中药指纹图谱研究

11(5.80)，12(7.28)。 • 峰面积比值：S: 7: ＝(1.000): (0.236～0.394) • 部分共有峰的峰形描述：
（二）起草说明
• 目的在于说明制定指纹图谱检测标准中各个项
目的理由，规定各项目指标的依据、技术条件
和注意事项等。
• 既要有理论解释，又要有实践工作的总结及试 验数据。
二．中药材指纹图谱研究的 一般方法
• 主要介绍与中药（新药）注射剂指纹图 谱技术申报要求有关的研究内容
样品收集
• 为了确保指纹谱的系统性，必须进行具 有广泛代表性的样品收集，尤其是不同 产地、不同采收期及加工方式的样品的 收集，只有保证了样品的代表性，才能 保证建立的指纹谱的有效性。
（一）指纹图谱的检测标准
1）通过指纹图谱的特征性，能有效 鉴别样品的真伪或产地； 2）通过指纹图谱主要特征峰的面积 或比例的制定，能有效控制样品的 质量，确保样品质量的相对稳定。
2．中药材指纹图谱的定义：
• 中药材指纹图谱系指中药材经适当 处理后，采用一定的分析手段，得到的 能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。 • 如果原药材需经过特殊炮制（如醋 制、酒制、炒炭等），则应制定原药材 和炮制品指纹图谱的检测标准。
（三）中药指纹图谱建立的 意义与原则
• 建立于中药成分的系统研究结果之上的指 纹图谱，是现阶段可以全面的反映中药的内在 质量的一个有效手段。世界公认，中药化学成 分的多样性与复杂性是发挥其疗效的物质基础， 同时也是质量评价的重点与难点。 • 中药药效的发挥，不能为一个或一种化学 成分所体现，那么，建立全面反映所含成分的 指纹图谱， 有效地体现中药成分的复杂性，从 而更好地评价中药的质量，中药指纹图谱必将 成为中药质量评价的发展趋势。
• 参照物的制备应根据检测方法的需要，选择
适宜的方法进行制备。
例：黄芪
(1)黄芪甲苷对照品溶液的制备：取黄芪甲苷
对照品，加流动相制成每1ml含1mg的溶液作 为皂苷类成分检测的对照品溶液。 (2)毛蕊异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照 品溶液的制备：取毛蕊异黄酮-7-O-β-D-吡喃 葡萄糖苷对照品，加流动相制成每1ml含1mg 的溶液作为黄酮及其苷类成分检测的对照品溶
各共有指纹峰面积的比值。
• 各共有指纹峰面积比值必须相对固定。
峰面积比值的要求：
• Ai≥20％At: SD≤±20％ • 10%At≤ Ai< 20%At: SD≤±25% • Ai≤ 10％At：峰面积比值不作要求，但必须 标定相对保留时间。 • 未达基线分离的共有峰，应计算该组峰的总 峰面积作为峰面积，同时标定该组各峰的相 对保留时间。
1、名称、汉语拼音
7(0.34) ， 8(0.36) ， 9(0.41) ， 10(0.43) ， 11(0.52) ，
12(0.54)，S(1.00)，13(1.63)，14(1.80)。 • 峰面积比值：1～5: 8: 9＝(0.269～0.449): (0.492～ 0.738): (1.00) • 部分共有峰的峰形描述：
例：黄芪黄酮类成分的指纹图谱
例：黄芪黄酮类成分指纹图谱的技术参数：
• 共 有 峰 的 峰 号 （ 相 对 保 留 时 间 ） ： 1(0.52) ，
2(0.58) ， 3(0.74) ， 4(0.90) ， S(1.00) ， 5(1.22) ，
6(1.36) ， 7(2.01) ， 8(3.25) ， 9(3.67) ， 10(4.35) ，
• 3．中药指纹图谱的建立： • 应以系统的化学成分研究和药理学 研究为依托； • 应体现系统性、特征性、稳定性三 个基本原则。
（1）系统性：
• 指的是指纹图谱所反映的化学成分，应包 括中药有效部位所含大部分的种类，或指标成 分的全部。 • 如中药人参中所含的有效成分多为皂苷类化合 物，则其指纹谱应尽可能多的反映其中的皂苷 成分； • 银杏叶的有效成分是黄酮和银杏内酯类，则其 指纹谱可采用两种方法针对这两类成分，分别 分析，以达到系统全面的目的。
中药指纹图谱研究
•
指纹图谱(fingerprint)系指某种中 药材或中药制剂，经适当处理后采 用一定的分析手段得到的、能表示 该样品特征的色谱、光谱或其它图 谱。
一、为什么要研究中药指纹图谱
• （一）中药质量分析的现状
• 质量稳定的原料是生产质量稳定的产品的先决 条件。
–中药材绝大部分来源于生物，包括植物药和 动物药。中药活性成分大部分为生物体内次 生代谢产物，少数为初生代谢产物。 – 产地、气候、生态环境、栽培或养殖技 术、产地加工、炮制方法等对中药材的化学 成分影响很大。 • 目前大部分中药的有效成分未被阐明或仅 部分阐明。
1．中药指纹图谱的定义与特点
（1）中药指纹图谱的定义：
• 中药指纹图谱是指某种（或某产地） 中药材或中成药中所共有的、具有特征 性的某类或数类成分的色谱或光谱的图 谱。
（2）中药指纹图谱的特点：
中药指纹图谱的特点：突破了传统的线 性思维，采用多学科、多领域的先进分析技 术，着眼于宏观规律性研究，建立客观、整 体和多指标的综合评价体系，在阐述中药的 活性成分的同时，阐明其中的其它成分，能 够展示各类成分的全貌，是当前国际公认的 有效的质量控制技术、能够对中药材、中药 制剂（包括半成品和成品）质量的真伪优劣 与稳定性作出较全面的评价。
• 色谱法采用相对保留时间标定指纹峰，光谱法 采用波长或波数标定指纹峰。
(3)共有指纹峰面积的比值
• 以对照品作为参照物的指纹图谱，以参照物
峰面积作为1，计算各共有指纹峰面积与参照
物峰面积的比值；
• 以内标物作为参照物的指纹图谱，则以共有
指纹峰中其中一个峰（要求峰面积相对较大、
较稳定的共有峰）的峰面积作为1，计算其他
•
随着现代科学手段引入到中药的品质研究 中，通过利用植物学，植物化学，分析化学以 及药理学等相关学科的研究方法，开辟了中药 品质评价的新天地。 • 中药的质量研究发展到普遍采用色谱学手 段，分析中药材或中药制剂中的化学成分，并 针对其中的一个或两个成分进行定性或定量分 析，无论在药典、部颁标准和地方标准，还是 现在申报的新药研究资料中，采用这种方式进 行质量的评价已成为主流。
（2）特征性：
• 是指指纹图谱中反映的化学成 分信息（具体表现为保留时间或位 移值）是具有高度选择性的，这些 信息的综合结果，将能特征地区分 中药的真伪与优劣，成为中药自身 的“化学条码”。
（3）稳定性：
• 指的是所建立的指纹图谱，在规 定的方法与条件下，不同的操作者 和不同的实验室应能作出相同的指 纹图谱，其误差应在允许的范围内， 这样才可以保证指纹图谱的使用具 有通用性和时间性，也是作为标准 方法所必备的特征之一。
(4)非共有峰面积
中药材供试品的图谱与指纹图谱比 较，非共有峰总面积不得大于总峰面
积的10％。
例：黄芪皂苷类成分的指纹图谱
黄芪皂苷类成分指纹图谱的技术参数：
• 共 有 峰 的 峰 号 （ 相 对 保 留 时 间 ） ： 1(0.17) ，
2(0.19) ， 3(0.22) ， 4(0.24) ， 5(0.27) ， 6(0.30) ，
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入
液相色谱仪中，记录60分钟的色谱图，即得。以毛蕊异黄酮-7-
O-β-D-吡喃葡萄糖苷的色谱峰(S峰)的相对保留时间和峰面积为1
计算相对保留时间和峰面积比值。
6、指纹图谱及技术参数
(1)指纹图谱
●根据供试品的检测结果，建立指纹图谱。
●采用HPLC和GC制定指纹图谱，其记录时间一般为1小时；
采用TLCS制定指纹图谱，必须提供从原点至溶剂前沿的图 谱；采用光谱法制定指纹图谱，必须按各种光谱的相应规定
提供全谱。
●化学成分类型复杂的品种，必要时可建立多张对照指纹图谱。 ●指纹图谱的建立：根据10批次以上供试品的检 测结果所给出的相关参数，制定指纹图谱。
(2)共有指纹峰的标定
• 采用色谱方法制定指纹图谱，必须根据参照物 的保留时间，计算指纹峰的相对保留时间。 • 根据10批次以上供试品的检测结果，标定中药 材的共有指纹峰。
例：黄芪
• 皂苷类成分指纹图谱检测供试品制备： 详细叙述提取、纯化、供试品配制等。 • 黄酮类成分指纹图谱检测供试品制备：
• 多糖类成分指纹图谱检测供试品制备：
4、参照物的制备
• 制定指纹图谱必须设立参照物。
• 应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜
的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照
品，可选择适宜的内标物作为参照物。
内容： 名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供
试品和参照物的制备、检测方法、指纹
图谱及技术参数。
1、名称、汉语拼音
按中药命名原则制定 如：黄芪 【名称】黄芪
【汉语拼音】Huangqi
2、来源 ●原植、动物：科名、中文名、拉丁学名、药
用部位、产地、 采收季节、产地加工、炮制
方法等。
●矿物药：矿物的类、族、矿石名或岩石名、
例：黄芪黄酮及其苷类成分的测定方法
照高效液相色谱法（中国药典2000年版一部附录ⅥD）测定。
色谱条件和系统适用性试验
色谱柱以十八烷基硅烷键合硅
胶 为 填 充 剂 ， 型 号 为 Polaris 5μ C-18-A ， 250×4.6mm （MetaChem公司产品）；流动相为乙氰－水（含0.042％磷酸） (1:4)，流速0.8ml/分钟，检测波长225nm；理论塔板数按毛蕊异 黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷计，应不低于3000。
3、供试品的制备
• 应根据中药材中所制备。
• 制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹
图谱中的体现。
• 对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化
学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需