HE染色操作常规流程
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HE染色操作常规流程
切好的片子应在60~70℃左右的烤箱中烘烤30分钟以上才能进行染色。HE染色手工程序:
脱蜡
1、二甲苯Ⅰ(AR)5分钟
2、二甲苯Ⅱ(AR)5分钟
3、100%酒精Ⅰ(AR、无水乙醇)1分钟
4、100%酒精Ⅱ(AR、无水乙醇)1分钟
5、95%酒精(工业酒精或医用酒精)1分钟
6、80%酒精(工业酒精或医用酒精)1分钟
7、自来水浸洗1分钟
以上3~7称为进水过程。
染色
1、苏木素染液6分钟
2、水冼1分钟
3、0.5-1%盐酸酒精分化片刻(上下三次颜色由蓝变红)
4、自来水冲冼15分钟以上
(然后95%酒精片刻,主要是避免所带的水份稀释以下的伊红酒精,此步可免)
5、1%伊红酒精浸染1~2分钟
6、水冼1分钟
脱水、透明、封固
95%酒精Ⅰ1分钟
95%酒精Ⅱ1分钟
100%酒精Ⅰ1分钟
100%酒精Ⅱ1分钟
石炭酸二甲苯(1:3) 10秒钟
以上称为脱水。
二甲苯Ⅰ透明1分钟
取出后用中性树胶(上海产,预先用二甲苯溶解,粘稠度适中即可)封固。
染色结果:
核:蓝黑色
胞浆:不同程度的粉红色
肌纤维:较深的粉红色
胶元纤维:淡红色
红细胞:桔红色。