酶 生化试验报告
酶活性测定实验报告讨论(3篇)
第1篇一、实验背景酶作为一种生物催化剂，在生物体内起着至关重要的作用。
酶活性是指酶催化特定化学反应的能力，它是评价酶功能的重要指标。
本实验旨在通过测定唾液淀粉酶的活性，探讨环境因素对酶活性的影响，以及酶的高效性。
二、实验目的1. 了解环境因素（如温度、pH值等）对唾液淀粉酶活性的影响。
2. 掌握酶活性测定的基本原理和实验操作方法。
3. 讨论酶的高效性及其在生物体内的作用。
三、实验原理1. 酶催化原理：酶通过降低反应活化能，加速化学反应的进行。
唾液淀粉酶是一种消化酶，能够将淀粉水解为葡萄糖。
2. 酶活性测定：本实验采用碘液法测定唾液淀粉酶活性。
碘液与淀粉形成蓝色复合物，当淀粉被水解后，蓝色消失，通过测定溶液颜色深浅变化，可以计算出酶活性。
3. 环境因素影响：温度、pH值等环境因素可以影响酶活性。
在一定范围内，温度升高，酶活性增强；当超过最适温度时，酶活性降低。
pH值对酶活性也有显著影响，最适pH值下酶活性最高。
四、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响：实验结果显示，随着温度的升高，唾液淀粉酶活性先增加后降低。
在37℃时，酶活性达到最大值。
这表明唾液淀粉酶的最适温度为37℃。
2. pH值对酶活性的影响：实验结果显示，唾液淀粉酶的最适pH值为6.8。
在pH值低于或高于6.8时，酶活性显著降低。
3. 酶的高效性：与无机催化剂相比，酶具有极高的催化效率。
本实验中，唾液淀粉酶的催化效率比无机催化剂高106~1013倍。
五、讨论1. 温度对酶活性的影响：温度对酶活性有显著影响，过高或过低的温度都会导致酶活性降低。
这是因为温度会影响酶的空间结构，进而影响酶的催化能力。
2. pH值对酶活性的影响：pH值对酶活性也有重要影响。
酶活性受到酸碱度的影响，最适pH值下酶活性最高。
这是因为pH值会影响酶活性中心的电荷状态，进而影响酶与底物的结合。
3. 酶的高效性：酶的高效性是其重要的生物特征之一。
酶的高效性源于其独特的催化机制，即通过降低反应活化能，加速化学反应的进行。
酶特性检验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的通过本实验，了解酶的催化作用特性，包括酶的专一性、高效性、温度和pH值对酶活力的影响，以及酶的激活剂和抑制剂对酶活力的作用。
通过对酶特性的研究，进一步掌握酶在生物体内的作用及其调控机制。
二、实验材料1. 实验材料：- 酶提取液（如唾液淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等）- 底物溶液（如淀粉溶液、蛋白质溶液、脂肪溶液等）- pH缓冲液（不同pH值的缓冲液）- 温度控制装置（恒温水浴）- pH计- 显微镜- 试管、试管架、滴管、移液器等2. 试剂：- 碘液- 斐林试剂- 班氏试剂- 激活剂（如金属离子）- 抑制剂（如竞争性抑制剂、非竞争性抑制剂）三、实验方法1. 酶的专一性检验：- 将酶提取液与底物溶液混合，观察酶催化底物反应的现象。
- 使用不同底物进行对比实验，验证酶的专一性。
2. 酶的高效性检验：- 将酶提取液与底物溶液混合，观察酶催化底物反应的现象。
- 使用相同底物，将酶提取液与无机催化剂（如FeCl3）进行对比实验，验证酶的高效性。
3. 温度对酶活力的影响：- 将酶提取液与底物溶液混合，在不同温度下进行反应。
- 观察酶催化底物反应的现象，分析温度对酶活力的影响。
4. pH值对酶活力的影响：- 将酶提取液与底物溶液混合，在不同pH值下进行反应。
- 观察酶催化底物反应的现象，分析pH值对酶活力的影响。
5. 激活剂和抑制剂对酶活力的影响：- 在酶提取液和底物溶液中分别加入激活剂和抑制剂。
- 观察酶催化底物反应的现象，分析激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
四、实验结果与分析1. 酶的专一性检验：- 通过实验观察，酶提取液在特定底物存在下表现出催化作用，而在其他底物上无催化作用，证明酶具有专一性。
2. 酶的高效性检验：- 通过实验观察，酶提取液在催化底物反应时，反应速度明显快于无机催化剂，证明酶具有高效性。
3. 温度对酶活力的影响：- 通过实验观察，酶催化底物反应的速度随温度升高而加快，在一定温度范围内，酶活力达到最大值，超过此温度，酶活力逐渐降低。
生物酶实验报告
一、实验名称生物酶活性测定二、实验目的1. 了解生物酶的基本概念和特性。
2. 掌握酶活性测定的原理和方法。
3. 通过实验验证酶活性受温度、pH值等因素的影响。
三、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一和可逆的特点。
酶活性是指酶催化特定化学反应的能力。
酶活性受多种因素的影响，如温度、pH值、底物浓度等。
本实验通过测定酶催化反应的速率，了解酶活性受温度、pH值等因素的影响。
四、实验器材及试剂1. 实验器材：- 酶制剂- 酶底物- pH计- 温度计- 移液器- 试管- 水浴锅- 混匀器- 计时器2. 实验试剂：- 酶抑制剂- 酶激活剂- 酶底物缓冲液- pH缓冲液五、实验步骤1. 准备实验材料，将酶制剂、酶底物、pH计、温度计等实验器材和试剂准备好。
2. 设置实验温度梯度，将水浴锅预热至不同温度（如20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃）。
3. 在不同温度下，分别取相同体积的酶底物和酶制剂，加入试管中。
4. 使用pH计测定不同温度下酶底物的pH值，并记录。
5. 将试管放入相应温度的水浴锅中，启动计时器，观察酶催化反应的速率。
6. 记录不同温度下酶催化反应的时间，计算酶活性。
7. 设置不同pH值梯度，重复上述步骤，观察酶活性受pH值的影响。
8. 设置不同底物浓度梯度，重复上述步骤，观察酶活性受底物浓度的影响。
9. 分析实验数据，得出结论。
六、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响：通过实验发现，随着温度的升高，酶活性逐渐增加，但当温度超过一定范围后，酶活性开始下降。
这是因为高温会导致酶的空间结构发生改变，从而失去催化活性。
2. pH值对酶活性的影响：实验结果表明，酶活性在不同pH值下存在一个最佳值。
当pH值偏离最佳值时，酶活性会下降。
这是因为pH值会影响酶的活性中心，从而影响酶的催化活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响：随着底物浓度的增加，酶活性逐渐增加，但当底物浓度超过一定范围后，酶活性不再增加。
酶的专一性实验报告
酶的专一性实验报告酶的专一性实验报告引言：酶是一类生物催化剂，能够加速生物体内化学反应的速率。
酶的专一性是指酶对于特定底物的选择性。
在本次实验中，我们将通过一系列实验来探究酶的专一性。
材料与方法：实验所需材料包括：淀粉溶液、淀粉酶溶液、葡萄糖试剂、碘液、试管、移液器、显微镜等。
实验步骤：1. 准备一组试管，分别加入相同体积的淀粉溶液。
2. 将每个试管中加入不同体积的淀粉酶溶液，使得每个试管中的淀粉酶浓度不同。
3. 将每个试管放置在恒温水浴中，保持温度恒定。
4. 在一定时间间隔内，取出一滴试管中的淀粉溶液，加入一滴碘液，并观察溶液颜色的变化。
5. 使用显微镜观察淀粉颗粒的形态变化。
结果与讨论：在实验中，我们观察到随着淀粉酶浓度的增加，淀粉溶液中的淀粉颗粒逐渐减少，并最终消失。
这说明淀粉酶对淀粉具有催化作用，并且酶的活性与酶的浓度相关。
此外，我们还观察到淀粉溶液中的颜色由初始的蓝黑色逐渐变为淡黄色。
这是因为碘液可以与淀粉形成复合物，形成蓝黑色的颜色。
而当淀粉被酶催化分解为葡萄糖时，碘液无法与葡萄糖反应，导致溶液颜色变浅。
进一步观察淀粉颗粒的形态变化，我们发现在淀粉酶作用下，淀粉颗粒逐渐变小，并最终消失。
这是因为淀粉酶能够将淀粉分解为较小的葡萄糖分子，使其溶解于溶液中。
实验结果表明，淀粉酶具有对淀粉的专一性。
这是因为淀粉酶的活性部位与淀粉分子的结构具有亲和力，使得淀粉酶能够选择性地与淀粉反应，而不与其他底物发生反应。
结论：通过本次实验，我们验证了酶的专一性。
淀粉酶对淀粉具有高度选择性，能够加速淀粉分解的反应速率。
这种专一性是由于酶与底物之间的亲和力所致。
深入理解酶的专一性有助于我们更好地理解生物体内化学反应的调控机制，并为酶的应用提供理论基础。
参考文献：[1] Berg, J. M., Tymoczko, J. L., & Gatto, G. J. (2015). Biochemistry. W. H. Freeman and Company.[2] Nelson, D. L., Cox, M. M. (2017). Lehninger Principles of Biochemistry. W. H. Freeman and Company.。
生化反应设计实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握生化反应的基本原理和操作方法。
2. 通过实验验证不同生化反应的特性和规律。
3. 提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理生化反应是指生物体内发生的化学反应，主要包括酶促反应、非酶促反应等。
本实验选取了以下几种生化反应进行探究：1. 酶促反应：以淀粉酶催化淀粉水解为例，研究酶促反应的特性和影响因素。
2. 非酶促反应：以蛋白质变性为例，研究非酶促反应的特性和影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 淀粉酶- 淀粉- 碘液- 氢氧化钠- 蛋白质溶液- 乙醇- 硫酸铜- 水浴锅- 试管- 移液枪- 滴管- 研钵- 研杵2. 实验仪器：- 恒温水浴锅- 酶标仪- 紫外可见分光光度计- 精密天平- 移液枪- 试管架- 移液器四、实验方法1. 酶促反应实验：（1）将淀粉酶与淀粉按一定比例混合，加入适量水，置于恒温水浴锅中，在一定温度下反应一段时间。
（2）取一定量的反应液，加入碘液，观察颜色变化。
（3）以未加淀粉酶的反应液为对照组，分析酶促反应的特性和影响因素。
2. 非酶促反应实验：（1）将蛋白质溶液与氢氧化钠按一定比例混合，观察颜色变化。
（2）将混合液加入乙醇，观察沉淀形成情况。
（3）将沉淀加入硫酸铜溶液，观察颜色变化。
（4）以未加氢氧化钠的反应液为对照组，分析非酶促反应的特性和影响因素。
五、实验结果与分析1. 酶促反应实验结果：通过实验观察，加入淀粉酶的反应液颜色逐渐变浅，说明淀粉被水解。
在对照组中，未加淀粉酶的反应液颜色未发生变化。
这说明淀粉酶具有催化淀粉水解的作用。
2. 非酶促反应实验结果：通过实验观察，加入氢氧化钠的反应液颜色逐渐变深，说明蛋白质发生变性。
在对照组中，未加氢氧化钠的反应液颜色未发生变化。
这说明氢氧化钠可以导致蛋白质变性。
六、实验结论1. 酶促反应具有高效、专一性等特点，是生物体内重要的化学反应类型。
2. 非酶促反应也具有重要的作用，如蛋白质变性等。
酶的浓度测定实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解酶浓度测定的原理和方法。
2. 掌握使用比色法测定酶浓度。
3. 通过实验，学习如何通过酶促反应的初速度来计算酶的浓度。
二、实验原理酶是生物体内一类具有催化功能的蛋白质，它们能够加速生物体内的化学反应。
酶的浓度是研究酶活性及其在生物体内作用的重要参数。
本实验通过测定酶促反应的初速度，根据米氏方程（Michaelis-Menten equation）计算酶的浓度。
米氏方程描述了酶促反应速率（v）与底物浓度（[S]）之间的关系：\[ v = \frac{V_{max}[S]}{K_m + [S]} \]其中，\( V_{max} \) 为最大反应速率，\( K_m \) 为米氏常数，表示酶对底物的亲和力。
当底物浓度很低时，反应速率与底物浓度成正比；当底物浓度较高时，反应速率达到最大值，此时即使增加底物浓度，反应速率也不再增加。
本实验通过改变底物浓度，测定不同浓度下的酶促反应初速度，绘制双倒数曲线（Lineweaver-Burk plot），从曲线的截距和斜率计算出酶的浓度。
三、实验器材与试剂1. 器材：- 试管架- 试管- 移液管- 移液枪- 恒温水浴箱- 721型分光光度计- 磷酸苯二钠底物液- pH 10.0 碳酸缓冲液- 碱性磷酸酶酶液- 4-氨基安替比林- 铁氰化钾2. 试剂：- 0.02 mol/L 底物液- pH 10.0 碳酸缓冲液- 蒸馏水- 酶液- 碱性溶液- 4-氨基安替比林- 铁氰化钾（K3Fe(CN)6）四、实验步骤1. 准备一系列不同浓度的底物液（例如：0.005 mol/L、0.01 mol/L、0.02 mol/L、0.04 mol/L、0.08 mol/L）。
2. 在恒温水浴箱中预热反应体系至适宜温度（例如：37°C）。
3. 分别取0.5 mL底物液于试管中，加入0.5 mL酶液，立即混匀。
4. 将试管放入恒温水浴箱中，记录反应初速度（例如：每隔30秒测定一次吸光度）。
实验报告影响酶活性的因素
实验报告影响酶活性的因素实验报告影响酶活性的因素酶是一类生物催化剂，能够加速化学反应的速率。
在生物体内，酶参与了许多重要的生化过程，如新陈代谢、消化和免疫等。
了解酶活性的影响因素对于理解生物体的正常功能以及疾病的发生机制具有重要意义。
本文将从温度、pH值、底物浓度和酶浓度四个方面来探讨实验报告对酶活性的影响。
一、温度对酶活性的影响温度是影响酶活性的重要因素之一。
在适宜的温度范围内，酶活性会随温度的升高而增加，因为高温能够提高酶分子的动力学能量，使其与底物发生更多的碰撞。
然而，当温度超过酶的适宜范围时，酶的活性会迅速下降，甚至失活。
这是因为高温会破坏酶分子的三维结构，使其失去催化功能。
因此，在实验报告中，我们需要控制好温度，以保证酶活性的准确测定。
二、pH值对酶活性的影响pH值是指溶液的酸碱程度，也是影响酶活性的重要因素之一。
不同的酶对pH值的要求不同，有些酶在酸性环境中活性较高，而有些酶则在碱性环境中活性更高。
这是因为酶的活性与其分子结构密切相关，而pH值能够改变酶分子的电荷状态，从而影响其催化活性。
在实验报告中，我们需要在不同的pH值条件下测定酶的活性，以确定其最适宜的工作条件。
三、底物浓度对酶活性的影响底物浓度是指在酶催化反应中底物的浓度，也是影响酶活性的重要因素之一。
在一定范围内，底物浓度的增加会使酶活性逐渐增加，因为更多的底物能够与酶分子发生碰撞，从而增加反应速率。
然而，当底物浓度超过一定限制时，酶活性将不再增加，因为酶的活性受到底物浓度的饱和限制。
在实验报告中，我们需要确定底物浓度与酶活性之间的关系，以了解酶催化反应的动力学特性。
四、酶浓度对酶活性的影响酶浓度是指在酶催化反应中酶的浓度，也是影响酶活性的重要因素之一。
一般来说，酶浓度的增加会使酶活性逐渐增加，因为更多的酶分子能够与底物发生碰撞。
然而，当酶浓度超过一定限制时，酶活性将不再增加，因为酶的活性受到酶浓度的饱和限制。
在实验报告中，我们需要确定酶浓度与酶活性之间的关系，以了解酶催化反应的动力学特性。
酶km的测定实验报告
酶km的测定实验报告酶KM的测定实验报告摘要本实验旨在通过测定酶的KM值来研究酶的底物浓度对酶活性的影响。
实验结果表明，酶活性随着底物浓度的增加而增加，但当底物浓度达到一定值后，酶活性不再随底物浓度的增加而增加，这表明酶的饱和现象。
通过对实验数据的分析，得出了酶的KM值，并对酶的底物浓度和酶活性之间的关系进行了讨论。
引言酶是一类生物催化剂，能够加速生物体内的化学反应，使生物体内的代谢过程能够正常进行。
酶的活性受到多种因素的影响，其中包括底物浓度。
底物浓度对酶活性的影响是酶学研究中的一个重要课题。
本实验旨在通过测定酶的KM 值，研究酶的底物浓度对酶活性的影响。
材料与方法1. 实验材料：酶、底物、缓冲液等。
2. 实验仪器：分光光度计等。
3. 实验步骤：首先准备一系列不同浓度的底物溶液，然后将酶溶液与不同浓度的底物溶液混合，并在一定时间内测定反应混合物的吸光度。
根据实验数据，绘制酶活性与底物浓度的曲线，并通过曲线拟合得出酶的KM值。
结果与讨论实验结果表明，酶活性随着底物浓度的增加而增加，但当底物浓度达到一定值后，酶活性不再随底物浓度的增加而增加，这表明酶的饱和现象。
通过对实验数据的分析，得出了酶的KM值。
KM值是酶与底物结合的亲和力的指标，它反映了酶与底物结合的紧密程度。
实验结果还表明，底物浓度对酶活性的影响是非线性的，这与酶的饱和现象密切相关。
通过对实验结果的分析，我们得出了酶的KM值，并对酶的底物浓度和酶活性之间的关系进行了讨论。
结论通过本实验，我们成功地测定了酶的KM值，并研究了酶的底物浓度对酶活性的影响。
实验结果表明，酶活性随着底物浓度的增加而增加，但当底物浓度达到一定值后，酶活性不再随底物浓度的增加而增加，这表明酶的饱和现象。
通过对实验数据的分析，我们得出了酶的KM值，并对酶的底物浓度和酶活性之间的关系进行了讨论。
这些结果对于深入理解酶的底物浓度对酶活性的影响具有重要的理论意义和实际应用价值。
酶的特异性实验报告
酶的特异性实验报告酶的特异性实验报告引言：酶是一类具有生物催化活性的蛋白质，能够加速化学反应的速率，但并不参与反应本身。
酶的特异性是指酶对于底物的选择性，即只催化特定的底物反应。
本实验旨在探究酶的特异性及其在生物体内的重要作用。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 蛋白质酶- 不同底物溶液（如淀粉酶、葡萄糖酶等）- 反应液（含有酶的缓冲液）- 试管- 显色试剂（如碘液、苏丹红等）- 恒温水浴2. 实验方法：- 步骤一：准备不同底物溶液，分别加入试管中。
- 步骤二：在每个试管中加入相同量的酶溶液。
- 步骤三：将试管放入恒温水浴中，保持一定的温度。
- 步骤四：等待一段时间后，加入显色试剂。
- 步骤五：观察试管中是否出现颜色变化。
实验结果与讨论：通过实验观察，我们可以得出以下结论：1. 酶的特异性：在实验中，我们使用了不同的底物溶液，如淀粉酶和葡萄糖酶。
我们发现，淀粉酶只催化淀粉的降解反应，而不对葡萄糖产生反应；葡萄糖酶则只催化葡萄糖的反应，对淀粉无反应。
这表明酶具有特异性，只催化特定的底物反应。
2. 酶的活性与温度的关系：在实验中，我们将试管放入恒温水浴中，控制反应温度。
我们发现，酶的活性与温度密切相关。
当温度过低时，酶的活性减弱，反应速率较慢；当温度过高时，酶的活性受到破坏，反应速率下降。
因此，适宜的温度可以提高酶的活性，加快反应速率。
3. 酶的活性与pH值的关系：酶的活性还受到溶液的pH值的影响。
在实验中，我们可以调整酶的缓冲液的pH值，观察酶的活性变化。
我们发现，不同酶对pH值的敏感程度不同。
例如，某些酶在酸性环境下活性较高，而在碱性环境下活性较低。
这表明不同酶对于酸碱环境有不同的适应性。
4. 酶在生物体内的作用：酶在生物体内起着至关重要的作用。
生物体内的代谢反应通常需要酶的催化。
例如，消化系统中的酶能够分解食物中的大分子物质，使其变得可吸收；免疫系统中的酶能够杀灭病原体；细胞内的酶能够调节细胞代谢等。
酶活力的测定实验报告
酶活力的测定实验报告酶活力的测定实验报告引言：酶是一类生物催化剂，能够加速生物体内化学反应的速率。
酶活力的测定是生物学实验中常见的实验之一，通过测定酶活力的大小，可以了解酶在不同条件下的催化效果，进而研究酶的特性及其在生物体内的作用机制。
本实验旨在通过测定过氧化氢酶的活力，探究酶活力与温度、酶浓度和底物浓度的关系。
材料与方法：1. 实验所需材料包括过氧化氢酶溶液、过氧化氢底物、缓冲液、显色剂等。
2. 实验仪器包括分光光度计、试管、移液器等。
3. 实验步骤：a. 准备一组不同温度下的试验样品，分别将过氧化氢酶溶液和过氧化氢底物按照一定比例混合，并加入适量的缓冲液。
b. 在不同温度下，将试验样品分别放入预先恒温的水浴中反应一定时间。
c. 取出反应后的试验样品，加入显色剂，并在分光光度计中测定吸光度。
d. 重复上述步骤，分别改变酶浓度和底物浓度，进行实验。
结果与讨论：通过实验测定，我们得到了不同条件下的酶活力数据，并进行了分析和讨论。
1. 温度对酶活力的影响：在实验中，我们分别将试验样品置于不同温度下进行反应，结果发现酶活力随温度的变化呈现一定的规律性。
当温度较低时，酶活力较低，随着温度的升高，酶活力逐渐增加，但当温度超过一定范围后，酶活力开始下降。
这是因为酶是一种蛋白质，其结构在高温下容易受到破坏，从而导致酶活力的降低。
2. 酶浓度对酶活力的影响：在实验中，我们分别改变了酶的浓度，结果发现酶浓度对酶活力有着明显的影响。
当酶浓度较低时，酶活力较低，随着酶浓度的增加，酶活力逐渐增加，但当酶浓度超过一定范围后，酶活力开始趋于饱和，增加酶浓度对酶活力的提高效果不明显。
这是因为酶浓度的增加会导致底物与酶结合的速率增加，但酶分子之间的竞争也会增加，从而限制了酶活力的提高。
3. 底物浓度对酶活力的影响：在实验中，我们分别改变了底物的浓度，结果发现底物浓度对酶活力也有着明显的影响。
当底物浓度较低时，酶活力较低，随着底物浓度的增加，酶活力逐渐增加，但当底物浓度超过一定范围后，酶活力开始趋于饱和，增加底物浓度对酶活力的提高效果不明显。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
生物大分子·酶 ——相关生化实验报告 小组成员：王书洋 张斌 贾官斐 杨翀 左天宇 单位：武警后勤学院临床医学系四队 四班 邮编：300162 关键词 淀粉酶; 活性; 温度; 抑制剂; 激活剂; 专一性
【前言】 目前临床主要以检测指标作为依据对疾病的诊断作出较为准确的判断。其中，酶学上的应用占了相当一部分。所以，从临床疾病诊断以及治疗的角度去对酶学知识的具体化了解和应用深化是十分有必要的。酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白，几乎所有的生化反应都离不开酶的催化。因此，一切对蛋白质活性有影响的因素都影响酶的活性。酶与底物作用的活性，受温度、pH值、酶液浓度、底物浓度、酶的激活剂或抑制剂等许多因素的影响。对酶活性的测定对临床诊断以及基础医学的研究都有着重要意义。很多酶其实包含几种具有同样催化效用的蛋白质，但它们的分子组成、理化性质与免疫学特性却有明显差异，这类蛋白质统称为该酶的同工酶。同工酶在组织和器官中的分布不同，通过测定不同同工酶的含量与活性的变化，可以推算出改组织和器官的变化。本综述旨在对后文的三次实验作为基础医学和临床医学的一次应用上的联系。
实验一影响酶促反应速度的因素 【实验原理】 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各种糊精和麦芽糖。淀粉溶液与碘反应呈蓝色；糊精根据分子大小，与碘反应分别呈蓝、紫、红、无色等不同的颜色；麦芽糖不与碘呈色。唾液淀粉酶的活性受温度、酸碱度、抑制剂与激活剂等的影响。
温度：温度降低，酶促反应减弱或停止；温度升高，反应速度加快。当上升至某一温度时，酶促反应速度达最大值，此温度称为酶的最适温度。由于酶的化学本质是蛋白质，温度过高会导致蛋白质构象的改变，因此如果温度继续升高，反应速度反而会迅速下降甚至完全丧失。
酸碱度：唾液淀粉酶最适pH为pH6.9，高于或低于酶的最适pH值，都将引起酶活性的降低，过酸或过碱的反应条件可使酶活性丧失。
抑制剂与激活剂：酶的活性常受某些物质的影响，能增加酶的活性称为酶的激活剂：降低酶活性且不使酶蛋白变性的称为酶的抑制剂。如Cl-为唾液淀粉酶的激活剂，Cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。
根据上述性质，可以用碘检查淀粉是否水解及其水解程度，间接判断唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。 【标本】 唾液 【测定方法】 试剂：1％淀粉溶液，1％氯化钠溶液，1％硫酸铜溶液，1％硫酸钠溶液，碘液，磷酸氢二钠（0.2mmol/L）, 柠檬酸溶液(0.1mmol/L)。
器材：试管，试管夹，恒温水浴锅(37℃),吸管，滴管，试管架， 操作： 1.收集唾液：实验者先将痰咳尽, 用自来水漱口, 清除口腔内食物残渣, 再含蒸馏水约15 mL, 作咀嚼咕漱运动, 3min 后吐入垫有两层经润湿处理的脱脂纱布的漏斗内, 过滤气泡及食物残渣后于小烧杯中备用。
2.观察温度对酶促反应速度的影响 取试管3支，编号1,2,3，按下表操作： 试剂(ml) 1 2 3 ○1唾液 1 1 1 ○21%淀粉 2 2 2 ○1○2水浴5min 100℃（冷却） 37℃ 0℃ ○1○2混合水浴5min 100℃ 37℃ 0℃ 碘液 1滴（冷却） 1滴 1滴
3. 观察pH对酶促反应速度的影响 （1）配制一系列pH不等的缓冲液。 试剂(ml) 1 2 3 0.2mmol/L磷酸氢二钠 5.15 7.72 9.72
0.1mmol/L柠檬酸 4.85 2.28 0.28 pH 5.00 6.80 8.00 （2）取试管3支，编号1,2,3，按下表操作： 试剂(ml) 1 2 3 唾液 2 2 2 缓冲液 3（pH5.00） 3（pH6.80） 3（pH8.00） 1%淀粉 2 2 2 37℃水浴10min 碘液 1滴 1滴 1滴 4观察激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响 取试管4支，编号1,2,3,4，按下表操作： 试剂 滴 1 2 3 4 1%淀粉 20 20 20 20 唾液 10 10 10 10 蒸馏水 6 — — — 1％氯化钠 — 6 — —
1％硫酸铜 — — 6 —
1％硫酸钠 — — — 6
37℃水浴5—10min 碘液 1滴 1滴 1滴 1滴
【结果及讨论】 温度对酶促反应的影响 ：此组实验的三个试管模拟人体的环境即近中性,通过观察不同温度下酶活性强弱, 证明温度对酶活性有很大影响。1 号试管的颜色变化比较大, 无色时淀粉被完全分解为单糖, 晴褐色时淀粉不完全分解, 蓝色时淀粉完全没被分解, 浅蓝色时少许被分解; 也就是说不同人的唾液淀粉酶活性在100 ℃时受影响的程度不同, 有的被完全抑制, 有的部分受影响, 而有的和在37℃时相比几乎无变化。2号试管无色, 说明淀粉完全被分解为单糖, 不能与碘发生颜色反应;通观3 号试管发现唾液淀粉酶活性在0 ℃时大都被抑制, 或是完全被抑制或是大部分被抑制。 pH 值对酶促反应的影响 ：此组实验在37 ℃ 下设置三个pH 值: 5. 0 ( 酸性) 、6. 8( 近中性) 和8. 0( 碱性) 。通过各个试管的颜色判断酶活性强弱。酶活性比较强时, 淀粉完全分解, 显示无色或碘液的浅黄色; 酶活性比较弱时, 淀粉不能被完全分解, 依被分解的程度不同显示不同的颜色。相比较而言, 2 号试管的颜色最浅, 说明37℃ 时酶活性最强, 淀粉被完全分解。1 号试管颜色相近,均为晴褐色, 说明其中的淀粉被分解为多糖, 也就是淀粉酶在酸性环境中能发挥作用; 而在3 号试管的碱性环境中, 淀粉酶发挥作用的强弱程度不同, 有的能将淀粉部分分解, 颜色呈现棕黄色, 有的不能分解, 呈深蓝色。 激活剂和抑制剂对酶活性的影响 ：在37℃、近中性环境中, 设置对照( 蒸馏水) 、0. 9% NaCl、1% CuSO4、1% Na2SO4 的四组实验, 通过观察颜色, 判断酶活性强弱, 从而得出抑制剂和激活剂。对照组中酶将淀粉完全分解, 加碘液呈无色,2、4 号颜色与1 号相近, 说明其中的淀粉被完全分解, 因此0. 9%NaCl、1 %Na2SO4 为激活剂, 3 号试管为深蓝色, 说明其中的淀粉没有被分解, 酶不能发挥其应有的作用, 可以判断1% CuSO4 为抑制剂。
【总结】通过实验发现唾液淀粉酶具有高度专一性, 其活性受温度、p H 值、激活剂及抑制剂等多种因素影响; 每个人产生唾液淀粉酶的量不同, 活性强弱也有差异。不同人的酶活性受环境条件影响程度也不同, 有些人的酶活性在一定条件下几乎不受影响, 而有些几乎失活。人体唾液淀粉酶在37℃ 活性最强, 但0 ℃ 、100 ℃下酶活性并没有完全丧失, 而是活性受到影响, 特别是0℃时酶活性受影响比较大, 其活性比较弱, 由此可知很多水果、蔬菜中的酶在低温时活性比较低, 有利于保鲜。同时发现中性环境中淀粉酶活性最强, 不同来源的酶对碱的耐受度不同, 有的影响不大, 有的几乎失活。稀释的唾液, 由于酶浓度降低, 其活性也相应降低, 出现相应的颜色反应。
【临床意义】（待补） 实验二血清乳酸脱氢酶的测定（比色法） 【实验原理】乳酸脱氢酶在有辅酶Ⅰ携氧的情况下，使乳酸脱氢酶生成丙酮酸，丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸苯肼。苯肼在碱性溶液中显红棕色，其显色的深浅与丙酮酸的浓度成正比。440nm下与同样处理的丙酮酸标准液进行比色，求得乳酸脱氢酶的活力单位。 【标本】新鲜兔肝 【材料与方法】 器材：紫外分光光度仪，加样枪，容量瓶，滴管，试管等。 试剂： 1. 0.1mol甘氨酸溶液 称取甘氨酸7.505g，氯化钠5.85g，蒸馏水溶解后稀释到1000ml。 2. pH10.0乳酸钠缓冲底物液 吸取70%乳酸钠溶液10ml、0.1ml甘氨酸溶液125ml、0.1N氢氧化钠75ml，混合，加氯仿数滴防腐，置冰箱保存。 3. 辅酶Ⅰ溶液 称取辅酶Ⅰ10mg，加蒸馏水2ml，溶解后置冰箱保存，约可用6周。 4. 2,4-二硝基苯肼溶液 称取2,4-二硝基苯肼19.8mg，用10NHCL10ml溶解后，加蒸馏水至100ml，置棕色瓶内，置冰箱保存。 5. 0.4N氢氧化钠溶液 。 6. 丙酮酸标准液（1μmol/L） 准确称取纯丙酮酸钠11.0mg，置于100ml容量瓶中，加入乳酸钠缓冲底物液使其溶解并稀释至刻度。此液应新鲜配制。 操作： 先将血清标本做1/5稀释（血清1份蒸馏水4份），然后按照表进行操作。 试剂ml 测定 对照 稀释血清（1/5） 0.1 0.1 乳酸钠缓冲底物液 1.0 1.0 37℃水浴 预温3min 辅酶Ⅰ溶液 0.2 0 蒸馏水 0 0.2 混匀，置37℃水浴箱保温15min 2,4-二硝基苯肼 1.0 0.1 混匀，置37℃水浴箱保温15min 0.4N氢氧化钠溶液 10 10
混匀，室温放15min，用440nm或蓝色滤光板进行比色，以蒸馏水调零，读取各管吸光度读数，以测定管吸光度减去对照管吸光度，于标准曲线上查其活力单位值。
[标准曲线绘制] 血清乳酸脱氢酶比色测定法标准曲线绘制操作步骤 加入物 管号 0 1 2 3 4 5 6 丙酮酸标准液（1μmol/L）
— 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
乳酸钠缓冲底物液 1.0 0.95 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5