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载体——精选推荐

载体——精选推荐

载体基因⼯程的载体载体的特征:在寄主细胞中能够⾃主复制;有⼀种或多种限制酶的单⼀切割位点,并在此位点插⼊外源基因⽚段;在基因组中有遗传标记,为寄主细胞提供易于检测的表型特征;载体分⼦较⼩,以便体外基因操作;对于表达型载体还应具有与宿主细胞相适应的启动⼦、增强⼦、加尾信号等基因表达元件;载体的类型质粒噬菌体其他载体(如:酵母⼈⼯染⾊体、细菌⼈⼯染⾊体、植物Ti质粒、动物病毒)质粒(plasmid): 多数情况下,质粒是存在于细菌染⾊体外的⼩的双链闭合环状DNA分⼦,能⾃主复制,并在细胞分裂时遗传给⼦代细胞并不是所有的质粒都是环状分⼦, 在多种细菌中都发现有线性质粒质粒⼴泛存在于原核⽣物中, 其⼤⼩从相对分⼦量⼩于1X106 到⼤于200X106质粒的形态1) cccDNA—双链闭合环状DNA2) ocDNA—开环DNA3) cDNA—线形DNA(L型)在DNA促旋酶(gyrase)作⽤下成负超螺旋构型, 在拓扑异构酶I的作⽤下解旋。

溴化⼄锭(ethidium bromide,EtBr)也有解旋作⽤溴化⼄锭插⼊DNA超螺旋的作⽤随着插⼊的溴化⼄锭数⽬增加,双螺旋解旋,导致超螺旋减少直⾄产⽣环状分⼦的开放形式. 进⼀步的插⼊在双螺旋中引⼊了过多的螺旋,导致反义的超螺旋(注意B和D处的螺旋⽅向). 为了清楚起见,只表⽰了双螺旋的⼀条单链质粒DNA的复制类型严紧型质粒这些质粒的复制是在寄主细胞严格控制之下的,与寄主细胞的复制偶联同步。

所以,往往在⼀个细胞中只有⼀份或⼏份拷贝松弛型质粒这些质粒的复制是在寄主细胞的松弛控制之下的,每个细胞中含有10-200份拷贝,如果⽤⼀定的药物处理抑制寄主蛋⽩质的合成才会使质粒拷贝数增⾄⼏千份。

如较早的质粒pBR322即属于严紧型质粒,要经过氯霉素处理才能达到更⾼拷贝数穿梭载体(shuttle vector) 可以在两种⽣物体内复制的载体分⼦质粒的命名规则⼩写字母p表⽰质粒(plasmid)p后⾯的两个⼤写字母表⽰发现或者构建该质粒的作者或者实验室名称数字表⽰编号例:pBR322、pET21、pGEM-T质粒的宿主范围质粒只编码少数⼏个其⾃⾝复制所需要的蛋⽩质,甚⾄在许多情况下只编码其中⼀个蛋⽩质所有其他复制所需的蛋⽩,包括DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶等都是由宿主细胞提供的质粒所编码的复制蛋⽩质定位在ori 附近,因此只有ori 周围的⼀⼩部分区域是复制所必需的因此,把质粒的其他部分删除掉,把外源序列加到质粒上,复制仍然可以继续进⾏质粒的宿主范围是由它的ori 决定的质粒的不相容性在没有选择压⼒的情况下,两种质粒不能共存于同⼀个宿主细胞内如果质粒拥有相同的复制调控机制,它们就不相容显性质粒和隐蔽质粒显性质粒(表达型质粒)----除了携带与本⾝复制和转移有关的基因外, 还携带⼀些其他的基因, 宿主细胞由于含有这样的质粒⽽呈现出新的性状, 这样的质粒称为显性质粒隐蔽质粒----⽆异常性状表现出来克隆载体例:pBR322、pUC18、pUC19、pGEM-T表达载体例:pET-21、pGEX质粒DNA的制备碱裂解法、煮沸法、层析柱过滤法碱裂解法原理:在⾼pH的碱性条件下,染⾊体DNA和蛋⽩质变性,质粒DNA由于其超螺旋共价闭合环状结构,尽管其DNA的⼤部分氢键也断裂,但是双链DNA仍然不会分离,当恢复到中性时,染⾊体DNA复性,并聚集形成不可溶的⽹架。

第四章 基因工程的质粒载体

第四章 基因工程的质粒载体
(a)表示位于F-细胞中的ColE1质粒的状,它的mob基因进行了转录,其产物 使bom位点发生单链断裂而出现缺口,于是ColE1 DNA 便从超盘旋的的结构 转变成为缺口环状的构型。但ColE1质粒缺乏形成性须的能力,无力进行结合 配对,所以它的DNA也就不能从一个细胞转移到另一个细胞。正是由于不能 够发生转移,这种从超盘旋到缺口环状的构型转变过程,就有可能被回复, 所以就出现这两种构型之间的平衡状态。
SC
2 质粒DNA的转移
(1)质粒的类型:在大肠杆菌中的质粒,可 以分为:
接合型质粒:能自我转移
具有自主复制的基因,控制细菌配对和质粒接合转 移的基因。
非接合型质粒 不能自我转移
按接合转移功 能分类
非接合型质粒
主要基因
自主复制基因,产生大肠杆菌素基因
按抗性记号 分类
Col质粒
接合型质粒
自主复制基因,抗菌素抗性基 因
第二代 酵母表达 穿梭质粒 体系
第三代 哺乳类细 病毒、脂质体 胞表达体系
第四代 基因直接 DNA本身 导入
细菌 酵母 培养动物细胞 生殖细胞、 体细胞、个体
(三)基因工程载体必须具备的条件:
※(1)有复制起点 ※(2)具有若干个限制性内切酶的单一识别位点 ※(3)具备合适的筛选标记 ※(4)具备合适的拷贝数目
(c)所示,F质粒无力帮助mob-突变体进行转移,其中F性须和转移装置虽已 形成,但ColE1 DNA并没有发生缺口。
(d)表示另一种具mob+表型并带有一个顺式显性突变的ColE1突变体,它缺 失了bom位点。在这样的寄主细胞中,虽然能够合成mob蛋白质,但由于不 能发生缺口,因此仍然不能够转移。
3.若质粒DNA经过适当的核酸内切 限制酶切割之后,发生双链断裂形成 线性分子(IDNA),通称L构型

质粒载体种类

质粒载体种类

质粒载体种类
质粒载体是在基因工程中经常使用的一种工具,常见的质粒载体种类包括:
1. Shuttle质粒载体:能够在多个宿主生物中复制的质粒载体,通常用于在不同宿主中进行基因表达或基因转导的研究。

2. 表达质粒载体:用于将特定基因的DNA序列插入到质粒载
体中进行表达的载体,通常包括启动子、转录终止子和选择标记基因等。

3. 空质粒载体:通常只包含质粒的骨架结构,没有包含具体的基因,常用作对照实验的负对照。

4. 感受态质粒载体:这种质粒载体可与RNA或DNA片段融合,形成DNA-RNA复合体,通常用于RNA干扰实验。

5. 水平转移质粒载体:这种质粒载体能够在细菌中进行一种称为水平转移的传递,用于研究基因在不同细菌中的传播。

6. 呈味性质粒载体:这种质粒载体能够在菌落中形成代谢产物,在实验室中常用于菌落筛选。

以上是一些常见的质粒载体种类,不同种类的质粒载体在基因工程中扮演不同的角色,被用于不同的研究目的。

质粒载体图谱大全Vector

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A. Geerlof
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T7-lac

质粒图谱信息

质粒图谱信息

质粒图谱信息一.九种表达载体Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-P, pMBP-C,pET-GST, pET-Trx, pET-His, pET-CKS, pET-DsbA二.克隆载体pTZ19R DNApUC57 DNAPMD18TPQE30pUC18pUC19pTrcHisApTrxFuspRSET-ApRSET-BpV AX1PBR322pbv220pBluescript II KS (+)L4440pCAMBIA-1301pMAL-p2XpGD926三.PET系列表达载体Protein Expression » Prokaryotic Expression » pETDsb Fusion Systems 39b and 40b Protein Expression » Prokaryotic Expression » pET Expression System 33bProtein Expression » Prokaryotic Expression » pET Expression SystemsProtein Expression » Prokaryotic Expression » pET Expression Systems plus Competent Cells Protein Expression » Prokaryotic Expression » pET GST Fusion Systems 41 and 42Protein Expression » Prokaryotic Expression » pETNusA Fusion Systems 43.1 and 44 Protein Expression » Prokaryotic Expression » pET Vector DNAProtein Purification » Purification Systems » Strep•Tactin Resins and Purification Kits四.PGEX系列表达载体T EcoR pGEX-1 I/BAPpGEX-2TpGEX-2TKpGEX-3XpGEX-4T-1pGEX-4T-2pGEX-4T-3pGEX-5X-1pGEX-5X-2pGEX-5X-3pGEX-6P-1pGEX-6P-2pGEX-6P-3五.PTYB systemPTYB1PTYB2PTYB11PTYB12六.真核表达载体pCDNA3.1(-)pCDNA3.1(+)pPICZ alpha ApGAPZαAPYES2.0pBI121pEGFP-N1pEGFP-C1pPIC9KpPIC3.5K如何阅读分析质粒图谱载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种非病毒转基因载体。

常用质粒资料.

常用质粒资料.

常用质粒载体特点汇总名称长度抗性特殊性能PAO815 7709 bp Amp 酵母表达pAxCAwt 44741 BP Amp 腺病毒表达pAxcw 42410 bp Amp 腺病毒表达pAAV-MCS 4.7 kbp Amp 哺乳动物细胞表达pBacPAK8 5.5 k Amp 杆状病毒表达PBI121 13.0 kbp Kan 植物细胞表达pBV220 3665 bp Amp 原核表达pCAMBIA 1300 植物细胞表达pCAMBIA 1301 11837 bp Kan 植物细胞表达pCAT3-Basic 4047 bp AmppcDNA 3 5446 bp Amp 哺乳动物细胞表达pcDNA 3.1(+) 5428 bp Amp 哺乳动物细胞表达pcDNA 3.1/ mys- HisA 5494 bp Amp 哺乳动物细胞表达pCl-neo 5472 bp Amp 哺乳动物细胞表达pCMV-MCS 4.5 kbp Amp 哺乳动物细胞表达pET-3a 4640 bp Amp 大肠杆菌表达pET-11a 5677 bp Amp 大肠杆菌表达pET-15b(+) 5708 bp Amp 大肠杆菌表达pET-20b(+) 3716 bp Amp 大肠杆菌表达pET-22b(+) 5493 bp Amp 大肠杆菌表达pET-23a(+) 3666 bp Amp 大肠杆菌表达pET-23b(+) 3665 bp Amp 大肠杆菌表达pET-23c(+) 3664 bp Amp 大肠杆菌表达pET-23d(+) 3663 bp Amp 大肠杆菌表达pET-28a(+) 5369 bp Kan 大肠杆菌表达pET-28b(+) 5368 bp Kan 大肠杆菌表达pET-28c(+) 5367 bp Kan 大肠杆菌表达pET-30a(+) 5422 bp Kan 大肠杆菌表达pET-30b(+) 5421 bp Kan 大肠杆菌表达pET-30c(+) 5423 bp Kan 大肠杆菌表达pET-31b(+) 5742 bp Amp 大肠杆菌表达pET-32a(+) 5900 bp Amp 大肠杆菌表达pET-32b(+) 5899 bp Amp 大肠杆菌表达pET-32c(+) 5901 bp Amp 大肠杆菌表达pET-39b 6106 bp Kan 大肠杆菌表达pET-42a 5930 bp Kan 大肠杆菌表达pGAPZ aA 3147 bp Zeo 酵母表达pGBKT7 7.3 kbp Kan 酵母表达pGEM3Zb 原核表达pGEM3Zf(+) 原核表达pGEM7Zf(+) 原核表达pGEX-2T 4969 bp Amp 原核表达pGEX-4T-1 4969 bp Amp 原核表达pGFP-N2 4732 bp Kan 哺乳动物细胞荧光蛋白表达pEGFP-C1 4731 bp Kan 哺乳动物细胞荧光蛋白表达pEGFP-C3 4727 bp Kan 哺乳动物细胞荧光蛋白表达pEGFP-N1 4733 bp Kan 哺乳动物细胞荧光蛋白表达pLEGFP-N1 6892 bp Amp 哺乳动物细胞荧光蛋白表达pGL3-Basic 4818 bp AmppGL36pLNCX 6620 bp Amp 反转录病毒表达pLNHX 5.6 kbp Amp 反转录病毒表达pLXSN 5.9 kbp Amp 反转录病毒表达pLXIN 6.1 kbp Amp 反转录病毒表达pMAL-p2x 6721 bp Amp 原核融合蛋白表达pMAL-c2x 6721 bp Amp 原核融合蛋白表达pPIC3.5K 9004 bp Amp/Kan 酵母表达pPIC9 8024 bp Amp 酵母表达pPIC9K 9276 bp Amp 酵母表达pPICZ aA 3593 bp Zeo 酵母表达pQBI PGK 5387 bp Amp 哺乳动物细胞荧光蛋白表达pQE-30 3461 bp Amp 原核表达pQE-9 3439 bp Amp 原核表达pRevTRE 6487 bp Amp 反转录病毒表达pSE420L 4617 bp AmppTac I Amp 原核表达pTac I(BamH I) Amp 原核表达pTAL-Luc 4956 bp Amp 哺乳动物细胞表达pTWIN1 7375 bp Amp pTXB1 6706 bp Amp pVAX1 2999 bp Kan。

2.1_基因工程载体-质粒载体_201209



抗菌素

b.蓝白斑试验(IPTG-Xgal 试验)
乳糖操纵子的天然诱导物是乳糖
乳糖类似物异丙基-β-D -硫代半乳糖苷 (IPTG) 有更强的诱导作用。 IPTG配合使用在基因工程可作蓝白斑筛选。
LacZ基因编码的乳糖苷酶 X-gal 蓝色吲哚产物
-半乳糖苷酶Xgal显色反应: -半乳糖苷酶能把无色的化合物 Xgal分解成半乳糖和一个深蓝色的 物质5-溴-4-氯靛蓝。 Xgal 半乳糖 5-溴-4-氯靛蓝
– 非接合型质粒 不能在天然条件下独立地发生接合作用 如Col、R的其它成员
• 值得注意的是,某些非接合型质粒(ColE1)在 接合型质粒的存在和协助下,也能发生DNA转移, 这个过程由 bom 和mob 基因决定
( 5)质粒DNA的构型:
SC型 共价闭合环形DNA(cccDNA) OC型 开环DNA(ocDNA) L 型 线性DNA(cDNA)
根据宿主细胞所含的拷贝数多少, 可将质粒分成:
• 严紧型
低拷贝数的质粒,每个宿主细 胞中仅含有1-2份的拷贝,称这类 质粒为“严紧型”复制控制的质 粒(stringent plasmid); 高拷贝数的质粒,每个宿主细 胞中可高达10-200份拷贝,这类 质粒被称为“松弛型”复制控制 的质粒(relaxed plasmid)。
• 松弛型
(4)可转移性
在天然条件下,大多质粒可通过 细菌接合作用从一种宿主细胞内转移 到另外一种宿主内。
大肠杆菌接合(conjunction)
如:F质粒(性质粒、或F因子)
质粒迁移
• 革兰氏阴性菌的质粒可分成两大类:
– 接合型质粒 能在天然条件下自发地从一个细胞转移到 另一个细胞(接合作用),如F、Col、R质粒等

质粒的分子生物学与质粒载体word精品文档6页

第三章质粒的分子生物学与质粒载体一、填空题1.基因工程中有3种主要类型的载体:——-------、------------一、-----------.2.由于不同构型的DNA插入EB的量不同,它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同,SC DNA的泳动速度—----------—,OC DNA泳动速度—---------—,L DNA居中,通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。

3.质粒的复制像染色体的复制一样,是从特定的起始点区开始的。

然而,质粒的复制可以是—---—向的、或是—----—向的。

在杂种质粒中,每个复制子的起点都可以有效地加以使用。

但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地位。

并认为:当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后,在正常情况下—------—的复制起点可能被苯闭。

4.就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:—-----—、—---------—、—----------------—。

另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。

5.如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中,则属于—---------—群,这是因为它们的——————————所致。

6.质粒拷贝数是指细胞中—------------------------—。

7.复制子由三部分组成:(1)—-----------------—---(2)——-----------————(3)—--------------—。

8.酵母的2μm质粒有------------,可以配对形成哑铃结构。

9.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后,一部分细胞中已测不出质粒,这种现象叫----------------。

10.pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于----——,它的四环素抗性基因来自于—-----------—,它的氨苄青霉素抗性基因来自于—---------—。

质粒载体种类

质粒载体种类
质粒载体种类繁多,可以根据其功能和用途进行分类。

以下是一些常见的质粒载体类型:
1. 克隆载体:这种类型的质粒主要用于克隆和扩增DNA片段。

它们通常具有易于克隆的限制性酶切位点,以及细菌选择标记和多克隆位点。

2. 表达载体:表达载体用于在宿主细胞中表达目的基因。

这些载体包含可调控的启动子和终止子,以及选择标记和目的基因的克隆位点。

3. 干扰基因表达载体:这种载体主要用于抑制目标基因的表达。

它们通常包含干扰RNA(RNAi)的序列,以沉默特定基因的表达。

4. 病毒载体:病毒载体可以利用病毒的特性来传递遗传物质。

它们可以携带治疗性基因或用于基因编辑,并通过感染宿主细胞来传递这些基因。

此外,还可以根据质粒的拷贝数、复制起始区、选择标记基因区、多克隆位点等特征对质粒载体进行进一步分类。

质粒载体种类

质粒载体种类质粒载体是在基因工程和分子生物学研究中广泛应用的一种工具,它可以用来携带和传递外源基因。

根据其特性和功能的不同,质粒载体可以分为多种类型,下面将介绍几种常见的质粒载体。

1. 表达质粒载体表达质粒载体是用于表达外源基因的载体。

它通常包含一个启动子、一个编码区和一个终止子。

启动子可以使外源基因在宿主细胞内得到转录和翻译,编码区则包含了外源基因的编码序列,终止子用于终止翻译过程。

常用的表达质粒载体包括pUC19、pET28a等。

这些载体具有高拷贝数和广谱宿主范围的特点,适用于大多数细菌和酵母的表达。

2. 克隆质粒载体克隆质粒载体用于将外源DNA片段克隆到质粒中。

它通常包含一个多克隆位点,用于插入外源DNA片段,以及一些选择标记,如抗生素抗性基因。

常见的克隆质粒载体有pGEM-T、pBluescript 等。

这些载体具有较高的拷贝数和较大的插入容量,适用于DNA 片段的克隆和扩增。

3. RNAi质粒载体RNAi质粒载体用于介导RNA干扰(RNA interference)。

它通常包含一个RNAi导体,其中包含外源基因的靶向序列,以及一个RNAi表达序列。

外源基因的靶向序列可以与目标基因的mRNA相互配对,从而介导其降解或抑制其翻译。

常见的RNAi质粒载体有pSUPER、pLKO等。

这些载体具有较高的RNAi效率和较强的基因沉默能力,适用于基因功能研究和基因治疗。

4. 荧光蛋白质粒载体荧光蛋白质粒载体用于表达荧光蛋白基因,常用于研究基因的表达和定位。

它通常包含一个荧光蛋白基因,如绿色荧光蛋白(GFP)或红色荧光蛋白(RFP),以及一个启动子和终止子。

外源基因的表达可以使细胞或生物发出荧光信号,从而实现基因的可视化。

常见的荧光蛋白质粒载体有pEGFP、pRSET等。

这些载体具有较高的表达效率和较强的荧光信号,适用于细胞标记和蛋白定位等研究。

5. 敲入质粒载体敲入质粒载体用于将外源DNA片段整合到宿主基因组中。

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酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF,pY15TEF,pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109;质粒pGADT7,pGBKT7;对照质粒pGBKT7-53,pGBKT7-lam,pGADT7-T,PCL1,酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc,配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33,KM71,KM71H,GS115,原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列,pET-GST,pGEX系列(含GST标签),pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列,pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列,pBV220,221,222,pTXB系列,pLLP-ompA,pIN-III-ompA (分泌型表达系列),pQBI63(原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF(+), pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK (+),pBlueScript SK(-)pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒: pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒:pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1,pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣: pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞: DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21(DE3)HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21(AI)BL21(DE3)plysS TG1 TB1 DH5a(pir)Tuner(DE3)Bl21 codonplusRIPL Novablue (DE3)Rosetta Rosetta(DE3)Rosetta(DE3)plys Rosetta-gami(DE3)Rosetta-gamiB(DE3), Rosetta-gamiB(DE3)plysS Orgami(DE3)OrgamiB(DE3)HMS174(DE3)植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体(随机突变体库)pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01,配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0,pSilencer 2.1-U6 hygro, pSilencer 3.1-H1 hygro,pSilencer 3.1-H1 neo, pSilencer 4.1-CMV neo, pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体(oligoengine)pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体(clontech): RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen(Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide)RNAi慢病毒载体(addgene): pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B,pSecTag2 A,pVAX1,pBudCE4.1,pTracer CMV2,pcDNA3.1(-)/myc-His A ,pcDNA6-Myc/His B,pCEP4, pIRES,pIRESneo,pIRES hyg3,pCMV-myc,pCMV-HA,pIRES-puro3,pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT,pBIND,pACT-MyoD,pBIND-Id,pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ,pOPI3CAT,pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统(Invitrogen):pcDNA4/TO/Myc-His A,pcDNA4/TO/Myc-His B,pcDNA4/TO/Myc-His C,pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ,pcDNA6/TR四环素调控系统(Clontech):pTet-On,pTet-Off,pTRE2,pRevTRE,pRevTet-On,pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc,pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc,pIκB-EGFP,pNFAT-TA-Luc,pCaspase3-sensor,pAP1(PMA)-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro],pGL4.75;p53-Luc,pAP-1-Luc, pNF-κB-Luc,pSRE-Luc,pFA2-Elk1,pFC-MEKK,pFR-luc,Gateway系统(invitrogen)pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR,乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株,pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523,pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444(GFP), pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1,腺病毒载体/慢病毒,逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒,腺病毒系统(Stratagene): pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统(Stratagene): pAAV-MCS,pAAV-RC,pHelper,pAAV-LacZ,pAAV-IRES-hrGFP,pCMV-MCS,慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。

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