魏氏梭菌及其主要毒素的研究进展
犊牛魏氏梭菌的分离鉴定及致病性研究
犊牛魏氏梭菌的分离鉴定及致病性研究陈萌;苏波;胡树贤;刘朋;程子龙;张建东;刘思当【摘要】2017年1月,山东省某规模化奶牛场10～20日龄犊牛出现腹泻、拉血便、呼吸困难等症状,部分犊牛突然死亡.通过流行病学调查和尸体剖检,初步怀疑为魏氏梭菌感染.采集病料进行病理组织学检查、细菌分离鉴定、生化试验、16S及毒素基因检测等,证明疫情由A型魏氏梭菌所致.对死亡犊牛的肠内容物及分离菌株进行致病性研究,发现肠内容物及分离菌株具有较强的致病性.药敏试验结果显示,该菌对青霉素、头孢噻呋、恩诺沙星等表现极敏感.根据病原确诊情况及药敏试验结果,指导临床用药,及时控制了牛场疫情.【期刊名称】《中国动物检疫》【年(卷),期】2018(035)010【总页数】5页(P90-94)【关键词】魏氏梭菌;分离鉴定;致病性;犊牛【作者】陈萌;苏波;胡树贤;刘朋;程子龙;张建东;刘思当【作者单位】山东农业大学动物科技学院,山东泰安 271000;山东省禹城市畜牧兽医局,山东禹城 251200;泰安市畜牧兽医局,山东泰安 271000;山东农业大学动物科技学院,山东泰安 271000;山东农业大学动物科技学院,山东泰安 271000;山东农业大学动物科技学院,山东泰安 271000;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271000【正文语种】中文【中图分类】S852.61魏氏梭菌又称产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens），是一种广泛存在于自然环境中，能够引发人和动物相关疾病的重要病原体[1]。
该菌也是肠道中的常在菌之一，在一定条件下，可以引起畜禽的气性坏疽、肠毒血症、坏死性肠炎、猝死症，以及人的气性坏疽和食物中毒等[2-4]。
该菌致病作用主要在于它所产生的毒素。
目前已发现的毒素有20种，根据其产生的致死性毒素α、β、ε和ι，可将其分为A、B、C、D、E 5种毒素型[5]。
2017年1月，山东省某规模化奶牛场10～20日龄犊牛出现腹泻、拉血便等症状，并有部分犊牛突然死亡。
65肉牛魏氏梭菌病的临床特点及防治措施
65肉牛魏氏梭菌病的临床特点及防治措施作者：商大智来源：《现代畜牧科技》 2017年第1期1 病原及流行特点肉牛魏氏梭菌病是由魏氏梭菌引起，也叫产气荚膜梭菌，菌体为两端钝圆的直杆状，大小为(0.6～2.4) ym×(1. 3～19. O)tim，呈单个或者成对存在，没有生长鞭毛，无法自行运动，经过革兰染色结果呈阳性。
菌体能够形成较大的圆形芽胞，一般存在于菌体的中央或者近端，大部分菌株能够形成荚膜。
该病主要是由于魏氏梭菌污染环境、饮水、饲料等，当肉牛食人菌体或者芽孢后，就会进入肠道，并开始大量繁殖，从而使其出现发病。
另外，当气候骤变，突然更换饲料或者改变饲养环境等，会导致机体抵抗力减弱，促使肠道菌群发生失调，导致肠道本身存在的魏氏梭菌开始大量繁殖，也容易使其出现发病。
2 临床症状最急性型。
病牛没有表现出任何前驱症状，而是在拴系或者放牧过程中突然出现异常，四肢软弱无力，行走摇晃，且无法稳定站立，往往卧地，有时也会在站立时伸直四肢用于支撑身体，即使对其进行驱赶，也不会行走，或者出现倒退以及步态不稳、缓慢走动；精神萎靡，将头触地后保持呆立不动；肌肉震颤，特别是后躯非常明显；跳跃、起卧后往往跌在地上，四肢如同游泳状不断划动，且头颈向后伸直，发出数声呜叫后快速死亡。
病程持续最短时只有几分钟，最长也只有1～2h。
还有些病牛在晚上一切正常，但在第二天早晨发现死于舍内。
病牛死后腹部快速胀大，并有混杂红色泡沫的液体从口腔流出，舌伸到口外，肛门发生外翻。
急性型。
病牛表现出体温升高或者保持正常，呼吸加速，心跳加快，精神萎靡或者烦躁不安，食欲减退或者完全废绝，四肢、耳鼻发凉，全身颤抖，行走摇晃。
病牛出现症状后病情快速恶化，并倒地不起，全身肌肉明显抽搐震颤，头颈后仰，四肢僵直，不停划动，大量流涎，口腔黏膜发绀，腹胀、腹痛明显，发出数声狂叫后出现死亡。
亚急性型。
病牛表现出间歇性不安，发作时两眼圆睁，两耳竖直，精神处于高度紧张的状态，接着变得安静，并不断呈周期性反复发作，最终发生死亡。
肉牛魏氏梭菌病的病因与防控
肉牛魏氏梭菌病的病因与防控李基旺，李水权，陈炫华（广东省湛江市畜牧技术推广站广东湛江524094）肉牛魏氏梭菌病是由于肉牛感染了魏氏梭菌而引起的一种急性传染病，典型的症状就是消化道或者实质器官出血，严重的引起肉牛猝死，病程短，发病急，严重危害养牛业的发展。
尤其是近些牛，由于养牛业的迅速发展，肉牛以集中圈养为主，养殖技术存在某些问题，造成此病的日趋严重，发病率逐渐升高，目前已经引起畜牧兽医工作者的高度重视。
1病因引起魏氏梭菌病的病原微生物为魏氏梭菌，此菌在自然界中广泛存在，而且也是肠道中的常在菌，其不会致病，但其产生的毒素有致病的作用。
魏氏梭菌能够产生多种外毒素，目前已知的已经有15种，其中能够引起致死的毒素有α、β、ε和ι。
魏氏梭菌在正常的情况下，滋生繁殖很慢，而且产生的毒素很少，这些毒素会随着肠道的蠕动排出体外，不会引起发病。
但是当牛群受到应激，如外界环境恶劣，噪音很大；突然更换饲料，特别是在将饲喂干草改变为饲喂富含蛋白质、能量的精饲料和青绿饲料的时候，瘤胃中的微生物菌群一时很难适应，导致机体的抗病力下降，胃肠道功能紊乱，饲料发酵造成酸碱失衡，此时就很容易引起魏氏梭菌大量繁殖，产生大量的毒素，这些毒素进入血液，导致发病，严重的会引起死亡。
此病一年四季都可以发生，不同品种、不同年龄的牛都有易感性。
2临床症状根据发病程度可以分为最急性型、急性型和亚急性型三种类型。
1）最急性型：发病急促，往往患牛没有任何征兆就会出现死亡，通常发病到死亡也就几分钟或者一两个小时。
有的肉牛晚上挺正常，第二天早晨就突然死亡了。
病牛死后腹部膨大，口鼻中流出带血色的分泌物，舌头突出，肛门外翻。
2）急性型：病程稍长，患牛的体温表现正常，也有的体温升高，食欲不佳甚至不再采食，口鼻流出白色或者红色的分泌物，肌肉颤抖，步态不稳，腹痛。
出现这些症状以后，病情发展很快，倒地、狂叫，不久死亡。
3）亚急性型：症状稍轻，兴奋不安和安静祥和交替发生，兴奋不安的时候精神高度紧张，两眼瞪视。
猪魏氏梭菌病的对症施治
猪魏氏梭菌病的对症施治作者：刘国信杨果平来源：《兽医导刊》 2017年第10期猪魏氏梭菌病又叫猪梭菌性肠炎、猪传染性坏死性肠炎、仔猪肠毒血症，其以发病急、病程短、腹胀为主要特征，虽然发病率不高，但死亡率极高，是一种严重危害养猪业的重要疾病，平时加强饲养管理，搞好日常消毒，定期预防保健，发病后及时作出确诊，并紧急对症施治，可大大降低发病死亡率。
（一）病原与流行病学猪魏氏梭菌病是由产气荚膜梭菌引起的传染病。
产气荚膜梭菌是一种革兰氏阳性菌，能产生芽胞，并能形成特殊荚膜的专性厌氧菌，在自然界中分布广泛，可见于土壤、污水、饲料、粪便以及人畜胃肠道内，是一种条件性致病菌，该菌至少可以产生15 种以上的毒素，能对人和多种动物致病。
在感染动物中以猪最为常见，常呈区域性流行。
本病一年四季均可发生，但在秋冬气候骤然变化、阴雨潮湿条件下更易流行。
猪群饲养密度过大、圈舍通风不良、消毒卫生欠佳，天气骤然变化以及接种、分群、出栏、驱赶等各种应激因素均可诱发本病的发生。
一般仔猪和种猪发生率高于育肥猪，1 ～ 3 日龄仔猪最易感，常整窝发病，病死率极高，以后随着日龄的增加，易感性降低。
种猪和育肥猪多呈零星散发，成年猪多发于90 ～ 180日龄，常突然发病，病程极短，如救治不及时很快死亡，也有先兆症状不明显而突然死亡的病例；近年来，随着集约化养猪业的兴起，在怀孕母猪、育肥猪群中发病率有不断上升的趋势，且一旦发病短期内不易清除。
（二）临床症状本病发生多呈急性经过，特征性症状主要表现为体温升高，口流涎水，鼻喷泡沫，呼吸急促，腹部迅速臌胀，猪腹痛难忍而不停起卧，摇头摆尾，剧烈抖动；全身皮肤苍白，四肢末梢及耳尖发绀，很多病例来不及治疗而死亡，病程一般2 ～ 3 h。
如发病于晚间，晚上喂食时会把料吃得干干净净，但早晨却见死在栏里，尸体僵硬，腹部臌气，口鼻流有白沫。
部分病例发病较慢，起初精神沉郁，食欲减少甚至废绝，体温一般正常，大便有秘结表现；但随着病情发展，腹部逐渐胀大，患猪出现呼吸困难，并排带有酸臭味的黄褐色或水样粪便，肛门及尾部常有污染粪便，猪只一直呆立，不愿躺下，如果不予合理治疗，一般经12 ～ 24 h 后死亡。
羊魏氏梭菌性疾病的防治
应加强饲养管理，定期检查饲料和水源质量，避免羊群接 触疫病
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病程与死亡率
病程短促，常无先兆症状而突然死亡，病死率高达80%以上。
03
诊断与鉴别
初步诊断
观察症状
观察羊是否出现食欲不振、精神萎靡 、腹部膨胀、腹泻等症状，可作为初 步诊断的依据。
临床检查
检查羊的体温、脉搏、呼吸等生理指 标，以及是否有其他异常表现，有助 于初步判断病情。
鉴别诊断
与其他腹泻病的鉴别
04
防治措施
预防措施
疫苗接种
定期为羊群接种魏氏梭 菌多联苗，提高羊群免
疫力。
饲养管理
保持羊舍清洁卫生，定 期消毒，提供营养均衡
的饲料和水源。
疫病监测
定期对羊群进行疫病监 测，及时发现并处理疑
似病例。
隔离措施
发现疑似病例时，及时 隔离治疗，防止疾病扩
散。
治疗措施
及时治疗
一旦发现疑似病例，应立即采取治疗措施，包括使用 抗生素、补液等。
病因分析
魏氏梭菌感染
羊魏氏梭菌性疾病主要由魏氏梭菌感 染引起，该菌是一种革兰氏阳性大杆 菌，可产生强烈的外毒素，导致羊只 发病。
传播途径
易感动物
羊只不分年龄、性别和品种均易感， 但以1岁以内的羊只最易感。
魏氏梭菌主要通过消化道传播，健康 羊只通过接触病羊粪便、污染的饲料 和水源等途径感染。
病理变化
在疫病流行期间，应限制 羊群的流动，避免疫情扩 散。
05
案例分析
典型案例介绍
地点
某山区农村
发病情况
羊群突然发病，出现高热、呼吸困难等症状
病例数
共120只羊，其中80只发病
奶牛魏氏梭菌病的诊断和防治
奶牛魏氏梭菌病的诊断和防治作者：刘成印来源：《畜牧兽医科学》 2018年第5期奶牛魏氏梭菌病的诊断和防治刘成印（山东省泰安市东平县梯门镇畜牧兽医服务站，东平271504）摘要：奶牛魏氏梭菌病又称为猝死症，其病原为魏氏梭菌。
虽然该种疾病的发病率不是很高，但由于魏氏梭菌能够产生多种毒素侵害动物机体，导致死亡率很高。
奶牛魏氏梭菌病常常发生于成年牛，犊牛极少发病。
临床上以牛突然死亡，出现消化道和实质器官出血为主要特征。
近些年，随着东平县奶牛养殖产业不断向前发展，奶牛魏氏梭菌病的发病率呈现高发趋势，对本地区奶牛养殖产业健康发展造成了不小的影响，因此做好该种疾病防治工作意义重大。
本文主要结合实际情况，就奶牛魏氏梭菌病的诊断和防治进行分析，希望通过本次研究对同行有所帮助。
关键词：奶牛魏氏梭菌病；诊断；防治中图分类号：S858.23文献标识码：Bdoi：10.3969/j.issn.2096-3637.2018.05.098奶牛魏氏梭菌病，是严重危害奶牛养殖产业的一种急性传染性疾病，该种疾病主要危害成年奶牛，导致成年奶牛突然死亡。
牛群中一旦出现该种疾病，将会快速传播整个牛群，发病急，传染速度快。
该种疾病流行和饲养管理条件有着密切联系，饲养管理不当，环境卫生差，饲料营养价值差，外界应激因素多，都会导致或加重各种疾病发生。
奶牛魏氏梭菌病流行有着明显的季节性，以夏秋季节高发，常常呈现地方流行性[1]。
做好该种疾病防治工作，对确保地区牛养殖产业健康可持续发展有着巨大帮助。
1发病经过2017年8月中旬，山东省东平县一养殖户向当地兽医站报告，他养殖的15头奶牛中出现发病牛。
该养殖场中2头为当年小牛，5头黑白花奶牛，8头夏洛来牛，平均年龄在3～5岁。
奶牛在引种过程中，进行了严格的产地检疫，运输检疫和到场隔离观察，健康无病。
8月13日，从本县某农场新购进1头奶牛，该头奶牛第2天突然发病，没有任何临床症状，突然倒地死亡。
随后牛群中的15头奶牛相继患病。
猪魏氏梭菌病的流行病学、临床症状及防治方法 - 养猪技术
猪魏氏梭菌病的流行病学、临床症状及防治方法-养猪技术1病因分析环境条件恶劣：暴发该病的主要原因是猪场环境卫生条件较差，饲养管理不合理。
尤其是猪场如果有大量妊娠母猪在定位栏内饲养，再加上没有安装水帘风机设备，而夏季温度较高，只采取电风扇进行降温；如果猪场供水不足，通常只能够满足机体饮水所需，没有足够的水用于防暑降温以及冲洗猪栏，导致卫生条件恶劣。
另外，饲养人员较少，劳动强度过大，饲养管理不当，也是潜在引起该病发生的因素。
育肥舍饲养数量过多：育肥舍猪只饲养密度过大，导致舍温较高时容易发生热应激，且彼此容易发生打架等而形成咬伤，特别是夏季饲养及饮水高峰期比较容易发生该病。
饲料缺乏营养：如果猪只以饲喂玉米豆粕型饲料为主，即饲喂由玉米、麸皮、豆粕以及预混料组成的饲料，导致饲料营养过于单一。
另外，为节省饲养成本而购买品质较差的预混料，不含有全面营养，导致机体肠道微生物菌群发生紊乱，从而引起该病。
2.流行病学魏氏梭菌是一种革兰氏阳性杆菌，呈梭状，能够生成芽胞，还能够生成特殊的荚膜，是一种专性厌氧菌。
广泛分布在自然界中，土壤、饲料、污水、粪便以及机体胃肠道内都存在，属于一种条件性致病菌。
该病通常在气候发生异常变化时容易发生且流行，任何品种、年龄的猪只都能够感染发生，其中仔猪和种公猪具有较高的发病率。
仔猪通常呈暴发性流行，病死率可达到20%～70%，而中大猪以及成年猪通常呈零星散发。
该病往往突然发生，病程持续时间非常短，迅速死亡。
特别是1周龄以下的哺乳仔猪以及使用过于频繁的种公猪具有非常高的发病率和死亡率。
3临床症状最急性型：通常没有先兆症状就突然发生死亡。
有时部分病猪会在死前表现出狂躁不安，叫声嘶哑，呼吸困难，共济失调，角弓反张，腹部明显膨胀，肌肤苍白，突然倒地，有白沫从口吐出，肌肉颤抖，四肢不停划动，往往在1～3h内发生死亡。
如果猪只在晚间发病，一般发现其在晚上将饲料全部吃光，而在第二天早晨在栏里死亡。
急性型：主要是发生肠坏死，肠壁明显增厚，失去弹性，颜色变黄。
猪魏氏梭菌病的症状和防治
猪魏氏梭菌病的症状和防治作者：陈芝鹏来源：《畜牧兽医科学》 2018年第6期1?发病情况1.1?流行病学猪魏氏梭菌病是一种常见的流行病，冬天是这个病发病的高峰期，尤其是当气候异常的时候，这种病就开始流行起来，并且不管什么年龄或者品种的猪都可能患病，而且仔猪和公猪发病率较高，再猪的死亡率也较高。
成年猪发病死亡率低于仔猪，这种病发病突然，而且病程迅速，对于仔猪来说是致命的威胁，因为仔猪患该病的死亡率极高，尤其是一周龄内的仔猪。
1.2?病原学魏氏梭菌可产生多种毒素，根据所分泌的主要毒素，我们可以将其分成A、B、C、D、E不同的类型，但是往往A型比较容易人，而B、C、D型更易感染到动物，因为它与动物的肠胃关系密切，该菌的形态是粗大杆菌并且两端钝圆，没有鞭毛。
它属于一种厌氧菌，对于营养要求以及氧气要求都不高。
1.3?发病案例四川某猪场有多窝仔猪突然发病，甚至有一头突然倒地，病情较急且病程较短，甚至会让人误以为是中毒所致，而且同时伴有腹泻的症状，有的病情严重的出现了死亡，有的病情较轻的经过卡那霉素以及泰乐菌素的治疗，并且稍微稳定了一些，但是效果也不显著，病死率仍然接近50%。
2?临床症状患病的仔猪体温会升高到大概39～40.5℃，呼吸也会加快平均60～80次每分钟，它的病程短发病时间快，且死亡率非常高，有的甚至在几分钟或者几十分钟内出现死亡，表现为腹部肿胀、食欲减少、且精神状态不佳、有时甚至会口吐白沫、乱闯乱撞、转圈倒地、全身肌肉抽搐、呻吟、乱叫、甚至会出现呼吸困难等症状。
且患病的仔猪粪便呈现的是深绿色和褐色，有时甚至会有血便的现象，并且伴有恶臭味，如果与大肠杆菌一起感染了甚至会出现脱水消瘦，呕吐不止的现象，可能导致猪的体质变弱。
不同的猪其临床表现不一样，种公猪发病会出现精神不振、口吐白沫、肌肉颤抖、呻吟、甚至呼吸困难的症状，第2天死亡后的腹部明显肿胀。
仔猪如果发病的话首先其体温会明显上升到40～40.5℃左右，然后其粪便以黄红色和褐色居多，并且伴有恶臭，严重的甚至倒地身亡，病程大概是1～3?d。
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报告内容
综述 分型及其依据 魏氏梭菌概述 纯化及鉴定 细菌毒力
魏氏梭菌产生的毒素
魏氏梭菌毒素研究
四种主要毒素研究进展
综述
革兰氏阳性有荚膜不运动的厌氧大杆菌， 革兰氏阳性有荚膜不运动的厌氧大杆菌，芽孢椭 圆形,位于菌体中央或次极端 位于菌体中央或次极端， 圆形 位于菌体中央或次极端，芽胞直径不大于菌 体，在一般培养时不易形成芽胞，在无糖培养基 在一般培养时不易形成芽胞， 中有利于形成芽胞（菌体形态） 中有利于形成芽胞（菌体形态） 广泛分布于自然界， 广泛分布于自然界，同时也是肠道中的常见菌之 在一定条件下， 一，在一定条件下，可引起各种严重疾病 发病急、死亡快， 发病急、死亡快，因此对于本病的防制主要用疫 苗进行免疫预防 危害：猝死症，家禽坏死性肠炎， 危害：猝死症，家禽坏死性肠炎，人食物中毒及 家畜肠毒血症、坏死性肠炎， 气性坏疽 ；家畜肠毒血症、坏死性肠炎，痢疾
分离诊断
气性坏疽发病急剧，后果严重，需要尽早准确的做出微生 气性坏疽发病急剧，后果严重， 物学诊断，争取早期治疗： 物学诊断，争取早期治疗： 标本 镜检：可发现 大杆菌， 镜检：可发现G＋大杆菌，并伴有其他杂菌和少量形态 不规则的白细胞。 不规则的白细胞。 培养基 厌氧培养 牛乳培养基 生化反应： 生化反应：TSC 动物实验： 动物实验：泡沫肝实验 进一步鉴定: 进一步鉴定:
疫苗现状
上世纪70年代到 年代 中监所的文希喆、王泰健、 上世纪 年代到80年代，中监所的文希喆、王泰健、屠 年代到 年代， 伟英等科研人员， 伟英等科研人员，在国际上率先开创了梭菌多联干粉苗的 研究，取得满意效果，保存期长，使用方便， 研究，取得满意效果，保存期长，使用方便，可以随意搭 疫苗的保护期也得到的延长， 配，疫苗的保护期也得到的延长，基本克服了液体苗的缺 陷。 效力检验：多联苗所含的成份越多，需要的动物也越多， 效力检验：多联苗所含的成份越多，需要的动物也越多， 以致于达到不便检验的程度，严重阻碍了多联苗的发展， 以致于达到不便检验的程度，严重阻碍了多联苗的发展， 采用免疫动物测定血清中和效价的方法， 采用免疫动物测定血清中和效价的方法，来评价梭菌苗的 效力。其方法是用梭菌苗免疫动物两次后， 效力。其方法是用梭菌苗免疫动物两次后，用国际单位 (I.U.)衡量血清的中和效价，检验每批疫苗所需试验动 衡量血清的中和效价， 衡量血清的中和效价 物为8-12只。 物为 只
培养特性
血平板： 血平板：双层溶血环
内环完全溶血内环完全溶血-θ毒素 外环不完全溶血- α毒素 外环不完全溶血-
蛋黄琼脂平板：Nagler反应 蛋黄琼脂平板：Nagler反应 庖肉培养基：数小时即可见到生长， 庖肉培养基：数小时即可见到生长，产生 大量气体，肉渣或肉块变为略带粉色， 大量气体，肉渣或肉块变为略带粉色，但 不被消化 培养基： 汹涌发酵” 牛乳培养基：“汹涌发酵”（stormy
(D)弥漫性血管内凝血（DIC） (D)弥漫性血管内凝血（DIC） 弥漫性血管内凝血
区别要点
外毒素
内毒素 为细菌细胞壁结构成份， 为细菌细胞壁结构成份，菌体 崩解后释出
存在部位
由活的细菌释放至细菌体外
细菌种类
革兰阳性菌多见
革兰阴性菌多见
化学组成 稳定性
蛋白质 60℃～ min破坏 60℃～80℃ 30 min破坏 强，有选择毒害作用，引起特殊临 有选择毒害作用， 床表现 强，可刺激机体产生高效价的抗毒 经甲醛脱毒成为类毒素， 素。经甲醛脱毒成为类毒素，仍有 较强的抗原性， 较强的抗原性，可用于人工自动免 疫
刘家森等克隆了α毒素基因序列中从第 个碱基到中止密码子约900 刘家森等克隆了 毒素基因序列中从第294个碱基到中止密码子约 毒素基因序列中从第 个碱基到中止密码子约 bp的核苷酸序列 并表达出大小约 8 ku的重组蛋白。重组蛋白完全涵盖 的核苷酸序列,并表达出大小约 的重组蛋白。 的核苷酸序列 并表达出大小约3. 的重组蛋白 毒素的羧基末端的蛋白序列并缺失掉了位于氨基末端内对α毒素起重要作 了α毒素的羧基末端的蛋白序列并缺失掉了位于氨基末端内对 毒素起重要作 毒素的羧基末端的蛋白序列并缺失掉了位于氨基末端内对 用的Trp1、His11、Asp56、His68等氨基酸残基 表达的重组蛋白含量 等氨基酸残基;表达的重组蛋白含量 用的 、 、 、 等氨基酸残基 占到菌体蛋白总量的30%以上 且表现出良好的反应原性 无毒性现象产生。 以上,且表现出良好的反应原性 无毒性现象产生。 占到菌体蛋白总量的 以上 且表现出良好的反应原性,无毒性现象产生
培养特性
本菌虽属厌氧性细菌， 本菌虽属厌氧性细菌，但对厌氧程度的要 求并不太严， 条件下， 求并不太严，2%~10%的CO2条件下，生长 的 更好 在普通培养基上能生长，若加葡萄糖， 在普通培养基上能生长，若加葡萄糖，血 液，则生长更好 生长适宜温度为37-47℃，多认为 生长适宜温度为 ℃ 多认为4347℃为最宜温度，在适宜条件下增代时间 ℃为最宜温度， 仅8min
免疫效果与制苗菌液中毒素毒力正相关 抗原含量过大会产生严重局部反应， 抗原含量过大会产生严重局部反应，会导 致安全性检验不合格
主要毒素
α毒素 毒素
各型产气荚膜梭菌均产生α毒素 它是产气荚膜梭 各型产气荚膜梭菌均产生 毒素,它是产气荚膜梭 毒素 菌最重要的毒素之一,同时又是 同时又是A型产气荚膜梭菌 菌最重要的毒素之一 同时又是 型产气荚膜梭菌 的主要毒素 型产气荚膜梭菌的主要毒素。 是A型产气荚膜梭菌的主要毒素。它具有磷脂酶 型产气荚膜梭菌的主要毒素 C(Phospholipase C,PLC)和鞘磷脂酶 和鞘磷脂酶 (Sphin-gomyelinase)两种酶活性 能水解细 两种酶活性,能水解细 两种酶活性 胞膜的主要成分膜磷脂,从而破坏细胞膜结构的完 胞膜的主要成分膜磷脂 从而破坏细胞膜结构的完 整性
疫苗现状
国内首先出现的是羔羊痢疾，肠毒血症等单价苗， 国内首先出现的是羔羊痢疾，肠毒血症等单价苗， 继之出现了羊猝狙、快疫二联苗，羊黑疫、 继之出现了羊猝狙、快疫二联苗，羊黑疫、快疫 二联苗，快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联苗。文 二联苗，快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联苗。 希喆等(1978)研制成功了快疫、羔羊痢疾、碎 研制成功了快疫、 希喆等 研制成功了快疫 羔羊痢疾、 肠毒血症、黑疫五联苗。纪金春等(1978) 狙、肠毒血症、黑疫五联苗。纪金春等 研制成功了快疫、羔羊痢疾、猝狙、肠毒血症、 研制成功了快疫、羔羊痢疾、猝狙、肠毒血症、 黑疫和肉毒中毒六联苗。 黑疫和肉毒中毒六联苗。
理化性质和生物学特性
α毒素是由 毒素是由370个氨基酸组成的单链多肽 分子量 个氨基酸组成的单链多肽,分子量 毒素是由 个氨基酸组成的单链多肽 为43 ku。它是一种依赖于锌离子的多功能性金 。 属酶,具有细胞毒性 溶血活性、致死性、 具有细胞毒性、 属酶 具有细胞毒性、溶血活性、致死性、皮肤坏 死性、 死性、血小板聚集和增加血管渗透性等特性 当把α毒素加热至 毒素加热至60~70℃时,就可以使其失去 当把 毒素加热至 ℃ 就可以使其失去 活性,当进一步加热到 当进一步加热到100℃时,又可以恢复部分 活性 当进一步加热到 ℃ 又可以恢复部分 活性
β毒素 毒素
产气荚膜梭菌β毒素是由产气荚膜梭菌 型和 产气荚膜梭菌 毒素是由产气荚膜梭菌B型和 型菌株产 毒素是由产气荚膜梭菌 型和C型菌株产 生的坏死、致死性毒素,可引起人和动物的坏死性肠炎 可引起人和动物的坏死性肠炎, 生的坏死、致死性毒素 可引起人和动物的坏死性肠炎 。 β毒素对胰酶敏感，37℃作用 毒素对胰酶敏感， ℃作用30min后即完全失活 毒素对胰酶敏感 后即完全失活 β毒素分为 、β2毒素 其中β2毒素是近年确认的由 型 毒素分为β1、 毒素,其中 毒素是近年确认的由C型 毒素分为 毒素 其中 毒素是近年确认的由 产气荚膜梭菌产生的一种新的毒素。 毒素与 毒素与β1毒素没 产气荚膜梭菌产生的一种新的毒素。β2毒素与 毒素没 有明显的氨基酸序列的同源性,但具有相似的生物学活性 但具有相似的生物学活性。 有明显的氨基酸序列的同源性 但具有相似的生物学活性。 而且,抗 毒素的抗体能识别纯化的 毒素,并能与 毒素的抗体能识别纯化的β2毒素 并能与β1毒 而且 抗β2毒素的抗体能识别纯化的 毒素 并能与 毒 素发生弱反应,然而 然而,抗 毒素的抗体只能与 毒素反应, 毒素的抗体只能与β1毒素反应 素发生弱反应 然而 抗β1毒素的抗体只能与 毒素反应 却不能与β2毒素发生反应 表明二者的免疫学相关性差,但 却不能与 毒素发生反应,表明二者的免疫学相关性差 但 毒素发生反应 表明二者的免疫学相关性差 其机制尚不清楚。 其机制尚不清楚。
纯化
液体培养基 43°温箱培养 连续传代
ห้องสมุดไป่ตู้
65-70°C半小时
3-4小时
镜检
血平板
TSC.石蕊牛奶
菌的 力
侵袭力：病原菌有突破宿主皮肤、 侵袭力：病原菌有突破宿主皮肤、黏膜 免疫防御机制， 生理屏障等 免疫防御机制，进 毒 入体内定居、 入体内定居、繁殖和扩散的能 力 力，包 膜、 膜、 和侵袭
： 有 宿主 生理功能 的
疫苗现状
梭菌类的疫苗有单价苗和多联苗， 梭菌类的疫苗有单价苗和多联苗，单价疫苗在实 际应用中难以取得很好的效果， 际应用中难以取得很好的效果，原因是致病的梭 菌种类较多，而且有的是混合感染，单价苗往往 菌种类较多，而且有的是混合感染， 是顾此失彼，不能有效地预防疾病。 是顾此失彼，不能有效地预防疾病。 国外相继出现了包括产气荚膜梭菌的四联、五联、 国外相继出现了包括产气荚膜梭菌的四联、五联、 七联和八联苗梭菌苗，不仅把梭菌苗联合起来， 七联和八联苗梭菌苗，不仅把梭菌苗联合起来， 而且还把所梭菌苗与需氧菌苗(如巴氏杆菌苗、沙 而且还把所梭菌苗与需氧菌苗 如巴氏杆菌苗、 如巴氏杆菌苗 门氏杆菌苗)联合起来 甚至与病毒苗(如羊痘疫 联合起来， 门氏杆菌苗 联合起来，甚至与病毒苗 如羊痘疫 联合起来进行防疫。 苗)联合起来进行防疫。 联合起来进行防疫