高效液相色谱法与化学发光微粒子免疫检测法测定血浆苯妥英浓度的一致性评价
25-羟基维生素D不同临床检测方法的评价
２５Ｇ羟基维生素D 不同临床检测方法的评价张民杰,程昱璇,桑培培,舒㊀杨,崔佳奕,檀旭东,史文杰,蒋㊀涛,周红辉,张春燕,田亚平(中国人民解放军总医院医学创新研究部出生缺陷防控技术研究中心,北京１００８５３)D O I :１０．１１７４８/b j m y ．i s s n ．１００６－１７０３．２０２１．１０．０３４收稿日期:２０２１Ｇ０７Ｇ１７;修回日期:２０２１Ｇ０８Ｇ０２基金项目:十三五重点研发计划亚健康状态的多参数量化评价研究(２０２０Y F C ２００２７００);国家重点研发计划(编号:２０１７Y F C １００１７００)作者简介:张民杰,女,技师,主要从事临床检验研究.通讯作者:张春燕,女,博士,助理研究员.田亚平,男,博士,博士生导师,主任医师/教授.摘要:目的㊀分析和比较电化学发光法(E C L I A )和液相色谱Ｇ串联质谱(L C ＧM S /M S )法检测２５Ｇ羟基维生素D [２５(O H )D ]的临床性能,为临床提供更准确有效的２５(OH )D 检测依据.方法㊀收集２６３例血清标本,分别用E C L I A 和L C ＧM S /M S 两种方法测定２５(OH )D 水平,对测定结果进行统计分析和比对,探讨两种方法测定结果的相关性和差异性.结果㊀分析２６３例临床样本结果,与L C ＧM S /M S 相比,E C L I A 相对平均偏差为－０．９％;E C L I A 检测结果与L C ＧM S /M S 检测结果相关性为０．５１,一致性为０．３９;B l a n d ＧA l t m a n 回归分析结果具有统计学意义,两种方法的测量结果存在差异.结论㊀E C L I A 无法检测２５(OH )D ２,与L C ＧM S /M S 对比存在差异,相关性和一致性有待提升.关键词:２５Ｇ羟基维生素D ;㊀液相色谱Ｇ串联质谱法;㊀电化学发光发;㊀相关性中图分类号:R ４４６．１㊀㊀文献标识码:AA nE v a l u a t i o no fD i f f e r e n tC l i n i c a lA s s a y s f o rH y d r o x yv i t a m i nD Z H A N G M i n j i e ,C H E N G Y u x u a n ,S A N GP e i p e i ,S H U Y a n g ,C U I J i a yi ,T A N X u d o n g ,S H IW e n j i e ,J I A N G T a o ,Z H A N G C h u n y a n ,T I A N Y a p i n g(R e s e a r c hC e n t e r o fB i r t hD e f e c t P r e v e n t i o nT e c h n o l o g y,M e d i c a l I n n o v a t i o nR e s e a r c h D i v i s i o no fC h i n e s eP L A G e n e r a lH o s p i t a l ,B e i j i n g １００８５３,C h i n a )A b s t r a c t :O b j e c t i v e T oa n a l y z e a n d c o m p a r e t h e c l i n i c a l pe rf o r m a n c e o f e l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c e (E C L I A )a n d l i q u i d c h r o m a t og r a ph y Ｇt a n d e m m a s s s p e c t r o m e t r y (L C ＧM S /M S )i n t h e d e t e c t i o n o f ２５h y d r o x y vi t a m i n D [２５(O H )D ],a n d t o p r o v i d em o r e a c c u r a t e a n d e f f e c t i v e ２５(O H )Dd e t e c t i o n p i p e l i n e ．M e t h o d s ２６３s e r u m s a m p l e sw e r ec o l l e c t e d ,a n dt h e ２５(O H )D c o n c e n t r a t i o n w a s m e a s u r e d b y E C L I A a n d L C ＧM S /M S ,r e s p e c t i v e l y ．T h em e a s u r e m e n t r e s u l t s w e r e s t a t i s t i c a l l y a n a l y z e d a n d c o m p a r e d t o e x p l o r e t h e c o r r e l a t i o n a n d d i f f e r e n c e o f t h e s e t w om e t h o d s ．R e s u l t s W e a n a l y z e d t h e r e s u l t s o f ２６３c l i n i c a l s a m p l e s ．W h e n c o m pa r e dw i t h L C ＧM S /M S ,t h er e s u l t sw e r ea sf o l l o w i n g :t h er e l a t i v ea v e r a ged e v i a t i o no fE C L I A w a s －０．９％;t h e s e n s i t i v i t y o f E C L I Aw a s ６９．８４％a n d t h e s p e c i f i c i t y wa s ７２．９７％;t h e c o r r e l a t i o nw i t h t h e r e s u l t s o f L C ＧM S /M Sw a s ０．６１,a n d t h e c o n s i s t e n c y w a s ０．４．T h e r e s u l t s o f B l a n d ＧA l t m a n r e g r e s s i o n a n a l y s i sw e r e s t a t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n t ,a n d t h em e a s u r e m e n t r e s u l t so f t h e t w o m e t h o d sw e r e p r o p o r t i o n a l l y di f f e r e n t ．C o n c l u s i o n T h e s e n s i t i v i t y a n d s p e c i f i c i t y o fE C L I A sd e t e c t i o no fh u m a n ２５(O H )Di s l o w e r t h a nt h a to fL C ＧM S /M S ．C o m p a r e dw i t hL C ＧM S /M S ,t h e r e i s a p r o p o r t i o n a l d i f f e r e n c e ,a n d t h e c o r r e l a t i o n a n d c o n s i s t e n c y ne e d t o b e i m pr o v e d ．K e y w o r d s :２５Ｇh y d r o x y Ｇv i t a m i nD ;㊀L C ＧM S ＧM S ;㊀E C L I A ;㊀C o r r e l a t i o n ㊀㊀维生素D 是机体内促进钙和磷酸盐吸收和代谢的重要调节分子,在维持钙磷水平稳定中发挥着重要作用,显著影响着机体骨代谢和钙稳态[１Ｇ２].除了这些对骨骼的影响,最近研究显示,维生素D 缺乏或缺失与许多疾病的风险增加有关,包括癌症㊁心血管疾病㊁糖尿病㊁传染性疾病和自身免疫性疾病[３Ｇ８].００８１L a b e l e d I mm u n o a s s a ys&C l i n M e d ,O c t ．２０２１,V o l ．２８,N o ．１０因此,准确测定维生素D对预防相关疾病具有重要作用.㊀㊀维生素D的两个重要形式是２５(O H)D２(麦角钙化甾醇)和２５(O H)D３(胆钙化甾醇),人体不能合成２５(O H)D２,只能通过食品或补剂获取,因此血清中检测出的大部分２５(O H)D为２５(O H)D３,只有少数人血清中含有能达到检测水平的２５(O H)D２.㊀㊀据报道,正常人２５(O H)D水平为５０~１２５n m o l/L,如果２５(O H)D检测结果低于３０n m o l/L则判断为维生素D缺乏,长期持续则可引起儿童佝偻病和成人软骨病;如２５(O H)D检测结果低于５０n m o l/L,但高于３０n m o l/L,则判断为维生素D不足,长期持续将损害骨骼健康,增加骨折风险;反之,如２５(O H)D检测结果高于１２５n m o l/L,可判断为维生素D过多,亦会对健康产生不利的影响.２５(O H)D过高(＞２００n m o l/L)达到毒性水平很少发生.相反,一个日益严重的公共卫生问题是２５(O H)D不足.多项研究发现,在全世界明显健康的人群中普遍存在维生素D缺乏[９Ｇ１５].因此,２５(O H)D的检测需要有更高的要求.本研究的目的是评估两种方法检测２５(O H)D的分析性能,为临床检测方法提供实验依据.材料和方法㊀㊀１㊀试剂和仪器㊀㊀２５Ｇ羟基维生素D２/D３测定试剂盒(质谱生物科技有限公司),质谱级甲醇㊁甲酸(沃特世科技有限公司),以及W a t e r s X e v o T Q D三重四极杆液质联用仪.㊀㊀２５Ｇ羟基维生素D检测试剂盒(罗氏诊断产品有限公司),以及电化学发光全自动免疫分析仪C o b a s６０００.㊀㊀２㊀研究对象㊀㊀收集并筛选临床样本血清２６３例,分别用两种方法检测血清２５(OH)D水平,并对结果的相关性进行研究.所有样本的信息均无限制要求,每个血清样本分为３份,在－８０ħ下冷冻储存.㊀㊀３㊀实验方法㊀㊀３．１㊀色谱条件和质谱条件㊀色谱条件:色谱柱: C１８柱(超高效液相色谱柱A D J T M D３C１８１．９μm ２．１ˑ１００mm);流动相:A相:含０．１％甲酸的水溶液;B相:甲醇;流速:０．３m L/m i n;进样体积:１５μL;柱温:３５ħ.㊀㊀梯度洗脱:见表１.表１㊀色谱梯度洗脱时间/m i n流动相A(％)流动相B(％)０８０２０１１０９０５８９８５２９８５．５１８０２０６８０２０㊀㊀质谱条件电力方式:电喷雾电离,正离子模式(E S I＋);检测方式:多反应监测模式(M R M);用于定量分析２５(O H)D３的离子反应为m/z４０１．４ң３８３．１５,用于定量分析２５(O H)D２的离子反应为m/z４１３．４ң３９５．１,内标２５(O H)D３的定量离子对m/z４０７．４ң３８９．１,内标２５(O H)D２的定量离子对m/z４１９．４ң４０１．１.㊀㊀３．２㊀E C L I A方法条件㊀用电化学发光全自动免疫分析仪和配套试剂盒,按照试剂盒说明书的标准操作流程进行样品处理和检测.㊀㊀４㊀统计学处理㊀㊀用M e d c a l c软件计算两种方法的相关系数(r);使用B l a n dＧA l t m a n图来评估两种方法检测２５(O H)D结果的相对平均偏差和相应的９５％的一致性(ʃ１．９６s),系统偏差和比例偏差分别由回归方程(Y＝a＋b X)的截距(a)和斜率(b)导出;用C o h nk a p p a系数评估两种方法在２５(O H)D状态分类中的一致性(κ＜０．４一致性较差;κ＝０．４~０．７一致性一般;κ＞０．７５一致性显著);２５(O H)D水平值以摩尔单位(n m o l/L)表示,换算公式为１n g/m L＝２．５n m o l/L.结㊀㊀果㊀㊀１㊀两种方法２５(O H)D测定结果㊀㊀用E C L I A和L CＧM S/M S分别检测２６３例血清样本中的２５(O H)D水平,测定结果见表２,检测的２６３例临床样本中,E C L I A检测２５(O H)D水平分布为９．０３~１４７．６５n m o l/L,L CＧM S/M S检测２５(O H)D水平分布为９．６３７~１１１．４０５n m o l/L,E C L I A和L CＧM S/M S 两种方法对２５(O H)D水平测定的结果平均值分别为４１．９６ʃ１９．１８n m o l/L和４１．６７ʃ１５．５３n m o l/L.１０８１标记免疫分析与临床㊀２０２１年１０月第２８卷第１０期㊀㊀２㊀相关性和一致性分析㊀㊀使用B l a n dＧA l t m a n一致性分析比较两种方法的２５(O H)D测定结果.图１为B l a n dＧA l t m a n偏倚曲线图,有１０个点(３．８％)落在L o A以及其９５％C I之外,其他点均随机分布在平均差水平线的上下及L o A内.两种方法测量的平均差百分比的算术平均值为－０．９２４８,９５％C I为－１．８２７２~２．４１４６,包含０,结合P＝０．６６２８,按α＝０．０５水准,认为两种方法的测量值的差异无统计学意义.B l a n dＧA l t m a n回归方程Y＝－１３．４４０４＋０．２９９３X,方程总体的截距和斜率的９５％C I分别为－２５．６５４２~－１．２２６７和０．２４５３~０．５７４１),均不包含０,P值均小于０．０５,按α＝０．０５水准,截距和斜率与０的差异具有统计学意义,表明两种方法的测量结果存在比例差异,见表１.注:蓝色实线表示成对测量之间的相对平均差;棕色虚线表示一致性的上限和下限(ʃ１．９６s)图１㊀B l a n dＧA l t m a n偏倚曲线图表２㊀通过B l a n dＧA l t m a n图对两种方法检测维生素D㊀㊀水平的相关分析B l a n dＧA l t m a n图参数参数值采样尺寸２６３算术平均值－０．９２４８(９５％C I:－５．０９６０~３．２４６３)P(H０:平均值＝０)０．６６２８下限－６８．２５８８(９５％C I:－７５．３９６４~－６１．１２１２)上限６６．４０９１(９５％C I:５９．２７１５~７３．５４６８)回归方程Y＝－１３．４４０４＋０．２９９３X截距－１３．４４０４(９５％C I:－２５．６５４２~－１．２２６７)P＝０．０３１２斜率０．２９９３(９５％C I:０．２４５３~０．５７４１)P＝０．０３２９重复性系数３４．１７６５(９５％C I:３１．４８８７~３７．３６９９)㊀㊀３㊀２５(O H)D２对两种检测方法的影响㊀㊀应用L CＧM S/M S检测２６３份血清患者样本,有１８８例样本检测出２５(O H)D２.其中６２．４％(１６４/２６３)的样本含有可量化水平的２５(O H)D２,L CＧM S/M S检测２５(O H)D２定量限为１．２５n m o l/L,测得达到定量限的２５(O H)D２水平为１．３４~４１．２０n m o l/L,占２５(O H)D总量的３％~７５％.图２为随机一例样本L CＧM S/M S检测２５(OH)D２和２５(O H)D３的质谱峰图,３．５２s处的峰面积为２５(O H)D３的检测值,３．６３s处的峰面积为２５(O H)D２的检测值,可以将两种测量值区分检测.用M e d c a l c分析软件计算两种方法测定２５(O H)D结果之间的相关系数,并用两个分类变量一致性的K a p p a系数计算两种方法一致性,２６３份样本检测２５(O H)D３和２５(O H)D２总和时相关性为０．５１(９５％C I:０．４１~０．５９),一致性为０．３９(９５％C I:０．２９~０．４８),当把所有含有２５(O H)D２的样本去除时,两种方法检测果的相关性为０．８５(９５％C I:０．７７~０．９０),一致性为０．６５(９５％C I:０．５１~０．８０),均有所升高.结果表明,２５(O H)D２是２５(OH)D的检测中的一个重要因素,E C L I A不能检测２５(O H)D２,将显著影响２５(O H)D的检测质量.２０８１L a b e l e d I mm u n o a s s a y s&C l i n M e d,O c t．２０２１,V o l．２８,N o．１０图２㊀L C ＧM S /M S 检测２５(OH )D ２和２５(OH )D ３的质谱峰图讨㊀㊀论㊀㊀本研究旨在分析和比较电化学发光法(E C L I A )和液相色谱Ｇ串联质谱(L C ＧM S /M S )法检测２５Ｇ羟基维生素D [２５(O H )D ]的临床性能.这些检测性能的差异转化为患者２５(O H )D 状态分类的显著差异.与L C ＧM S /M S 方法相比,E C L I A 法无法检测２５(O H )D ２,这对临床决策有明显影响.㊀㊀本研究两种方法检测结果之间的相关性很低,具有差异性,引起差异的原因可能有以下几点.首先,E C L I A 和L C ＧM S /M S 都可能存在校准器中的基质和临床样本之间发生的基质效应,从而检测出相对于真实水平有差异的２５(O H )D 测量结果[１６].其次,E C L I A法试剂说明书标注其试剂无法避免２５(O H )D ３的C ３异构体的影响,达到了９１％的高度交叉反应,同时,E C L I A 试剂通常检测范围较L C ＧM S /M S 窄,L C ＧM S /M S 的２５(O H )D ２和２５(O H )D ３的检出限为０．１５n g /m L ,定量限为０．５n g /m L ,因此E C L I A 对于一些低水平的２５(O H )D 无法准确检出.此外,临床受试者之间２５(O H )D 结合蛋白水平的差异也是E C L I A 和L C ＧM S /M S 方法之间存在差异的可能原因[１７].㊀㊀目前,国内外临床常用的检测２５(O H )D 的方法有高效液相色谱法㊁高效液相色谱串联质谱法㊁放射免疫法㊁酶联免疫法㊁电化学发光免疫法㊁全自动生化法等[１８],相比于其他方法,L C ＧM S /M S 能够同时测定２５(O H )D ２和２５(O H )D ３,这有助于监测２５(O H )D ２补充剂的疗效,特别是在使用２５(O H )D ２作为补充剂的国家[１９Ｇ２０].L C ＧM S /M S 方法具有更高的特异性和灵敏度,能更全面的反映体内２５(O H )D 状况.随着L C ＧM S /M S 在越来越多的临床实验室中实施应用,L C ＧM S /M S 已经成为世界各地的许多实验室都选择的２５(O H )D 常规定量方法.L C ＧM S /M S 是目前应用最广泛的２５(O H )D 的定量方法之一[２１],L C ＧM S /M S 也被视为２５(O H )D 定量的金标准.㊀㊀实验结果表明,我国有相当一部分人群体内存在２５(O H )D ２.鉴于２５(O H )D ２的存在对E C L I A 检测人体内２５(O H )D 准确性具有一定影响,建议采用L C ＧM S /M S 开展对２５(O H )D 的检测,尤其是针对２５(O H )D ２有补充需求的人群.另外,在用不同的方法对２５(O H )D 进行检测时,使用统一的检测分界值可能是一个问题,因此还需要进一步的研究来确定不同检测方法的决定限度,并对现有的２５(O H )D 测定方法进行标准化,总而言之,２５(O H )D 的测定对临床实验室来说仍然是具有挑战性的.参考文献[１]D U S S O AS ,B R O W N AJ ,S L A T O P O L S K Y E ．V i t a m i nD [J ]．A mJ P h y s i o l R e n a l P h ys i o l ,２００５,２８９(１):F ８ＧF ２８．[２]HO L I C K M F ．V i t a m i n D d e f i f i c i e n c y [J ]．N e w E n g lJ M e d ,２００７,３５７:２６６Ｇ２８１．[３]HO L I C K M F ,B I N K L E Y N C ,B I S C H O F F ＧF E R R A R IH A ,e ta l ．E n d o c r i n e S o c i e t y ２０１１E v a l u a t i o n ,T r e a t m e n t ,a n d p r e v e n t i o nof v i t a m i nDd e f i c i e n c y :a ne n d o c r i n e s o c i e t y c l i n i c a l pr a c t i c e g u i d e l i n e [J ]．JC l i n E n d o c r i n o l M e t a b ,２０１１,９６(７):１９１１Ｇ１９３０．[４]C UMHU RC M ,C U R E E ,Y U C E S ,e ta l ．M e a n p l a t e l e tv o l u m e a n dv i t a m i nDl e v e l [J ]．A n n L a b M e d ,２０１４,３４(２):９８Ｇ１０３．[５]李光．免疫化学发光法㊁酶联免疫吸附法测定２５羟维生素D 在骨质疏松诊断中的应用[J ]．实用老年医学,２０１６,３０(１０):８６５Ｇ８６６．[６]MO R R I SH A．V i t a m i n D a c t i v i t i e sf o rh e a l t ho u t c o m e s [J ]．A n nL a b M e d ,２０１４,３４(３):１８１Ｇ１８６．[７]S O U B E R B I E L L EJC ,B O D YJ J ,L A P P EJM ,e t a l ．V i t a m i nDa n d m u s c u l o s k e l e t a lh e a l t h ,c a r d i o v a s c u l a rd i s e a s e ,a u t o i m m u n i t y a n d c a n c e r :r e c o m m e n d a t i o n s f o rc l i n i c a l p r a c t i c e [J ]．A u t o i m m u n R e v ,２０１０,９:７０９Ｇ７１５．[８]P I T T A S AG ,S U N Q ,M A N S O NJE ,e t a l ．P l a s m a ２５Ｇh y d r o x yv i t a m i nD c o n c e n t r a t i o na n dr i s k o fi n c i d e n tt y p e ２d i a b e t e si n w o m e n [J ]．D i a b e t e sC a r e ,２０１０,３３:２０２１２０２３．[９]HO L I C K M F ．T h e v i t a m i nDd e f i c i e n c y p a n d e m i c :A p pr o a c h e s f o r d i a g n o s i s ,t r e a t m e n t a n d p r e v e n t i o n [J ]．R e vE n d o c rM e t a b D i s o r d ,２０１７,１８(２):１５３Ｇ１６５．３０８１标记免疫分析与临床㊀２０２１年１０月第２８卷第１０期[１０]S A HO T A O．U n d e r s t a n d i n g v i t a m i n D d e f i c i e n c y[J]．A g eA g e i n g,２０１４,４３(５):５８９Ｇ５９１．[１１]C H A R O E N N G A M N,S H I R V A N IA,H O L I C K M F．V i t a m i nD f o r s k e l e t a l a n dn o nＧs k e l e t a lh e a l t h:W h a tw es h o u l dk n o w[J]．JC l i nO r t h o p T r a u m a,２０１９,１０(６):１０８２Ｇ１０９３．[１２]D AW S O NＧHU G H E SB,H E A N E YRP,H O L I C K M F,e t a l．E s t i m a t e so fo p t i m a lv i t a m i n D s t a t u s[J]．O s t e o p o r o sI n t,２００５,１６(７):７１３Ｇ７１６．[１３]H O L I C K M F．V i t a m i n D:t h e u n d e r a p p r e c i a t e d DＧl i g h t f u l h o r m o n e t h a t i s i m p o r t a n t f o rs k e l e t a l a n dc e l l u l a rh e a l t h[J]．C u r rO p i nE n d o c r i n o lD i a b e t e s,２００２,９:８７Ｇ９８．[１４]S P I R O A,B U T T R I S S J L．V i t a m i nD:A n o v e r v i e wo f v i t a m i n Ds t a t u sa n di n t a k ei n E u r o p e[J]．N u t rB u l l,２０１４,３９(４):３２２Ｇ３５０．[１５]S N I J D E R M B,v a nS C H O O R N M,P L U I J M S M F,e ta l．V i t a m i nDs t a t u s i n r e l a t i o n t o o n eＧy e a r r i s k o f r e c u r r e n t f a l l i n g i no l d e rm e n a n dw o m e n[J]．JC l i nE n d o c r i n o lM e t a b,２００６,９１:９８０Ｇ９８５．[１６]WA L L A C E A M,G I B S O N S,d e l a HU N T Y A,e t a l．M e a s u r e m e n to f２５Ｇh y d r o x y v i t m a i n Di nt h ec l i n i c a l l a b o r a t o r y: c u r r e n t p r o c e d u r e s,p e r f o r m a n c e c h a r a c t e r i s t i c s a n d l i m i t a t i o n s[J]．S t e r o i d s,２０１０,７５:４７７Ｇ４８８．[１７]H E I J B O E RAC,B L A N K E N S T E I N M A,K E M A IP,e ta l．A c c u r a c y o f６r o u t i n e２５Ｇh y d r o x y v i t a m i n D a s s a y s:I n f l u e n c eo f v i t a m i nDb i n d i n gp r o t e i nc o n c e n t r a t i o n[J]．C l i nC h e m,２０１２,５８(３):５４３Ｇ５４８．[１８]程雅婷．人血清中２５羟基维生素D测定的两种质谱方法比较[J]．中华临床医师杂志(电子版),２０１３,７(１４):６５３５Ｇ６５３７．[１９]S A E N G E R A K,L A H A T J,B R E MN E R D E,e t a l．Q u a n t i f i c a t i o no fs e r u m２５Ｇh d y r o x y v i t a m i n D(２)a n d D(３) u s i n g H P L CＧt a n d e m m a s ss p e c t r o m e t r y a n d e x a m i n a t i o n o f r e f e r e n c e i n t e r v a l s f o r d i a g n o s i s o f v i t a m i nDd e f i c i e n c y[J]．A m JC l i nP a t h o l,２００６,１２５(６):９１４Ｇ９２０．[２０]E Y L E SD,A N D E R S O NC,K OP,e t a l．As e n s i t i v eL C/M S/ M Sa s s a y o f２５O H v i t a m i nD３a n d２５O H v i t a m i nD２i nd r i e d b l o o d s p o t s[J]．C l i nC h i m A c t a,２００９,４０３:１４５Ｇ１５１．[２１]Z OËMA U N S E L L,D E N N I S J WR I G H T,S A N D R A J R A I N B OW．R o u t i n ei s o t o p eＧd i l u t i o n l i q u i d c h r o m a t o g r a p h yＧt a n d e m m a s s s p e c t r o m e t r y a s s a y f o r s i m u l t a n e o u sm e a s u r e m e n t o f t h e２５Ｇh y d r o x y m e t a b o l i t e s o f v i t a m i n sD２a n dD３[J]．C l i nC h e m,２００５,５１(９):１６８３Ｇ１６９０．(上接第１７５８页)[５]中华医学会肝病学分会．慢性乙型肝炎防治指南(２０１５更新版)[J]．中华肝脏病杂志,２０１５,２３(１２):８８８Ｇ９０５．[６]Z I T T E R MA N NS I,C A P U R R O MI,S H IW,e t a l．,S o l u b l eg l y p i c a n３i n h i b i t st h e g r o w t ho fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m ai nv i t r o a n d i nv i v o[J]．I n t JC a n c e r,２０１０,１２６(６):１２９１Ｇ１３０１．[７]Y UJ,MA Q,Z HA N GB,e t a l．C l i n i c a l a p p l i c a t i o no f s p e c i f i c a n t i b o d y a g a i n s t g l y p i c a nＧ３f o r h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m ad i a g n o s i s[J]．S c i C h i n aL i f eS c i,２０１３．５６(３):２３４Ｇ２３９．[８]K L A D N E Y RD,B U L L A G A,G U OL,e t a l．G P７３,an o v e lG o l g iＧl o c a l i z e d p r o t e i nu p r e g u l a t e db y v i r a l i n f e c t i o n[J]．G e n e,２０００,２４９(１Ｇ２):５３Ｇ６５．[９]T A H O N A M,E LＧG H A N A M M Z,Z A K YS,e t a l．S i g n i f i c a n c e o f g l y p i c a nＧ３i n e a r l y d e t e c t i o n o f h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m ai n c i r r h o t i c p a t i e n t s[J]．JG a s t r o i n t e s tC a n c e r,２０１９,５０(３):４３４Ｇ４４１．[１０]田江川．血清异常凝血酶原㊁磷脂酰肌醇蛋白聚糖Ｇ３㊁甲胎蛋白联合检测对H B V相关H C C的诊断价值分析[J]．实用医院临床杂志,２０１９,１６(２):１４３Ｇ１４６．[１１]E LＧS A A D A N Y S,E LＧD E M E R D A S H T,H E L MY A,e ta l．D i a g n o s t i cv a l u e o f g l y p i c a nＧ３f o r h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a s[J]．A s i a nP a c JC a n c e rP r e v,２０１８,１９(３):８１１Ｇ８１７．[１２]S U NB,HU A N GZ,WA N GB,e t a l．S i g n i f i c a n c e o f g l y p i c a nＧ３(G P C３)e x p r e s s i o n i nh e p a t o c e l l u l a r c a n c e rd i a g n o s i s[J]．M e dS c iM o n i t,２０１７,２３:８５０Ｇ８５５．[１３]范公忍,熊锦华,蔺会云,等．血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖３在肝细胞癌中的表达及其与临床病理因素的相关性[J]．肿瘤研究与临床,２０１３,２５(１０):６８５Ｇ６８８,６９２．[１４]白晶,张立军,展玉涛,等．化学发光酶免疫法检测血清G P７３的临床应用[J]．首都医科大学学报,２０１７,３８(４):５６６Ｇ５７１．[１５]黄风玲,杨颖,张瑞丽,等．肝细胞癌组织中高尔基体蛋白７３和转化生长因子β１及S m a d２的表达水平及其意义[J]．中国全科医学,２０１６,１９(２６):３１９１Ｇ３１９５．[１６]X U ER,F E N G J,M E N G Q,e t a l．T h e s i g n i f i c a n c e o fg l y p i c a nＧ３e x p r e s s i o n p r o f i l i n g i n t h e t u m o r c e l l u l a r o r i g i n t h e o r e t i c a l s y s t e mf o r h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a p r o g r e s s i o n[J]．JG a s t r o e n t e r o lH e p a t o l．２０１７,３２(８):１５０３Ｇ１５１１．[１７]H A R U Y AMA Y U K I H I R O,Y O R I T A K E N J I,Y AMA G U C H I T E T S U J I,e ta l．H i g h p r e o p e r a t i v e l e v e l so fs e r u m g l y p i c a nＧ３c o n t a i n i n g NＧt e r m i n a l s u b u n i t a r e a s s o c i a t e d w i t h p o o rp r o g n o s i s i n p a t i e n t sw i t hh e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a a f t e r p a r t i a lh e p a t e c t o m y[J]．I n t JC a n c e r,２０１５,１３７(７):１６４３Ｇ１６５１．[１８]A HM E DO M A RK A S E B,M A N A L H A S S A N,S A H I N L A C I N, e t a l．E v a l u a t i n g c l i n i c a l a n d p r o g n o s t i c i m p l i c a t i o n s o f G l y p i c a nＧ３i nh e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a[J]．O n c o t a r g e t,２０１６,４３(７):６９９１６Ｇ６９９２６．[１９]陈继军,杨宏勋,李超,等．A F P和D C P在肝癌患者预后评价中的作用[J]．国际外科学杂志,２０１３,４０(４):２３３Ｇ２３７．４０８１L a b e l e d I mm u n o a s s a y s&C l i n M e d,O c t．２０２１,V o l．２８,N o．１０。
高效液相色谱法同时检测人血清中3种抗癫痫药的浓度
高效液相色谱法同时检测人血清中3种抗癫痫药的浓度方焱;孙言才;屈建【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2003(007)004【摘要】目的建立一种同时测定人血清中苯巴比妥(PB)、苯妥英(PT)和卡马西平(CBZ)3种抗癫痫药物的高效液相色谱(HPLC)定量方法.方法采用C18色谱柱;流动相为甲醇-水(55:45);内标物为巴比妥(BB);检测波长为220 nm;流速为1.0ml@min;柱温为30℃.结果PB在1.0～80 mg@L-1范围内呈线性(r=0.999 9,n=5),PT在1.0～50 mg@L-1范围内呈线性(r=0.999 6,n=5),CBZ在0.5～20 mg@L-1范围内呈线性(r=0.999 5,n=5);其最低检测浓度分别为0.25、0.25及0.1 mg@L;平均回收率分别为95.75%、96.54%和92.13%;日内RSD(%)小于6.29%,日间RSD(%)小于6.64%(n=5).结论本法简便、快速、灵敏,适用于癫痫病人血药浓度监测及药代动力学研究.【总页数】2页(P289-290)【作者】方焱;孙言才;屈建【作者单位】安徽省立医院药剂科临床药学研究室,合肥,230001;安徽省立医院药剂科临床药学研究室,合肥,230001;安徽省立医院药剂科临床药学研究室,合肥,230001【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.反相高效液相色谱法同时测定三种常用抗癫痫药血清浓度 [J], 杜青云;陈锦珊;黄惠丽2.RP-HPLC法同时测定人血清中4种抗癫痫药的浓度 [J], 胡伟;马爱玲;刘宣彤;刘如品;王可3.高效液相色谱法与荧光偏振免疫法测定3种抗癫痫药血清浓度的相关性比较 [J], 路伟;王大果;蒋大义;曾繁涛4.反相高效液相色谱法同时测定茶碱和3种抗癫痫药血药浓度 [J], 谢军平;冯玲玲;杨瑞玲5.高效液相色谱法与荧光偏振免疫法在抗癫痫药血清浓度测定中的相关性比较分析[J], 章佳佳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、苯妥英钠、卡马西平血药浓度
高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、苯妥英钠、卡马西平血药
浓度
祝文兵;阳利龙;何周康
【期刊名称】《儿科药学杂志》
【年(卷),期】2015(21)6
【摘要】目的：建立高效液相色谱（HPLC）法同时测定癫痫患儿血浆中苯巴比妥（PB）、苯妥荚钠（PH）、卡马西平（CBZ）三种药物浓度。
方法：采用HypersllODS2（150mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相甲醇一水（54：46），流速0．9mlMmin，检测波长240nm，柱温25qc，进样量10μL。
结果：PB、PH、CBZ的线性范围分别为1．04～104．24μg/L、0．91—67．99μg／mL、0．37—37．00μg／mL，提取回收率分别为91．50％、89．20％、95．80％。
结论：本研究所建立的方法操作简便、结果准确、重现性好，适用于
同时测定PB、PH、CBZ三种药物的血药浓度。
【总页数】3页(P38-40)
【关键词】高效液相色谱法;苯巴比妥;苯妥英钠;卡马西平;血药浓度
【作者】祝文兵;阳利龙;何周康
【作者单位】湖南省儿童医院
【正文语种】中文
【中图分类】R969.3
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、苯妥英钠、卡马西平的血药浓度 [J], 荣荣;邹广杰;张启丽;邹良宏;李明泉;张美燕;于治国
2.高效液相色谱法测定血清中卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥血药浓度 [J], 叶可人
3.高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、卡马西平及苯妥英钠的血药浓度 [J], 李朋梅;张相林;唐崑;商永光
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化学发光免疫分析法和液相色谱-串联质谱法检测儿童血清25-羟基维生素D的一致性研究
化学发光免疫分析法和液相色谱-串联质谱法检测儿童血清25-羟基维生素D的一致性研究马少杰;毕颖薇;胡文娟;时琰丽;韩颖;王红【期刊名称】《临床和实验医学杂志》【年(卷),期】2024(23)1【摘要】目的比较化学发光免疫分析法(化学发光法)和液相色谱-串联质谱法(液相质谱法)检测儿童血清25-羟基维生素D[25(OH)D]的一致性。
方法前瞻性选取2016年9月至2017年9月于民航总医院儿科健康体检的155名1~14岁儿童为研究对象。
留取血清,化学发光法直接测定25(OH)D含量,液相质谱法分别测定25(OH)D2含量和25(OH)D3含量,再求和得到25(OH)D含量。
应用Passing-Bablock回归、组内相关系数(ICC)、Bland-Altman分析比较检测结果,用加权Kappa评价两种方法诊断维生素D营养状态的一致性。
结果液相质谱法检测血清25(OH)D含量平均为(29.34±6.93)ng/mL,高于化学发光法[(27.74±8.06)ng/mL],差异有统计学意义(P<0.05)。
组内相关系数ICC为0.913,两个检测方法具有一致性。
Bland-Altman分析显示两种检测方法的差值平均为1.6 ng/mL,95%CI:-6.2~9.4。
化学发光法和液相质谱法呈线性相关,R 2=0.760,P<0.010,回归方程为Y=1.285X-9.813。
化学发光法与液相质谱法的Passing-Bablock回归方程斜率为1.285(95%CI:1.177~1.406),截距为-9.813(95%CI:-13.256~6.623)。
化学发光法判断维生素D营养水平与液相质谱法总体符合率为92.90%(144/155),加权Kappa=0.412,两者检测方法不一致可接受。
结论化学发光法和液相质谱法评估健康儿童25(OH)D的相关性和一致性可接受。
在评价和监测儿童维生素D营养状况时,应充分考虑不同方法学间各自存在的差异,兼顾准确性和可行性。
高效液相色谱法测定人血浆中左乙拉西坦的药物浓度
高效液相色谱法测定人血浆中左乙拉西坦的药物浓度蔡 乐，朱 英，张明华，陈静静，柴 栋（解放军总医院药学部，北京 100853）[摘要] 目的：建立人血浆中左乙拉西坦（LEV）的高效液相色谱测定方法。
方法：以甲硝唑为内标，血浆样品经乙腈沉淀蛋白，二氯甲烷提取去杂质，取水相进样分析。
采用Hypersil BDS色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 µm），流动相为水-乙腈（87 : 13，v/v），流速1.0 mL·min-1，检测波长205 nm，柱温40 ℃，进样量20 µL。
结果：LEV在2.5 ～ 80.0 µg·mL-1范围内线性关系良好（r = 0.999 4），批内变异（RSD）在1.06% ～ 1.97%之间，批间变异（RSD）在3.46% ～ 8.14%之间，方法学回收率为94.00% ～102.48%。
结论：本方法灵敏度高，操作简便易行，可用于临床LEV血药浓度的监测。
[关键词] 左乙拉西坦；甲硝唑；高效液相色谱法；血浆；治疗药物监测[中图分类号] R917 [文献标识码] A [文章编号] 1672 – 8157(2018)03 – 0145 – 03 Concentration determination of levetiracetam in human plasma by HPLCCAI Le, ZHU Ying, ZHANG Ming-hua, CHEN Jing-jing, CHAI Dong(Pharmaceutical Department of PLA General Hospital, Beijing 100853, China)[ABSTRACT] Objective: To establish a high-performance liquid chromatographic (HPLC) method for the concentration determination of levetiracetam in human plasma. Methods: With metronidazole as the internal standard, acetonitrile was added to plasma sample for precipitating protein. The supernatant was washed with dichloromethane, and the upper aqueous was injected to HPLC. Hypersil BDS column (4.6 mm × 250 mm, 5 µm) was selected. And the mobile phase was a mixture of water and acetonitrile (87 : 13, v/v) at a flow rate of 1.0 mL·min-1. The detection wavelength was 205 nm. Column temperature was 40 ℃ and injection volume was 20 µL. Results: Levetiracetam showed a good linear relation in the range of 2.5 – 80.0 µg·mL-1 with a good correlation coefficient (r = 0.999 4). The intra-batch variations were ranged from 1.06% to 1.97% and inter-batch variations were ranged from 3.46% to 8.14%. The mean recoveries were ranged from 94.00% to 102.48%. Conclusion: The method was sensitive, specific and simple. It is suitable for monitoring the concentration of levetiracetam in human plasma.[KEY WORDS] Levetiracetam; Metronidazole; HPLC; Plasma; Therapeutic drug monitoring左乙拉西坦（levetiracetam，LEV）是一种吡咯烷酮衍生物，其化学结构与其他抗癫痫药物无相关性。
不同他克莫司血药浓度检测方法的对比分析
·论著·不同他克莫司血药浓度检测方法的对比分析郭奉洁1，马锡慧2，李彬钰2，孙玉洁2（1.解放军总医院第八医学中心卫勤部，北京100091；2.解放军总医院第八医学中心原移植研究室，北京100091）【摘要】目的分析化学发光微粒子免疫法和胶乳增强免疫抑制法检测他克莫司（Tacrolimus，Tac）全血药物浓度的结果。
方法用化学发光微粒子免疫法和胶乳增强免疫抑制法平行检测96例肾移植受者他克莫司全血药物浓度，对比检测结果差异性并进行相关和回归分析。
结果采用化学发光微粒子免疫法测得的Tac血药浓度（5.78±2.18）μg/L低于采用胶乳增强免疫抑制法测得的Tac血药浓度（6.51±2.32）μg/L，且差异具有统计学意义（P＜0.001）；两种方法检测Tac血药浓度结果呈显著正相关（r＝0.9676，P＜0.0001）；两种方法检测Tac血药浓度结果符合一元线性回归方程Y＝0.551+1.032X （其中X为化学放光微粒子免疫法，Y为胶乳增强免疫抑制法）。
结论两种方法检测Tac血药浓度具有很好的相关性，但差异显著，不可相互比较，二者可通过一元线性回归方程来互相推算，建议同一患者长期选用同一种方法监测Tac血药浓度，以便为临床提供准确可靠的个体化用药依据。
【关键词】化学发光微粒子免疫法；胶乳增强免疫抑制法；他克莫司；肾移植Comparative analysis of different methods of tacrolimus blood concentration detectionGuo Fengjie1, Ma Xihui2, Li Binyu 2, Sun Yujie 2. 1. Basic Research Laboratory, the eighth medical center of PLA generalhospital，Beijing 100091, China；2. Beijing Key Laboratory of Immunology Regulatory and Organ Transplantation，Beijing100091，China.Corresponding author：Ma Xihui，Email：****************【Abstract】Objective To analyze the results of the determination of Tacrolimus（Tac） concentration in wholeblood by chemiluminescent microparticle immunoassay and latex enhanced immunosuppression. Methods Thewhole blood concentration of tacrolimus in 96 renal transplant recipients was parallelly measured by chemiluminescent microparticle immunoassay and latex enhanced immunosuppression, the results of different tests were comparedand the correlation and regression were analyzed. Results The concentration of tacrolimus measured by chemiluminescent microparticle immunoassay （5.78±2.18）μg/L was lower than that measured by latex enhanced immunosuppression（6.51±2.32）μg/L, and the difference was statistically significant（P＜0.001）. There was a significant positive correlation between the two methods（r＝0.9676，P＜0.0001）, besides, the results of the two methods were in accordance with the linear regression equation Y＝0.551+1.032X（X was the chemical radio-particle immunoassay, Y was the latex enhanced immunosuppression）. Conclusion There was a good correlation between the two methods, but due to the significant difference, comparison between each other cannot be made. Thetwo methods can be calculated by linear regression equation. It is suggested that the same method should be selectedfor the same patient to monitor the whole blood concentration of tacrolimus in the long run, so as to provide accurateand reliable basis for clinical individual drug application.【Key words】Chemiluminescent microparticle immunoassay；Latex enhanced immunosuppression；Tacrolimus；Kidney transplantation DOI：10.3969/j.issn.2095-5332.2021.02.007 基金项目：军队医学科技青年培育计划（18QNP035）；国家自然科学基金（81571555） 通讯作者：马锡慧，Email：****************他克莫司（Tacrolimus，Tac）是从筑波链霉菌的培养液中分离获得的一种大环内酯类抗菌药物，因其高效的免疫抑制作用已被广泛应用于各种实质器官的临床移植［1］。
反相高效液相色谱法测定人血清中苯妥英钠浓度
反相高效液相色谱法测定人血清中苯妥英钠浓度 刘红卫;杜文力;杜恩起;王明霞;李海芳;李鹏坤 【期刊名称】《河北医科大学学报》 【年(卷),期】2001(022)006 【摘 要】目的 筛选快速测定人血清中苯妥英钠浓度的反相高效液相色谱方法 .方法 采用高效液相色谱法.柱规格:symmetryC18柱(5μm,3.9×150 mm).流动相组成:甲醇:水(1:1,v/v),流速1.0ml/min.Waters 2487双波长紫外检测器,检测波长210 nm.结果 本法在(1.0～32.0)μm/ml间线性良好,相关系数r=0.9998,高、中、低浓度样品的日间和日内测定相对标准偏差RSD均小于5%,平均回收率为95.23%.结论 本法是HPLC法测定苯妥英钠血药浓度的较好方法 .
【总页数】2页(P340-341) 【作 者】刘红卫;杜文力;杜恩起;王明霞;李海芳;李鹏坤 【作者单位】河北医科大学第四医院药剂科,石家庄,050011;河北医科大学第四医院药剂科,石家庄,050011;河北医科大学第四医院药剂科,石家庄,050011;河北医科大学第四医院药剂科,石家庄,050011;河北医科大学药学院;河北医科大学药学院
【正文语种】中 文 【中图分类】R917 【相关文献】 1.反相高效液相色谱法测定人血清中苯妥英钠的浓度 [J], 张晓景 2.高效液相色谱法同时测定人血清中氨茶碱、苯巴比妥、苯妥英钠及卡马西平的浓度 [J], 周丽娟;边潮 3.RP-HPLC法同时测定人血清和脑脊液中苯巴比妥、苯妥英钠和卡马西平浓度 [J], 许贤瑞;董通;张庆;杨小英;党宏万 4.用高效液相色谱法同时测定人血清中苯妥英钠和卡马西平的浓度 [J], 张若楠;吴永麟 5.反相高效液相色谱法同时测定血浆中苯妥英钠及其主要代谢产物的浓度 [J], 张丹;汪世英
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HPLC同时测定血清中苯妥英、苯巴比妥和卡马西平的浓度
HPLC同时测定血清中苯妥英、苯巴比妥和卡马西平的浓度齐腊梅【期刊名称】《华西药学杂志》【年(卷),期】2001(16)6【摘要】目的 :建立同时测定微量血清中苯妥英、苯巴比妥和卡马西平浓度的方法。
方法 :采用HPLC法 ,以巴比妥为内标同时测定。
KromasilC18不锈钢色谱柱 ,流动相为甲醇水(5 7∶43) ,流速0 .8ml·min 1,检测波长 2 5 4nm。
结果 :检测浓度范围苯妥英为 4.0～5 0 .0 μg·ml 1(r=0 .9995 ) ,苯巴比妥 5 .0～6 0 .0 μg·ml 1(r=0 .9996 ) ,卡马西平为2 .5～2 0 .0 μg·ml 1(r =0 .9992 )。
最低检测限分别为1.0 μg·ml 1、2 .0 μg·ml 1和0 .5 μg·ml 1;平均回收率分别为99.2 2 %、99.6 8%和 98.6 2 % ;日内和日间RSD均低于 5 % (n =5 )。
结论 :该法准确、灵敏度高 ,重复性好 ,可作为【总页数】2页(P455-456)【关键词】苯妥英;妥巴比妥;卡马西平;高效液相色谱法;血药浓度;抗癫痫药【作者】齐腊梅【作者单位】安徽省安庆市立医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R971.6;R927.2【相关文献】1.HPLC法同时测定血清中苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的浓度 [J], 陈秋虹;何林;曾明辉;汪震2.HPLC法同时测定人血清中苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的浓度 [J], 涂厉标;祝永明3.HPLC法同时测定血清中苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的浓度 [J], 曾明辉;吴正中;陈秋虹;童荣生4.RP-HPLC法测定血清中苯巴比妥、苯妥英与卡马西平的浓度及临床应用 [J], 梁建成;黄义昆;张三平;骆泽宇;韦敏;覃文安5.RP-HPLC同时测定人血清中苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的浓度 [J], 汤文璐;王永铭;伍章保;屈建因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定血浆中环磷酰胺浓度
高效液相色谱法测定血浆中环磷酰胺浓度目的：建立血浆中环磷酰胺浓度的高效液相色谱测定法。
方法：样品经甲醇沉淀蛋白，离心后取上清液直接进样。
色谱柱：Shim-pack CLC-ODS柱(150 mm ×6 mm，5 μm)；流动相：甲醇－水（1∶1 v/v)；流速：1.0 ml/min；检测波长：325 nm。
异环磷酰胺为内标。
结果：环磷酰胺最低检出量为5 mg/L，平均回收率为96.4%±2.31%。
结论：本方法简易、快捷、准确，适用于临床血药监测。
标签：高效液相色谱法；血浆；环磷酰胺浓度环磷酰胺(CTX) 是氮芥类烷化剂，为常用化疗药物，广泛用于各种肿瘤的治疗。
环磷酞胺经肝脏微粒体氧化酶系代谢为有抗癌活性的代谢产物而发挥作用。
化疗药物一般毒性较大，治疗指数较窄，需要通过药物监测来设计个体化给药方案，从而保证患者的用药安全。
以往的报道，HPLC测定法大多采用乙睛-水为流动相[1]，本实验采用甲醇－水为流动相，运用高效液相色谱法测定血浆中CTX的浓度，快捷、准确，适用于临床血药浓度监测。
1 材料与方法1.1 材料高效液相色谱仪：Waters公司510型泵，991型紫外二极管阵列检测器，U6K 进样阀。
环磷酞胺标准品(中国药品生物制品检定所) ，异环磷酰胺(Ifo) 对照品CP级，其他试剂AR级。
1.2 方法1.2.1 色谱条件色谱柱：Shim-pack CLC-ODS柱(150 mm×6 mm，5 μm)；流动相：甲醇－水（1∶1 v/v)；流速：1.0 ml/min；检测波长：325 nm。
1.2.2 标准液制备CTX标准液：精密称取CTX标准品50 mg，于100 ml量瓶中，蒸馏水溶解定容，浓度为500 μg/ml。
Ifo对照液：精密称取Ifo对照品5 mg 于100 ml量瓶中，蒸馏水溶解定容，浓度为50 μg/ml。
1.2.3 样品处理我院2006年11月~2007年1月期间收住院用药患者，静脉注射CTX 800 ml后1 h，取上肢静脉血2 ml离心，取血浆0.5 ml，加入甲醇溶液3 ml，振荡，离心4 000 r/min，15 min取上清液20 μl直接进样。
人类免疫缺陷病毒检测试剂临床研究注册技术审查指导原则
附件3人类免疫缺陷病毒检测试剂临床研究注册技术审查指导原则一、前言人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）检测试剂是指运用免疫学及分子生物学等方法原理对人血清、血浆或其他体液中的特定的HIV生物学标记物，涉及HIV 1型（HIV-1 ）p24抗原、HIV抗体、HIV核酸、HIV基因耐药突变等进行定量或定性分析的试剂。
据《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》（国食药监械〔2023〕229号）的分类原则，该类产品作为第三类体外诊断试剂（In Vitro Diagnostic,IVD）管理，属高风险管理产品。
本指导原则制定的重要目的是让申请人明确在注册申报过程中对本类试剂在临床研究方面重点关注内容，同时规范注册申请人对于注册申报资料中有关临床研究资料的规定。
本指导原则是对HIV检测试剂临床研究的一般性规定，申请人应依据具体产品的特性对临床研究资料的内容进行充实和细化。
申请人还应依据具体产品的特性拟定其中的具体内容是否合用，若不合用，需具体阐述其理由及相应的科学依据。
本指导原则只是针对HIV检测试剂的特点，强调需重点考虑的问题，临床实验的基本规定应符合《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》（国食药监械〔2023〕240号）的规定，涉及临床实验协议、方案、报告的撰写等。
本指导原则不涉及行政审批规定，不作为法规强制执行。
本指导原则是申请人和技术审评人员的指导文献，假如有可以满足适合的法规规定的其他方法，也可以采用，但是需要提供具体的研究资料和验证资料。
应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定，随着法规和标准的不断完善、科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将进行适时的调整。
二、合用范围HIV生物学标记物是指机体在感染HIV后，在不同的感染阶段出现的生物学标记物，涉及：HIV抗体、HIV-1p24抗原、HIV核酸、HIV 基因耐药突变等。
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高效液相色谱法与化学发光微粒子免疫检测法测定血浆苯妥英
浓度的一致性评价
鲁静;陈岩;郭美华;钱钊;曲婷;段丽娟;海鑫
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2017(36)2
【摘 要】Objective To establish a high performance liquid chromatography
(HPLC) method for determining phenytoin concentration in epilepsy
patients' plasma,and compare this method with chemiluminescence
microparticle immunoassay (CMIA),and to evaluate the consistency of the
two methods.Methods HPLC and CMIA methods were applied to
determine the plasma concentration of phenytoin in 60 epileptic
patients,respectively.The difference of results was analyzed by two-side
paired t-test,and then the correlation and consistency of the two methods
were investigated with Passing-Bablok regression and Bland-Altman
method.Results There was no significant difference between the results of
the two methods (P ＞0.05).The regression equation of the determination
results by HPLC (Y) and CMIA (X) was Y=0.992 9X +0.143 7 (R2 =0.992 6,n
=60),which indicated the correlation of the two methods was good.Bland-
Altman analysis showed that the consistency of the two methods for
determining was good.Conclusion HPLC and CMIA method in monitoring
plasma concentration of phenytoin have good correlation and
consistency.Both methods can be used for therapeutic drug monitoring of
phenytoin.%目的 建立高效液相色谱(HPLC)法和化学发光微粒子免疫检测(CMIA)
法测定癫(痫)患者血浆苯妥英浓度,评价2种测定方法的一致性.方法 分别用HPLC
法和CMIA法测定60例癫(痫)患者血浆中苯妥英的浓度,并对2种方法测定结果进
行统计分析.对测定值采用双侧配对t检验比较差异,并用Passing-Bablok回归法
和Bland-Altman偏差图法分析,考察2种方法的相关性及一致性.结果 2种方法测
定结果差异无统计学意义(P＞0.05).2种方法回归方程为Y=0.992 9X+0.143
7(R2=0.992 6,n=60),显示2种方法相关性良好.Bland-Alrman法分析表明2种测
定方法的一致性良好.结论 HPLC法和CMIA法测定癫(痫)患者血浆中苯妥英的浓
度具有较好的相关性与一致性,2种测定方法均可用于苯妥英浓度的测定.
【总页数】5页(P131-135)
【作 者】鲁静;陈岩;郭美华;钱钊;曲婷;段丽娟;海鑫
【作者单位】哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大
学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔
滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学
附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨
150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001
【正文语种】中 文
【中图分类】R971.6;R969.1
【相关文献】
1.RP-HPLC法测定人血浆中苯巴比妥、苯妥英和卡马西平浓度 [J], 詹三华;李顺
炜;毛名扬
2.高效液相色谱法测定血清中苯巴比妥、卡马西平、苯妥英的浓度 [J], 谢陶吟;陈
荣;邹素兰;钱爱而;钱春艳
3.高效液相色谱法测定血浆中苯妥英药物浓度 [J], 罗巧林;刘长碧
4.高效液相色谱法同时测定人血浆中唑尼沙胺、苯妥英、卡马西平及环氧卡马西平
的浓度 [J], 马春来;焦正;施孝金
5.HPLC法与化学发光微粒子免疫法测定癫痫患者血浆中卡马西平浓度的一致性评
价 [J], 白建海;牟红云;郑丹;庞苗菜;丁晓敏;张敏丽;王时力;王毅超
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