馏分 峰切割 洗脱
高效液相色谱法测定红茶中的茶黄素
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分析的主要茶黄素未达到理想的基线分离。 & & 本研究采用 (+* （ (： ! ) 的醋酸 水 溶 液； *： 乙腈
收稿日期： !""$ -"+ -*!
作者简介： 王坤波， 男， 主要从事天然健康产品研制开发和植物功能成分的研究， .-/&01 ： 2&34563789 !* (3: (8/: 基金项目： 国家计委 “ 十五” 高新技术产业化重大专项资助项目 （ ;<;=-"!*"+ -"$ ） :
色谱复习题答案整理
色谱复习题答案整理一．名词解释1capacity fact：容量因子，也称分配容量或容量比，用k′表示。
其定义为：一定温度与压力下两相达平衡后，溶质在固定相和流动相中分配量（质量或摩尔数）之比.2分配系数：K,一定温度与压力下两相达平衡后，组分在固定相和流动相中浓度的比值;3extra-column effect：柱外效应，即除柱内多种因素产生的色谱峰扩张外，其它产生峰扩张的因素之和：进样系统，系统连接管，检测器及其它柱外因素引起的峰扩张。
4gradient elution：梯度洗脱，在HPLC分析中，控制流动相组成或洗脱强度随时间的改变而改变，以使极性差异较大的多个组分均能分离,同时谱峰间隔较均匀，分析时间尽量短。
5HPSEC：高效体积排阻色谱法,即以多孔性填料为固定相，依据样品组分分子体积大小的差别进行分离的液相色谱方法。
常用于肽和蛋白质的分子量分布测定及多步分离纯化程序中。
其填料一般有硅胶基质和合成高聚物基质以及高交联多糖型凝胶三种。
6ODS：十八烷基键合硅胶，又称C18. 典型的反相色谱柱，表面键和的基团为非极性羟基，适于分离弱极性，中等极性，较强极性及可电离的酸碱性有机物。
7基线：在正常操作条件下，仅有流动相通过检测器系统时所产生的连续的响应信号，一般是一条直线;8峰面积：色谱曲线与基线间所包围的面积;9半峰宽：亦称半宽度,半峰宽度,指色谱峰高一半处的宽度10标准偏差σ：正态分布曲线x=±1时（拐点）的峰宽之半。
正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。
标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。
σ小，分散程度小、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。
11死时间t0:流动相流过色谱柱所需时间(不保留组分流过色谱柱所需时间)12调整保留时间:tR ’=tR-t，指扣除死时间后的保留时间。
13保留时间tR—进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。
14相对保留值:(用γ或α表示,也称分离因子)两个组分调整保留值之比=tR2’/tR1’=VR2’/VR2’;15分离度:相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值，也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。
液相色谱峰形拖尾解决方案
峰形后拖解决方案和实例继前一篇《峰形前拖解决方案》，我们对峰形后拖的情况及其解决方案也进行了总结。
与《峰形前拖解决方案》相同，在这里我们也同样的撇开所有的污染、塌陷、死体积等其它因素，假设系统是好的，柱子是新的、好的，单纯探讨液相方法与峰形后拖之间的关系，通过调整液相方法来解决峰形前拖的问题。
这样有利于厘清拖尾产生的根本原因，对峰形拖尾的问题提供一些经验上解决方案。
首先让我们了解一下峰形后拖的几种常见形式，三种常见的拖尾如下：系统是好的，柱子是好的，为什么会产生后拖？我们还是回顾一下，色谱分离的一般过程，正常的峰形应该是样品在色谱柱上均匀前移的情况下得到的，浓度分布在整个通过色谱柱柱床的过程中任何时候都呈正态分布，如下图所示：色谱分离是一个物理过程，样品分子经过在固定相与流动相之间的多次分配、吸附解吸，由于不同分子与固定相和流动相之间的相互作用力的差异而使它们在色谱柱中的移动速度不同，以此实现分离的目的。
相同色谱条件下，有些化合物容易产生拖尾，有些则不产生拖尾，这说明拖尾的产生跟样品本身的性质是密切相关的，通常非极性和弱极性的化合物能获得良好的峰形，而带有－COOH、－NH2、－NHR、－NR2等极性基团的化合物则比较容易产生拖尾。
可以想象一下，样品分子在分析过程所处的环境，一是流动相，二是固定相，流动相可以自由流动的，均一性比较好，因此可以认为样品分子四周都被相同组成的流动相所包围，其对每个样品分子的相互作用力也是均匀的、对称的，不应该是引起浓度分布发生变化的主要原因。
考虑固定相，固定相中除了C18长链外还有填料键合时残余的硅羟基，由于C18长链是非极性的，其与样品分子的相互作用力也是很微弱的范德华力，而硅羟基则具有一定的极性Si－Oδ－Hδ＋，在pH一定的条件下甚至还会发生电离，形成－Si－O－形式的离子态。
Si－Oδ－Hδ＋和－Si－O－对于极性化合物之间的作用力则是一种极性的静电作用力，这种作用力比范德华力要强得多，同时，因为硅胶表面键合了C18长链，由于空间位阻作用，样品分子中能接触到残余硅羟基的机会不会很多，只有少部分的分子才能与残余硅羟基产生作用。
欧洲药典10.02.2.4620246色谱分离技术
07/2016:202462.2.46.色谱分离技术色谱分离技术是样品组分在流动相和固定相两相中分布的多级分离方法。
固定相可能是由固体或凝胶承载的固体或液体。
固定相可以填充在一柱子内，或分散成一层，或分布成一层薄膜等。
流动相可以是气体或液体或超临界流体。
分离可能是基于吸收、质量分布（分配）、离子交换等，或者基于分子理化特性的不同，诸如分子的大小、质量、体积等。
本文包含了常用参数的定义和计算及系统适用性通常适用的要求。
分离的原理、装置和方法在下列通用方法中给出：—纸色谱（2.2.26）;—薄层色谱（2.2.27）;—气相色谱（2.2.28）;—液相色谱（2.2.29）;—尺寸排阻色谱（2.2.30）;—超临界流体色谱（2.2.45）。
定义各论中的系统适用性和可接受标准已经用下文定义的参数设置。
对于某些设备的某些参数，例如信噪比和分离度，可由设备制造商提供的软件计算。
使用者有责任确保该软件的计算方法与欧洲药典的要求相当，如果不是这样，进行必要的修正。
色谱图检测器响应、流出液浓度或用于测量流出液浓度的其他数量对时间或体积的一种图解或其他的表示方法。
理想的色谱图被描述成是基线上高斯峰的序列（图2.2.46.-1）。
峰当某一单一组分（或者2或更多未分离的组分）从色谱柱被洗脱出来时，色谱图中记录检测器响应的部分。
色谱峰可用下列参数定义，峰面积或峰高（h）及半峰高处的峰宽（w h）或峰高（h）及拐点之间的峰宽（W i）。
在高斯峰中（图2246.-1）,有下列关系：W h = 1.18W i保留时间（t R）洗脱出某一组分所需的时间（图2.2.46.-1，基线刻度以分钟表示）保留体积（V R）洗脱出某一组分所需的流动相体积。
可使用下面公式，通过保留时间和流速（F）, 单位毫升每分钟，来计算：V R = t R X F滞留时间（t M）洗脱出非保留组分所需的时间（图 2.2.46.-1，基线刻度以分钟表示）。
尺寸排阻色谱中使用符号t o表示（见下文）。
TLC跑经验总结
T L C跑经验总结(总14页) -本页仅作为预览文档封面，使用时请删除本页-看了MERK兄的帖子，很受启发，想起发这个帖子，希望大家把在过柱子过程中的获得的成功的或不成功的，成熟的或不成熟的经验或想法，留在这块，我们大家可以互相学习，互相交流，期待着共同的进步，共同的提高，希望大家跟帖。
谢谢！先把板子爬好其实也不是这么简单。
有时候板上很好，柱子差远了。
有同感！我感觉过柱子跟爬板，不太一样，板爬的好，过柱子时，可就没有那么幸运了。
板子爬不好，柱子一定爬不好还是先把板子爬好，板子比柱子好把握，有个参考好多了。
还是先把板子爬好，掌握好各个Rf值对，过柱是一个很好的参考，我一般在开始时选用2、3个展开剂过柱，开始用极性小的展开剂，将极性小的杂质先除名，再用极性大的。
如果我想要的那个东东的Rf值约左右（展开剂是氯仿／甲醇：10／1），那么我能否单用氯仿过柱？柱子和板有差异的话，想看的清楚一点，最好把板90度爬两次，如果不是会洗脱液中分解的话，应该会比较容易重复的！柱子情况与TLC基本上一样的，但是装柱和上样一定要搞好不然很容易跑得一塌糊涂无论干柱还是湿柱，把柱子压实分离效果才会好过柱的关键有几点:1是选择好硅胶,装柱的时候要压紧,压平,使柱子中间没有气泡;2是要选择好展开剂;最好先查查文献，看看有没有类似的色谱条件，这样做起来就事半功倍了回9楼：可以单一用氯仿做洗脱剂！效果还不错！感觉冬天过柱效果较差9楼兄弟这个不好说,因为我们大家过柱的方法不一定相同,学校一般使用常压或加压,而我们这里使用的确实减压间歇法.好的板子很重要只要你的化合物有极性区别，理论上没有分不开的柱子。
所以一定要耐心，有几分象钓鱼。
过柱子是一个经验活，主要凭感觉，因为它和您的待分离物的个数、各点间的间距、Rf值...均有关系，柱子过多了，就会感觉出一个合适的洗脱液以及极性。
但也并非无规律可循，过柱前爬板是必不可少的，试不同极性，找一个各点分离较开的极性，内径一厘米的柱子一般极性放大10倍左右，柱子越粗，极性放达越大。
海洋仪器分析复习题
一、概念分离度：定义为相邻两组分保留时间之差与两组分基线宽度总和之半的比值。
分配系数：在一定温度下，组分在两相之间分配达到平衡时的浓度比，是色谱分离的依据。
总分离效能指标：既能反映柱效率又能反映选择性的指标，称为总分离效能指标，用相邻两色谱峰保留值之差与两峰底宽平均值之比表示梯度洗脱：是指在分离过程中使流动相的组成随时间改变而改变，通过连续改变色谱柱中流动相的极性、离子强度或pH等因素，使被测组分的相对保留值得以改变，提高分离效率。
程序升温：对于宽沸程的多组分混合物，可在分析过程中按一定速度使柱温随时间呈线性或非线性增加，使混合物各组分能在最佳温度下洗出色谱柱。
气相色谱分析法：是一种物理、化学的分离、分析方法。
利用混合物各组分在互相接触的固定相和气体作为的流动相中有不同的分配比（或不同的吸附能力），当两相作相对运动时，这些组分在两相中进行多次反复分配平衡（或吸附或解吸），从而使各组分得到分离，然后按顺序被检测。
它是由惰性气体将气化后的试样带入加热的色谱柱，并携带分子渗透通过固定相，达到分离目的。
液相色谱分析法：相对保留值：某一组分i的调整保留值与标准误s的调整保留值之比，称为组分i对s的相对保留值ris。
反相液相色谱：固定液极性 < 流动相极性（RLLC）极性大的组分先出柱，极性小的组分后出柱正相液相色谱：固定液极性 > 流动相极性（NLLC）极性小的组分先出柱，极性大的组分后出柱生色团：能吸收紫外-可见光的基团助色团：本身无紫外吸收，但可以使生色团吸收峰加强同时使吸收峰长移的基团红移：由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基）或采用不同溶剂后吸收峰位置向长波方向的移动，叫红移（长移）。
蓝移：由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基）或采用不同溶剂后吸收峰位置向短波方向移动，叫蓝移（紫移，短移）。
共振吸收线：电子从基态跃迁到激发态时要吸收一定频率的光，这种谱线称为共振吸收线。
共振发射线：当电子再跃迁回基态时，则发射出同样频率的光(谱线)，这种谱线称为共振发射线。
色谱习题及答案(绝对精华).
色谱分析综合体填空：1.氢火焰离子化检测器和热导池检测器分别属于_质量型__和___温度__型检测器。
气相色谱仪的心脏是_色谱柱___。
2.固定液一般是按照__相似相溶___原理选择；在用极性固定液分离极性组分时，分子间作用力主要是 ___________ __诱导力，极性愈大，保留时间就愈___ 长__。
3.固定液通常是高沸点的有机化合物，这主要是为了保证固定液在使用温度下有____ 较好的热稳定性__ ，防止___发生不可逆的化学反应____ 。
5.与填充柱相比，毛细管色谱柱的相比β 较大，有利于实现快速分析。
但其柱容量_较小_。
6.在HPLC仪中，为了克服流动相流经色谱柱时受到的阻力，要安装_耐高压的六通阀___ 。
7.气相色谱分析中，载气仅起输送作用；而液相色谱分析中，流动相还要直接参加__实际的分配过程__，要想提高高效液相色谱的柱效，最有效的途径是__使用小粒径填料_。
8.欲分离位置异构体化合物，宜采用的高效液相色谱的分离模式是__梯度洗脱___。
9、色谱法中，将填入玻璃管内静止不动的一相称为固定相，自上而下运动的一相称为流动相，装有固定相的柱子称为色谱柱。
10、液相色谱检测器一般可用紫外可见分光光度检测器，荧光检测器；气相色谱检测器可用热导检测器，氢火焰离子检测器，电子俘获检测器等。
色谱学分析基础：1、色谱塔板理论的假设？答、(1) 在每一个平衡过程间隔内, 平衡可以迅速达到；(2) 将载气看作成脉动(间歇)过程；(3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略；(4) 每次分配的分配系数相同。
(5) 所有的物质在开始时全部进入零号塔板2、色谱定性的方法都有哪些？答、(1) 用保留时间定性(2) 用相对值保留定性(3) 用保留指数定性(4) 用化学反应配合色谱定性(5) 用不同类型的检测器定性⑹色谱和各种光谱或波谱联用3、内标法定量分析时，内标物选择应满足那些条件？答：①试样中不含有该物质②与被测组分性质比较接近③不与试样发生化学反应④出峰位置应位于被测组分接近，且无组分峰影响4、色谱分析中，固定相的选择原则是什么？固定相的选择：气－液色谱，应根据“相似相溶”的原则5、色谱定量分析中为什么要用校正因子？在什么情况下可以不用?答：各种化合物在不同的检测器上都有不同的应答值，所以尽管往色谱仪中注入相同质量的物质，但得到峰面积却不一样，因此峰面积定量时就必须把由色谱仪上得到的峰面积乘上一个系数，得到此成分的质量，在实际分析中，常用某物质做标准，得到一个相对的校正系数，就叫‘相对校正因子'试样中不是所有组分6、总结色谱法的优点。
食品中那非类物质的测定(BJS 201805)
附件食品中那非类物质的测定（BJS 201805）1 范围本标准规定了食品（含保健食品）基质中90种那非类物质的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。
标准中方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的定性和定量测定。
标准中方法二超高效液相色谱-串联高分辨质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的筛查和定性确证。
方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法2原理试样经甲醇超声提取，过滤后，滤液供超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱仪测定，外标法定量。
3试剂和材料注：水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1 甲醇（CH3OH）：质谱级。
3.1.2 甲酸（HCOOH）：质谱级。
3.1.3 乙酸乙酯（C4H8O2）：分析纯。
3.1.4 盐酸（HCl）：分析纯。
3.2 试剂配制3.2.1 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀释至1000mL，用滤膜（4.3）过滤后备用。
3.2.2 盐酸甲醇溶液（1+99）：取盐酸1mL用甲醇稀释至100mL。
3.2.3 甲醇水溶液（1+1）：将甲醇与水等体积混合。
3.3 标准品西地那非等90种物质标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制—1 —3.4.1标准储备液（200 μg/mL）：分别精密称取Lodenafil carbonate（46罗地那非碳酸酯）、Sildenafil dimer impurity（63西地那非二聚体杂质）、Vardenafil dimer（69伐地那非二聚体）标准品（3.3）各10mg，用盐酸甲醇溶液（1+99）溶解并稀释至50mL，摇匀；分别精密称取其余87种标准品（3.3）各10 mg，用甲醇溶解并稀释至50mL，摇匀，制成浓度为200 μg/mL标准储备液。
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馏分峰切割洗脱
章节一：馏分
馏分是指在石油加工过程中，将原油分离成不同沸点范围内的组分的过程。
这些组分被称为馏分，每个馏分都有自己的特定用途。
馏分的分离是通过在蒸馏塔中加热原油并将其蒸发，然后将蒸汽冷却并收集不同沸点范围内的组分来实现的。
馏分的种类包括汽油、柴油、煤油、润滑油和沥青等。
章节二：峰切割
峰切割是一种分离和分析化学混合物的方法，特别是对于复杂的混合物。
在峰切割中，混合物被注入到色谱柱中，然后通过控制温度和流速，将混合物分离成不同的组分。
这些组分分别出现在色谱图中的不同峰中。
峰切割通常用于分析石油和天然气中的化合物。
章节三：洗脱
洗脱是一种从固体材料或液体混合物中提取化合物的方法。
在洗脱过程中，化合物被溶解在溶剂中，然后通过滤纸或其他分离方法从混合物中分离出来。
洗脱通常用于从天然产物中提取天然产物，例如从植物中提取化合物用于药物制剂。
洗脱也可以用于从废水中去除有毒化合物。