分子生物学组实习小结

分子生物学室实习报告

前言

分子诊断学作为一门新兴的学科，在疾病的诊断、疗效监测等多方面都逐渐扮演起了重要的角色，但真正能很好的将分子生物学诊断信息运用好的医务工作者还只是少数，不少医生目前仍对传统的检验项目的临床意义和可信度仍然怀有质疑的态度，更不用说一些刚发展起来的检验项目。因此检验专业的实习生不仅要掌握分子诊断学常用检验项目的原理、方法，更应该孰知其临床意义，更好的与临床进行沟通，才能更好的运用先进的检验诊断技术为患者服务。

实习目的：

熟悉分子室常规的检查项目，掌握标本的签收和处理，掌握PCR的原理，核酸（DNA和RNA）的提取，PCR仪的使用，熟悉核酸杂交的原理和操作方法及杂交仪的使用。了解各检测项目的临床意义。

实习内容：

1．HBV DNA检测（定性和定量）、HCV RNA检测（定量）：核酸提取是扩增前最主要的步骤，每个环节都要注意防止交叉污染。主要步骤：每个EP管加100微升DNA浓缩液，再加100微升待测血清，震荡混匀，离心12000rpmx10min，用加样枪弃上清，加30微升DNA提取液，震荡，金属浴（100℃）10min，离心12000 rpmx5min。提取后，配试剂，加样，扩增1h45min，扩增仪型号为7300。分析结果。注意，金属浴过程中，金属浴箱要盖上，每个EP管要盖严，防止加热过程中发生爆管，造成实验室的污染。若发生爆管，详细记录好发生爆管的标本编号，爆管发生的原因，时间等情况。HSV-II型病毒DNA检测（定量）、HPV 病毒（6、11型和16、18型）DNA检测（定量）的标本均为分泌物，标本加生理盐水，震荡，取1ml至EP管，离心12000rpmx5min，弃上清，注意沉淀易漂起，不要讲沉淀弃掉，加50微升DNA提取液，震荡，金属浴（100℃）10min。然后配试剂，加样，扩增1h20min，PCR仪为7600。检验结果需要与患者的病史、临床信息综合分析，绝对不可仅仅只凭PCR结果进行疾病的诊断。

2．核酸杂交主要是指HPV21型检测，标本多为女性的阴道分泌物，首先提取DNA，进行核酸体外扩增，得到扩增产物，然后金属浴煮沸，淬火，得到大量单链的DNA片段，将单链DNA片段加入到500微升杂交液中（之前的DNA 提取及淬火等操作在标本处理间进行，扩增在核酸扩增间进行），并到产物分析间进行核酸的杂交，每台杂交仪可一次做15个标本，应注意防止漏液和交叉污染。

3．其他流式细胞术等，但由于标本量较少，平时多的不多。

实习存在的问题和不足

分子生物学室的实习感觉还是太过短暂，再加之实习人数多，操作的机会少，特别是标本少的项目，基本还是处于见习的状态，而且相比其他组的实习，缺乏主动思考的的动力，也许事理论知识学习不够扎实，也许是跟老师交流太少，在以后的学习和工作中，应加强相关学习，真正掌握好这这一门新兴的学科，为今后的学习、该工作或者科研服务

实习感想：

一个月的实习很快结束了，每天其实都在做着大量的重复工作，但是我并没有因此而感到厌烦，相反我觉得这是一门艺术，因为没有谁能保证2次加样的量是完全一样的，而我们能做的就是是通过不断的练习，规范我们的操作，使每次加样量尽可能的减小误差，会做不代表能做好，真正的快乐就在于，将别人认为枯燥无聊的工作做的完美无瑕。

分子诊断学是一门有力的科研武器，不仅可以运用于临床诊断，在今后的工作中我们也可以运用这一门学科，在学术上进行更深入的探索

在实习结束之际，我要感谢分子生物学室每一位老师，感谢他们耐心、亲切的教导，是他们严谨、一丝不苟的工作态度教育了我，是他们团结协作、融洽的工作气氛感染了我。他们循循善诱给我讲解，他们耐心规范了我的操作，他们给予我很大的信任与鼓励，。而我能做的是在今后的学习和工作中带着一颗感恩的心认真负责地工作，培养高尚的职业道德、严肃的科学态度和一丝不苟的工作作风，使自己成为一名合格的检验专业的的优秀人员。

祝福分子生物学室每一位老师工作顺利、阖家幸福