激活剂与抑制剂对酶促反应的影响
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
影响酶作用的因素：影响酶促反应的因素常有酶的浓度、底物浓度、pH值、温度、抑制剂、激活剂等。
其变化规律有以下特点：
1、酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。
2、底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著，当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。
3、酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂，激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。
注意事项：
激活剂和抑制剂对于酶活性的影响，常常分不清激活剂，因为加入蒸馏水、NaCl、Na2SO4这3支试管的颜色一致，都是黄色。
出现这种现象的原因是酶活性太高了，需要稀释唾液，唾液稀释至加入蒸馏水的试管呈浅红色即可。
这样一来，这3支试管的颜色分别是浅红、黄、浅红，就可以断定Cl-是激活剂。
偶尔也有分不清抑制剂的就是加入蒸馏水、CuSO4、
Na2SO4这三支试管的颜色一致，都是蓝色。
因为酶活性太低，需要提高酶活性，只要重新制备唾液淀粉酶就行（但是新酶的活性不可太高，否则又分不清激活剂）。
最后3支试管的颜色应该是浅红、蓝、浅红，可以断定Cu2+是抑制剂。
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇)
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇) 影响酶促反应速度的因素生化实验实验二影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。
淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。
在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。
此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。
因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
淀粉I2 【操作】1. 温度对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：2. PH对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：3．激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管，编号，按下表操作：【结果及分析】观察各管颜色变化，说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。
【实验注意事项】篇二：生化实验思考题参考答案生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解1、实验材料的选择依据是什么？答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。
从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。
2、材料的破碎方法有哪些？答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法；(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等；(3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。
实验二总糖与还原糖的测定1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。
间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。
实验八酶促反应的影响因素
实验八酶促反应的影响因素一、目的要求1．了解温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
2．学习检定温度、pH、激活剂、抑制剂影响酶促反应速度的方法。
二、实验原理在酶促反应中，酶的催化活性与环境温度、 pH有密切关系，通常各种酶只有在一定的温度、pH范围内才表现它的活性，一种酶表现其活性最高时的温度、pH值称为该酶的最适温度、最适pH。
在酶促反应中，酶的激活剂和抑制剂可加速或抑制酶的活性，如氯化钠在低浓度时为唾液淀粉酶的激活剂，而硫酸铜则是它的抑制剂。
本实验利用淀粉水解过程中不同阶段的产物与碘有不同的颜色反应，定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中各种因素对其活性的影响。
淀粉（遇碘呈蓝色）→紫色糊精(遇碘呈紫色)→红色糊精(遇碘呈红色)→无色糊精(遇碘不呈色)→麦芽糖(遇碘不呈色)→葡萄糖(遇碘不呈色)。
所以淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断，以此反映淀粉酶的活性，由此检定温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。
三、实验器材试管和试管架、恒温水浴、冰浴、吸量管（1 mL6支、2 mL4支、5 mL4支）、滴管、量筒、玻棒、白瓷板、秒表、烧杯、棕色瓶。
四、实验试剂1．新鲜唾液稀释液(唾液淀粉酶液)：每位同学进实验室自己制备，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，0.5 min后使其流入量筒并稀释至200倍(稀释倍数可因人而异)混匀备用。
2．1%淀粉溶液A(含0.3%NaCl)：将1 g可溶性淀粉及0.3 g氯化钠混悬于5 mL蒸馏水中，搅动后，缓慢倒入沸腾的60 mL蒸馏水中，搅动煮沸1 min，冷却至室温，加水至100 mL,置冰箱中保存。
3．1%淀粉溶液B(不含NaCl)4．碘液：称取2 g碘化钾溶于5 mL蒸馏水中，再加入1 g碘，待碘完全溶解后，加蒸馏水295 mL，混匀贮于棕色瓶中。
5．1%NaCl溶液6．1%CuSO溶液47．缓冲溶液系统按下表混合配制。
第9章__酶动力学
max
V max [ S ] V max V Km [ S ] 2
K 3 [ E ][S ] V max [ S ] K 3 [ E ][S ] 复 习 V K 3 [ ES ] V K 3 [ ES ] Km [ S ] Km [ S ] Km [ S ]
失活 (inactivation)：凡是酶活力的降低或丧失都称为 酶的失活。 抑制 (inhibition)：使酶活力下降或丧失但并不引起酶 蛋白变性，它主要改变酶活性中心的化学性质。 抑制剂（ inhibitor ）：引起酶的抑制作用的物质称为 酶的抑制剂。
研究抑制剂对酶的作用有重大的意义： （1）药物作用机理和抑制剂型药物的设计与开发；抗癌药 （2）了解生物体的代谢途径，进行人为调控或代谢控制发酵； （3）通过抑制剂试验研究酶活性中心的构象及其化学功能基 团，不仅可以设计药物，而且也是酶工程和化学修饰酶、酶 工业的基础。
最适温度： 温度对酶促反应速度的影响有两个方面： 1. 温度升高，加快反应速度。 2. 温度升高，酶变性失活。 最适温度不是酶的特征常数，它与底物种类、作用时间、pH、离子强 度 等因素有关。 温血动物酶的最适温度35℃—40℃；植物酶最适温度40℃—50℃；微生 物差别大，如细菌Taq DNA聚合酶70℃。 温度系数 Q10：温度升高 10℃，反应速度与原来的反应速度之比，大多 数酶的Q10一般为1~2。
（二） 小分子有机物的激活作用
1.某些激活剂（如Cys、GSH）能还原巯基酶中的某些二硫键使 成-SH，-SH是巯基酶起催化作用所需的基团，提高了酶活性。 2.金属螯合剂，如EDTA(乙二胺四乙酸)，可络合一些重金属离 子，解除它们对酶的抑制，从而使酶活升高。
温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
[目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理； 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程；
[原理] 1. 温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应 的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。 温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、 失活； 2.pH ：酶活性最大时的环境 pH 为最适 pH 。 pH 不仅 会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。
3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
C．激活剂、 抑制剂组 1%淀粉 试剂 （2滴） 唾液
C1管
1ml 1%NaCl 10d
C2管
1ml 1%CuSO4 10d
C3管
1ml
C4管
1ml
1%Na2SO4 蒸馏水 10d 10d
摇匀， 37℃保温,每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷 盘小池中（小池预先加好0.1%碘液） 。当碘液不变色时， 分别向4管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
收集唾液 ( 自来水漱口、收集唾液约 2-3ml 于小烧杯 中，蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A．温度组 唾液 （2ml） 1%淀粉 （1ml） 1%碘液 A1管 冰水浴 5分钟 冰水浴 15分钟 2d A2管 37 ℃水 浴5分钟 37℃水浴 15分钟 2d A3管 沸水浴 5分钟 沸水浴 15分钟 2d
2、pH对酶活性的影响 B．PH值组 B1管 PH5.0 2ml 10d B2管 PH6.8 2ml 10d B3管 PH8.6 2ml 10d
磷酸盐缓冲液 （2ml） 1%淀粉 唾液
摇匀，立即置37℃保温，每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中（小池预先加好0.1%碘液）。当碘液不 变色时，分别向3管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
激活剂与抑制剂对酶的影响实验目的
KI-I2溶液（mL） 记录观察结果
2滴
2滴
2滴
从1号试管中用玻棒取出1滴溶液，置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。待 1号试管内的溶液遇碘不再变色后，立即取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶 液颜色的变化。
操作步骤
1. 取3支试管，各加2mL 含0.3％氯化钠的0.5％ 淀粉溶液。 2. 另取3支试管，各加1mL淀粉酶液。 3. 将此 6 支试管分为 3 组，每组中盛淀粉溶液与 淀粉酶液的试管各1支。 4. 三组试管分别置入 0℃ 、 37℃ 与 100℃ 的水浴 中。 5. 等 5min 后，将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶 液中，继续维持原温度条件5min后，立即滴加2 滴碘液，观察溶液颜色的变化。
操作步骤
1、唾液淀粉酶液的准备
实验者用蒸馏水嗽口，除去食物残渣。然后含一口蒸馏 水于口中，轻嗽一分钟，吐入小烧杯中。将其稀释一倍。
2、检查试剂
试剂处理
（取2只试管，按下表操作）
试管编号 #1 3 — 2 #2 － 3 2
含0.3％NaCl的淀粉溶液（mL） 2% 蔗糖溶液（mL） Benedict试剂（mL） 摇匀，沸水浴煮沸3min 记录观察结果
3. 淀粉酶的专一性实验
试管编号
（取2只试管，按下表操作）
#1 1 3
#2 1 －
试剂处理
已稀释的唾液溶液（mL） 含0.3％NaCl的0.5%淀粉溶液 （mL） 2%蔗糖溶液（mL） Benedict试剂（mL） 记录观察结果
—
2
3
2
摇匀，置37℃水浴保温15min 摇匀，沸水浴煮沸2min
二、pH对淀粉酶活性的影响
三、温度对淀粉酶活性的影响
实验目的 了解温度对酶活性的影响及最适温度的定义。 实验原理
影响酶促反应速度的因素
实践练习： 酶促反应的最适温度( ) 随时间延长而升高 是在某条件下，酶促反应速度最大时的温度 在人体内为50℃ 都不超过50℃
演讲完毕，感谢观看
实践练习： 简答题 影响酶促反应速度的因素有哪些？
（七）抑制剂对酶促反应速度的影响
1.不可逆性抑制
不可逆抑制剂与酶分子以共价键结合，使酶失活。（不能用透析立法去除）
① 有机磷化合物 有机磷杀虫剂能与胆碱酯酶的活性中心结合，使酶失活。
-Ser-OH
-Ser-O
P
O-R
O-R
O
P
O-R
O-R
O
X
胆碱酯酶
磷酰化胆碱酯酶（失活）
底物的消耗量
产物的生成量
单位时间
单位时间
或
v =
0 时 间
产 物
（二）酶浓度对反应速度的影响 v= k[E] （k为速度常数）
v
[S]
底物浓度对酶促反应速度的影响 底物浓度对酶反应速度的影响
呈现矩形双曲线（rectangular hyperbola）
温度（℃）
最适 温度
01
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，请尽量言简意赅地阐述观点。
（六）激活剂对酶促反应速度
02
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，请尽量言简意赅地阐述观点。
的影响
03
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，请尽量言简意赅地阐述观点。
酶的激活剂：使酶由无活性
04
的物程度与下列那种因素无关（ ） A．作用时间 B．抑制剂浓度 底物浓度 酶与抑制剂的亲和力的大小
实践练习： 哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度（ ） 不可逆抑制作用 竞争性可逆抑制作用 非竞争性可逆抑制作用 抑制作用
影响酶催化作用的因素
影响酶催化作用的因素1．酶催化速率的表示方法：单位时间内底物的减少量或产物的生成量。
2．影响酶作用的因素及其规律。
影响酶促反应的因素常有酶的浓度、pH、温度、、底物浓度、激活剂、抑制剂等，其变化规律有以下特点：(1)温度对酶促反应的影响①在一定温度范围内酶促反应速率随温度的升高而加快；但当温度升高到一定限度时，酶促反应速率不仅不再加快反而随着温度的升高而下降。
②在一定条件下，酶活性最大时的温度称为该酶的最适温度。
见图1。
③低温影响酶的活性，但不会使酶的空间结构破坏，温度升高后，酶仍能恢复活性。
但高温会导致酶变性，使其永久失去活性。
(2)pH对酶促反应的影响①每一种酶只能在一定限度的pH范围内才有活性，超过这个范围酶就会永久失去活性。
②在一定条件下，每一种酶在某一pH时活性最大，此pH称为该酶的最适pH。
如图2表示胰蛋白酶的活性与pH的关系。
(3)底物(反应物)浓度对酶促反应的影响①在底物浓度较低时，反应速率随底物浓度增加而加快，反应速率与底物浓度近乎成正比。
②在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速率也随之加快，但不显著。
③当底物浓度很大，且达到一定限度时，反应速率就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应速率也几乎不再改变，原因是酶饱和了。
见图3。
(4)酶浓度对酶促反应的影响。
在底物足够、其他条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其他不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应速率与酶浓度成正比。
见图4。
(5)酶激活剂和酶抑制剂对酶活性的影响①酶激活剂：能增强酶的活性或使非活性的酶变为活性酶，如唾液淀粉酶需要被氯离子激活后，其活性才能增强。
②酶抑制剂：能使酶的活性下降或丧失，如氰化物可以抑制细胞色素氧化酶的活性。
影响酶作用的因素：曲线分析：曲线含义的准确表述：B 点：该酶发挥催化作用的最适温度或最适pH 值AB 段：达到最适温度(pH 值)前，随着温度(pH 值)升高，酶的催化效率提高酶的最适pH 值往往随底物种类、浓度等的变化而不同，因此，并不是一个常数，只是在一定条件下才有意义。
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激活剂与抑制剂对酶促反应 的影响
Exp.14 Effects of Activator and Inhibitor on the Enzyme-catalyzed EnzymeReaction
一、实验原理
唾液淀粉酶可催化淀粉逐步水解， 唾液淀粉酶可催化淀粉逐步水解，生成分子大小不同 的糊精及最后水解成麦芽糖。淀粉及糊精遇碘各呈不同的 的糊精及最后水解成麦芽糖。 颜色反应。直链淀粉(即可溶性淀粉)遇碘呈蓝色， 颜色反应。直链淀粉(即可溶性淀粉)遇碘呈蓝色，糊精按 分子的大小遇碘可呈蓝色、紫色，褐色和红色。 分子的大小遇碘可呈蓝色、紫色，褐色和红色。最小的糊 精和麦芽糖遇碘不显色。根据颜色反应， 精和麦芽糖遇碘不显色。根据颜色反应，可以了解淀粉被 水解的程度。 水解的程度。 有些物质可作为激活剂，能提高酶活性， 有些物质可作为激活剂，能提高酶活性，有些物质可 作为抑制剂，能降低酶活性，也能影响淀粉被水解的程度。 作为抑制剂，能降低酶活性，也能影响淀粉被水解的程度。 因此，通过与碘产生的颜色反应判断淀粉被水解的程度， 因此，通过与碘产生的颜色反应判断淀粉被水解的程度， 了解激活剂和抑制剂对酶促作用的影响。 了解激活剂和抑制剂对酶促作用的影响。
3 1 15 min 冷却 1
3 1 1
1 3 1 1
四、实验结果
比较各管现象，解释现象。 比较各管现ห้องสมุดไป่ตู้，解释现象。
五、思考题
1.本实验中1 1.本实验中1、2、3管各有何用意? 本实验中 管各有何用意? 2.结合激活剂和抑制性实验 结合激活剂和抑制性实验， 2.结合激活剂和抑制性实验，对酶的激活剂抑制剂进行深 入探讨。 入探讨。
三 方法与步骤
支试管,按下表操作 取3支试管 按下表操作 支试管
表1.酶的激活剂抑制剂实验 1.酶的激活剂抑制剂实验 酶的激活剂抑制剂
管号 试剂
1 1
2 1
3
1％ NaCl/ml ％ 0.1％CuSO4/ml ％ 蒸馏水/ml 蒸馏水 0.1％淀粉溶液 ％淀粉溶液/ml 稀释唾液 /ml 37 ℃ 碘化钾-碘溶液 滴 碘化钾 碘溶液/滴 碘溶液 现象
二、实验用品
1、材料 、 唾液(进食前的 稀释100~400倍. 进食前的)稀释 唾液 进食前的 稀释 倍 2、试剂 、 （1）0.1％淀粉溶液： 取可溶性淀粉 克，先用少量的水 ） ％淀粉溶液： 取可溶性淀粉1克 调成糊状，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加变搅， 调成糊状，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加变搅，最后 以沸蒸馏水稀释至100ml。 以沸蒸馏水稀释至 。 溶液： 溶于100ml蒸馏水。 蒸馏水。 （2） 1％ NaCl溶液：1gNaCl 溶于 ） ％ 溶液 蒸馏水 溶液： 溶于100ml蒸馏水。 蒸馏水。 （3） 0.1％CuSO4溶液：1g CuSO4溶于 ） ％ 蒸馏水 碘溶液: （4） 碘化钾 碘溶液 ） 碘化钾-碘溶液