低产桔霉素红曲霉复合诱变育种
红曲霉所产桔霉素及其检测与控制
红曲霉所产桔霉素及其检测与控制
陈旭峰;周立平;孙佰申;马莉锋;贾波
【期刊名称】《酿酒》
【年(卷),期】2004(031)004
【摘要】红曲霉能够生成多种生理活性而备受关注,但大多红曲霉同时也产生一种真菌毒素-桔霉素.红曲产品的桔霉素问题已经使我国红曲出口受到了很大的影响.介绍了红曲霉所产桔霉素的产生、合成途径、检测方法以及控制红曲霉产生桔霉素的几种措施.
【总页数】4页(P113-116)
【作者】陈旭峰;周立平;孙佰申;马莉锋;贾波
【作者单位】浙江工业大学,杭州,310014;浙江工业大学,杭州,310014;浙江工业大学,杭州,310014;浙江工业大学,杭州,310014;浙江经贸职业技术学院,杭州,310035【正文语种】中文
【中图分类】TS261.12
【相关文献】
1.红曲发酵过程中桔霉素和黄曲霉毒素的检测方法及控制对策刍议 [J], 孙强;马祖兵;李小芳;吴纯洁;罗佳
2.红曲霉0301产色素培养条件优化及其桔霉素含量检测 [J], 邹宇;侯红漫;张笑;刘阳;陈莉
3.红曲霉桔霉素的检测方法及红曲霉产桔霉素的判别方法 [J], 许赣荣;李凤琴;陈蕴;李玉伟;虞慧玲
4.红曲霉菌株CS-5筛选及不产桔霉素机理研究 [J], 杨华;刘丹;马博雅;王旭锋;李贞景;陈勉华;王昌禄
5.红曲霉桔霉素的检测和控制方法研究进展 [J], 李培睿;张晓伟;曹依曼
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红曲色素和桔霉素代谢调控方法的研究进展
红曲色素和桔霉素代谢调控方法的研究进展黄颖颖;陈慎;杨成龙;陆东和【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2018(043)002【摘要】在食品安全问题日益受到关注的今天,取代人工合成色素的天然色素具有广阔的市场前景.红曲色素是国际范围内生产量及使用量最大的天然食用色素之一,广泛应用于肉制品加工和水产品加工领域的着色.福建红曲以品质优、色价高的特点,在国内外享有极高声誉,但在红曲霉代谢过程中同时会合成真菌毒素桔霉素,使红曲色素在使用中存在安全隐患.我国红曲色素产品中桔霉素含量普遍偏高,制约了我国红曲产品的出口和使用领域的拓展.红曲色素和桔霉素合成呈伴生现象,常出现提高红曲色素产量的同时,桔霉素含量也相应提高的情况,因此调控红曲霉代谢过程中促进红曲色素的产生同时抑制桔霉素的产生成为解决这一矛盾的关键.文章介绍了国内外红曲色素和桔霉素的代谢调控方法的研究概况,主要包括菌种选育、发酵工艺优化及基因工程等来达到调控目的,通过掌握红曲菌代谢调控网络,研究红曲菌产桔霉素的代谢途径及途径中的代谢机制,进而综合分析调控红曲霉合成代谢桔霉素存在的问题并提出应对措施,对推动红曲产品的出口和红曲产业的健康发展具有重要意义.【总页数】7页(P188-194)【作者】黄颖颖;陈慎;杨成龙;陆东和【作者单位】福建省农业科学院农业工程技术研究所,福州350003;福建省农产品发酵加工工程技术研究中心,福州 350003;福建省农业科学院农业工程技术研究所,福州350003;福建省农产品发酵加工工程技术研究中心,福州 350003;福建省农业科学院农业工程技术研究所,福州350003;福建省农产品发酵加工工程技术研究中心,福州 350003;福建省农业科学院农业工程技术研究所,福州350003;福建省农产品发酵加工工程技术研究中心,福州 350003【正文语种】中文【中图分类】TS201.57【相关文献】1.铵盐对紫色红曲霉合成代谢红曲色素及桔霉素的影响 [J], 岳建明;杨强;肖潇;尹胜;张婵;王成涛;胡济美;赵吉兴2.红曲色素发酵生产过程桔霉素控制技术研究进展 [J], 石侃;夏枫耿;吴振强3.高产红曲色素低产桔霉素紫色红曲霉转化子筛选与代谢产物分析 [J], 许楚旋;任浩;章婷;冯青青;吴巧玉;蒋冬花4.氯化铵对紫色红曲霉固态发酵红曲色素和桔霉素合成的双向调控作用 [J], 周文斌;黄梓芮;洪家丽;李路;郭伟灵;蒋雅君;刘斌;倪莉;饶平凡;陈劲星;吕旭聪5.无桔霉素红曲色素突变株FM5183对单谷氨酸钠(MSG)、组氨酸的代谢特性 [J], 吴祖芳;翁佩芳;张礼星;Philippe J BLANC因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
浅变红曲霉桔霉素
浅变红曲霉桔霉素
许赣荣
【期刊名称】《酿酒科技》
【年(卷),期】1999(000)003
【摘要】红曲产品中可能存在真菌霉素（ｍｙｃｏｔｏｘｉｎ）－－桔霉素（ｃ
ｉｔｒｉｎｉｎ）．根据国内外对给曲桔霉素的最新研究成果，介绍了桔霉素的有关性质，如桔霉素的生产菌种（株）、桔霉素的代谢途径、桔霉素的有关理化性质、如何控制桔霉素的生产。
作者认为，桔霉素问题的出现，在我国红曲生产及应用领域来说，即是机遇，又是挑战。
我国红曲生产行业对红曲桔霉素的问题应引起足够的重视，对生产菌种及红曲的发酵工艺技术要进行系统
【总页数】4页(P20-22,19)
【作者】许赣荣
【作者单位】无锡轻工大学生物工程学院
【正文语种】中文
【中图分类】TS261.12
【相关文献】
1.红曲霉桔霉素的检测方法及红曲霉产桔霉素的判别方法 [J], 许赣荣;李凤琴;陈蕴;李玉伟;虞慧玲
2.红曲霉桔霉素的检测和控制方法研究进展 [J], 李培睿;张晓伟;曹依曼
3.不同温度对红曲霉液态发酵合成红曲黄色素及桔霉素的影响 [J], 况嘉铀;屈廷啟;韦胜;王伟平
4.低桔霉素红曲霉变异菌株筛选及其变异位点分析 [J], 桂艳玲;唐光甫;满海乔;赵杰宏
5.高效液相色谱法同时测定酱油中黄曲霉素B_1、棕曲霉毒素A和桔霉素 [J], 黄化成;赵尊行;李寅宾
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复合诱变选育高产洛伐他汀红曲菌
复合诱变选育高产洛伐他汀红曲菌作者：陈秉梅孙丽娟陈巧如来源：《福建农业科技》2020年第06期摘要：为了提高紫色红曲霉菌M21发酵产洛伐他汀的含量，首先确定了紫外线、亚硝酸和氯化锂单诱变剂的最适诱变剂量，再采用紫外亚硝酸和紫外氯化锂复合诱变剂对出发菌株M21进行诱变选育。
结果表明：最适处理剂量为紫外线照射时间90 s，亚硝酸处理时间30 min，氯化锂处理浓度0.8‰。
紫外氯化锂复合诱变剂在最适处理剂量下对原始出发菌株M21的复合诱变效果更佳，得到了3株高产突变菌株ULi17、ULi19和ULi26，洛代他汀产量比出发菌株分别提高75.2%、60.4%和67.0%，遗传稳定结果显示ULi17产量最高、遗传性状较为稳定，因此将ULi17确定为后续研究的出发菌株。
关键词：洛伐他汀;紫色红曲霉菌;诱变选育中图分类号： Q939.97文献标志码： A文章编号： 0253-2301（2020）06-0007-05DOI：10.13651/ki.fjnykj.2020.06.002Breeding of High-yield Lovastatin from Monascus Strains by Complex MutagenesisCHEN Bing-mei， SUN Li-juan， CHEN Qiao-ru（Fujian Vocational College of Bioengineering， Fuzhou， Fujian 350002， China）Abstract：In order to improve the content of lovastatin produced by the fermentation of Monascus purpureus M21， the optimal mutagenesis dose of single mutagen such as ultraviolet ray，nitrous acid and lithium chloride was firstly determined， and then the complex mutagens ofultraviolet ray-nitrous acid and ultraviolet ray-lithium chloride were used to mutagenize the original strain M21. The results showed that the optimal treatment dose was the irradiation time ofultraviolet ray being 90 s， the treatment time of nitrous acid being 30 min， and the concentration of lithium chloride being0.8‰. The complex mutagen of ultraviolet ray and lithium chloride had better effect on the complex mutagenesis of the original strain M21 under the optimal treatment dose， and the three high-yield mutant strains ULi17， ULi19 and ULi26 were obtained. The production of lovastatin was 75.2%， 60.4% and 67.0% higher than that of the original strain， respectively. The results of geneticstability showed that ULi17 had the highest yield and stable genetic characters， so ULi17 was identified as the original strain for the subsequent studies.Key words：Lovastatin; Monascus purpureus ; Mutation breeding近年來，高胆固醇血症发生率正以惊人的速度增长，可引发多种心血管疾病并发症，因此严重威胁到公众健康。
红曲霉的研究进展_侯敏
方面红曲霉中的洛伐他汀具有降胆固醇、降血脂的作用； 在 工业上，红曲霉产生的莫纳斯叮 A（ Monascidin A） 、安卡内酯 （ Ankalactone） 、几丁质酶和糖肽类物质等可以开发应用为安 全的食品防腐剂［6］。 1． 1 红曲霉及红曲色素 红曲色素以粮食为原料，是红曲 菌培养过程的代谢产物，一般情况下，以大米为原料，生产红 曲米的回收率可达 50% ～ 60% ，红曲米的色素含量可达 5% ～ 10% ，而其他天然色素在原料中的含量则大多在 3% 以 下［7］。红曲色素结构有 10 种，其中 6 种为醇溶性的色素，另 外 4 种为水溶性色素［8］。红曲霉发酵所产生红曲色素有 20% ～ 30% 分泌到发酵液中（ 即胞外色素） ，70% ～ 80% 在菌 体内（ 胞内色素） 。胞内色素多为醇溶性色素，而胞外色素多 为水溶性色素。对红曲霉发酵液中红曲色素的提取可以采 用活性炭（ 粉状） 吸附法、等电点共沉淀法等。活性炭吸附法 是先用活性炭吸附发酵液中的色素，然后用乙醇进行洗脱。 研究发现，以粉状活性炭吸附后，以 95% 的乙醇在 50 ℃ 洗脱 30 min 效果较好，但活性炭吸附的色素不易洗脱，色素回收 率较低。等电点共沉淀法是通过调节发酵液的 pH 到豆蛋 白的等电点，从而使与豆蛋白结合的水溶性色素一起沉淀下 来，然后将发酵液离心沉淀，浓缩后获水溶性红曲色素。该 方法在 pH 3． 1 ～ 3． 5 范围内沉淀效果较好，对色素的提取率 较活性炭 吸 附 法 较 高。菌 体 内 红 色 素 提 取 主 要 是 浸 提 法。 但湿菌体直接用有机溶剂浸提的效果不够理想，浸提液中色 素含量很低，且对浸提液进行浓缩时，因水含量过高，有机溶 剂蒸发慢。对菌体进行烘干处理后进行色素提取的效果更 好，菌体烘干后有机溶剂对色素的浸提速度明显高于湿菌 体，浸提液色价高，且缩短了浓缩时间，避免了红曲色素发生 部分聚合反应，以及提取液的沉淀变性。菌体内色素大多为 醇溶性色素，乙醇和丙酮提取率较高 ，但从经济和毒性方面 考虑 ，乙醇较为适宜 ，且易回收，便于色素的干燥浓缩，其中 以 60% 的乙醇于 60 ℃ 恒温处理 1 h 获得了最大的菌体色素 提取率。在用 乙 醇 提 取 菌 体 色 素 的 同 时，加 入 一 定 量 的 钠 盐、钙盐或其混合物，均可以提高提取效果，可能是由于 2 种 金属离子的存在改变了细胞膜的通透性，从而使色素提取率
功能性红曲中功能成分的研究进展
and citrinin etc． ，are introduced． The composition，extraction and determination of these functional ingredients are ex-
plained． The degradation method of citrinin is discussed． Other functional ingredients，such as ergosterol，the active
谢林明等人［5］用萃取法提取红曲色素，用正 交法优化了萃取工艺，得出用 80% 乙醇、在 80℃ 下萃取 30 min、pH 值为 4 和萃取次数为 2 次时， 红曲色素的提取率达 12． 25% 。
唐明和邵伟等人［6］通过 CO2 超临界萃取法 萃取红曲米中红曲色素，得到萃取最佳条件： 红曲 米原料颗粒直径为 0． 3 mm、萃取温度为 50℃ 、萃 取压力为 20 MPa、CO2 流量为 10 kg / h 和萃取时 间为 4 h。
大量临床试验证明，洛伐他汀能有效地降低 人体内胆固醇含量。人体血液中洛伐他汀含量达 到 1 ～ 5 μg / L 时具有降低胆固醇的功效。人体中
真正发挥作用的是酸式洛伐他汀，可直接被人体 吸收，不需要人体内的羟基酯酶参与水解，不增加 肝、肾负担，直 接 发 挥 降 脂 作 用［21］。 酸 式 洛 伐 他 汀因无需人体内的羟基酯酶参与水解而减少了 肝、肾负担，所以降酯效果好，毒副作用小。
张金彪和周碧青等人［7］认为可 以 用 碱 解 法 制备水溶性红曲红色素，碱解过程可使红斑素和 红曲红素分子中的内酯键打开，生成羧酸盐，提高 其亲水性。当反应体系中 NaOH 与红曲色素用量 比例为 1∶ 13 时，碱解过程可在 15 min 内完成。
红曲醋高产洛伐他汀低产桔青霉素的研究
红曲醋高产洛伐他汀低产桔青霉素的研究张江宁;杨春;张玲;丁卫英【摘要】采用纯种培养专用红曲霉与老陈醋生产工艺相结合生产红曲保健陈醋,研究红曲醋制备过程中酒精发酵、醋酸发酵阶段,发酵温度、发酵时间、接种量、翻曲次数对洛伐他汀、桔青霉素含量的影响,工艺参数为:发酵温度32℃,酵母菌接种量20％,发酵时间9天,发酵结束时酒精度为10°;醋酸发酵阶段分段发酵法,即38℃下发酵12天,然后将温度降低至32℃发酵3天左右,翻曲次数为每天1次.该工艺制得的醋洛伐他汀含量为0.05 mg/mL,桔青霉素含量为0.01 mg/L.【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2019(044)001【总页数】4页(P85-88)【关键词】红曲醋;洛伐他汀;桔青霉素【作者】张江宁;杨春;张玲;丁卫英【作者单位】山西省农业科学院农产品加工研究所,太原030031;山西省农业科学院农产品加工研究所,太原030031;山西省农业科学院农产品加工研究所,太原030031;山西省农业科学院农产品加工研究所,太原030031【正文语种】中文【中图分类】TS201.3红曲在中国已有上千年的历史，红曲霉发酵物红曲在食品着色、食品防腐及药用医疗等方面的应用都有记载[1]，国内外大量研究表明红曲含有洛伐他汀成分，因此具有明显的降胆固醇和降血脂的功效[2]。
食醋是重要的调味品之一,目前市售红曲醋经动物实验证明其降血脂作用并不明显，主要原因是其功效成分含量较低，同时红曲霉发酵过程中产生对人体有害的真菌毒素桔青霉素，因此，如何通过工艺革新提高红曲醋中洛伐他汀含量、降低桔青霉素含量具有重要意义。
本实验采用纯种培养专用红曲霉与老陈醋生产工艺相结合生产红曲保健陈醋，研究红曲醋制备过程中酒精发酵、醋酸发酵阶段，发酵温度、发酵时间、接种量、翻曲次数对洛伐他丁、桔青霉素含量的影响，旨在掌握生产主动权，充分提高功能成分含量，适应现代化生产，丰富功能性醋的产品种类，提高老陈醋的附加值。
功能性红曲中功能成分的研究进展
文章编号：1006－8481（2011）01－0017－05功能性红曲中功能成分的研究进展逯慎杰，刘秀河（山东轻工业学院食品与生物工程学院，山东济南250353）摘要：为了更好地利用红曲，介绍了红曲中红曲色素、洛伐他汀和桔霉素等的组成、提取与检测方法，同时还介绍了桔霉素的降解方法，并综述红曲中其它功能成分有麦角甾醇、酶类活性物质和γ－氨基丁酸等，同时，对功能性红曲潜在的价值空间做出了展望。
关键词：红曲米；功能成分；提取；检测；功效中图分类号：TS201．4文献标识码：AResearch progress of the functional ingredients in monascus red riceLU Shen－jie，LIU Xiu－he（College of Food and Biological Engineering，Shandong Institute of Light Industry，Jinan，Shandong，250353）Abstract：For a better use of red koji，the functional ingredients in red yeast rice，like monascus pigment，lovastatin and citrinin etc．，are introduced．The composition，extraction and determination of these functional ingredients are ex-plained．The degradation method of citrinin is discussed．Other functional ingredients，such as ergosterol，the active substances of enzymes andγ－aminobutyric acid are summarized．The prospect of potential value of functional monas-cus red rice is put forward as well．Key Words：red kojic rice；functional ingredient；extraction；determination；efficiency0前言红曲的使用至今已有1000多年的历史，李时珍在《本草纲目》中提到：“此乃人窥造化之巧者也”，“奇药也”，作为中药，它具有活血和健脾等功效。
保健品中桔霉素危害
保健品中桔霉素的危害红曲是一种真菌，为中国传统的食品发酵菌种。
目前主要用于酿造、中药、食品着色剂和化妆品等。
特殊的红曲菌株会产生一些对人体有益的代谢产物，可使高血脂、高血压、高血糖、肥胖等代谢症候群及阿兹海默症（老人失智症）患者得到改善。
另外发现某些红曲霉能产生具有抑制胆固醇生物,因此红曲开始被开发为降血脂的品和保健食品。
红曲经由许多研究证实可改善代谢症候群症状，且又不像一般的药物有许多明显的副作用。
基于这些红曲好处与功能，使红曲产品在近年来越来越受大众接受与喜爱。
但是不一定每一种红曲产物都具有这些改善的效果，红曲的多功效主要来自于红曲菌株发酵所产生的代谢产物，必需有良好的菌株与完善的发酵方式才能得到具有功效性的代谢产物，与确保红曲产品的多功效。
红曲在发酵过程中可能会伴随着色素的代谢而产生毒素──橘霉素（citrinin），又称桔霉素。
桔霉素是由青霉属、曲霉属和红曲霉的某些菌株产生的一种广泛污染玉米、大米、小麦等农作物的真菌毒素，在红曲米中的污染尤为普遍近年来，由于它能够生成多种生理活性物质而备受各国的关注。
然而，目前发现多种长期应用于工业生产的红曲霉在产生色素和生理活性物质的同时,大部分能分泌桔霉素。
吃一般的红曲会伤肝伤肾是因为天然发酵的红曲常含有霉菌毒素橘霉素，目前卫生署的健康食品规范是规定所有含有橘霉素的产品，其橘霉素含量不得超过2ppm（百万分之二）。
所以，应以此作为选择安全健康食品的原则。
过量的橘霉素将造成健康的危害。
桔霉素对动物及人类具有肾毒性、致畸性、致癌性等。
桔霉素主要作用的靶器官是肾脏,它不仅可以致畸、导致肿瘤的发生,而且可以诱发突变.，其次血管扩大，支气管收缩，肌张力增加。
红曲的安全性开始受到质疑。
因此,在提高色素产量的同时如何降低红曲产品中桔霉素的含量就显得尤为重要。
本实验室的检测服务对红曲生产企业和应用企业及整个产业链起到良好的推动作用经济效益分析：解决桔霉素超标问题，可增强保健品厂家在市场的竞争力，明显提高经济效益。
红曲霉代谢产物的研究进展_李雪梅
红曲霉是目前世界上能产食用色素的重要微生 物之一。在我国已有 1 000 多年药食两用的历史。 法国学者 van Tieghem 在 1884 年建立了红曲霉属的 分类。在分类上，红曲霉属真菌界、子囊菌门、子 囊菌纲、 散囊菌目、 红曲菌科、 红曲霉属 （Monascus van Tieghem ） 。目前，美国培养物物种保藏中心 （ ATCC ） 已 有 58 个 红 曲 菌 株 。 根 据 1983 年 Hawksworth 和 Pit 的分类系统，大部分红曲菌株属 于 3 种：丛毛红曲霉 M. pilosus K. Satô ex D. Hawksw. & Pitt、紫色红曲霉 M. purpureus Went 及 安卡红曲霉 M. anka Nakazawa et Satô[1]。 20 世纪 70 年代，日本 Endo 首次从红色红曲 霉 M. rubber van Tieghem 中分离出活性物质红曲可 林（monacolin K）以来， 日本、 美国、 韩国、中国 等众多专家学者对红曲进行了广泛而深入的研究， 取得了令人瞩目的成果。尤其是通过红曲霉代谢产 不断挖掘出生物活 物的成分分析及其活性研究[3-4]， 性物质及新化合物。红曲霉的代谢产物主要有红曲 色素、monacolins 类化合物、桔霉素及其他代谢产
收稿日期：2010-11-11
[2]
物等。关于红曲化学成分及活性研究的报道较多， 本文对其研究进展进行综述。 1 红曲色素 红曲色素是红曲霉在生长代谢过程中产生的天 然色素。红曲色素是多种色素成分的混合物，以颜 色的不同可分为黄色素、橘黄色素及红色素 3 类； 以溶解性不同可分为水溶性色素和脂溶性色素两 类。红曲色素作为一种天然色素，安全性高，经急 慢性毒性实验及致畸、突变实验都证明其无毒，故 红曲色素已广泛应用于各种食品和化妆品中[5-7]。 1932 年，Nishikawa 首次从紫色红曲霉等培养 物中分离了黄色和橘黄色晶体。随后将红曲色素用 有机溶剂提取分离，经元素定性、熔点测定，紫外、 红外和可见光吸收光谱以及核磁共振谱分析，认为 红曲色素是由化学结构不同、性质相近的红、黄、 红曲色素属 橘黄 3 类不同色素组成的混合色素[5-6]。 于聚酮类（polyketide）色素，主要由 6 种结构相近 的成分组成，其中，monascin（1）与 ankaflavin（2） 为黄色素，rubropunctatin（3）与 monascorubrin（4）
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收稿日期院圆园员远原员员原圆愿曰修回日期院圆园员苑原园员原园猿基金项目院中药材产业技术创新平台渊再园员园园员缘苑缘冤作者简介院庄晓晓袁硕士袁研究方向为农业生态系统与种质资源利用袁耘鄄皂葬蚤造院扎澡曾蚤葬燥曾蚤葬燥圆源岳员远猿援糟燥皂通信作者院王钰袁教授袁博士袁研究方向为植物育种袁耘鄄皂葬蚤造院园猿员猿远岳葬澡怎援藻怎凿援糟灶
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摘要以通过晕垣离子束诱变筛选出的高产洛伐他汀红曲霉菌株酝缘园原圆为出发菌株袁进行紫外诱变袁筛选低桔
霉素产量菌株遥将出发菌株置于猿园宰紫外灯下猿园糟皂处分别照射猿园尧远园尧怨园尧员圆园和员缘园泽后袁对所得诱变菌株进行液态发酵遥采用高效液相色谱法渊匀孕蕴悦冤中的荧光检测渊姿藻曾越猿猿员灶皂袁姿藻皂
越缘园园灶皂冤和紫外检测渊姿越圆猿愿灶皂冤测定
发酵产物中的桔霉素和洛伐他汀的含量遥结果表明袁通过紫外诱变袁获得一株优良菌株遥其液态发酵的产物中的桔霉素产量为圆郾员缘皂早辕蕴袁与出发菌株相比桔霉素含量减少了怨远郾远豫袁而洛伐他汀产量为园郾猿猿愿皂早辕皂蕴袁与出发菌株相比只减少了员远郾缘豫袁对该菌株进行传代培养员圆代袁结果表明该菌株具有较好的遗传稳定性遥关键词红曲霉曰桔霉素曰洛伐他汀曰紫外诱变曰复合诱变中图分类号 匝怨猿猿文献标识码 月文章编号 圆园怨缘原员苑猿远渊圆园员愿冤园员原园员园源原园猿
杂糟则藻藻灶蚤灶早燥枣造燥憎鄄赠蚤藻造凿糟蚤贼则蚤灶蚤灶皂燥灶葬泽糟怎泽遭赠糟燥皂责燥怎灶凿皂怎贼葬贼蚤燥灶遭则藻藻凿蚤灶早在匀哉粤晕郧载蚤葬燥鄄曾蚤葬燥袁宰粤晕郧再怎袁蕴陨运怎燥鄄噪怎燥袁杂匀耘晕载蚤葬燥鄄则怎蚤渊杂澡燥燥造燥枣砸藻泽燥怎则糟藻泽葬灶凿耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼葬造耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早袁粤灶澡怎蚤哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁匀藻枣藻蚤圆猿园远园员袁悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼陨灶燥则凿藻则贼燥泽糟则藻藻灶燥怎贼造燥憎糟蚤贼则蚤灶蚤灶赠蚤藻造凿泽贼则葬蚤灶袁葬泽葬泽贼葬则贼蚤灶早泽贼则葬蚤灶袁贼澡藻澡蚤早澡鄄赠蚤藻造凿造燥增葬泽贼葬贼蚤灶酝燥灶葬泽糟怎泽泽贼则葬蚤灶酝缘园鄄圆憎葬泽贼则藻葬贼藻凿遭赠怎造贼则葬增蚤燥造藻贼袁憎澡蚤糟澡憎葬泽泽藻造藻糟贼藻凿遭赠晕垣蚤燥灶遭藻葬皂皂怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽援栽澡藻泽贼葬则贼蚤灶早泽贼则葬蚤灶憎葬泽蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿葬贼猿园糟皂怎灶凿藻则葬猿园宰哉灾造葬皂责袁葬灶凿贼澡藻凿燥泽藻憎葬泽猿园袁远园袁怨园袁员圆园葬灶凿员缘园泽援栽澡藻糟燥灶贼藻灶贼泽燥枣糟蚤贼则蚤灶蚤灶葬灶凿造燥增葬泽贼葬贼蚤灶蚤灶贼澡藻枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶责则燥凿怎糟贼泽憎藻则藻凿藻贼藻则鄄皂蚤灶藻凿遭赠澡蚤早澡责藻则枣燥则皂葬灶糟藻造蚤择怎蚤凿糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠渊匀孕蕴悦冤憎蚤贼澡枣造怎燥则藻泽糟藻灶糟藻凿藻贼藻糟贼蚤燥灶渊姿藻曾越猿猿员灶皂袁姿藻皂越缘园园灶皂冤葬灶凿怎造贼则葬增蚤燥造藻贼凿藻贼藻糟贼蚤燥灶渊姿越圆猿愿灶皂冤葬枣贼藻则贼澡藻造蚤择怎蚤凿枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶燥枣贼澡藻泽糟则藻藻灶藻凿皂怎贼葬早藻灶蚤扎藻凿泽贼则葬蚤灶援栽澡藻则藻泽怎造贼泽泽澡燥憎藻凿贼澡葬贼葬灶藻曾糟藻造造藻灶贼泽贼则葬蚤灶酝员圆园鄄员憎葬泽燥遭贼葬蚤灶藻凿遭赠怎造贼则葬增蚤燥造藻贼皂怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽援栽澡藻遭藻泽贼泽贼则葬蚤灶酝员圆园鄄员赠蚤藻造凿藻凿圆郾员缘皂早辕蕴糟蚤贼则蚤灶蚤灶袁憎澡蚤糟澡憎葬泽怨远郾远豫造燥憎藻则贼澡葬灶贼澡藻燥则蚤早蚤灶葬造泽贼则葬蚤灶援匀燥憎藻增藻则袁造燥增葬泽贼葬贼蚤灶责则燥凿怎糟贼蚤燥灶憎葬泽园郾猿猿愿皂早辕皂蕴袁憎澡蚤糟澡憎葬泽燥灶造赠凿藻糟则藻葬泽藻凿遭赠员远郾缘豫援栽燥藻曾葬皂蚤灶藻贼澡藻早藻灶藻贼蚤糟泽贼葬鄄遭蚤造蚤贼赠燥枣酝员圆园鄄员袁贼澡藻泽贼则葬蚤灶憎葬泽糟燥灶贼蚤灶怎燥怎泽造赠泽怎遭鄄糟怎造贼怎则藻凿贼燥贼澡藻员圆贼澡早藻灶藻则葬贼蚤燥灶袁泽澡燥憎蚤灶早贼澡葬贼贼澡藻泽贼则葬蚤灶澡葬凿早燥燥凿早藻灶藻贼蚤糟泽贼葬遭蚤造蚤贼赠援运藻赠憎燥则凿泽酝燥灶葬泽糟怎泽曰糟蚤贼则蚤灶蚤灶曰造燥增葬泽贼葬贼蚤灶曰怎造贼则葬增蚤燥造藻贼皂怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽曰糟燥皂责燥泽蚤贼藻皂怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽
红曲霉是单子囊菌渊酝燥灶葬泽糟怎泽冤的腐生真菌袁其代谢产物有色素咱员暂尧抗生素尧洛伐他汀咱圆暂尧麦角固醇和酌原氨基丁酸等遥洛伐他汀渊蕴燥增葬泽贼葬贼蚤灶冤是一种胆固醇合成抑制剂袁由日本学者远藤章林于员怨苑怨年在红色红曲霉渊酝燥灶葬泽糟怎泽援则怎遭藻则冤中发现遥由于其独特的疗效袁目前已被称为最佳的血脂调节物咱猿暂遥但洛伐他汀的生产及应用被次级代谢产物桔霉素所限制遥桔霉素是由脂类代谢产生的袁会对健康造成一系列短期或者长期的影响咱源暂遥动物实验证实桔霉素是一种神经毒性的真菌毒素袁可以使动物致死袁并有致畸作用咱缘暂遥同时还会引起实验动物的肾脏肿大尧尿量增多尧肾小管扩张和上皮细胞变性坏死等症状咱远原苑暂遥杨建
等咱愿暂通过优化发酵培养基使桔霉素的含量降低到员园缘员皂早辕蕴遥刘颖等咱怨暂
通过对不同来源的红曲样品分
离纯化袁再结合固态发酵定向筛选袁得到一株低产桔霉素菌株晕宰猿原圆该菌株桔霉素含量低于最低检测限员远郾园滋早辕噪早遥
微生物诱变育种包括物理诱变和化学诱变遥紫外诱变作为物理诱变的一种袁其诱变的机制是紫外辐射影响阅晕粤中碱基的正常配对和双链的解开袁从而影响
源园员
第猿缘卷第员期圆园员愿年圆月生物学杂志允韵哉砸晕粤蕴韵云月陨韵蕴韵郧再灾燥造郾猿缘 晕燥郾员云藻遭袁圆园员愿阅晕粤的复制遥复合诱变一般包括两种或两种以上的诱变剂的先后使用袁同一种诱变剂的重复使用和两种或多种诱变剂的同时使用遥一般认为复合诱变具有协同作用袁其效果会比单一诱变效果好遥王轩等咱员园暂以紫外诱变结合化学诱变的方法袁使诱变菌株比原始菌株的桔霉素含量降低了怨园豫以上遥本研究以晕垣离子束诱变后得到的高产洛伐他汀菌株为出发菌株袁对其再进行紫外诱变袁以期得到低产桔霉素且洛伐他汀产量相对高而稳定的诱变菌株遥员 材料与方法员郾员 材料与试剂员郾员郾员 菌种红曲霉酝缘园原圆由安徽大学资源与环境工程学院资源植物保护与利用研究组通过晕垣离子束诱变筛选及保存咱员猿暂遥员郾员郾圆 主要试剂和仪器洛伐他汀标准品院中国药品生物制品检定所曰桔霉素标准品院上海源叶生物科技有限公司曰其他化学试剂均为分析纯遥高效液相色谱仪院宰葬贼藻则泽曰色谱柱院粤早蚤造藻灶贼缘栽悦原悦员愿渊圆冤渊圆缘园皂皂伊源郾远皂皂袁缘滋皂冤曰恒温恒湿箱院宁波江南仪器厂曰摇床院上海知楚仪器有限公司遥员郾员郾猿 培养基种子培养基院员园园皂蕴甘油袁圆缘早蛋白胨袁圆早晕葬晕韵猿袁圆早在灶杂韵源窑苑匀圆韵袁员早酝早杂韵源窑苑匀圆韵袁员早运圆匀孕韵源袁员园园园皂蕴蒸馏水遥液态发酵培养基院员园园皂蕴甘油袁圆园皂蕴玉米浆袁员园早硝酸钠袁员园早乙酸钠袁缘早甲硫氨酸袁缘早运匀圆孕韵源袁圆早酝早杂韵源窑苑匀圆韵袁员园园园皂蕴蒸馏水遥酝耘粤渊麦芽提取物冤培养基院圆园早麦芽提取物袁员园早蛋白胨袁圆园早葡萄糖袁员缘早琼脂袁员园园园皂蕴蒸馏水袁责匀缘郾源遥员郾圆 方法员郾圆郾员 桔霉素含量测定液相色谱条件院色谱柱粤早蚤造藻灶贼缘栽悦鄄悦员愿渊圆冤渊圆缘园皂皂伊源郾远皂皂袁缘滋皂冤曰荧光检测器袁激发波长猿猿员灶皂袁发射波长缘园园灶皂袁流速员郾园皂蕴辕皂蚤灶曰等度洗脱流动相比例院甲醇颐纯水渊磷酸调责匀源冤越缘缘颐源缘袁进样量圆园滋蕴袁柱温保持在圆愿益遥标准曲线院称取员皂早标准品溶解于缘园皂蕴甲醇溶液中袁配制成圆园皂早辕蕴溶液遥稀释成浓度为圆尧源尧远尧愿尧员园和员圆皂早辕蕴标准液遥提取方法院圆皂蕴发酵液袁加入源皂蕴乙醇袁远园益水浴员澡袁冷却后袁愿园园园则辕皂蚤灶离心员园皂蚤灶袁取上清液用园郾圆圆滋皂有机微孔滤膜过滤遥员郾圆郾圆 洛伐他汀含量测定液相色谱条件院色谱柱粤早蚤造藻灶贼缘栽悦鄄悦员愿渊圆冤渊圆缘园皂皂伊源郾远皂皂袁缘滋皂冤曰检测波长圆猿愿灶皂袁流速员郾园皂蕴辕皂蚤灶曰梯度洗脱流动相比例院乙腈颐园郾员豫磷酸缓冲液渊园耀远皂蚤灶袁远园颐源园曰远耀圆源皂蚤灶袁远园耀怨缘颐源园耀缘曰圆远耀猿园皂蚤灶袁怨缘耀远园颐缘耀源园冤进样量员园滋蕴袁柱温保持在猿缘益遥
标准曲线院称取缘园皂早标准品溶解于员园皂蕴乙腈溶液中袁配制成缘皂早辕皂蕴溶液遥吸取圆皂蕴溶液于员园皂蕴容量瓶中袁配制成浓度为员皂早辕皂蕴标准液袁再稀
释成浓度为园郾园员尧园郾园猿尧园郾园缘尧园郾园苑和园郾园怨皂早辕皂蕴标准液遥提取方法院圆皂蕴发酵液袁加入远皂蕴无水乙醇袁缘园园宰超声圆园皂蚤灶袁苑园益水浴圆澡袁冷却后袁愿园园园则辕皂蚤灶
离心员园皂蚤灶袁取上清液用园郾圆圆滋皂有机微孔滤膜过滤遥员郾圆郾猿 红曲霉紫外诱变
将红曲霉接种于酝耘粤培养基袁猿园益培养苑凿遥无菌水冲洗并收集孢子悬液于员缘园皂蕴锥形瓶中袁加入无菌玻璃珠袁员远园则辕皂蚤灶袁猿园益袁培养圆源澡遥无菌脱脂棉过滤除去菌丝袁孢子浓度稀释到员园愿个辕皂蕴遥取缘皂蕴孢子悬液于无菌培养皿中袁调整紫外灯距培养皿距离为猿园糟皂袁开启皿盖袁分别处理猿园尧远园尧怨园尧员圆园和员缘园泽遥诱
变后用移液器吸取园郾圆皂蕴悬液在红光下涂布平板袁避光培养苑耀愿凿遥员郾圆郾源 高产洛伐他汀低产桔霉素菌株筛选
统计不同诱变剂量下存活菌落袁计算致死率遥分别挑取单菌落于酝耘粤培养基袁猿园益培养苑凿遥接种菌丝于种子液培养基袁员远园则辕皂蚤灶袁猿园益培养苑凿遥将种子液按员颐圆园比例接种于液态发酵培养基中袁员远园则辕皂蚤灶袁猿园益培养员园凿遥匀孕蕴悦法检测发酵产物中的桔霉素及
洛伐他汀含量袁筛选具低产桔霉素及高产洛伐他汀性状菌株遥通过连续传代培养检测其遗传稳定性遥员郾圆郾缘 数据处理
实验数据采用耘曾糟藻造圆园员猿和杂孕杂杂圆圆统计软件进行分析遥计量资料的数据以均数依标准差渊曾依泽冤表示遥多组间比较采用方差分析曰均数间两两比较采用蕴杂阅原贼检验遥孕臆园援园缘为差异具有统计学意义遥
致死率渊豫冤越空白对照存活菌株数原单个剂量下存活菌株数空白对照存活菌株数伊员园园豫
正突变率渊豫冤越低产桔霉素菌株数诱变存活菌株数伊员园园豫
圆 结果与分析圆郾员 不同紫外线照射剂量对红曲霉致死率的影响
计算孢子悬液在不同紫外线照射时间下的致死率如表员所示袁随着诱变时间的增加而上升袁在员缘园泽达到最大值怨源郾缘豫遥为了提高孢子的诱变率袁一般采用较高的致死率袁故紫外线照射时间为员圆园耀员缘园泽遥圆郾圆 诱变菌株桔霉素含量检测
紫外诱变后的菌株袁液态发酵后测定其发酵产物中桔霉素含量袁又根据其生长情况袁筛选得到条件较好的员园圆株红曲霉菌株袁其桔霉素含量如图员所示袁诱变菌株与出发菌株相对比只有员员郾苑豫表现正突变遥缘园员