12荧光分析
rf荧光检测器的使用流程
RF荧光检测器的使用流程1. 简介RF荧光检测器是一种用于检测射频（RF）信号的设备，通过检测信号频率和强度来判断射频信号的存在和强度。
它可以用于无线电设备的调试、射频信号的定位以及无线电频谱分析等领域。
2. 准备工作在使用RF荧光检测器之前，我们需要进行一些准备工作，以确保设备的正常使用和精确的测量结果。
•确保RF荧光检测器已经接通电源，并处于正常工作状态。
•检查并确认设备所需的电池或电源是否已经安装或连接。
•查阅设备的用户手册，了解设备的功能和操作流程。
•确保周围环境符合设备的工作要求，例如避免信号干扰和电磁辐射等。
3. 检测信号频率和强度使用RF荧光检测器进行信号检测的主要目的是判断信号的频率和强度。
以下是使用流程：1.打开RF荧光检测器电源，并等待设备启动。
2.设置检测模式为频率测量模式。
3.将荧光探头靠近待检测的RF信号源。
4.观察设备显示屏上的频率数值，记录下检测到的信号频率。
4. 调试无线电设备除了检测信号频率和强度，RF荧光检测器还可以用于调试无线电设备。
以下是使用流程：1.打开RF荧光检测器电源，并等待设备启动。
2.设置检测模式为射频测量模式。
3.将荧光探头靠近待调试的无线电设备。
4.调整设备的参数，例如频率、功率等，观察荧光检测器的指示，判断设备的工作状态和调试结果。
5. 定位射频信号源RF荧光检测器还可以用于定位射频信号源的位置。
以下是使用流程：1.打开RF荧光检测器电源，并等待设备启动。
2.设置检测模式为信号定位模式。
3.持握荧光探头，移动探头位置，寻找最强的信号源位置。
4.根据荧光指示器的强度变化，辅助确定射频信号源的位置。
6. 无线电频谱分析RF荧光检测器还可以进行无线电频谱分析，帮助用户了解周围环境的射频信号情况。
以下是使用流程：1.打开RF荧光检测器电源，并等待设备启动。
2.设置检测模式为频谱分析模式。
3.根据设备提供的菜单进行设置，例如频率范围、带宽等。
4.观察设备显示屏上的频率分布图，了解周围射频信号的强度和分布情况。
X 射线荧光光谱测定氟石中的氟化钙和杂质的含量
X射线荧光光谱测定氟石中的氟化钙和杂质的含量应晓浒林振兴（宁波出入境检验检疫局，宁波市柳汀街144号，315010)摘要本文采用12:22(Li2B4O7:LiBO2=12:22)作熔剂制备氟石熔融片，用波长色散X射线荧光光谱仪测定氟石中的CaF2、SiO2、Fe2O3、SO3、P2O5。
本法测量准确度、精密度较好，所得结果可与湿法化学分析结果相比。
关键词X射线荧光，氟石。
1 前言氟石是我国的大宗出口矿产品，对外贸易合同中一般对CaF2、SiO2、Fe2O3、SO3、P2O5的含量有较严格的规定。
常规湿法化学分析[1]存在操作复杂、分析时间长等问题。
本文采用熔融制样X射线荧光光谱法测定酸级和冶金级氟石中的CaF2和杂质的含量，消除了试样的粒度效应和矿物效应。
并且选用混合熔剂12:22，解决了硫在制样过程中容易挥发的问题。
2 实验仪器及方法2.1 仪器及测量条件SRS3400型顺序式X射线荧光光谱仪,铑靶X光管,功率4kW，德国Bruker公司制造，测量条件见表1。
ISP4×4半自动熔样炉，澳大利亚ISP公司。
成分分析谱线分光晶体峰位角(°) 电流(mA) 电压(kV) 测量时间(s) T.CaF2Ca Kα1,2LiF200 113.130 50 50 30 SiO2Si Kα1,2InSb 144.593 135 30 30Fe2O3Fe Kα1,2LiF200 57.520 50 50 30 SO3S Kα1,2Ge 110.670 135 30 30 P2O5P Kα1,2Ge 140.999 135 30 60 CaF2 F Kα1,2OVO55 43.069 135 30 300 2.2试剂2.2.1 12:22，Li2B4O7:LiBO2=12:22，X射线荧光光谱分析专用试剂，经400℃ 5小时灼烧；2.2.2 LiBr 溶液，5mg/mL ； 2.2.3 LiNO 3溶液，220mg/mL ；2.2.4 试料:105℃下干燥2小时,粒度过100目。
荧光光谱 FL概要
S1
２. 无辐射跃迁的类型
振动弛豫: Vr 10-12sec 外 转 移:无辐射跃迁回到 基态 内 转 移:S2~S1能级之间有 重叠 系间跨跃: S2~T1能级之间 有重叠 反系间窜跃:由外部获取能 量后 T1 ~ S2
迟 滞 荧 光
磷 光
外转移
5
二. 分子荧光(磷光)光谱
1. 荧光(磷光)激发光谱与发射光谱
4
分子的活化与去活化 (p78)
振动弛豫
S2
内转移 荧光
反系间 窜跃
系间 １. 辐射跃迁的类型 窜跃
共振荧光：10-12 sec 荧 光：10-8 sec 磷 光：1~10-4 sec 迟滞荧光:102~10-4 sec
T1
紫 外 可 见 吸 收 光 谱
紫 外 可 见 共 振 荧 光 S0 光 谱
CH3 CH3
hv
+
_
N
CH3
24
CH3
3. 氧的熄灭作用 氧分子是荧光、磷光的熄灭剂，
1
3
M O 2 3 M* 3 O 2
*
3
k1
没有除氧，溶液中 难以观察到磷光
M* 3 M* 3 (M*M) 2M kT
4. 自熄灭与自吸收 当荧光物质的浓度大于1g/L时，常发生荧光的自熄灭(浓度熄灭) 自吸收：
15
3. 荧光(磷光)的量子产率
荧光量子产率的定义： (p91)
发射荧光的分子数 F 激发分子总数
发射磷光的分子数 P 激发分子总数
F
kF k F ki
i 1 n
P st
kP k P ki
i 1 n
kF、 kp主要取决与荧光物质的分子结构； st系间窜跃效率。 ki主要取决化学环境，同时也与荧光物质的分子结构有关。 大多数的荧光物质的量子产率在0.1~1之间； 例如：0.05mol/L的硫酸喹啉，F=0.55； 荧光素 F=1 化合物
MDM2基因扩增检测试剂盒（荧光原位杂交法）说明书
MDM2基因扩增检测试剂盒（荧光原位杂交法）说明书【产品名称】通用名称：MDM2基因扩增检测试剂盒（荧光原位杂交法）英文名称：FISH detection Kit for the amplification of MDM2 gene【包装规格】10人份/盒、20人份/盒【预期用途】本产品用于检测福尔马林固定、石蜡包埋人脂肪肉瘤组织样本中的MDM2基因扩增情况[1,2]。
【检验原理】荧光原位杂交法（Fluorescent In Situ Hybridization，FISH）能够使细胞中特定的核苷酸片段通过荧光而清楚的呈现，FISH试验过程中包含了双链DNA的解链，荧光标记的DNA探针能够与目标序列结合[2-3]。
杂交完成之后，多余的探针被清洗掉，同时，细胞核被复染剂4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色会发出蓝色的荧光。
本试剂盒包含一组探针：MDM2(红色)位点和CEP12（绿色）位点及DAPI复染剂。
正常细胞信号方式：每个细胞显示两个绿色信号及两个红色信号。
异常细胞信号方式：细胞中若出现三个及以上红色信号且绿色信号不小于两个。
【主要组成成分】MDM2 /CEP12探针及DAPI于-20℃避光、密封储存；不应与有毒、有污染和有不良气味的物品混存；开封后，探针及DAPI 24小时内可在2-8℃避光、密封储存；24小时内不能使用完的，请放置于-20℃±5℃避光、密封储存；自生产之日起有效期为一年。
【适用仪器】本试剂盒探针杂交需在杂交仪上进行杂交，如ThermoBrite。
本试剂盒探针需在荧光显微镜下观察并分析结果。
所需荧光显微镜的配置包括：物镜：在FISH分析上，使用100×消色差浸油类型物镜可取得满意效果。
镜油：在浸油式物镜上使用的镜油应为低水平自发荧光配方，并专门在荧光显微镜上使用。
滤光片：建议客户处客使用探针前向滤片组供应商了解所使用的滤片组的详细情况，以便选择与标记荧光染料相适应的滤片组。
12种酚类液相检测条件
12种酚类液相检测条件一、单一酚类酚类是一类常见有机化合物，可以广泛应用于医药、化工、能源等领域。
为了保证酚类产品的质量，液相检测是不可或缺的方法之一。
以下是12种常见的酚类液相检测条件，按照不同的类别划分。
1. 酞菁蓝法酞菁蓝法主要用于对单一酚类的分析。
该方法在环境保护、化学制品等领域具有广泛应用。
样品采用酸化处理后加入氧化剂，再加入酞菁蓝酸钠作为指示剂，通过比色法测量样品中的酚类含量。
2. 铁氧化法铁氧化法可用于单一酚类的检测，该方法基于酚类物质的氧化反应。
反应条件包括酸性环境、氧化剂和铁离子的存在。
酚类在该条件下发生氧化反应，生成带有荧光的化合物，进而测定酚类的含量。
3. 液液萃取法液液萃取法是一种简单有效的单一酚类检测方法。
该方法通过样品的提取与浓缩，将酚类物质分离出来，进而对其进行检测。
液液萃取法通常采用非极性有机溶剂作为提取剂，结合前处理工艺，能够有效地提高样品的精度和准确度。
二、二元酚类二元酚类是两种以上酚类化合物的混合物，液相检测的方法与单一酚类有所不同。
4. 外斯曼试剂法外斯曼试剂法可以有效地检测二元酚类，其基本原理是二元酚类在碱性条件下与外斯曼试剂反应，生成带有颜色的复合物。
通过比色测量样品的吸光度，即可计算出二元酚类的含量。
5. 紫外吸收法紫外吸收法是一种简便实用的二元酚类检测方法。
该方法基于二元酚类的紫外吸收性质。
在波长280nm以下，酚类物质的吸光度与浓度呈线性关系，可以通过光谱测量法测定样品中的二元酚类含量。
6. LC-MS/MS法LC-MS/MS法是现代分析技术中最为先进的二元酚类检测方法之一。
该方法结合高效液相色谱技术和质谱技术，能够高效地分离和检测酚类混合物中不同成分的含量。
该方法具有灵敏度高、准确性好等优点。
三、多元酚类多元酚类是三种以上酚类化合物的混合物，液相检测的方法又有所不同。
7. 气相色谱-质谱法气相色谱-质谱法是一种基于LRMS和HRMS等的多元酚类检测方法。
吖啶橙_十二烷基苯磺酸钠_有机磷农药体系的荧光反应及分析应用
摘 要 : 在 pH 6. 20 的 KH2 PO42Na2 HPO4 缓冲溶液中 , 吖啶橙 (AO) 与一定浓度 的十二烷基苯磺酸 ( SDBS) 发生荧光增强反应 , 当在该体系中加入有机磷农药 后 , 在 λex = 494 nm 处荧光强度明显下降 , 其降低程度与有机磷农药的加入量 呈良好的线性关系 , 线性范围和检出限分别为 01020～0128 mgΠL 、01020 mgΠL 。 据此建立了测定有机磷农药残留总量的新方法 。该方法用于大米和土壤中有机 磷农药残留总量的检测 , 回收率在 9211 %～9618 %之间 , RSD 在 218 %～413 % 之间 。 关键词 : 吖啶橙 ; 十二烷基苯磺酸钠 ; 有机磷农药残留总量
的荧光强度略有增加 (曲线 2′、3′) , 这是由于 AO 与 phoxim 络合 , 使其共轭体系变大 , 离域π电子 较易激发 ; 当在 AO 溶液中加入一定浓度的 SDBS 后 , 荧光强度明显增大 ( 曲线 4′) , 且 λex 红移至
494 nm , 再加入不同浓度的 phoxim 后 , 发现荧光强 度显著降低 (曲线 5′、6′) , 且荧光降低的程度与 phoxim 浓 度 在 一 定 范 围 内 成 正 比 , 因 此 可 用 于 phoxim 的测定 。关于实验机理 , 作者认为 : AO 在 溶液中以发荧光的单体和不发荧光的二聚体形式 存在 , SDBS 的加入使 AO 二聚体更多的向单体转 化 , 因此荧光强度增大 。而加入 phoxim 后 , 三者相 互作用生成了不发荧光的三元聚合物 AO2SDBS2 phoxim , 降低了 AO 单体的浓度 , 因此总体荧光强 度呈下降趋势 。
分子荧光分光光度法实验技术
标准样品设置
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待测样品设置
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空白校零
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开始测定
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重新计算
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九、荧光光度计使用注意事项：
1、比色皿使用之前应清洗干净。若比色皿很脏， 清洗方法为：先将比色皿置于铬酸洗液中浸泡半 小时左右，再用蒸馏水洗净，凉干留用。
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一、荧光分析法
物质的基态分子受一激发光源的照 射，被激发至激发态后，在返回基态时， 发射出与吸收光波长相等或较长的荧光。 若物质分子用X射线或红外光激发，则分 别产生X射线荧光或外光荧光。
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一、荧光分析法
通常所指的分子荧光是指紫外-可见光 荧光，即利用某些物质受到紫外光照射后， 发射出比吸收的紫外光波长相等或更长的 紫外荧光或可见荧光，通过测定物质分子 产生的荧光强度进行分析的方法称为荧光 分析。
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七、荧光分光度计的性能
可检测荧光、磷光及生物发光 扫描速度快，可达24000 nm/分，数据采
集速率达80次/秒 波长范围：190-1100 nm 光谱带宽：1.5、2.5、5、10和20 nm五档
切换 具有液体池和固体池，并具有自动控温设备。
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5、罩上仪器罩，打扫室内卫生，并在仪器使用登 记本上填写使用记录。
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操作软件包
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定性分析操作
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预扫描
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【干货】12个样品前处理要求
【干货】12个样品前处理要求以下的十二种样品前处理方法便是你实验过程中经常会用到的！1、核磁共振波谱仪（1）送检样品纯度一般应>95%，无铁屑、灰尘、滤纸毛等杂质。
一般有机物须提供的样品量：1H谱>5mg，13C谱>15mg，对聚合物所需的样品量应适当增加。
（2）本仪器配置仅能进行液体样品分析，要求样品在某种氘代溶剂中有良好的溶解性能，进样前应先选好所用溶剂。
常备的氘代溶剂有氯仿、重水、甲醇、丙酮、DMSO、苯、邻二氯苯、乙腈、吡啶、醋酸、三氟乙酸。
（3）检测前尽量提供样品的可能结构或来源。
如有特殊要求请说明（如，检测温度、谱宽等）。
2、红外光谱仪为了保护仪器和保证样品红外谱图的质量，本仪器分析的样品，必须做到：（1）预先纯化，以保证有足够的纯度；（2）预先除水干燥，避免损坏仪器，同时避免水峰对样品谱图的干扰；（3）易潮解的样品，请用户自备干燥器放置；（4）易挥发、升华、对热不稳定的样品，请用带密封盖或塞子的容器盛装并盖紧，同时必须在样品分析任务单上注明；（5）有毒性和腐蚀性的样品，必须用密封容器装好。
并且必须分别在样品瓶标签的明显位置和分析任务单上注明。
3.气相色谱-质谱联用仪气相色谱仪均使用毛细管柱（不能使用填充柱）。
进入气相色谱的样品，必须在色谱柱的工作温度范围内能够完全汽化。
4、液相色谱-质谱联用仪（1）易燃、易爆、毒害、腐蚀性样品必须注明。
（2）为确保分析结果准确、可靠，要求样品完全溶解，不得有机械杂质；未配成溶液的样品请注明溶剂，已配成溶液的样品请标明浓度。
（3）请尽可能提供样品的结构式、分子量或所含官能团，以便选择电离方式；如有特殊要求者，请提供具体实验条件。
（4）液相色谱–质谱联用时，所有缓冲体系一律用易挥发性缓冲剂，如乙酸、醋酸铵、氢氧化四丁基铵等配成。
凡要求定量分析者请提供标准对照品。
.5、紫外-可见吸收光谱仪（1）样品溶液的浓度必须适当，且必须清澈透明，不能有气泡或悬浮物质存在；（2）固体样品量>0.2g，液体样品量>2mL。
12分析化学第十二章分析化学中的常用分离方法
第十二章 定量分析中的分离方法 (1~2学时)在络合滴定一章中讨论过用掩蔽方法消除干扰问题。
在实际工作中，单用掩蔽的方法有时难以消除干扰离子的影响，此时，需要选用适当的分离方法使待测组分与干扰组分分离；对于微量或痕量组分的测定，常需要富集后才能测定。
对于常量组分的分离和痕量组分的富集，总的要求是分离、富集要完全，即待测组分回收率要符合一定的要求。
对于含量大于1％的常量组分，回收率应接近100％；对于痕量组分，回收率可在90~110％之间，在有的情况下，例如待测组分的含量太低时，回收率在80~120％之间亦属符合要求。
§12-1 沉淀分离法沉淀分离法是利用反应使待测组分与干扰离子分离的方法。
常用的沉淀分离方法有：1 氢氧化物沉淀分离法使离子形成氢氧化物沉淀[如Fe(OH)3等]或含水氧化物(如SiO 2·H 2O 等)。
常用的沉淀剂有NaOH 、氨水、ZnO 等。
⑴ NaOH 溶液：通常用它可控制pH 值≥12，常用于两性金属离子和非两性金属离子的分离。
⑵ 氨和氯化铵缓冲溶液：它可将pH 值控制在9左右，常用来沉淀不与NH 3形成络离子的许多种金属离子，亦可使许多两性金属离子沉淀成氢氧化物沉淀。
⑶ 利用难溶化合物的悬浮液来控制pH 值：例如ZnO 悬浮液就是较常用的一种，ZnO 在水中具有下列平衡：ZnO + H 2OZn(OH)2 Zn 2+ + 2 OH －[Zn 2+][OH －]2 = Ksp [OH －]= ][2+Zn K sp当加ZnO 悬浮液于酸性溶液中，ZnO 溶解而使[OH －]达一定值时，溶液pH 值就为一定的数值。
例如[Zn 2+]=0.l mol ·L －1时，[OH －]= =1.1×10－61.0102.117-⨯而当[Zn 2+]改变时，pH 值的改变极其缓慢。
一般讲，利用ZnO 悬浮液，可把溶液的pH 值控制在5.5~6.5。
荧光定量PCR(qPCR)对基因表达的分析
荧光定量PCR（qPCR）对基因表达的分析一、实验试剂SYBR Green premix（Takara，RR420A）二、试验设备和材料无RNase的离心管、PCR管、枪头。
三、操作步骤（一）引物设计原则（1）设计引物的长度一般为18–28个核苷酸。
（2）扩增产物长度80-150 bp最好，最长是300 bp。
（3）避免重复核苷酸延伸段。
（4）目标为50% GC含量，有助于防止错配稳定化。
（5）选择Tm值匹配的引物（相差在5°C范围内），60℃左右最好。
（6）避免一个Assay中采用的所有引物之间以及各引物内出现序列互补。
（二）总RNA提取（TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit，9767）准备工作：Buffer RL中加入50×DTT；Buffer RWB中加入无水乙醇；配制70%DEPC乙醇。
1. 动物培养细胞的 RNA 提取（1）细胞的裂解。
①倒出培养液，使用 1×PBS清洗一次。
②向培养细胞中加入适当量（Table 1 中推荐的使用量）的裂解 Buffer RL（使用前请确认已加入 50×DTT Solution），水平放置片刻，使裂解液均匀分布于细胞表面并裂解细胞，然后使用移液枪吹打细胞使其脱落。
（6 孔细胞培养板每孔加入 350μL）③将内含细胞的裂解液转移至离心管中，用移液枪反复吹吸直至裂解液中无明显沉淀。
（2）裂解液室温静置2 min。
注：对于基因组含量较多的材料或者材料起始量较大时，可以直接按步骤 7 进行（否则 DNA 含量过高可能造成 gDNA Eraser Spin Column 堵塞），如基因组含量较低或材料起始量较少时，可以按步骤 3-6 进行。
（3）将gDNA Eraser Spin Column放到2 mL 的Collection Tube（试剂盒提供）上。
（4）将裂解液转移入到gDNA Eraser Spin Column中。