食品中黄曲霉毒素检测技术的研究进展
粮油食品中黄曲霉毒素检测技术研究

粮油食品中黄曲霉毒素检测技术研究摘要:粮油是人们生活中的必需品,在新时期背景下,人们对于粮油安全储备的要求越来越高,我国面临的粮油国际市场与储存现状也越来越严峻。
国际上对粮油的储存与出口标准不断提高,新时期国际贸易竞争形势严峻,我国粮油的发展需要得到切实的关注,加强对粮油市场的监管,对粮油市场的各方面情况进行归纳与总结,促进新时期背景下粮油储存质量切实符合人们的利益与安全需求。
因此,应加强新时期背景下对粮油储存及检测方法的研究,促进我国粮食经济和谐发展。
关键词:粮油食品;黄曲霉毒素;危害;预防措施引言食品安全问题近年来愈来愈受到人们的重视。
黄曲霉毒素除了是一种剧毒物质之外,由于其极强的致癌性也被认为是迄今发现的最强的天然致癌物质。
除了对食用者本体的毒害外,黄曲霉毒素还会表现为对食用者后代的毒性,即具有较强的致畸性。
1黄曲霉毒素概述1.1黄曲霉毒素性质黄曲霉毒素又称ATF,属于黄曲霉毒素,是粮油食品中寄生曲霉、黄曲霉产生的有毒类代谢产物。
黄曲霉具有十分强烈的毒性和致癌性,是食物检测中的主要污染指标。
一般黄曲霉素存在于动植物、土壤中,尤其是坚果类食品,如花生、核桃,同时在奶制品、食用油、玉米等食品中也存在黄曲霉毒素,这种毒素大多被消化道吸收,在肝脏中分布,代谢产物具有致突变性、毒性、致癌等多种影响。
1.2毒性及危害几种黄曲霉毒素中,黄曲霉毒素B1(AFB1)在食品中较为常见,其毒性通常分为急性中毒、慢性中毒和致癌性3种。
其中急性中毒毒性比砒霜大68倍,被认为是目前已知的霉菌中毒性最强的。
食物中毒,轻者导致患者恶心、呕吐,或者出现腹胀、肝痛等症状;重者会引发癌症。
它主要是通过膳食渠道,影响人体肝脏代谢功能,进一步引发急性肝炎、肝硬化等,最终导致肝癌。
它也能诱使动物发生癌症,主要通过降低粮食、饲料中的营养价值,刺激家禽肠胃,从而引发炎症、小肠黏膜出血等症状,严重者进一步引发癌症。
KOVáCS等在试验中发现黄曲霉毒素可以通过影响出血败血性巴斯德氏菌进而对猪造成影响,仅感染多杀巴斯德氏菌的猪中没有观察到肉眼可见的损伤,而进食了黄曲霉毒素B1的动物则会加重出血败血性巴斯德菌引起的肺部变化,使肺部间质性水肿,肺部损伤复杂化。
食品中黄曲霉素检测的应用研究

食品中黄曲霉素检测的应用研究黄曲霉素是一种由黄曲霉菌产生的次生代谢产物,属于真菌毒素。
它可以存在于多种食品中,如谷物、大豆、坚果、生肉和畜禽饲料等。
黄曲霉素具有广谱的毒性,对人体和动物的肝脏、肾脏、中枢神经系统和免疫系统都具有严重的危害。
对食品中的黄曲霉素进行检测是确保食品安全的重要措施之一。
食品中黄曲霉素的检测方法主要分为两类:一种是传统的基于化学分析的方法,如薄层色谱法、高效液相色谱法和气相色谱法;另一种是基于生物技术的方法,如酶联免疫吸附测定法和免疫层析法。
这些方法可以对食品样品中的黄曲霉素进行快速、准确、灵敏的检测。
近年来,针对食品中黄曲霉素的检测方法进行了许多应用研究,主要集中在以下几个方面:1. 方法改进和优化:研究人员不断改进和优化传统的检测方法,提高其检测的准确性和灵敏度。
利用液相色谱-三重四极杆质谱联用技术可以实现对多种黄曲霉素的同时检测,减少检测时间和成本。
2. 样品前处理技术:由于食品样品中黄曲霉素的含量往往很低,需要进行样品前处理才能提取出足够的黄曲霉素进行检测。
研究人员通过改进样品前处理技术,如固相萃取和液液萃取,提高了黄曲霉素的提取效率和检测灵敏度。
3. 生物传感器技术:生物传感器是利用生物体内的生物分子与待测物质发生特异性反应,通过测量反应信号来检测目标物质的一种分析仪器。
研究人员开发了各种基于生物传感器的黄曲霉素检测方法,如利用表面等离子共振传感器和阻抗分析仪等。
4. 快速检测技术:为了满足食品生产和市场监管的需求,研究人员还致力于开发快速检测技术。
利用荧光共振能量转移技术和纳米材料等,可以实现对食品中黄曲霉素的快速检测。
总结而言,食品中黄曲霉素检测的应用研究主要集中在方法改进和优化、样品前处理技术、生物传感器技术和快速检测技术等方面。
这些研究的成果不仅可以提高对食品中黄曲霉素的检测准确性和灵敏度,还可以为保障食品安全提供重要的技术支持。
食品中黄曲霉素检测的应用研究

食品中黄曲霉素检测的应用研究
黄曲霉素是一种由霉菌产生的毒素,常见于谷物、坚果、豆类和干草等食品中。
摄入过多的黄曲霉素会对人体健康造成严重影响,甚至可能导致黄曲霉素中毒。
对食品中的黄曲霉素进行检测和研究非常重要。
1. 检测方法研究:近年来,随着技术的不断进步,食品中黄曲霉素的检测方法也得到了不断改进。
常见的检测方法包括高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、酶联免疫吸附试验等。
研究人员可以通过改进和创新检测方法,提高黄曲霉素的检测灵敏度和准确性。
2. 食品中黄曲霉素的分布研究:不同食品中的黄曲霉素含量各不相同,研究人员可以通过调查和分析不同食品中黄曲霉素的分布情况,了解其存在的程度和潜在风险。
这有助于及早发现和解决黄曲霉素污染问题。
3. 黄曲霉素的危害评估研究:黄曲霉素对人体健康的影响是复杂而多样的,除了常见的急性中毒症状外,还可能导致免疫抑制、致突变和致癌等慢性健康问题。
研究人员可以通过动物试验和流行病学研究等方法,评估黄曲霉素对人体健康的危害程度,为制定食品安全标准和风险管理措施提供科学依据。
4. 黄曲霉素污染的防治研究:对黄曲霉素污染食品的防治是食品安全的重要环节。
研究人员可以通过开发抗菌剂、改变加工条件和探索新的贮藏方法等途径,寻找有效的方法来减少和防止黄曲霉素的污染。
借助信息技术的发展,还可以建立黄曲霉素预警系统,提前预测和监测黄曲霉素污染的可能性。
食品中黄曲霉素检测的应用研究对于确保食品安全和人体健康具有重要意义。
通过不断改进检测方法、研究黄曲霉素的分布、评估其危害以及探索防治方法,可以有效控制黄曲霉素污染,保障人们的饮食安全。
食品中黄曲霉素检测的应用研究

食品中黄曲霉素检测的应用研究黄曲霉素(aflatoxin)是由黄曲霉属真菌产生的一类具有强烈毒性的化合物,对人体健康具有潜在的致癌和致畸作用。
它是一种广泛存在于植物食品和饲料中的自然毒素。
随着现代食品生产和贸易的发展,黄曲霉素污染已成为全球食品安全的一个严重问题。
对食品中黄曲霉素进行快速、准确和可靠的检测具有重要的意义。
食品中黄曲霉素检测的应用研究涉及到多个方面,包括检测方法的开发与改进、样品预处理技术、黄曲霉素生物毒理学研究等。
下面将对这些方面进行详细介绍。
首先是检测方法的开发与改进。
目前常用的黄曲霉素检测方法包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)。
这些方法各自具有特点和优缺点,需要根据不同的样品和要求选择适当的方法。
近年来,还出现了一些新的检测方法,如光纤免疫法、表面增强拉曼光谱法(SERS)和纳米材料检测法等,这些方法在提高灵敏度和准确性方面具有优势,但需要进一步的研究和验证。
其次是样品预处理技术。
由于食品样品中的黄曲霉素含量通常较低,需要进行富集、提取和净化等处理,以提高检测的灵敏度和准确性。
目前常用的样品预处理技术包括固相萃取(SPE)、液液分配、超滤和凝胶过滤等。
这些技术能够有效去除样品中的干扰物质,并提高黄曲霉素的浓度,以便于后续的检测。
然后是黄曲霉素的生物毒理学研究。
黄曲霉素在人体内具有强烈的致癌和致畸作用,主要通过损害DNA和RNA的结构和功能来发挥作用。
通过研究黄曲霉素的毒性机制和作用靶点,可以为进一步的食品安全控制和风险评估提供科学依据。
还可以通过研究黄曲霉素与其他物质的相互作用,探索潜在的防护和解毒措施。
最后是食品安全控制与监测体系的建立。
食品中黄曲霉素的污染问题长期存在,对人体健康造成威胁。
建立完善的食品安全控制和监测体系非常重要。
这包括制定相关的食品安全标准、监测网络和监测方法,并加强食品生产和贸易中的监管和管理,以保护消费者的权益。
食品中黄曲霉素检测的应用研究

食品中黄曲霉素检测的应用研究食品安全一直是人们关注的焦点之一,而黄曲霉素被认为是食品中一种常见的毒素,对人体健康具有潜在危害。
针对食品中黄曲霉素的检测与研究显得十分重要。
本文将从食品中黄曲霉素的危害、检测方法和应用研究这三个方面进行探讨。
一、食品中黄曲霉素的危害黄曲霉素是一种由曲霉属真菌产生的毒素,广泛存在于不同类型的食品中,如谷物、坚果、肉类和奶制品等。
它是一种脂溶性毒素,具有强烈的肝毒性和致癌性,长期摄入或暴露于其下会导致肝损伤、肝细胞癌等严重健康问题。
食品中黄曲霉素的存在一直受到人们的高度关注。
目前,用于食品中黄曲霉素检测的方法主要包括色谱法、免疫学法和生物传感器法等。
色谱法是最常用的方法之一,包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)和液相色谱-质谱联用法(LC-MS)。
免疫学法主要是利用抗体与黄曲霉素结合产生免疫反应进行检测,如酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫层析法。
而生物传感器法则是利用生物感受器对黄曲霉素进行敏感检测,如基于细胞、酶和抗体的生物传感器。
这些方法各有优缺点,因此在具体应用时需要综合考虑。
随着科学技术的不断进步,食品中黄曲霉素检测方法也在不断完善和创新。
最近的研究表明,一些新型的检测方法逐渐受到关注。
近年来关于基于纳米材料的黄曲霉素检测方法的研究日益活跃。
研究人员利用纳米材料的特殊性质和高表面积,设计不同的检测平台和传感器来提高检测的灵敏度和特异性。
随着基因工程技术的不断发展,越来越多的研究也将注意力投向了基于DNA技术的黄曲霉素检测方法。
这些方法利用DNA与黄曲霉素之间的特异性结合,可以实现对食品中极低浓度的黄曲霉素进行快速准确的检测。
除了检测方法的创新外,中国一些研究机构和企业还积极开展着食品中黄曲霉素检测技术的标准化工作。
通过建立规范的检测方法和标准,进一步提高了检测的准确性和可靠性,同时为食品生产企业和监管部门提供了技术支持和依据,有助于保障食品安全。
食品中黄曲霉毒素检测技术的研究现状

食品中黄曲霉毒素检测技术的研究现状作者:金迪来源:《粮食科技与经济》2020年第04期[摘要]近年来,随着我国经济的快速发展和人们生活水平的提高,越来越多的消费者开始关注食品的质量和安全。
随着食品行业的发展,食品安全问题层出不穷,严重危害人们的身体健康,而黄曲霉毒素是影响食品质量安全的主要毒素之一。
研究表明,黄曲霉毒素种类繁多、毒性极强,对人体的致癌性也极为显著,是目前已知最强的致癌物之一。
因此,食品中的黄曲霉毒素已经成为危害人类健康的重大问题,对食品中的黄曲霉毒素进行准确、有效的检测,能够降低食物中毒的风险。
本文对食物中黄曲霉毒素检测技术的研究现状进行综述,以期对食品公共卫生能够有进一步的了解。
[关键词]食品;黄曲霉毒素;检测技术中图分类号:TS207.4 文献标识码:A DOI:10.16465/431252ts.2020041 黄曲霉毒素概述食物中毒是指食用被生物、化学有毒有害物质污染的食品或者食用含有有毒有害物质的食品后发生的急性、亚急性食源性疾病。
当前食物中毒已经成为影响人类健康的主要因素之一,引起了人们的广泛关注。
污染食物的最具毒性的有害毒素是黄曲霉毒素(AFT),这是一种具有紫外线荧光特性的霉菌毒素,主要是指所有黄曲霉和寄生曲霉产生的对人体有害的次生代谢物,有各种各样的次生代谢物,目前已发现黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2等17种重要代谢产物[1]。
黄曲霉毒素进入人体后,能够在细胞内抑制DNA、RNA以及大分子蛋白质的合成,阻止糖类和脂类的代谢。
黄曲霉毒素主要利用肝细胞内质网微粒体混合功能氧化酶系的作用进行代谢,从而产生对人体有害的物质。
黄曲霉毒素的毒性是多系统毒性,主要包括对消化系统、肝脏、血液、免疫系统、生殖系统等的毒性[2]。
如果摄入量过多会引起急性中毒,对人体的肝脏、脾脏等产生巨大的损伤;如果長时间少量摄入,会出现慢性中毒的症状,如发育迟缓和体重减轻。
根据研究了解黄曲霉毒素的毒性是砒霜的68倍、氰化钾的10倍左右[2],这表明黄曲霉毒素对人体健康会构成巨大威胁。
黄曲霉毒素检测技术的研究与应用

黄曲霉毒素检测技术的研究与应用黄曲霉毒素是一种常见的真菌毒素,主要存在于谷类、油料等作物中,如果人或动物食用含有黄曲霉毒素的食物,会出现严重的中毒症状,甚至危及生命。
因此,对黄曲霉毒素的检测变得尤为重要。
近年来,各种黄曲霉毒素检测技术不断涌现,主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、免疫学方法等。
其中,免疫学方法被广泛应用,在黄曲霉毒素检测方面具有重要的作用。
免疫学方法是通过检测目标物与抗体的相互作用来进行检测的。
将含有黄曲霉毒素的样品与特定的抗体相结合,形成抗原-抗体复合物。
这样的复合物可以被一些检测手段所识别和测量,从而实现对样品中黄曲霉毒素的检测。
目前,免疫学方法被广泛应用于实际生产中,主要表现在以下几个方面:1. 检测谷物和油料由于谷物和油料是黄曲霉毒素的重要来源,因此在这些作物的种植、收获、加工和储存过程中,人们需要对它们进行检测以确保食用安全。
免疫学方法因其具有快速、准确、便捷和灵敏度高等特点,受到了广泛的应用。
2. 监测饮品和饲料除了谷物和油料,饮品和饲料中也可能存在黄曲霉毒素。
很多食品企业都使用尿液免疫法、酶联免疫法和荧光竞争性免疫分析法等免疫学方法对这些食品进行检测,以确保产品的质量和安全性。
3. 生态环境监测免疫学方法还可以用于环境中黄曲霉的检测。
黄曲霉可以分泌出孢子进入大气中,并在土壤中繁殖生长。
在生态环境中,通过免疫学方法对黄曲霉进行检测,可以及时了解环境中的污染情况,并采取措施加以治理。
总体而言,免疫学方法在黄曲霉毒素的检测方面具有重要的应用价值。
随着科技的不断进步和生产工艺的不断完善,免疫学方法的检测灵敏度和特异性还将得到进一步的提高,为确保人类和动物的生命健康贡献更大的力量。
高效液相色谱法检测食品中黄曲霉毒素研究进展

黄 曲霉 毒素具有极强 毒性和致癌性 , 世界 上大多 数国家和地 区都规定 其在 食 品中限量要求 , 要求对 并 黄曲霉毒素进行 有效监管。高效液相色谱法是一种检 测痕量物质 常用方 法, 检测黄 曲霉毒素一般 步骤是采
用 适合溶剂提取 目标物 , 净化浓缩 , ,柱 分离后检测 C8
于 9 % 回收率 ; 8 该净化法用 于花生、 巴西坚果 、 玉米 、
器检测 。根 据检测器不 同, 可分 为荧光检测 法和质谱
检 测法两类。
1 取 和 净 化 提
样 品提取 溶剂选 择 取决 于黄 曲霉 毒素 自身物 化 性质 , 一般 所用 提取 溶剂 为 甲醇、 乙腈 水 溶液 。尽 管 早期 方法 经常使 用氯 仿 , 考虑 到氯 仿对 环境影 响 , 但
现 已基本 上被替代 。一些新 的提取 技术, 如超 临界流
体萃取
、Hale Waihona Puke 加压流体 萃取( 加速流体萃取 ) b 被用于
中图分 类号 : S 0 . T 274
文献 标 识码 : A
文章 编号 : 08 9 7 ( 0 2 O — 00 — 0 10 — 5 8 2 1 ) 3 0 1 4
采用硅胶柱 ( 0 / L) 3 3m 建立简单 、 mg 可靠方 法分析检 测来 自不 同植物 油 中黄曲霉 毒素 , 结果 表明 , 胶柱 硅
pe t m anc i r or e lqui c om at r d nr og apIY I
BI if n , Ru - e g HE u p n Xi - i g
( oee h mi l n ier g Qig a U iesyo S i c a dT c n l y S a d n Q n d o 60 2 C ia) C l g C e c E g ei , n d o nvri f c ne n eh o g ,h n o g ig a 2 6 4 , hn l a n n t e o
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
第7期(总第484
期)
2019年
7
月
农产品加工
Farm Products Processing
No.7Jul.
文章编号:1671-9646
(
2019)07b-0086-04
食品中黄曲霉毒素检测技术的研究进展
史春悦(天津市南开区教育后勤服务中心,天津300190)摘要:黄曲霉毒素主要是由黄曲霉、寄生曲霉产生的次级代谢产物,
在自然界中尤其是湿热地区分布广泛,污染范
围广,具有强致癌和致突变性。
目前
,用于检测黄曲霉毒素含量的技术主要包括大型仪器分析技术和免疫分析技术。
对当前黄曲霉毒素检测技术的研究进展进行简要综述,
旨在为食品中黄曲霉毒素的检测分析提供参考
。
关键词:食品;黄曲霉毒素;黄曲霉;
寄生曲霉;仪器分析;免疫分析;
研究进展
中图分类号:TS201.1 文献标志码:A doi: 10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2019.07.059
Research Progress in the Detection of Aflatoxins in
Foods
SHI Chunyue(Tianjin Nankai District Education Logistics Service Center, Tianjin 300190, China)
Abstract: Aflatoxins are mainly secondary metabolites produced by Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus. It is widely
distributed in nature, especially in hot and humid areas, with a wide range of pollution,
and is highly carcinogenic and
mu
tagenic. At present, the detection technology for aflatoxins mainly includes large-scale instrumental analysis technology and
immunoassay technology. In this paper, a brief review of the current research progress in the detection of aflatoxins was pro
vided to provide reference for the detection and analysis of aflatoxins in food.Key words:
food; aflatoxins; Aspergillus flavus ; Aspergillus parasiticus ; instrumental analysis; immunoassay; research
progress
黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFs)主要是由黄曲霉 (Aspergillus flavus)
、
寄生曲霉(Aspergillus paraciti
-
cus)产生的次级代谢产物叭
这类真菌在自然界中
,
尤其是在高温高湿的热带和亚热带地区分布广泛、
污染范围广,谷物、豆类、坚果、油脂
、调味品、
乳制品等易受其污染叫已知的黄曲霉毒素有20多种,
在自然条件下产
生的黄曲霉毒素主要包括AFB1,AFB2,
AFG
1和
AFG2[3]O
根据其在紫外照射下产生的荧光颜色不同,
主要分为黄曲霉毒素B (Blue)与黄曲霉毒素G (Green)。B族黄曲霉毒素包括黄曲霉毒素B1(AFBJ 和黄曲霉毒素B2(AFBJ,在紫外照射下呈现蓝色荧 光,主要由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生;G族黄曲霉 毒素包括黄曲霉毒素G1(AFG)和黄曲霉毒素G2 (AFG),在紫外照射下呈现绿色荧光,主要由黄曲 霉菌产生45]。AFM1由AFB1通过体内代谢产生,泌 乳动物食用受AFB1污染的食物或饲料后由乳汁或尿 液进行分泌冋。黄曲霉毒素具有强致癌性和毒性,世界卫生组 织的癌症研究机构已将其列为I类致癌物。黄曲霉毒 素结构类似物的基本结构均有1个氧杂萘邻酮(香 豆素)和1个双咲喃环,致癌性主要与香豆素结构 有关,毒性主要与二咲喃环结构有关,其中以AFB1 最为常见且毒性最强。我国GB/T 2761-2017国家标 准规定了食品中真菌毒素的限量,分别规定了谷物、 豆类、坚果及其制品等产品中AFB1的限量,限量为 0.5~20.0弘g/kg,规定乳及乳制品中AFM1的限量为 0.5 “g/kg。我国 GB/T 5009.22—2016 国家标准规定 了食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定方法,主要 包括同位素稀释液相色谱-串联质谱法、高效液相
色谱-柱前衍生法
、高效液相色谱
-柱后衍生法
、
酶联免疫吸附筛查法、薄层色谱法。
目前
,用于检测
黄曲霉毒素含量的技术基于原理不同,大体上可以分
为基于色谱分离、荧光检测或质谱检测原理的大型仪
器检测技术和基于免疫学原理的快速检测技术叫
1仪器分析法
用于黄曲霉毒素检测的仪器法分析法主要包括 高效液相色谱法(High Performance Liquid Chro
matography ,HPLC)、超高效液相色谱法(Ultra HP-
收稿日期:2019-03-30
作者简介:史春悦(1990—),女,硕士,助理工程师,
研究方向为食品安全,2019年第7
期
史春悦:食品中黄曲霉毒素检测技术的研究进展
・
87
・
LC, UHPLC)、
液相色谱与质谱联用法
(HPLC-tan_
dem Mass Spectrometry
, HPLC-MS/MS)
、
气相色谱与
质谱联用法(GC-tandem Mass Spectrometry, GC-MS/
MS)等
。
通常使用紫外或荧光检测器配合HPLC进行检
测。
Campos W
E O
等人[8]对坚果中 AFB1,AFB?,
AFG1和AFG
2进行检测,样品经甲醇提取
、免疫亲
和柱净化、高效液相色谱荧光检测及柱后衍生化进
行定量检测。Fu Z等人回利用
UHPLC-UV法对玉米和
花生中的黄曲霉毒素,对AFB], AFB2,AFG], AFG
?
的最低检出限分别为0.32,0.19, 0.32,
0.19 “
g/kg。
液相或气相色谱与质谱联用适用于对同一样本 中多种待测物质同时进行定量检测,具有较高的灵
敏度。
Lattanzio V M T 等人[10利用 HPLC-MS/MS 对谷
物中包括AFB1,AFB2,AFG
1和AFG
?在内的多种真
菌毒素同时进行定量检测。
Vaclavik L
等人[11]
利用
UHPLC-MS/MS对咖啡豆中34种真菌毒素同时检测。
仪器分析法灵敏度高,能够进行精确的定量检
测,
可进行自动进样,从而实现自动化检测,但由
于存在样本前处理复杂、试验仪器昂贵等问题,难
以对大量样本进行快速检测。
2免疫学检测方法免疫学检测方法基于抗原抗体的特异性反应, 检测结果可以通过视觉判断或者酶标仪读数,能够
对真菌毒素进行定性或定量检测。该方法具有高特
异性、
高灵敏性、便于携带、
操作简单等特点,可
以用于真菌毒素的现场快速检测。2.1酶联免疫分析壮
酶联免疫分析方法(ELISA)的原理基于抗体、
抗原之间的特异性反应及酶的高效催化作用。由于
真菌毒素属于小分子半抗原,通常采用竞争反应模
式。用于标记的酶通常是辣根过氧化物酶或碱性磷
酸酶[12]
o
竞争法分为直接竞争法和间接竞争法
。
Lawellin D
W
等人问通过采用辣根过氧化物酶来标记
AFB1 半抗原, 利用直接竞争 ELISA 法对玉米中
AFB
1
进行检测,检出限为10 pg/mLo Zhang Q[14]利用间接
竞争ELISA法,对检测乳制品中AFM1进行检测, 检出限达3 ng/L,回收率为91%~110%° Li P等人㈣ 利用单克隆抗体10C9建立的ELISA方法,对花生中 黄曲霉毒素总量进行检测,回收率为87.5%~ 102 .0%, 能够实现花生样品中黄曲霉总量的快速检测。ELISA检测方法简单易操作,具有高特异、高 灵敏等特性,可对批量样本中的黄曲霉毒素进行快 速检测,在农产品食品安全检测领域已有广泛应用。 但在实际检测中可能会岀现重复性差、假阳性率高 等情况,样品中的氧化酶、蛋白酶等也可能会对检 测结果造成影响。2.2免疫亲和检测技术免疫亲和技术(Immunoaffinity Column, IAC) 的原理基于免疫化学反应, 通过对待测物质进行净 化和浓缩,去除样品基质干扰,采用高效液相色谱 仪、荧光分光光度仪或ELISA进行检测,可以提高 检测灵敏度和准确度。免疫亲和柱联合色谱分析 法(IAC-HPLC)将免疫分析方法的快捷、特异性与 仪器分析方法的精确性等优点结合起来,比传统的 HPLC更稳定、可靠,目前已成为黄曲霉毒素定量检 测的重要方法。Fei Ma等人[16]利用单克隆抗体1C11 制备出免疫亲和柱,利用IAC-HPLC法检测花生、 植物油和茶叶中的黄曲霉毒素含量,AFB1,AFB2, AFG1,AFG2 的检出限分别为 0.25, 0.30,0.10, 0.18 p,g/kgo2.3免疫层析法免疫层析法的原理是将抗原或抗体包被于固相 载体硝酸纤维膜上,检测时将样品加到试纸上的样 品垫,样品在毛细管作用下前移与标记探针相互作 用形成复合物,可通过肉眼或对借助信号采集仪器 对显色结果进行定性或定量分析。免疫层析试纸条 的组分包括样品垫、标记探针固定垫、硝酸纤维膜 (NC膜)、吸水垫和底板。基于胶体金标记的免疫层析技术(GNP-ICA) 将胶体金标记技术、免疫分析技术和层析技术联系 起来。宋青龙等人呵利用该方法研制岀一种胶体金快 速定量检测试剂盒,用于谷物和饲料中黄曲霉毒素 B1的检测,检测结果与HPLC检测结果相符。免疫层析法具有快捷、 灵敏、 特异的特点, 结 果判断直观可靠、成本低廉、操作简单、不依靠大 型仪器设备和专业技术人员,在现场监控和大规模 样品检测中取得了广泛应用。2.4荧光免疫法荧光免疫法采用荧光标记取代酶联免疫检测法 中的酶标记, 通过检测荧光信号对结果进行测定, 具有较高的灵敏度,可实现对微量或超微量样品的 检测。常用的荧光免疫分析法主要包括荧光免疫分 析(Immuno-fluoremetrie Assays, IFMA)、荧光偏振 免 疫分析 (Fluorescence Polarization Immunoassay,
FPIA)、
荧光激发共振能量转移免疫分析
(Fluores