温度 PH 激活剂和抑制剂对酶活性的影响

（一）、温度、PH对酶活性的影响

一、实验目的

了解温度对酶活性的影响。了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。

二、实验原理

三、实验步骤

1、温度对酶活性的影响

取3支试管，编号后按下表加入试剂

试管编号

试剂

1 2 3

0.2%淀粉溶液

1.5 1.5 1.5

无

稀释唾液/ml

1 1

煮沸过的稀释唾液/ml 无无

1

摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10min后取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。

注意事项：

1、唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min

后，使其流入量筒，并稀释到50ml。

2、PH对酶活性的影响

取4个标有号码的20ml试管。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和

0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。

试管编号

试剂

1 2 3 4

0.2mol/L磷酸氢二钠/ml

5.15

6.05

7.72 9.72

0.1mol/L柠檬酸/ml

4.85 3.95 2.28 0.28

PH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。

第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。

观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。

注意事项：

1、从第三管中取混合液，是因为它的PH接近唾液淀粉酶的最适PH。

2、间隔1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各

试管反应时间相同。

四、实验结果

1、温度

1 2 3

浅蓝一半暗

褐

一半浅

蓝深蓝

2、PH

1 2 3 4

深蓝浅蓝浅紫深紫

分析：

酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。唾液淀粉酶的最适温度为37摄氏度。低温抑制酶的活性，高温使酶失活。淀粉遇碘显蓝色，按其分解程度由低到高会依次出现蓝色、紫色、暗褐色、无色。所以可用碘来检验其水解程度。

PH也能影响酶的活性，在最适PH下，酶的活性最大，偏酸、偏碱都降低酶的活性，唾液淀粉酶的最适PH为6.8。

（二）、激活剂和抑制剂对酶活性的影响

一、实验目的

了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。

二、实验原理

三、实验步骤

取4支试管按下表加入试剂，观察现象并记录。

试剂

试管编号

1 2 3 4

0.1%淀粉溶液/ml

1.5 1.5 1.5 1.5

1%CuSO4溶液/ml

0.5

无无无

1%Nacl溶液/ml 无

0.5

无无

1%Na2SO4溶液/ml 无无

0.5

无

蒸馏水/ml 无无无

0.5

稀释唾液/ml

0.5 0.5 0.5 0.5

37摄氏度恒温水浴5min

碘化钾-碘溶液/滴

2 2 2 2

四、实验结果

1 2 3 4

深蓝浅蓝中蓝中蓝

分析：

酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。

加入Na2SO4是为了消除Na+和SO42-对酶活性的影响。