中药方剂药效学实验讲义2006

动物：小鼠，18～22g，6 只，雌雄皆用。 药品：25%延胡索生品水煎醇沉液（A-YHS）、 25%延胡索醋制品水煎醇沉液（Z-YHS）、 生理盐水（NS）、 0.9%醋酸溶液苦味酸 器材：粗天平、1ml 注射器、5 号针头、鼠笼。 [方法] 取小鼠 6 只，编号，称重。随机分成 3 组，每组 2 只。分别注射 0.1ml/10gA-YHS、 0.1ml/10gZ-YHS 及等容量的 NS。30min 后，每鼠腹腔注射 0.9%醋酸溶液 0.1ml/10g。记录 20min 内各鼠出现扭体反应的次数。以 t 检验进行数据统计，并计算药物扭体反应抑制百分率。
中药药理作用，借助了现代科学知识和实验技术对中药作用的再认识。它主要是实验 药理学开始的，即从观察中药对实验动物生理、生化功能的影响开始的，再进一步研究对 人体的作用及作用机制。中药药理作用的提出，大约是从 1920 年以后开始的，它是以现 代医学的术语来表达的。
虽然中药功效和中药药理作用是以不同的术语进行表达的，但两者都能反映中药对机 体的作用，都属于中药药效学内容，其实质是一致的，因此，它们对中药作用的认识必然 存在相关性，如：
1
中药方剂药效学实验讲义
上海中医药大学中药学院 2006 年 3 月
2
编写说明
中药方剂药效学实验是以中医药理论为指导，用现代医学方法研究中药及方剂药理作 用的一门课程。本课程以提高学生创新意识、科学思维为目标，结合中药及方剂功效进行 药理实验，培养学生自主设计和动手能力，为今后研究中医药奠定基础。
8
心肌缺血,促进冠状侧枝循环开放,提高缺血心内氧分压的作用,比单味川芎作用强。 配伍后的药效与复方多靶点、多环节的作用有关,如由黄连、黄柏、大黄、甘草所组成的复 方,其抑菌效果很好。研究表明,黄连抑制细菌的呼吸和 RNA 的合成,黄柏对细菌的 RNA 有 强烈抑制作用,大黄对细菌的乳酸脱氢酶有很强的抑制作用,甘草则抑制细菌的 DNA 的合 成,经上药配伍后的复方即可对细菌代谢的多个环节起抑制作用, 从而增强了抑菌能力。 ②产生新效用,扩大治疗范围
4
第一章 实验研究的基本内容与要求
一、查阅资料与文献综述 二、实验研究的基本要求 （一）实验设计的基本原则
“重复、对照、随机” （二）实验动物的选择
1．种族差异 2．年龄与性别 （三）实验剂量与给药量的计算 1．实验剂量 2．给药容量 （四）实验纪录的基本要求 （五）实验数据的整理与方法 1．数据整理 2．统计公式
6
第二章 中药功效与中药药理作用的相关性
中药，是以中医药理论为指导，运用辨证认治的方法来运用的药物。药效学, 是药理学 中的重要内容，它主要研究的是药物对机体的作用。显然，中药药效学就是研究中药对机 体的作用。
中药功效，反映的是中药对人体的作用。中药功效是人们在长期与疾病作斗争中不断 总结出的对药物作用性质的认识，它是以病理状态的人为对象，从临床观察总结出的药物 的作用，是中药对人体作用的反映。中药功效的记载，早在《神农本草经》上就已见到， 它以传统中医药学的术语进行表达的。
生理盐水扭体次数—药物扭体次数 扭体反应抑制百分率（%）= —————————————— ×100%
生理盐水扭体次数
[记录] 编号 体重（g）
药物
剂量（ml/10g） 20min 扭体反应次数（次）
Fra Baidu bibliotek
1
2
3
4
5
6
[结果]
组别
剂量
动物数
扭体反应次数
抑制率
（mg/kg）
（n）
（X±SD）
（% ）
NS
S-YHS
7
第三章 方剂的药理实验研究
一、实验研究的内容 1、验证方剂功用，阐明其作用机理 方剂功效和作用机理的研究是方剂实验药理研究中最活跃的领域。目前药理研究已涉 及到 1000 多首古今方剂，有些研究在广度肾深度上均有不同程度的展开,对方剂功效和作 用机理的药理研究，一方面由单一指标、一组相关指标发展到多系统、多组指标的观察； 另一方面由整体药效深入向器官、细胞甚至分子水平上的机制探讨。 2.方剂配伍的研究 方剂药物配伍的作用关系一直是凭经验来理解的,方剂药理实验通过拆方研究来认识 方剂的配伍关系,为从实验意义上理解方剂配伍的合理性提供了可能。因此复方配伍的研究 在中医方剂的现代研究中占有重要的位置。 3.方剂适应“证”的研究 “方证相关”是中医方剂的一个重要特性。因此长期以来中医一直强调“有是证用是 方”, 组方遣药有高度选择性, “方证相关”不仅是古今临床中医选方用方的主要根据, 也是 现代探讨中医病证模型“以方测证”的依据。方剂与其适应“证”之间的相关领域已见有 一些初步的研究。 4.方剂治法理论的研究 中医方剂治法理论对方剂的发展有深远的影响。治法一方面指导着临床遣药组方、化 裁成方和创制新方, 另一方面治法由于处方用药与辨证论治的经验而日益成熟与完善。当现 代药理学介入中医方剂学后,传统的治法开始在内容和功能上发生变化，实验已经证实，属 同一治法的不同方剂具有共同的药理作用基础，属同中有异治法的方剂，药理作用也有差 异，药理实验在证明治法理论合理性的同时，传统治法的进一步提高。 5.方剂剂型的药理研究 发展新的中药剂型是发掘古方的一个重要方面。但药味组成相同的方剂可因其剂型不 同而发生功效上的差异,现代剂型药理实验的比较研究是认识这种差异的重要手段。现代围 绕剂型的药理研究表明方剂剂型与功效的关系是复杂的,同一组成的方剂的不同剂型在功 效上可以相同,也可能不同。不同剂型表现在药理上的差异, 包括药效强度的改变和其他药 理作用的改变。因此，方剂剂型的药理研究，对验证药效，筛选成药剂型，发现方剂的新 的效用都是有意义的。 6.方剂临床药理研究 动物实验的结果为临床药物的效用和安全性提供了重要依据。但动物与人有异,实验也 常受到多方面客观因素的限制, 因此药理实验结果与临床的实际不全一致, 如经长期临床确 认的方剂，有时实验却不能获得有关药理作用的证据, 而经药理实验证实的方剂用于临床却 无甚疗效。如果说,任何药物的药效和安全性最终都必须在人身上进行验证,那么,对于中医 方剂来说,临床则有着更为特殊的意义。。中医方剂源于临床又直接通向临床,因此, 从某种意 义上说, 中医方剂的临床应用本身就是一种人体药理试验,许多历经过长期临床检验的方剂 在中医理论指导下可直接用于临床。建立适用于中医方剂效用价值评估体系和在验证疗效 基础上对方剂药理作用的研究是方剂现代临床发展中的重要一环。
a. 量反应资料 t 检验计算公式：
t=
t 值判断： 算出 t 值时，按自由度 f(f=n1+n2-2)从 t 值表中查出 t0.05 、t0.01 值，与实算值 t 比较：
若 t>t0.01,则 p<0.01，差别有非常显著意义 若 t>t0.05,则 p<0.05，差别有显著意义 b. 质反应资料 x2 计算公式
二、方剂药理实验研究的意义 1．阐明方剂配伍意义，加深对方剂组方的认识。 有关中药与复方的药理实验研究，涉及到方剂的配伍问题，为从实验意义上理解方剂 配伍的合理性、科学性提供了可能。 ①协同增效 实验证明, 配伍用药较单味药疗效好。如当归补血汤黄芪和当归单味使用虽也能提高正 常或贫血小鼠红血球和血红蛋白, 但作用不如全方明显。在抑制正常大鼠血小板聚集作用方 面,两者配伍后作用强于单味药,并有明显协同作用。川芎与人参、川芎与丹参配伍具有抗
x2=
查 x2 值表（四格表的自由度恒等于 1）， 得 0.05 的机率点为 3.841，若 x2 值> x20.05 ，则 p<0.05，差别有显著意义。
5
其它方法请参阅相关统计学参考书。 （六）实验报告的书写
1． 讨论分析 2． 结论 三、自主实验设计的基本要求 目的、原理、材料、方法、结果、讨论等。
中药配伍后, 还可产生单味药根本不具备的效用,。某些方剂的拆方、组方实验也证明, 构成药单味无效的, 组方后则可能显效。如正柴胡饮中除芍药外, 其他药包括君药柴胡对病 毒感染性肺炎均无作用,但配伍后的全方对病毒感染性肺炎有较好的对抗作用,药物间相互 关系复杂多变,但配伍后对肺病变呈现最好的抑制作用。 ③减缓药物毒副作用
建立相应疾病的“病”或“证”的模型，运用现代药理学研究方法，阐明方剂产生作 用的靶器官或靶点，在靶器官或靶点上如何产生作用，及其相互之间的关系，从而在验证 临床疗效的同时，阐明方剂的作用机理。如对补阳还五汤的药理实验研究发现，补气药配 伍活血药，从血流变学的指标（如全血比粘度、全血还原粘度、红细胞电泳、血沉及血沉 方程 K 值等指标）证明优于单纯的活血化瘀药。并揭示补阳还五汤治疗中风后遗症半身不 遂与改善血液状态、预防血栓形成、促进血栓溶解的机理有关。 3、发现新的药理作用，扩大临床应用范围。
9
第四章 中药方剂药效综合实验
实验一 延胡索生品和醋制品镇痛作用的比较（扭体法） [目的] 用镇痛实验（扭体法）来验证中药延胡索的止痛功效，比较延胡索生品和醋制品的镇 痛效价。 [原理] 化学物质醋酸溶液注入小鼠腹腔,可刺激腹膜引起持久的疼痛,致使小鼠产生“扭体”反 应(腹部收缩内凹,后肢伸展同时躯体扭曲等)。镇痛药减轻疼痛反应，可明显地减少小鼠发生“扭 体”反应的次数。 [材料]
减缓方剂中某些药物的毒性、烈性及副作用,是中药配伍的一大目的。药理实验证明不 少合理的配伍具有减缓药物毒副作用,从而增强疗效。如四逆汤有升压和强心作用, 附子不 仅能加强心肌收缩且有升压作用, 干姜无明显作用,甘草仅有升压作用,但三味药配伍后则使 心收缩在强度和持续时间上超过单味附子, 升压效应大于各单味药,且可使附子引起的异位 心率失常的毒副作用得以减缓。此外,甘草中含有的甘草酸,能与附子中的生物碱(乌头碱) 形成复盐, 在体内逐渐分解而起作用, 这样就避免了机体因短时间内吸收过量生物碱而引起 剧烈反应。实验证明,四逆汤煎剂的半数致死量(LD50)较单味附子相差 4.1 倍。 2、验证临床疗效，阐明方剂疗效的实质。
功效
中药
药理作用
解表
麻黄、桂枝、柴胡
清热燥湿、泻火解毒 黄芩、黄连
回阳救逆
附子
扩张体表血管、促进汗腺分泌； 解热等
抗菌、抗病毒、抗炎、抗病源微生 物；解热等
强心、升压、改善微循环等
活血化瘀 . . .. . .
丹参、川芎、益母草
降低血黏度、抗凝血、改善微循环 、 增加器官血流量等
可见经典中药理论对某些中药功效的描述与现代研究所揭示的药理作用密切相关。可以认 为药理作用用现代医学语言表达了中药的主要功效，同时也说明许多中药的传统功效有其科学 性，随着研究的深入，将会进一步被药理作用得到更精确的阐明。
本课程面向中医基础专业、中医（七年制）学，总学时为 28 学时，分理论与实验二 大部分。
实验教学改革是一项长期的任务，开设本课程是教学实验改革的一种尝试，该课程从 教学内容到方法尚需不断完善，衷心希望广大读者多提宝贵意见。
编者 2006.3
3
目录
第一章 实验研究的基本内容与要求 第二章 中药功效与中药药理作用的相关性 第三章 方剂的药理实验研究 第四章 中药方剂药效综合实验
大量方剂药理学研究表明，方剂的药理研究结果与方剂的传统功效大多是一致的，但 有的方剂在药理研究中往往又发现与传统方剂功效不同的、新的药理作用，从而完善和补 充了方剂的功效理论，扩大了方剂的临床实用范围。如生脉散的传统功效为益气养阴，治 疗外感暑热或久咳伤肺所致的气阴两伤。药理研究发现，人参、麦冬、五味子配伍能产生 一种新的物质，对心血管作用较为显著，能增强心肌收缩力，轻度降低外周阻力，增加冠 脉流量，改善心肌供血，调节血压，改善微循环。这些药理研究结果，扩大了生脉散的临 床应用范围，广泛用于休克及心血管系统疾病的治疗。
实验一 延胡索生品和醋制品镇痛作用的比较（扭体法） 实验二 中药镇痛作用实验（热板法） 实验三 三承气汤对小鼠小肠运动的影晌 实验四 三承气汤对家兔离体肠平滑肌的作用 第五章 实验设计与讨论 第六章 自主实验设计参考 参考一 茵栀黄注射液大鼠胆汁流量的影晌 参考二 苦参素注射液抗大鼠足跖肿胀作用 参考三 血塞通注射液对大鼠体外血栓形成的影响
Z- Y HS
[注意事项] ①醋酸有挥发性，宜用前临时配制。②每只动物腹腔注射部位和操作技术力求一