HE染色操作常规流程

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HE染色操作常规流程

切好的片子应在60~70℃左右的烤箱中烘烤30分钟以上才能进行染色。HE染色手工程序:

脱蜡

1、二甲苯Ⅰ(AR)5分钟

2、二甲苯Ⅱ(AR)5分钟

3、100%酒精Ⅰ(AR、无水乙醇)1分钟

4、100%酒精Ⅱ(AR、无水乙醇)1分钟

5、95%酒精(工业酒精或医用酒精)1分钟

6、80%酒精(工业酒精或医用酒精)1分钟

7、自来水浸洗1分钟

以上3~7称为进水过程。

染色

1、苏木素染液6分钟

2、水冼1分钟

3、0.5-1%盐酸酒精分化片刻(上下三次颜色由蓝变红)

4、自来水冲冼15分钟以上

(然后95%酒精片刻,主要是避免所带的水份稀释以下的伊红酒精,此步可免)

5、1%伊红酒精浸染1~2分钟

6、水冼1分钟

脱水、透明、封固

95%酒精Ⅰ1分钟

95%酒精Ⅱ1分钟

100%酒精Ⅰ1分钟

100%酒精Ⅱ1分钟

石炭酸二甲苯(1:3) 10秒钟

以上称为脱水。

二甲苯Ⅰ透明1分钟

取出后用中性树胶(上海产,预先用二甲苯溶解,粘稠度适中即可)封固。

染色结果:

核:蓝黑色

胞浆:不同程度的粉红色

肌纤维:较深的粉红色

胶元纤维:淡红色

红细胞:桔红色。

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