自然和社会的责任感，促进学生形成正确的世界观和价值观。
同时现代教育理论认为，从某种意义上说，主动参与的学习过程比单纯获得现成的结论更重要。
在学生通过对植物细胞工程的学习之后，可能会对是否能对动物细胞进行培养、克隆动物等问题产生疑问。
本节课在设置情景，介绍动物细胞工程相关技术之后，我采用自主学习的方法，先让学生自学动物细胞的培养过程，找出关键概念，画出动物细胞培养的流程图，在此基础上，再对学生的流程图进行修正，并强调重要的名词和概念。
对于动物细胞培养应注意的问题，我采用一系列问题串的形式，让学生讨论探究。
最后总结得出结论。
通过对植物组织培养和动物细胞培养的比较，实现对新知识进行有意义的构建。
最后通过介绍居里夫人的名言，进一步激励学生热爱科学，关爱生命的情感。
二、教学目标分析知识目标： 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用；2、说出贴壁生长、接触抑制、原代培养、传代培养等基本概念；3、区分植物组织培养和动物细胞培养的异同能力目标： 1、通过自学概括出动物细胞培养的过程，积极参与小组讨论2、运用已学知识，分析动物细胞培养的条件。
情感目标： 1、培养热爱科学，关爱生命健康的情感2、关注细胞工程研究的发展和应用前景三、学习者特征分析本节课的学习者特征分析主要是根据教师平时对学生的了解而做出的：〔1〕学生是某某培元中学高二年学生；经过一年多的高中学习，已经掌握了一定的生物学基础知识,具备了独立思考和判断的能力。
〔2〕学生已经学习了基因工程、植物细胞工程的学习，对动物细胞工程的学习有较浓厚的兴趣。
〔3〕学生在以前较少开展课堂的自主学习和讨论，有必要加以引导四、教学策略选择与设计〔1〕情境激趣策略：通过大量动物细胞培养的图片、诗歌、名人名言激发学生的学习兴趣和热爱科学的情感〔2〕以任务驱动的自主学习策略：通过布置每位学生阅读教材相关内容，培养学生的自主学习能力。
动物细胞培养和核移植技术(上课用)
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（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细
胞 吸收氧气和营养物质、排出代谢废物 。
（2）气室中充入5％C02：气体的主要作用
是 维持培养液适宜的pH
。
（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生
长，但要注意选择抗生素的 种类和剂量 ，以
保证抗生素对肝脏无害。
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08年宁夏卷回答下列有关动物细胞培养的问题：
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原代培养
• 定义：把第1代细胞的培养与10代以内的细胞 培养统称为原代培养。
•过程：从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养（1—2天换一次 培养液） 细胞贴壁生长 长成单层细胞
取材（动物组织） →细胞分散→初次培养 精品文档
传代培养
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 增部分加细。胞突变，获
得不死性，向癌细 胞方向发展，糖蛋 白减少。
50代以后
接触抑制
失去接触抑制
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一、动物细胞培养过程 2、为什么要对取出的动物组织进行处理，
使细胞分散？ 分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排
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一、动物细胞培养过程 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外， 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤 作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
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一、动物细胞培养过程
5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器 官或组织做动物细胞培养材料？
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们 的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺 盛，容易培养。
动物细胞培养和核移植技术课件
(3)如何区分原代培养与传代培养？ 答案 ①原代培养：通常将动物组织消化后的初次培养称 为原代培养。 ②传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处 理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖，即为传代培养。
2．条件 (1)无菌、无毒的环境：培养液应进行_无__菌___处理。 (2)营养：合成培养基的成分为糖、__氨__基__酸___、促生长 因子、无机盐、微量元素、_血__清___、血浆等。 (3)温度和 pH：适宜的温度为__3_6_._5_±_0_.5__℃_____；pH 为 _7_._2_～__7_._4___。 (4)气体环境：_空__气___ 95%和 CO25%的混合气体。
【归纳提炼】 1．不同层次的克隆
(1)分子水平：如DNA复制。 (2)细胞水平：动物细胞培养。 (3)个体水平：“多利”羊的诞生。 2．动物细胞核移植的条件及结果 (1)核移植一般选择去核的卵母细胞，因为卵母细胞体 积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营 养条件。一般不选择生殖细胞作为供核细胞，因为生殖 细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。
【归纳提炼】 动物细胞培养与动物组织培养的比较
【活学活用】
1．判断下面关于动物细胞培养的叙述的正误。
(1)动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性
()
(2)需要对细胞进行一次脱分化处理和两次蛋白酶处理 ( )
(3)原代培养的细胞是指从贴壁生长到发生接触抑制的细胞
()
(4)恒温条件下，细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而
5．应用 (1)加速家畜_遗__传___改良进程，促进优良畜群繁育。 (2)增加濒危动物数量，保护_濒__危___物种。 (3)生产医用蛋白。 (4)作为_异__种__移植的供体。 (5)用于组织器官的移植。
动物细胞培养和核移植技术(上课用)111_PPT幻灯片
动物细胞培养技术 ----基础 动物细胞核移植技术 动物细胞融合技术 生产单克隆抗体技术
一、动物细胞培养
（一）概念P44： 从动物机体中取出相关的组织，将它分散成 单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这 些细胞生长和增殖。
（二）原理： 细胞增殖
（三）动物细胞培养过程：
胰蛋白酶
单个细胞
加培养液
细胞悬浮液ຫໍສະໝຸດ 从原代培养细胞群中筛选出 进行传代培养的细胞，能传 到50代左右，其遗传物质没 有发生变化,这种传代细胞称
原代培养
胰蛋白酶
为细胞株。 细胞株 遗传物质未变
传代培养 50代细胞
动物胚胎或幼龄动 7、细胞系：
物的组织、器官
胰蛋白酶
传到50代左右后有部分细胞遗 传物质发生了变化，带有癌变
动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官
剪碎，再用胰蛋白酶/胶
单个细胞原蛋白酶处理
加培养液
细胞悬浮液
原代培养
胰蛋白酶
传代培养
动物胚胎或幼龄动 3、动物细胞生长特点： 物的组织、器官 ①细胞贴壁：
胰蛋白酶
单个细胞
要求： 培养瓶或培养皿的内表
加培养液 面光滑、无毒、易于贴附。
细胞悬浮液 ②接触抑制：
原代培养
4、气体环境： （95%空气和5% CO2 ） O2：细胞代谢所必需的 CO2：维持培养液的PH
三、动物细胞培养的应用(P47)
1、生产生物制品（细胞产物），如蛋白质生物制 品－病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等
2、应用于基因工程，动物细胞是基因工程技术中 常见的受体细胞 3、获得细胞用于检测有毒物质 4、用于生理、病理、药理等方面的研究，如筛选 抗癌药物等
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2、生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的 “复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野 C 驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是 A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术， 经脱分化、再分化，培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养 培育成新个体 C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核 卵细胞中，经孕育培养成新个体 D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育 成新个体
利用动物体细胞核移植技术
动物核移植：
将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经 去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育 成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为 动物个体。
克隆动物：
用核移植的方法得到的动物。
聚焦四、动物体细胞核移植技术和克隆动物
动物细胞培养能获得克隆个体吗？如何才能获 白面绵羊乳 黑面绵羊去 得克隆动物？ 动物细胞全能性受限。 归纳动物核移植定义：
聚焦一、动物细胞培养过程 2、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细 胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？ 细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。
胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6 时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适 宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜 pH为7.2～7.4。
卵细胞
细胞质
细胞核移植
细胞核 融合后的卵细胞 卵裂 早期胚胎 C母绵羊子宫 胚胎移植
妊娠 分娩 多莉羊
聚焦四、动物体细胞核移植技术和克隆动物
聚焦四、动物体细胞核移植技术和克隆动物
（MⅡ卵母细胞） 供体细胞注入去 核卵母细胞 激活受体细胞， 完成分裂、发育 去核的卵 母细胞 去核卵母细 胞体积比较 大
胚胎移植
聚焦四、动物体细胞核移植技术和克隆动物
培养的 体细胞
MⅡ卵母
细胞去核
电刺激 促融合、 重组细胞 分裂、 发育
重组胚胎 新个体
供体细胞（供核）
细胞培养
体细胞
注入
细胞融合
重组 细胞
卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质）
去核
无核卵母细胞
胚胎移植 构建重组胚胎 代孕母体
生出与供体奶牛遗传 基础相同的犊牛
克隆动物细胞、组织、器官可作为移植的供体
了解胚胎发育及衰老过程、做疾病模型等
聚焦五、体细胞核移植技术的应用前景
聚焦六、体细胞核移植技术存在的问题
胚胎移植－动物幼体产出概率＜10％ 克隆动物存在着健康问题。例如：许多
克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体 型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺 陷，免疫失调等。 克隆动物的食品安全性问题存在争议
6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚 胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要 原因是这样的组织细胞 D A.容易产生各种变异
B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强
7.（09江苏）下图是一个新生小鼠的肝脏小块 培养装置示意图。请回答下列问题。 （1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细 吸收氧气和营养物质、排出代谢废物 胞 。 （2）气室中充入5％C02：气体的主要作用 是 维持培养液适宜的pH 。 （3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生 长，但要注意选择抗生素的 种类和剂量 ，以 保证抗生素对肝脏无害。
液体培养基 葡萄糖、动物血清 细胞株、细胞系 获得细胞 或细胞分泌蛋白
你达到学习目标了吗？ 1、说出动物细胞培养的过程？ 2、简述动物细胞培养的条件？ 3、说出动物细胞培养的应用？ 4、对比说出动物细胞培养与植物组织培养原理、 条件、结果、培养目的
巩固练习：
1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下 列叙述正确的是 C A．都需用培养箱 B．都须用液体培养基 外界条件适 C．都要在无菌条件下进行 宜，植物细 D．都可体现细胞的全能性 胞不需要。 动物细胞培 养一般需要 培养箱。
病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等
2、获得烧伤病人植皮所需的细胞
3、获得细胞用于检测有毒物质
4、为治疗及预防疾病提供理论依据。
比较项目 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的
植物组织培养 细胞的全能性
固体培养基 蔗糖、植物激素 植物体或组织 快速繁殖、培育 无病毒植株等
动物细胞养
细胞增殖
动 物 细 通常采用的 胞 技术手段 工 程
动物细胞培养
动物细胞核移植
动物细胞融合 单克隆抗体
注意关键词:
细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养
动物细胞培养的过程:
动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官
剪碎
动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。
9.回答下列有关动物细胞培养的问题： ⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目， 最好选用细胞分裂到 中 期的细胞用显微镜进行 观察。 ⑸在细胞培养过程中，通常在 冷冻 条件下保存 细胞，因为在这种条件下，细胞中 酶 的活性 降低，细胞的 新陈代谢 速率降低。 ⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发 生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织 当作 抗原 进行攻击。
知识结构
动物细胞培养 动物细胞培养 和核移植技术 动物体细胞核 移植技术和克 隆动物
细胞培养的应用和概念 细胞培养的过程 细胞培养的条件 细胞培养技术的应用 核移植技术和 克隆动物的概念
体细胞核移植技术的过程
体细胞核移植技术的应用前景
体细胞核移植 技术存在的问题
七：巩固提升
1.在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没 D 有运用到 A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术
维持培养液的PH
成分比较：
动物细胞培养液的主要成分：
葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
植物组织培养呢？
动物体细胞大都生活 在液体的环境
（1）液体培养基
与植物培养基相比其特点是： （2）含有动物血清
无机盐、蔗糖 、维生素、生长 调节物质、植物激素
聚焦三、动物细胞培养的应用 1、获得细胞产物，如蛋白质生物制品－
2、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要 区别的是 A A.培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株 3、动物细胞工程技术的基础是 D 愈伤组织 条件适宜 A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 可以传代 培养不分 化。
遗传物质 未改变
单个细胞
胰蛋白酶 （分解弹性纤维） 加培养液
细胞悬浮液 原代培养 10代细胞
细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
聚焦一、动物细胞培养过程 简述动物细胞培养 的操作过程
分离组织（低幼动物）
分散细胞（胰蛋白酶） 原代培养（细胞增殖） 分装 传代培养（细胞增殖）
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附 在瓶壁上，称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光 滑、无毒、易于贴附。
4、细胞株的特点是
C
A．遗传物质没有改变，可以无限传代 B．遗传物质发生改变，不可无限传代 C．遗传物质没有改变，不可无限传代 D．遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以 无限传代 5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养 条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为: A．原代培养 B．传代培养 D C．细胞株 D．细胞系
原代培养
定义：把第1代细胞的培养与传10代以内的细
胞培养统称为原代培养。
•过程：从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养（1—2天换一 次培养液） 细胞贴壁生长 长成单层细 胞
取材（动物组织） →细胞分散→初次培养
传代培养 (subculture)
温故：动物细胞培养过程 幼龄动物的组织、器官
胰蛋白酶 剪碎 细胞悬浮液 （单个细胞） 原代培养
10代细胞 细胞株 动物细胞培养不能 细胞系 最终培养成生物体 50代细胞 无限传代 传代培养
接触抑制
聚焦四、动物体细胞核移植技术和克隆动物
根据动物细胞核仍具有全能性 的特点,怎样将动物细胞的全能性表 达?
聚焦二、动物细胞培养条件 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中 据此思考： 1 .内环境稳态包括呢些方面？ 适宜的温度、pH值、渗透压、营养、氧气。 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 无菌、无毒的环境。
3.体外培养细胞时需要提供哪些物质？如 何才能保证类似于内环境的营养环境？培 养基应是液态还是固态？ 充足的营养、适宜的温度、pH和气体 环境。加入动物血清。培养基应是液态。
归纳:
1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植
2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状
3.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状
聚焦五、体细胞核移植技术的应用前景
1、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育
2、保护濒危物种，增加动物的存活数量
3、可作为生物反应器，生产医用蛋白
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 部分细胞突变，获 增加。
得不死性，向癌细 胞方向发展，糖蛋 白减少。
接触抑制 50代以后 失去接触抑制
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传 物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。