绿色木霉在肥料中的作用以及使用方法

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真菌的生物学特性[精心整理]

真菌的生物学特性[精心整理]

木霉菌属于半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目,粘孢菌类,是一类普遍存在的真菌。

绿色木霉是木霉菌中具有重要经济意义的一种,目前在工业、农业和环境科学等方面有着广泛的用途。

绿色木霉在自然界分布广泛,常腐生于木材、种子及植物残体上。

绿色木霉能产生多种具有生物活性的酶系,如:纤维素酶、几丁质酶、木聚糖酶等。

绿色木霉是所产纤维素酶活性最高的菌株之一,所产生的纤维素酶的降解作用,目前日益受到重视,国内外对这方面的研究也很多。

同时,绿色木霉又是一种资源丰富的拮抗微生物,在植物病理生物防治中具有重要的作用。

它的作用机制有以下几种:产生抗生素;重寄生作用,这是木霉菌作为拮抗菌最重要的机制;溶菌作用;竞争作用。

纤维单胞菌属拉丁学名[Cellulomonas (Bergey et al.,1923),Clark,1952] 在幼龄培养物中细胞为细长的不规则杆菌,0.5~0.6μm×2.0~5.0μm,直到稍弯,有的呈V字状排列,偶见分支但无丝状体。

老培养物的杆通常变短,有少数球状细胞出现。

革兰氏阳性,但易褪色。

常以一根或少数鞭毛运动。

不生孢,不抗酸。

兼性厌氧,有的菌株在厌氧条件下可生长但很差。

在蛋白胨-酵母膏琼脂上的菌落通常凸起,淡黄色。

化能异养菌,可呼吸代谢也可发酵代谢。

从葡萄糖和其他碳水化合物在好氧和厌氧条件下都产酸。

接触酶阳性。

能分解纤维素。

还原硝酸盐到亚硝酸盐。

最适生长温度30℃。

广泛分布于土壤和腐败的蔬菜。

康宁木霉菌丝有隔膜,蔓延生长,广铺于固体培养基上,菌外观为浅绿,黄绿或绿色,反面无色,分生孢子.梗为菌丝的短侧枝,其上对生或互生分枝,分枝上又可继续分枝,形成2级,3级分枝,分枝末端即为瓶状梗.分生孢子由小梗相继生出面,靠黏液把它们聚成球形或近球形的孢子头,分生孢子卵形成椭圆形,壁光滑.单个孢子近无色,形成堆状为绿色,与此相似的还有绿色木霉!此菌有很强的纤维素霉及纤维,二糖淀粉酶等,它能利于农副产品,如麦杆,木材,木屑等纤维素原料,使之转变为糖质原料佛州侧耳子实体覆瓦状丛生。

木霉的形态特征

木霉的形态特征

木霉的形态特征木霉(Trichoderma)是一类真菌,广泛分布于自然界中,特别是在土壤和腐烂的植物物质中。

它们通常是分解性真菌,对分解有机物和植物残渣起着重要作用。

木霉的形态特征可以根据其生命周期和菌丝体的外观来描述。

以下是木霉的一些主要形态特征:1.菌丝体:木霉的菌丝体是其主要体型。

它通常是多分枝、透明或白色的线状结构,具有分枝分叉的形态。

这些菌丝体可以广泛扩展,覆盖在废弃植物物质或土壤上。

2.生殖器:木霉具有不同类型的生殖器,包括分生子囊(conidiophores)、分生子囊梗(conidiophore stalks)和分生子(conidia)。

分生子囊是从菌丝体上伸出的柄状结构,其顶端形成分生子。

这些分生子通常是单个、椭圆形或纺锤形,具有不同的颜色,通常为绿色、橙色或白色。

3.生长速度:木霉通常生长迅速,可以迅速覆盖其生长基质,特别是在适宜的温度和湿度条件下。

4.色素:分生子通常具有颜色,这有助于区分不同的木霉物种。

例如,Trichoderma harzianum的分生子是绿色的,而Trichoderma koningii的分生子是橙色的。

5.无性生殖:木霉主要通过无性生殖来传播,即通过分生子的形式。

它们会释放分生子,这些分生子可以在适宜的条件下发芽并形成新的菌丝体。

6.抑制其他真菌生长:木霉以其富含抗真菌活性的特性而著名,它们常常用来生物防治,可以抑制其他病原真菌的生长,对植物健康有益。

总的来说,木霉是一类在真菌界中具有重要生态和应用意义的真菌,其形态特征主要包括多分枝的菌丝体、分生子和分生子囊,以及不同颜色的分生子。

木霉对分解有机物、植物保健和生物防治都具有重要作用。

不同的木霉物种可以在形态和生态学特征上有所不同。

绿色木霉代谢物抑菌活性及其稳定性的研究

绿色木霉代谢物抑菌活性及其稳定性的研究

3《食品工业》2011年第5期1.安徽农业大学茶与食品科技学院 (合肥 230036);2.仲恺农业工程学院轻工食品学院 (广州 510225)摘 要 以绿色木霉为原料,研究其代谢物的抑菌活性及稳定性。

试验结果表明:绿色木霉代谢物对芒果炭疽菌的抑制作用最强,抑菌率达到74.18%;对热、光、微波较为稳定;pH6~7时稳定;Cu2+、Fe3+对代谢产物的影响较大:防腐剂、氧化剂、还原剂在一定浓度范围内对其影响不显著。

关键词 绿色木霉;代谢物;抑菌活性;稳定性Study on Antibacterial Activity and Stability of Metabolite ofTrichoderma virideChu Fu-hong1,2,Yu Xin2,*1.College of Tea&Food Science And Technology, Anhui Agricultural University (Hefei 230036)2.College of Light Industry and Food Science, Zhongkai University of Agriculture and Engineering(Guangzhou 510225)Abstract Chose Trichoderma viride as material, study on its antibacterial activity and stability. Resultsshowed that the metabolite has highest antifungal activitiy to Colletotrichum gloeosporioides, up to74.18%; it was stable to light, heat and microwave; be stable when pH 6~7; Cu2+, Fe3+ have large effecton its stability. Preservative, oxidizer and reducing agent have unsignifi cant effect within the scope of theconcentration.Keywords Trichoderma viride;metabolite;antibacterial activity;stability绿色木霉代谢物抑菌活性及其稳定性的研究褚福红1,2,于新2*利用微生物发酵产生抗菌素,因不受季节、地域、气候的影响,易于规模化生产,近年来备受重视。

绿色木霉Tv04—2的筛选及其对人参立枯病菌拮抗机制的研究

绿色木霉Tv04—2的筛选及其对人参立枯病菌拮抗机制的研究

茵丝结合位点伴有细胞壁溶解现象。 进一步研究发现 , 木霉菌孢子悬浮液、 代谢液 、 难挥发性物质对人 参立枯 菌均有较 高的抑制作用 , 而易挥发性物质对人参 立枯 菌的影 响不显著。研 究结果表 明, 霉菌 木
T0 — v4 2对人 参 立 枯病 菌 的拮 抗作 用是 营养 、 间竞 争 、 空 重寄 生 作 用及 代谢 产 物抗 生 作 用 的综 合 体 现 。
枯菌作对照 , 定期观察菌落生长情况 , 计算抑菌率 。 抑菌率( : %) x O l0
上清液 ,。 p 0 5 ̄ 2 m滤膜过滤 , 滤液( 木霉菌代谢液 ) 与培 2 绿 色木霉菌 T 0 — . v4 2易挥 发物质 对人参 立枯 养基混匀后倒平板 , 代谢 液加入 量和接种方法 同上 , 测定不 同浓度代谢液对人参立枯菌 的抑制率 ,根据
[ r cec n eh o g/ dri t no rd i a C ieeMe in n tr dc ] 9 Wol S i ea dTc nl yMoen ai Taio l hns d n o z o f tn dc adMa i Meia 3 i e ea
20 第十卷 08
菌 , 上 培养 皿 , 封 口膜 密 封 。 以不 接 种 木 霉 作 对 合 用 照 , 处 理 3次 重 复 。2 ℃恒 温 倒 置 培 养 ,d后 测 量 每 5 5
1 人 参 立枯 病 优 良拮 抗 木 霉 菌株 的 筛选 .
根据表 1 的统计和分析结果 , 株木霉菌对 人参 7 立枯 菌均 有抑制 作用 , 抑制率不 同 , 中 ,v4 2 但 其 T0—
第四期
V l 0N , o 1 o 。 4
将 活 化 的供 试 木 霉 菌 株 和 人参 立 枯 菌 在 P A平 D 板上 对 峙 培 养 , 饼 间距 约 4m, 单 独 接 种 人 参 立 菌 e 以

木霉菌在生物防治上的应用及拮抗机制_王芊

木霉菌在生物防治上的应用及拮抗机制_王芊

综 述木霉菌在生物防治上的应用及拮抗机制X王 芊(黑龙江省农科院植保所,哈尔滨150086)摘要:简述了拮抗木霉菌在生物防治上的应用前景。

许多木霉种群如哈茨木霉、绿色木霉、钩状木霉、长枝木霉等都是植物病原真菌的拮抗菌。

木霉菌的作用机制多种多样,包括产生抗生素、重寄生作用、溶菌作用、竞争作用等。

关键词:木霉菌;生物防治;拮抗机制中图分类号:S476.1 文献标识码:A 文章编号:1002-2767(2001)01-0041-3 Utilization and Mechanism of T richoderma in Biological ControlWANG Qian(Institute o f Plant Pro tection,Heilo ng jiang Academ y of Agr icultural Sciences,Harbin150086,China)Abstract:T he pro spect of antifungal Tr ichod erma in the utilization of bio logical co ntrol w as analy sed.M any Kinds of T richoder ma can be used as a metho d o f biolog ical contr ol against plant pathogens.such as T.har z ianum,T.v ir ide,T.hamatum and so on.The antifung al mechanism of T richoder ma is varied,including antibiotic,dissolve hy pha,parasitism and competition.Key words:T richoder ma;biolog ical contr ol;antifungal m echanism 木霉菌属于半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目,粘孢菌类,是一类普遍存在的真菌,常见于土壤中,是土壤微生物的重要群落,也见于植物残体及动物粪便上,从植物根围、叶片及种子、球茎表面经常可以分离到[9]。

哈茨木霉施用方式对烟草生长、黑胫病防治及诱导抗性的影响

哈茨木霉施用方式对烟草生长、黑胫病防治及诱导抗性的影响

㊀山东农业科学㊀2023ꎬ55(2):119~126ShandongAgriculturalSciences㊀DOI:10.14083/j.issn.1001-4942.2023.02.016收稿日期:2022-05-27基金项目:河南省自然科学基金项目(212300410160)ꎻ河南省烟草公司许昌市公司科技项目(2018411000240043)作者简介:匡志豪(1997 )ꎬ男ꎬ河南潢川人ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向:烟草栽培与生理生化研究ꎮE-mail:1832786548@qq.com通信作者:殷全玉(1975 )ꎬ女ꎬ河南固始人ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ主要从事烟草栽培和生理研究ꎮE-mail:quanyuy@126.com哈茨木霉施用方式对烟草生长、黑胫病防治及诱导抗性的影响匡志豪1ꎬ王典2ꎬ云菲1ꎬ王兆双2ꎬ韩梦园1ꎬ张幸博2ꎬ王景1ꎬ殷全玉1(1.河南农业大学烟草学院ꎬ河南郑州㊀450002ꎻ2.河南省烟草公司许昌市公司ꎬ河南许昌㊀461000)㊀㊀摘要:为探究生防菌株哈茨木霉对烟草生长促进和黑胫病防治效果的最佳施用方式ꎬ本试验在温室盆栽条件下分析了哈茨木霉浸种㊁灌根和叶面喷施3种施用方式对烟草生物学性状㊁生理特性㊁烟草黑胫病防治效果以及诱导抗性的影响ꎮ结果表明ꎬ哈茨木霉浸种㊁灌根㊁叶面喷施处理对烟草地上部和地下部生物学性状及生物量积累均具有显著促进作用ꎬ整体表现为灌根>浸种>叶面喷施ꎮ哈茨木霉对烟株叶面积促进效果高于株高和茎围ꎬ移栽后28d经灌根处理烟株根系更加发达ꎬ总根长㊁根体积㊁分枝数较对照显著增加ꎬ地上部和地下部鲜质量较对照分别增加86.14%和84.16%ꎮ灌根处理后烟株硝酸还原酶活性㊁根系活力㊁叶绿素含量均随时间推移逐渐升高ꎬ在移栽后21d达到稳定ꎮ哈茨木霉定殖量与防御性酶活性和烟草黑胫病防治效果呈正相关关系ꎬ经诱导烟草根系POD㊁PPO㊁PAL和CAT活性显著升高ꎮ各时期灌根处理烟株体内哈茨木霉定殖量均显著高于浸种和叶面喷施处理ꎬ烟草黑胫病发病率较对照降低75.00个百分点ꎬ病情指数降至13.89ꎮ综上可知ꎬ移栽期哈茨木霉灌根处理能有效提高烟株生长质量ꎬ诱导烟株抗性增强ꎬ降低烟草黑胫病发生ꎮ关键词:哈茨木霉ꎻ施用方式ꎻ生物学性状ꎻ生理特性ꎻ烟草黑胫病ꎻ诱导抗性中图分类号:S435.72㊀㊀文献标识号:A㊀㊀文章编号:1001-4942(2023)02-0119-08EffectofTrichodermaharzianumApplicationMethodonTobaccoGrowthꎬBlackShankControlandInducingResistanceKuangZhihao1ꎬWangDian2ꎬYunFei1ꎬWangZhaoshuang2ꎬHanMengyuan1ꎬZhangXingbo2ꎬWangJing1ꎬYinQuanyu1(1.CollegeofTobaccoꎬHenanAgriculturalUniversityꎬZhengzhou450002ꎬChinaꎻ2.XuchangBranchofHenanTobaccoCompanyꎬXuchang461000ꎬChina)Abstract㊀ToinvestigatethebestapplicationmethodofthebiocontrolstrainTrichodermaharzianumforpromotingtobaccogrowthandcontrollingblackshankꎬthepotexperimentwasconductedingreenhousebyset ̄tingthreeapplicationmethodsasseedsoakingꎬrootirrigationandfoliarspraying.Theireffectsonbiologicaltraitsꎬphysiologicalcharacteristicsꎬblackshankcontrolandresistanceinductionoftobaccowereanalyzed.TheresultsshowedthatseedsoakingꎬrootirrigationandfoliarsprayingwithTrichodermaharzianumsignifi ̄cantlypromotedtheabove ̄groundandunder ̄groundbiologicaltraitsandbiomassaccumulationoftobaccowiththeoverallperformanceofrootirrigation>seedsoaking>foliarspraying.TheleafareaoftobaccoplantswaspromotedbyTrichodermaharzianummorethanplantheightandstemcircumference.Therootsystemdevel ̄opedbetterunderirrigationtreatmentofTrichodermaharzianumat28thdayaftertransplantingꎬandthetotalrootlengthꎬrootvolumeandnumberofrootbranchesincreasedsignificantlycomparedwiththecontrol.Thea ̄bove ̄groundandunder ̄groundfreshmassincreasedby86.14%and84.16%comparedwiththecontrolꎬre ̄spectively.Thenitratereductaseactivityꎬrootvigorandchlorophyllcontentofthetobaccoplantsunderirriga ̄tiontreatmentincreasedgraduallywiththetimeextensionandwasstableafter21daysoftransplanting.ThecolonizationamountofTrichodermaharzianumwaspositivelycorrelatedwiththedefensiveenzymesactivitiesandtobaccoblackshankcontroleffect.TheactivitiesofPODꎬPPOꎬPALandCATintobaccorootsincreasedsignificantlyaftertreatedwithTrichodermaharzianum.TheinvivocolonizationofTrichodermaharzianuminto ̄baccounderirrigationtreatmentwassignificantlyhigherthanthatunderseedsoakingandfoliarapplicationꎬandtheincidenceoftobaccoblackshankreducedby75.00percentagepointscomparedwiththecontrolꎬandthediseaseindexwasreducedto13.89.InconclusionꎬrootirrigationwithTrichodermaharzianumattrans ̄plantingtimecouldeffectivelyimprovethegrowthqualityoftobaccoplantsꎬincreaseresistanceandreducetheincidenceoftobaccoblackshank.Keywords㊀TrichodermaharzianumꎻApplicationmethodꎻBiologicaltraitsꎻPhysiologicalcharacteris ̄ticsꎻTobaccoblackshankꎻInducingresistance㊀㊀烟草是中国重要的经济作物ꎬ由于长期连作及过量化肥㊁农药施用ꎬ烟区土壤质量下降㊁病害发生日益严重㊁烟叶品质降低ꎬ同时对生态环境产生一系列负面影响[1]ꎮ烟草黑胫病是由烟草疫霉菌(Phytophthoranicotianae)引起的一种土传真菌病害[2]ꎬ在中国各烟区普遍发生ꎬ严重地块发病率高达75%以上[3]ꎬ是危害烟叶生产的主要病害之一ꎬ严重影响了烟叶生产的可持续发展ꎮ木霉菌是一类广泛存在于土壤中的拮抗真菌ꎬ通过竞争优势㊁重寄生作用以及诱导植物产生抗性[4]等方式ꎬ达到高效㊁安全㊁绿色防治效果ꎮ王献慧等[5]在花生种植前利用哈茨木霉浸种ꎬ有效提高了植株叶片数和侧枝长ꎬ显著降低了叶斑病发病率ꎮ王依纯等[6]通过棘孢木霉㊁哈茨木霉和拟康氏木霉灌根ꎬ均提高了黄瓜幼苗叶绿素含量㊁硝酸还原酶活性以及根系活力ꎬ促进幼苗生长ꎮ张敏等[7]采用绿色木霉叶面喷施玉米ꎬ对株高㊁根长均有促进效果ꎬ根活力㊁过氧化物酶活性及叶绿素含量较对照显著升高ꎮ木霉制剂对植物促生防病效果随使用方式不同存在较大差异ꎬ如刘峰等[8]利用哈茨木霉浸种㊁拌土和叶面喷施处理均能促进玉米幼苗生长ꎬ其中拌土处理对植株地上部生长性状㊁根长及生物量积累提高效果更显著ꎮ张敏等[7]认为木霉浸种和叶面喷施混合处理能有效增强玉米防御类酶活性ꎬ提高对玉米丝黑穗病的防治效果ꎮ肖密[9]比较了哈茨木霉菌T2-16孢子悬浮液浸种㊁灌根以及掺拌基质对西瓜枯萎病的防治效果ꎬ其中木霉菌掺拌基质处理下的西瓜过氧化物酶(POD)㊁苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)活性提高最显著ꎬ防治效果达到60%ꎮ当前ꎬ利用木霉菌防治植物病害报道已有很多ꎬ但木霉菌施用方式对烟草的生长㊁病害防效以及诱导抗性的影响缺乏系统研究ꎮ本课题组利用前期筛选出对烟草黑胫病病菌有较强拮抗效果的哈茨木霉菌ꎬ研究哈茨木霉浸种㊁灌根和叶面喷施3种施用方式对烟草生物学性状㊁生理特性㊁诱导抗性及烟草黑胫病防治的影响ꎬ旨在提高生产中木霉菌剂使用效果ꎬ为绿色烟叶生产提供技术支撑ꎮ1㊀材料与方法1.1㊀试验材料1.1.1㊀供试烟草品种㊀K326由河南农业大学烟草学院提供ꎮ1.1.2㊀供试培养基㊀PDA:马铃薯200gꎬ葡萄糖20gꎬ琼脂15~20gꎬ蒸馏水1000mLꎬpH自然ꎮ燕麦琼脂培养基(OA):燕麦仁60gꎬ蔗糖20gꎬ琼脂8gꎬ蒸馏水1000mLꎬpH自然ꎮ1.1.3㊀供试菌株㊀哈茨木霉CGMCC23294由中国农业科学院农业微生物菌种保藏中心提供ꎻ烟草疫霉菌(Phytophthoranicotianae)由河南农业大学烟草学院提供ꎮ1.1.4㊀菌液制备㊀将哈茨木霉接入PDA平板于021㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀(27ʃ1)ħ培养5~7d后ꎬ用无菌水冲洗孢子ꎬ制成1ˑ107cfu/mL孢子悬浮液备用ꎮ将烟草疫霉菌接入燕麦琼脂(OA)培养基ꎬ(26ʃ1)ħ培养6~7d后ꎬ用无菌水冲洗孢子ꎬ并调节为1ˑ105cfu/mL孢子悬浮液备用ꎮ1.2㊀试验处理本试验于2021年6月至10月在河南农业大学许昌校区烟草基地温室大棚内进行ꎬ棚内温度28ħꎬ湿度40%ꎮ盆栽土壤采用大田耕层土壤ꎬ基础土壤肥力:速效钾144.61mg/kgꎬ速效磷118.89mg/kgꎬ碱解氮70.50mg/kgꎬ有机质16.45g/kgꎬ除去杂草和石子后过1cmˑ1cm筛网ꎬ按1.83g/kg添加复合肥(NʒP2O5ʒK2O=1ʒ1.5ʒ3)ꎬ充分混匀ꎬ装入内口径20.5cm㊁高度13.5cm的花盆ꎬ每盆装土量3kgꎮ1.2.1㊀对照处理㊀将烟草种子表面消毒(质量分数75%乙醇ꎬ1minꎻ30%双氧水ꎬ5min)后ꎬ播种于装有已灭菌基质的漂浮育苗盘中培育ꎬ总计50株ꎮ1.2.2㊀浸种处理㊀烟草种子表面消毒后ꎬ用哈茨木霉孢子悬浮液浸种处理48hꎬ无菌水漂洗干净ꎬ播种于装有已灭菌基质的漂浮育苗盘中ꎬ待烟苗到达成苗期装盆移栽至温室大棚ꎬ总计50株ꎮ1.2.3㊀灌根处理㊀消毒后的烟草种子ꎬ采用常规漂浮育苗ꎬ待烟苗到达成苗期装盆移栽ꎬ利用哈茨木霉孢子悬浮液进行灌根处理ꎮ每株烟接种20mLꎬ总计50株ꎮ1.2.4㊀叶面接种处理㊀烟苗长至成苗期后移栽ꎬ移栽当天ꎬ将哈茨木霉孢子悬浮液均匀喷施在烟苗叶片上直至叶表面布满一层细微水珠而不滴落为止ꎬ每株烟均匀喷施20mLꎬ总计50株ꎮ哈茨木霉孢子悬浮液灌根与叶面喷施处理时间相同ꎬ各处理挑选长势均匀一致烟株同一时间移栽ꎬ且移栽方式与后续管理措施保持一致ꎮ1.3㊀测定指标及方法1.3.1㊀生物学性状测定㊀移栽后28d进行生长量指标测定ꎬ各处理选取5株ꎬ测量株高㊁茎围㊁叶片长度和宽度(自上而下第5片叶)ꎬ计算叶面积(叶面积=0.6345ˑ叶长ˑ叶宽)ꎮ将盆内土壤倒出ꎬ轻轻抖落根部土壤ꎬ用清水反复冲洗干净ꎬ吸水纸吸干水分称量地上部和地下部鲜质量ꎻ通过EPSON根系扫描仪将根系完整扫描的图像存入计算机ꎬ利用WinRHIZO分析总根长㊁根表面积㊁平均根直径㊁根体积及分支数ꎻ扫描后的根部同地上部在105ħ烘箱杀青15min后ꎬ70ħ烘干测干质量及根冠比(地下部鲜质量/地上部鲜质量)[10]ꎮ1.3.2㊀生理生化指标测定㊀移栽后7㊁14㊁21㊁28d分别采集各处理烟株自上而下第4片叶ꎬ避开叶脉ꎬ在叶片中部环状切取0.5gꎬ采用丙酮乙醇提取比色法ꎬ测定叶绿素含量[11]ꎻ将烟苗挖出ꎬ根部清洗干净并吸干水分ꎬ称取1.0gꎬ参照朱秀云等[12]的方法ꎬ采用TTC法测根系活力ꎻ另外取0.1g烟株根部参照张春秋等[13]的方法ꎬ采用活体分光光度法测根系硝酸还原酶活性ꎬ各生理指标测定3次重复ꎬ每次重复均来自同一烟株ꎮ1.3.3㊀哈茨木霉在烟株体内定殖规律㊀在移栽后7㊁14㊁21㊁28d分别取各处理烟株根部㊁茎基部和叶片各0.1g混合ꎬ每株烟重复取样3次ꎬ将混合样品在液氮中冻干研磨成粉ꎬ采用生工生物工程(上海)股份有限公司试剂盒进行真菌DNA提取ꎮ依照哈茨木霉测序结果根据其rDNA转录间隔区特有保守序列设计引物EF1-728F(5ᶄ-CATCGAGAAGTTCGAGAAGG-3ᶄ)和TEF1LLEr ̄ev(5ᶄ-AACTTGCAGGCAATGTGG-3ᶄ)并对其序列进行PCR扩增ꎮPCR反应体系:模板DNA4.0μLꎬEF1-728F和TEF1LLErev各1.0μLꎬ2ˑTaqPCRStarMix25μLꎬ加ddH2O补足至50μLꎮPCR反应程序:94ħ预变性4minꎻ94ħ变性45sꎬ57ħ退火30sꎬ72ħ延伸1minꎬ共35个循环ꎻ72ħ延伸10minꎬ16ħ保存ꎮ取40μL扩增产物在1%琼脂糖凝胶中进行电泳检测ꎬ采用ToloPrep柱式PCR纯化/胶回收试剂盒对目标条带进行纯化ꎬ利用超微量分光光度计检测其浓度ꎬ取3次结果平均值ꎬ各处理重复3次ꎮ1.3.4㊀抗病性及诱导抗性指标测定㊀各处理烟苗在移栽后28dꎬ采用灌根接种法ꎬ将配制好的烟草疫霉孢子悬浮液(1ˑ105cfu/mL)20mL均匀接种在烟株根部土壤ꎬ14d后调查发病率ꎬ计算病情指数及防治效果ꎬ并测定各处理烟株根部过氧化物酶(POD)㊁多酚氧化酶(PPO)㊁苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化氢酶(CAT)活性[14]ꎬ各处理3次重复ꎮ烟草黑胫病分级标准参照中华人民共和国烟草行业标准YC/T39 1996ꎮ121㊀第2期㊀㊀㊀匡志豪ꎬ等:哈茨木霉施用方式对烟草生长㊁黑胫病防治及诱导抗性的影响发病率(%)=病株数/调查总株数ˑ100㊀ꎻ病情指数=ð(病级数ˑ该级病株数)/(最高病级数ˑ调查总株数)ˑ100㊀ꎻ防治效果(%)=(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数ˑ100㊀ꎮ1.4㊀数据处理利用MicrosoftExcel2019进行数据处理和图表制作ꎬ通过SPSS25.0在0.05水平上对数据进行差异显著性检验ꎮ2㊀结果与分析2.1㊀哈茨木霉不同施用方式对烟草生物学性状的影响2.1.1㊀哈茨木霉不同施用方式对烟草地上部生物学性状的影响㊀由表1和图1可知ꎬ与对照相比ꎬ在移栽后28dꎬ哈茨木霉不同施用方式对烟草地上部生长均具有明显促进作用ꎬ以灌根处理对烟草株高和叶面积提高效果最显著ꎬ较对照分别增加54.22%和67.42%(P<0.05)ꎬ显著高于浸种和叶面喷施处理ꎻ相比对照处理ꎬ3种施用方式对烟株茎围影响均达显著水平ꎬ以叶面喷施处理增幅最大ꎬ达到23.40%(P<0.05)ꎮ整体来看ꎬ哈茨木霉对烟草叶面积促进效果优于茎围和株高ꎮ㊀表1㊀哈茨木霉不同施用方式烟株地上部生物学性状处理株高(cm)茎围(cm)叶面积(cm2)对照31.65ʃ1.62d3.29ʃ0.32b238.03ʃ13.12c浸种44.26ʃ3.22b3.77ʃ0.34a336.93ʃ24.20b灌根48.81ʃ2.85a3.85ʃ0.39a398.52ʃ25.61a叶面喷施39.27ʃ2.39c4.06ʃ0.45a315.18ʃ17.29b㊀㊀注:表中数据为平均值ʃ标准差ꎻ数据后不同小写字母表示不同处理间差异显著(P<0.05)ꎮ下同ꎮ2.1.2㊀哈茨木霉不同施用方式对烟草地下部生物学性状的影响㊀由图2和表2可知ꎬ3种施用方式对烟草根部各指标表现出不同程度地促进作用ꎬ哈茨木霉灌根处理的烟株在移栽后28d根系更发达ꎬ各根系指标均高于浸种和叶面喷施处理ꎮ经灌根处理烟株总根长㊁根表面积㊁平均根直径㊁根体积和分支数较对照增加显著ꎬ增幅分别达43.21%㊁62.91%㊁87.63%㊁119.79%和80.46%ꎻ浸种处理对烟草根系各指标提高也较显著ꎬ较对照分别提高28.86%㊁49.60%㊁27.84%㊁85.03%和42.87%ꎻ相比对照ꎬ叶面喷施处理对烟草根表面积㊁平均根直径及根体积影响不显著ꎬ较对照增加14.02%㊁4.12%和17.47%ꎮ结合烟株地上部发育(表1)可知ꎬ哈茨木霉施用方式对烟草地上部和地下部生物学性状影响相同ꎬ即灌根>浸种>叶面喷施ꎮA:烟株地上部长势ꎻB:去除泥土后烟株生物学形态(从左到右依次是对照㊁浸种㊁灌根和叶面喷施处理)ꎮ图1㊀移栽后28d哈茨木霉不同施用方式下烟株长势A:对照ꎻB:浸种处理ꎻC:灌根处理ꎻD:叶面喷施ꎮ图2㊀移栽后28d哈茨木霉不同施用方式下烟株根系扫描图221㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀㊀表2㊀哈茨木霉不同施用方式烟株地下部生物学性状处理总根长(cm)根表面积(cm2)平均根直径(mm)根体积(cm3)分支数(个)对照682.16ʃ48.71b225.99ʃ31.55b0.97ʃ0.09c5.61ʃ0.73b6877ʃ554c浸种879.02ʃ61.14a338.08ʃ30.65a1.24ʃ0.31b10.38ʃ1.85a9825ʃ773b灌根976.94ʃ70.76a368.16ʃ28.83a1.82ʃ0.35a12.33ʃ2.67a12410ʃ951a叶面喷施833.08ʃ78.59a257.67ʃ25.81b1.01ʃ0.13c6.59ʃ1.32b8727ʃ602b2.1.3㊀哈茨木霉不同施用方式对烟草生物量积累的影响㊀由表3可知ꎬ哈茨木霉浸种㊁灌根和叶面喷施处理后烟株地上部和地下部生物量积累均高于对照ꎮ以灌根处理对烟株生物量积累促进作用最强ꎬ其次是浸种处理ꎬ叶面喷施效果相对较弱ꎮ灌根处理烟株地下部鲜质量㊁地上部鲜质量㊁地下部干质量和地上部干质量较对照分别增加84.16%㊁86.14%㊁63.29%和64.17%(P<0.05)ꎮ浸种处理烟株地上部鲜质量和干质量增幅分别为62.49%和58.35%(P<0.05)ꎬ与灌根处理间无显著差异ꎮ对照㊁浸种和灌根处理之间烟株根冠比差异不显著ꎬ经叶面喷施后烟草根冠比有所下降ꎬ说明哈茨木霉能促进烟草地上部和地下部生物量积累ꎬ并不能有效提高烟草根冠比ꎮ㊀㊀表3㊀哈茨木霉不同施用方式下烟株生物量积累处理地下部鲜质量(g)地上部鲜质量(g)地下部干质量(g)地上部干质量(g)根冠比对照9.91ʃ0.67c74.68ʃ5.42c1.58ʃ0.41c12.03ʃ1.66b13.27ʃ2.11a浸种15.07ʃ1.13ab121.35ʃ11.04a1.95ʃ0.34b19.05ʃ2.59a15.44ʃ2.79a灌根18.25ʃ1.29a139.01ʃ10.86a2.58ʃ0.29a19.75ʃ2.68a13.42ʃ2.18a叶面喷施12.42ʃ1.37bc97.58ʃ6.37b1.68ʃ0.36c13.77ʃ2.03b10.23ʃ2.13b2.2㊀哈茨木霉施用方式对生理特性的影响2.2.1㊀哈茨木霉施用方式对烟草根系硝酸还原酶活性和叶片叶绿素含量的影响㊀由图3可知ꎬ叶绿素含量随移栽时间逐渐增加ꎬ各时期含量均表现为灌根>浸种>叶面喷施>对照ꎮ其中浸种和灌根处理各时期叶绿素含量与对照之间均呈显著差异ꎬ最大增幅为33.70%和51.52%(P<0.05)ꎬ分别出现在移栽后第7天和14天ꎬ两处理间差异随时间逐渐减小ꎬ在移栽后第28d浸种与灌根处理之间叶绿素含量无显著差异ꎮ移栽后7d叶面喷施与对照间叶绿素含量差异不显著ꎬ在第21天ꎬ两处理间差值达到最大ꎬ相比对照提高21.61%(P<0.05)ꎮ各时期3种施用方式烟草根系硝酸还原酶活性与对照之间均呈显著差异ꎬ总体变化趋势与叶绿素相同ꎬ各处理硝酸还原酶活性随移栽时间逐渐升高ꎬ以灌根处理最高ꎮ浸种和灌根处理酶活性在移栽后21d较对照增幅达到最大ꎬ分别为29.54%和55.72%(P<0.05)ꎻ叶面喷施处理酶活性在移栽后第14天较对照提高24.77%(P<0.05)ꎬ移栽后28d灌根处理烟草根系硝酸还原酶活性最高ꎬ浸种与叶面喷施处理之间无显著差异ꎮ折线图表示各处理硝酸还原酶活性ꎬ柱状图表示叶绿素含量ꎮ不同小写字母表示同一时期处理间差异显著(P<0.05)ꎮ下同ꎮ图3㊀哈茨木霉不同施用方式下烟草硝酸㊀㊀还原酶活性和叶绿素含量2.2.2㊀哈茨木霉施用方式对烟草根系活力的影响㊀由图4可知ꎬ哈茨木霉处理可以不同程度提高烟草根系活力ꎬ3种施用方式烟草根系活力随移栽天数呈现先升高后降低的趋势ꎮ其中以灌根处理促进作用最显著ꎬ峰值出现在移栽后第14天ꎬ相较对照增幅最大ꎬ达到41.71%(P<0.05)ꎻ浸种和叶面喷施处理根系活力峰值均出现在移栽后第21天ꎬ较对照分别提高20.35%和12.99%(P<0.05)ꎮ随移栽时间延长对照处理烟株根系活力逐渐升高ꎬ与各处理间差值呈逐渐缩小趋势ꎬ但在移栽后28d仍显著低于哈茨木霉处理ꎮ图4㊀哈茨木霉不同施用方式烟草根系活力321㊀第2期㊀㊀㊀匡志豪ꎬ等:哈茨木霉施用方式对烟草生长㊁黑胫病防治及诱导抗性的影响2.3㊀不同施用方式下哈茨木霉在烟草体内定殖规律由图5可知ꎬ通过PCR扩增检测ꎬ对照处理烟株各时期体内哈茨木霉DNA含量均为零ꎮ浸种和灌根处理烟株体内哈茨木霉定殖量随移栽时间延长呈先升高后降低趋势ꎬ分别在移栽后第14天和第21天达到最大值ꎬ各时期灌根处理烟株体内哈茨木霉定殖量均显著高于浸种和叶面喷施处理ꎻ经叶面喷施处理烟株体内哈茨木霉定殖量随时间逐渐减少ꎮ图5㊀不同施用方式下哈茨木霉在烟株体内定殖规律2.4㊀哈茨木霉施用方式对烟草诱导抗性的影响2.4.1㊀哈茨木霉施用方式对烟草黑胫病拮抗效果的影响㊀对照处理烟株发病率和病情指数均显著高于哈茨木霉处理ꎬ以灌根处理对烟草黑胫病防治效果最显著ꎬ达到75.94%ꎬ病情指数为13.89(P<0.05)ꎻ浸种和叶面喷施处理下烟草黑胫病发病率㊁病情指数和防治效果差异不显著ꎬ两处理防效分别为53.32%和49.48%ꎮ㊀㊀表4㊀哈茨木霉不同施用方式下烟草黑胫病拮抗效果处理发病率(%)病情指数防治效果(%)对照91.67ʃ0.96a57.74ʃ1.88a浸种29.17ʃ1.59bc26.95ʃ0.94b53.32ʃ1.64b灌根16.67ʃ1.36c13.89ʃ0.96c75.94ʃ1.67a叶面喷施37.50ʃ1.83b29.17ʃ1.94b49.48ʃ2.27b2.4.2㊀哈茨木霉施用方式对烟草诱导抗性的影响㊀由表5可知ꎬ哈茨木霉对烟草根部防御性酶活性具有诱导效应ꎮ3种施用方式均有效提高了烟草根部POD活性ꎬ但三者之间无显著差异ꎬ灌根处理后烟草POD活性较对照增加28.70%(P<0.05)ꎬ高于浸种和叶面喷施处理ꎮPPO活性以灌根处理最高ꎬ较对照提高71.34%(P<0.05)ꎻ浸种与叶面喷施处理之间无显著差异ꎬ分别较对照增加33.84%和39.63%(P<0.05)ꎮ浸种处理后烟草根部PAL活性较对照升高5.87%ꎬ与对照间无显著差异ꎻ灌根和叶面喷施处理能显著提高PAL活性ꎬ分别提高66.75%和32.52%(P<0.05)ꎮ浸种和灌根处理对CAT活性促进作用最明显ꎬ较对照分别提高80.33%和105.92%(P<0.05)ꎬ叶面喷施效果显著低于浸种和灌根ꎬ与对照之间差异不显著ꎮ综上结果ꎬ3种施用方式对烟草根部POD㊁PPO㊁PAL和CAT活性均有促进作用ꎬ其中以灌根处理对各防御性酶活性诱导效果最显著ꎮPOD活性受施用方式影响较小ꎬPAL和CAT活性受施用方式影响最大ꎮ在生物胁迫条件下ꎬ灌根处理有利于激发烟草根部POD㊁PPO㊁PAL和CAT活性ꎬ提高烟草诱导抗性ꎮ㊀㊀表5㊀㊀㊀哈茨木霉施用方式对烟草诱导抗性的影响(U/g)处理PODPPOPALCAT对照11.29ʃ1.12b3.28ʃ0.21c4.09ʃ0.52c13.17ʃ1.59c浸种13.10ʃ0.86a4.39ʃ0.07b4.33ʃ0.14c23.75ʃ3.27a灌根14.53ʃ1.02a5.62ʃ0.18a6.82ʃ1.23a27.12ʃ2.97a叶面喷施13.59ʃ1.37a4.58ʃ0.54b5.42ʃ0.22b16.95ʃ2.68bc3㊀讨论与结论木霉菌作为一种广谱性生防菌ꎬ至少对18个属20余种病原真菌和多种病原细菌有拮抗效果[15]ꎮ木霉不仅在植物土传病害防治中具有重要作用ꎬ还能促进植物生长㊁提高植物免疫力㊁增强抗逆性[16]ꎮ关于木霉促进植株生长已有很多报道ꎮ杨春林等[17]通过哈茨木霉T-h-30灌根处理后ꎬ黄瓜㊁番茄㊁芹菜幼苗株高㊁地茎及鲜质量均较对照显著增加ꎻ王禹佳等[18]利用绿色木霉处理玉米后ꎬ相比对照总根长㊁根体积和根表面积分别提高74.0%㊁65.0%和47.4%ꎮ本研究中哈茨木霉经3种施用方式处理后的烟株株高㊁叶面积㊁总根长㊁根体积㊁地上部鲜质量和地下部鲜质量等均高于对照ꎬ与前人研究结果相似ꎬ其中灌根处理对以上指标促进效果最显著ꎮ其原因可能是灌根处理后421㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀土壤和烟株体内哈茨木霉定殖量更多ꎬ其代谢产物中具有幼苗生长的类植物生长素6-PP(6-n-pentyl-6H-pyran-2-one)以及可降解乙烯前体物质的ACC脱氨酶ꎬ缓解了乙烯对烟株生长的抑制作用[19ꎬ20]ꎮ哈茨木霉通过诱导增加烟草侧根㊁丛生根㊁延伸根长度等方式ꎬ形成更发达的根系网络[21]ꎬ其中总根长和分枝数的增加有利于烟株从更广泛的土壤中获取水和养分ꎬ根体积和根表面积的提高扩大了与土壤的接触面积和吸收范围[22]ꎻ另一方面部分微溶或难溶的矿物质在哈茨木霉作用下溶解后被根系吸收ꎬ从而加快烟株生长[23]ꎮ各生理指标变化是衡量植株生长质量的重要依据ꎬ有研究表明棘孢木霉和哈茨木霉灌根均能显著提高黄瓜幼苗叶绿素含量㊁根系活力㊁叶片硝酸还原酶活性等生理指标[24]ꎮ杨春平等[25]发现在较高浓度木霉L24作用下ꎬ浸种处理相较叶面喷施更有利于提高玉米叶绿素含量和根系活力ꎮ本研究结果显示3种施用方式对烟株各生理指标促进效果整体表现为灌根>浸种>叶面喷施ꎬ经灌根处理后ꎬ烟株叶面积和叶绿素含量显著提高ꎬ加快了叶片光合速率ꎬ增加碳水化合物的形成和积累ꎻ同时烟株根系活力和硝酸还原酶活性升高ꎬ提高土壤水肥吸收和氮素利用效率ꎬ进而促进烟株生长和生物量的积累ꎮ植物 木霉 病原菌互作是一个复杂的系统ꎬ诱导抗性在植物抗病过程中起着至关重要的作用ꎬ它是指在外界因子诱导下ꎬ植物启动自身防御系统ꎬ增强对病原菌的抗性现象ꎬ通常以防御性酶活性表示[26]ꎮ已有研究表明木霉菌能通过诱导植物体内POD㊁CAT㊁PPO㊁PAL等防御性酶活性升高ꎬ抑制病原菌入侵[27-29]ꎮ本试验结果显示ꎬ不同施用方式下ꎬ烟株体内哈茨木霉定殖量存在显著差异ꎬ以灌根处理各时期定殖量最高ꎬ同时哈茨木霉定殖量与烟草防御性酶活性和黑胫病防治效果呈正相关ꎮ说明在烟草疫霉胁迫下ꎬ哈茨木霉定殖量是影响烟草防御活性的关键因素ꎮ本试验以灌根处理后烟株根系POD㊁PPO㊁PAL和CAT活性提高最显著ꎬ分别较对照升高28.70%㊁71.34%㊁66.75%和105.92%ꎬ烟草黑胫病防治效果达到75.94%ꎮ与宋玉娟[30]㊁庄敬华[31]㊁陈捷[32]等的研究结果一致ꎮ因此ꎬ诱导抗性可能是哈茨木霉防治烟草黑胫病的重要机制ꎮ综上所述ꎬ在移栽时利用哈茨木霉灌根ꎬ能有效促进烟株生长ꎬ提高对烟草黑胫病的防治效果ꎬ在病原菌胁迫下ꎬ有利于诱导烟株产生抗性ꎬ抑制病原菌侵染ꎬ增强抗病能力ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[1]㊀施河丽ꎬ向必坤ꎬ彭五星ꎬ等.有机无机肥料配施对植烟土壤养分及细菌群落结构的影响[J].中国土壤与肥料ꎬ2019(4):58-66.[2]㊀夏振远ꎬ谷医林ꎬ张宏越ꎬ等.复合微生物制剂改善土壤生物学特性和防治烟草黑胫病的研究[J].中国土壤与肥料ꎬ2021(1):192-196.[3]㊀桑正林ꎬ杨顺强ꎬ武婷ꎬ等.不同抗性烤烟根系分泌单糖特征及其对黑胫病菌的化感效应[J].西北植物学报ꎬ2018ꎬ38(4):698-705.[4]㊀张静洁ꎬ朱云云ꎬ卢亦帆ꎬ等.烟管菌 M1 对番茄灰霉病的防治及促生作用[J].园艺学报ꎬ2021ꎬ48(5):960-972. 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[22]袁中友ꎬ郭彦彪ꎬ李强ꎬ等.有机无机肥配施对生态重建先锋植物类芦生长的影响[J].水土保持学报ꎬ2014ꎬ28(5):302-308.[23]AltomareCꎬNorvellWAꎬBjörkmanTꎬetal.Solubilizationofphosphatesandmicronutrientsbytheplant ̄growth ̄promotingandbiocontrolfungusTrichodermaharzianumrifai1295 ̄22[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiologyꎬ1999ꎬ65(7):2926-2933.[24]马光恕ꎬ梁枭ꎬ李梅ꎬ等.木霉菌对黄瓜生理特性及立枯病防治效果的影响[J].中国生物防治学报ꎬ2021ꎬ37(2):277-285.[25]杨春平ꎬ刘露ꎬ杜鹏ꎬ等.绿色木霉L24对玉米幼苗生长的影响[J].四川农业大学学报ꎬ2009ꎬ27(4):419-422. [26]葛银林ꎬ李德葆.植物抗病性的诱导㊁机制㊁分子生物学研究进展[J].中国生物防治ꎬ1995ꎬ11(3):134-141. [27]遇文婧ꎬ杨帅ꎬ刁桂萍.深绿木霉对山新杨生长及抗叶枯病能力的影响[J].东北林业大学学报ꎬ2019ꎬ47(1):71-75.[28]台莲梅ꎬ高俊峰ꎬ左豫虎ꎬ等.长枝木霉菌T115D诱导大豆叶片防御酶活性及疫病盆栽防治效果[J].中国生物防治学报ꎬ2018ꎬ34(6):897-905.[29]杨帅ꎬ孙丽丽ꎬ邓世林ꎬ等.棘孢木霉发酵液对番茄早疫病抗氧化系统和脂质过氧化作用的影响[J].中国农学通报ꎬ2017ꎬ33(5):90-94.[30]宋玉娟ꎬ韩雪莲ꎬ张安盛ꎬ等.棘孢木霉T-6对烟草促生及对黑胫病和根黑腐病的抗病作用[J].中国烟草科学ꎬ2020ꎬ41(1):50-55.[31]庄敬华ꎬ高增贵ꎬ杨长城ꎬ等.绿色木霉菌T23对黄瓜枯萎病防治效果及其几种防御酶活性的影响[J].植物病理学报ꎬ2005ꎬ35(2):179-183.[32]陈捷ꎬ蔺瑞明ꎬ高增贵ꎬ等.玉米弯孢叶斑病菌毒素对寄主防御酶系活性的影响及诱导抗性效应[J].植物病理学报ꎬ2002ꎬ32(1):43-48.621㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀。

硫酸二乙酯(DES)对绿色木霉诱变效果的研究

硫酸二乙酯(DES)对绿色木霉诱变效果的研究韩大勇;张君胜;张铎;邵喜霞;张力【摘要】利用硫酸二乙酯(DES)对出发菌株绿色木霉菌株ZJ进行处理,筛选出1株纤维素酶产量高且性状稳定的高产菌株化L4C,该菌株发酵4 d后纤维素酶滤纸酶活达到15.56 U/g,较出发菌株提高了11.45倍.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2010(000)004【总页数】3页(P225-227)【关键词】绿色木霉;纤维素酶;诱变;硫酸二乙酯【作者】韩大勇;张君胜;张铎;邵喜霞;张力【作者单位】江苏畜牧兽医职业技术学院,江苏泰州,225300;江苏畜牧兽医职业技术学院,江苏泰州,225300;甘肃省科学院生物研究所,甘肃白银,730000;甘肃农业大学动物科技学院,甘肃兰州,7300070;江苏畜牧兽医职业技术学院,江苏泰州,225300【正文语种】中文【中图分类】S816.34粮食短缺、能源紧张是世界各国所面临的难题。

我国的粮食供应受人口多、耕地少的双重制约,形势尤为严峻。

在此境况下,畜牧业要持久稳定发展,就必须减少其对粮食的依赖[1]。

农作物秸秆是自然界中最为丰富的可再生资源之一,是潜在的动物饲料资源[2]。

但是农作物秸秆中纤维素含量高,适口性差,动物难于消化,秸秆饲料的应用价值受到限制。

近年来利用微生物所产生的纤维素酶将秸秆转化为营养价值较高的蛋白质饲料备受人们的青睐。

然而,在生产上缺乏产纤维素酶酶活力高的菌株,大量纤维素类物质不能作为饲料的生产原料。

要有效地利用秸秆首先要解决木质素与纤维素的降解问题,微生物产生的纤维素酶、木质素酶对纤维物质的酶促水解具有良好的应用前景。

对木霉、曲霉等产纤维素酶、白腐真菌产木质素酶已有许多报道,但均存在着酶活力不高、菌种严重退化的问题,所以不断诱变选育高效的产酶菌株,优化其产酶条件是一项重要而有意义的工作。

诱变是最早在抗生素上应用的一种育种技术,它通过物理、化学、生物因素作用于抗生菌,人为地使其遗传物质发生变异,从中选育高产菌株,由于它操作简便、速度快、收效大而且手段多样,所以是实验室及生产上最为常用的高产菌株育种方式。

木霉菌的生物防治机理

木霉菌的生物防治机理*古丽吉米拉.米吉提, 王志英, 范海娟, 王娜,窦恺,黄颖,刘志华*(东北林业大学东北林业大学林学院森保学科哈尔滨150040)摘要:木霉菌是重要的植物病害生物防治菌,本文从木霉菌通过对营养和空间的竞争来抑制病原真菌的生长和繁殖,木霉菌对病原真菌的重寄生机制,木霉菌产生抗生素抑制或杀死病原真菌的抗生机制,以及木霉菌促进植物生长诱导植物系统抗病性机制等综述木霉的生物防治机制。

为全面理解木霉的对植物真菌病害生物防治机制提供理论指导。

关键词:木霉;植物病害;生物防治The Mechanism of Trichoderma spp. Biological Control toFungal plant phytopathogenGulijimila.Mijiti Wang Zhi ying Fan Hai juan Wang Na Dou Kai Huang Ying Liu Zhihua( College of Forest Protection Northeast Forestry University Harbin 150040)Abstract: Trichoderma spp. is effective biocontrol agents for fungal plant phytopathogen. Trichoderma biocontrol mechanism includes competition for nutrients and space and mycoparasitism to fungal plant phytopathogen, production of antibiotics, promotion plant growth, and induction plant systemic resistance responses, etc. In the paper which we concluded will provide theoretical guidance for the comprehensive understanding the role of Trichoderma spp. in biological control mechanisms for plant fungus diseases.Keywords: Trichoderma, fungal plant pathogens, biological contro l植物真菌病害生物防治菌木霉(Trichoderma spp.)对多种植物真菌病害具有较好的防治效果。

木霉及其代谢产物在果蔬保鲜中的应用研究进展

2021年1月第42卷第1期专题论述—220—DOL10.12161/j.issn.l005-6521.2021.01.036木霉及其代谢产物在果蔬保鲜中的应用研究进展杨萍,杨睿(哈尔滨商业大学学,黑龙江哈尔滨150028)摘要:采后果蔬在&藏运销过程中极易被病原菌侵染发生严重的腐烂,而木霉及其代谢产物能抑制果蔬中常见病原菌的生长繁殖,起到抑菌防腐保鲜的作用。

木霉对生物体无毒、无害、对环境无污染,是一种有发展前景的生物保鲜法。

该文对近年来木霉在果蔬保鲜中的应用研究进展进行综述,包含木霉的种类、木霉保鲜机理,木霉及代谢产物在果蔬保鲜上的应用效果和木霉商业化产品,以及利用木霉开发保鲜产品中存在的问题及解决方法。

关键词:采后果蔬;木霉;代谢产物;生物保鲜;研究进展Application of Trichoderma and Its Metabolites in Fruits and Vegetables PreservationYANG Ping,YANG Rui(College of Food Engineering,Harbin University of Commerce,Harbin150028,Heilongjiang,China) Abstract:Postharvest fruits and vegetables are easy to be infected by pathogens during storage,transportation and marketing.Trichoderma and its metabolites can inhibit the growth and reproduction of common pathogens in fruits and vegetables,and play an important role in antibacterial,antiseptic and preservation.Moreover, Trichoderma is non-toxic,harmless and non polluting to the environment,which is a promising biological preservation method.In this paper,the application and research progress of Trichoderma in fruits and vegetables preservation in recent years were reviewed,including the types of Trichoderma,the preservation mechanism of Trichoderma,the application effect of Trichoderma and its metabolites in fruit and vegetable preservation,the commercial products of Trichoderma,and the problems and solutions in the development of fresh-keeping products by Trichoderma.Key words:postharvest fruits and vegetables;Trichoderma;metabolites;biological preservation;research progress文杨萍,杨睿•木霉及其代谢产物在果蔬保鲜中的应用研究进展[J&.食品研究与开发,2021,42(1):220-224.YANG Ping,YANG Rui.Application of Trichoderma and Its Metabolites in Fruits and Vegetables Preservations[J].Food Research and Development,2021,42(1):220-224.我国果蔬产量和消费量均处于世界前列,但由于果蔬采摘后自身呼吸作用、病原菌侵染、贮运条件等原因,造成约占总产量20%~30%的腐烂[1]。

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一、木霉菌概述:木霉菌属真菌门,半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,丛梗孢科,
木霉属,广泛存在于不同环境条件下的土壤中。自19世纪中叶,人类对木霉
菌已有了初步的认识,但直到上世纪60年代木霉菌的分类地位才得以确定。
大多数木霉菌可产生多种对植物病原真菌、细菌及昆虫具有拮抗作用的生物活
性物质,比如细胞壁降解酶类和次级代谢产物,并能提高农作物的抗逆性,促
进植物生长和提高农产品产量,因此被广泛用于生物防治、生物肥料及土壤改
良剂。由于化学农药对环境的负面影响较为严重,所以对环境较为友好的生物
农药木霉菌受到了广泛的关注。

绿色木霉是所产纤维素酶活性最高的菌株之一,所产生的纤维素酶对作物有降
解作用,效果非常好,绿色木霉又是一种资源丰富的拮抗微生物,在植物病理
生物防治中具有重要的作用。具有保护和治疗双重功效,可有效防治土传性病
害。绿色木霉菌剂防治蔬菜根结线虫病的生物农药,还可以防治黄瓜等葫芦科、
番茄等茄科蔬菜的根结线虫病害。绿色木霉菌剂生物农药通过产生抗生素、营
养竞争、微寄生、细胞壁分解酵素、以及诱导植物产生抗性等机制。可直接加
入腐熟剂、有机肥料、生物菌剂等肥料中,在分解纤维、病理防治中有重要作
用。

二、木霉菌特点:
系列产品在防治灰霉病上,主要有以下几个防治特点:
1.拮抗作用:木霉菌通过产生小分子的抗生素和大分子的抗菌蛋白或胞壁降解
酶类来抑制病原菌的生长、繁殖和侵染。木霉菌在抗生和菌寄生中,可产生几丁
质酶、β21 ,3 葡聚糖酶、纤维素酶和蛋白酶来分解植物病原真菌的细胞壁或分
泌葡萄糖苷酶等胞外酶来降解病原菌产生的抗生毒素。同时,木霉菌还分泌抗
菌蛋白或裂解酶来抑制植物病原真菌的侵染。

2.竞争作用:木霉菌可以通过快速生长和繁殖而夺取水分和养分、占有空间、
消耗氧气等,以至削弱和排除同一生境中的灰霉病病原物。

3.重寄生作用:研究发现木霉菌会在特定环境里形成腐霉对灰霉病菌具有重寄生
作用,它进入寄主菌丝后形成大量的分枝和有性结构,因而能抑制葡萄灰霉病症
状的出现。

4.诱导抗性:木霉菌可以诱导寄主植物产生防御反应,不仅能直接抑制灰葡萄孢
的生长和繁殖,而且能诱导作物产生自我防御系统获得抗病性。
5.促生作用:经实验人员发现,木霉菌在使用过程中,不仅能控制灰霉病的发生,
而且能增加种子的萌发率、根和苗的长度以及植株的活力。

三、《2014关于植物根系防病治报告》木霉菌通过产生抗生素、营养竞争、
微寄生、细胞壁分解酵素、以及诱导植物产生抗性等机制,对于多种植物病原
菌具有拮抗作用,具有保护和治疗双重功效,可有效防治土传性真菌病害,在
苗床使用木霉菌,可提高育苗与移植的成活率,保持秧苗健壮生长。也可用于
防治灰霉病。 (适合肥料直接添加,以及喷洒的全水溶性肥)木霉菌特效期长,
作用位点多,不产生抗药性,不怕高湿,而且湿度越大防治效果越好。杀菌谱
广,无残留毒性,对作物没任何不良影响。

【适用范围】根腐病、灰霉病、立枯病、腐霉病、猝倒病、枯萎病等土传病害。

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