LC-MS法测定水产品药物残留试验中减少基质干扰问题的方法探讨
关注水产品质量安全,选择准确、高效、便捷的水产品兽药残留检测方法
摘要水产品质量安全直接关乎我国从传统渔业向生态渔业转变进程，为促进我国渔业经济可持续发展，需要重视水产品兽药残留检测问题。
为此，笔者结合自身工作经验，概述了我国水产品中兽药残留的现状；简述了水产品中兽药残留检测的前处理和检测分析方法；展望了我国水产品中兽药残留检测技术发展的目标。
1.背景水产品养殖过程中常用的投入品主要包括鱼苗、饲料、兽药、运输和捕捞用具等，其中药物包括环境改良剂（如生石灰、沸石等）、消毒剂（氯化钠、高锰酸钾等）、抗氧化剂（柠檬酸）、营养剂（牛磺酸）、杀虫驱虫剂（氯化铜、硫酸铜等）、抗微生物药品（青霉素、诺氟沙星等）、代谢改善药物（V A、V C）、免疫激活剂（葡聚糖）等。
根据我国相关规定，氟苯尼考、孔雀石绿、氯霉素、磺胺类等为水产品养殖禁（限）用药物。
关注水产品兽药残留检测可以提高水产品质量安全，促进我国生态渔业健康发展。
2.水产品中兽药残留现状我国每年会开展一次较大规模的水产品药残监控抽检活动，2019年上半年检测合格率为99.3%，硝基呋喃类代谢物和孔雀石绿合格率分别为为99.7%和99.5%，其余药物未检测到，禁用药品主要集中在鳜（超标率12%）、虹鳟、斑点叉尾鮰、鲤、草鱼、鲶和鲫7种水产品。
2020年，北京、山西等产地水产品兽药残留合格率为100%，但其余地区仍存在氧氟沙星、硝基呋喃类代谢物、氯霉素、诺氟沙星和孔雀石绿5 项指标超标。
2021年我国通过随机抽检的方法对上千余种水产养殖产品进行安全隐患排查，各地区根据水产品产出和经营状况开展专项整治活动，确保水产品质量安全。
3.水产品中兽药残留检测方法3.1 水产品中兽药残留检测的前处理方法我国水产品种类繁多，涉及的药物品类多，由于水产品组分多元、基质多样，且兽药残留可检测的水平含量较低，必须通过分离、提取、萃取等方法对待检水产品进行前处理，才能提高检测的准确率。
兽药残留检测前处理方法多样，如振荡萃取（OE）、超声波萃取（UE）、固相萃取（SPE）、超临界流体萃取（SFE）和QuEChERS 技术等。
液相色谱-串联质谱法测定水产品中酰胺醇类药物及其代谢物残留
液相色谱-串联质谱法测定水产品中酰胺醇类药物及其代谢物残留目的：基于标准GB31658.20-2022，优化液质测定水产品中酰胺醇类药物的前处理步骤，补充该标准的适用范围。
方法：搅碎混匀的鱼肉试样，经过不同提取液、净化液以及定容液，得到18组实验结果，内标法定量，确定最佳组合，进行方法验证。
结果：在优化前处理条件后氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺的线性范围为0.10～100ng/mL，相关系数均大于0.998，方法的回收率为83.1%～103.6%，相对标准偏差在0.66%～4.89%。
结论：本方法可为标准GB31658.20-2022的适用范围补充提供参考依据，适用于水产品中酰胺醇类药物及其代谢物残留量的测定。
关键词：酰胺醇类药物；液相色谱串联质谱；水产品；前处理优化酰胺醇类药物又称氯霉素类抗生素，是一类在兽医临床上用于治疗畜禽以及水产动物细菌性疾病的广谱抗生素，主要包括氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考。
氯霉素和甲砜霉素在兽医临床抗感染的治疗中发挥了重要作用，但近年来，随着公众对其潜在毒性，残留和耐药性的广泛关注，许多国家陆续禁止了它们在兽医临床上的使用，以及禁用于食源性动物，氟苯尼考逐渐成为氯霉素和甲砜霉素的替代品[1,2]。
酰胺醇类药物常见的检验方法有ELISA，HPLC，GC，GC-MS[3]，LC-MS/MS等等，ELISA具有半定量，假阳性概率，LC，GC无法提供结构确证，干扰物质较多，定性不够准确，GC-MS，GC-MS/MS需衍生，前处理较繁琐，进样时间长，定量不够准确，LC-MS/MS快速，简便，定性定量准确，灵敏度高。
氟苯尼考在动物体内有多种代谢产物，但大部分以氟苯尼考和氟苯尼考胺的形式存在，因此部分国家规定氟苯尼考的标志残留物为氟苯尼考和氟苯尼考胺之和[4,5]。
氟苯尼考胺是氟苯尼考在动物体内的代谢物，农业部235号公告将氟苯尼考胺作为标志残留物计算氟苯尼考残留量，氟苯尼考残留量是以氟苯尼考胺和氟苯尼考残留总量计在欧盟(EU)No37/2010号法规中也有规定，另外，氟苯尼考残留标志物在GB31650中规定为氟苯尼考和氟苯尼考胺之和。
液相色谱——串联质谱法
液相色谱——串联质谱法液相色谱——串联质谱法1. 概述液相色谱——串联质谱法（LC-MS）是一种用于快速鉴定和定量分析大量小分子物质和链状有机化合物的一种惰性重排技术。
这种技术通过将液相色谱和质谱两大仪器技术的优越性能有机结合，实现了液体中微量物质的快速鉴定、分离和测定。
这套技术比单独使用液相色谱成像分析，可以提高检测限下限，解决液相色谱分离后质谱加速定性分析的问题，因而更加实用。
2. 技术原理LC-MS系统由液相色谱分离柱，检测装置，与两个机构负责操纵液相色谱组分提取等主要部件组成。
样品分离和分析步骤就是将样品溶解在适当的溶剂中，经液相色谱－质谱就可以分析出单分子组分的物化性质和表观分子量，以及细微程度的组成差别。
检测装置实现了LC-MS连续启动程序，得到样品组分的全谱图谱，获取检测信息，实现LS-MS技术的数据处理，实现样品鉴别，定量计算，同时获取实时的检测数据，保证检测的准确性和准确度。
3. 优势（1）具备高敏感性和低检出限，可以检测非常稀少的物质，提高检测的灵敏度。
（2）可以实现快速和自动化操作，大大提高测定速度。
（3）LC-MS能实现样品分离前质谱加速定性分析、消除高纯度物质混杂分离困难、采样测定对比分析等特点，从而提高检索精确度和结果准确度。
（4）结合液相色谱分离和双离子检测质谱技术，可以自动化连续运行，来自动调整参数实现高灵敏度测定和高分辨率分离。
4. 应用领域LC-MS主要用于有机物、抗生素、毒素、毒物、化合物的研究以及在生物信息学和医学方面的研究等。
当前有机物、抗生素、毒素、毒物在药物研究、毒理、环境污染检测和药物开发等领域都有广泛的应用，以及药剂学、兽医学、分子毒理学和菌类学领域的研究。
5. 结论液相色谱——串联质谱法（LC-MS）是一种结合液相色谱和质谱技术，可以用于鉴定薄分子物质和链状有机化合物的惰性重排技术。
该技术可以飞快地连续运行，自动调整参数，从而实现了高灵敏度测定和高分辨率分离，同时也可以检测非常稀少的物质，具有广泛的应用领域。
2024年水产品药物残留检测方案
2024年水产品药物残留检测方案一、背景水产品药物残留是指水产品中存在超过国家或地区安全标准规定的药物残留物质。
药物残留是目前水产品安全面临的重要问题之一，不仅对消费者健康构成潜在威胁，也对水产品出口造成贸易壁垒。
因此，建立科学且可行的水产品药物残留检测方案是非常必要的。
二、目标本方案旨在建立一套全面、准确、高效的水产品药物残留检测方案，确保水产品的药物残留水平符合相关标准，提升水产品的安全性和市场竞争力。
三、方法1. 采样根据水产品不同类型、来源和生长环境的不同特点，确定有代表性的采样点，并按照规定的采样方案进行采样，确保样品的代表性和可比性。
2. 样品前处理对采集回来的水产品样品进行前处理，包括去除杂质、加工处理以及样品的粉碎、挤压等操作，以获得适合药物残留检测的样品。
3. 样品提取采用适当方法将样品中的药物残留物质提取出来。
可以根据药物的性质，采用不同的提取方法，如溶剂提取、固相微萃取等。
4. 分离与纯化根据不同的药物残留物质，采用适当的色谱技术对样品进行分离与纯化。
例如，可以使用气相色谱、液相色谱等技术。
5. 检测与定量采用合适的检测技术对样品中的药物残留物质进行检测与定量。
常用的检测技术包括高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS/MS)、气相色谱-质谱联用技术(GC-MS/MS)等。
6. 数据分析与处理对检测所得数据进行统计分析和处理，计算得到水产品中不同药物残留物质的含量和含量分布情况，并将结果与国家或地区相关标准进行比较，判定样品的合格与否。
四、考虑因素1. 国家或地区标准根据国家或地区制定的相关标准，确定药物残留物质的限量要求和检测方法。
2. 技术条件根据当前的检测技术和设备，选择合适的方法和手段进行药物残留检测。
3. 数据分析与处理建立合理的数据分析与处理方法，保证检测结果的准确性和可靠性。
4. 资源投入考虑到人力、物力和财力等方面的资源投入，确保检测方案的实施和运行。
五、预期效果通过建立全面、准确、高效的水产品药物残留检测方案，可以实现以下效果：1. 提高水产品的安全性和质量，保护消费者的健康权益。
农残分析检测中的基质效应及消除
农残分析检测中的基质效应及消除
基质效应是指在农残分析检测中，样品基质所引起的误差或干扰。
基质效应的存在可
能会影响到分析结果的准确性和可靠性。
在农残分析检测中，需要采取措施来消除基质效应，从而得到准确可靠的检测结果。
基质效应常常来自样品基质中存在的物质，如蔬菜、水果等农产品中的糖类、脂肪类、蛋白质等。
这些物质与待测农药或农残分析中的目标化合物可能产生相互作用，从而影响
到分析结果。
一种常用的消除基质效应的方法是样品前处理，即通过提取、净化等手段将基质中的
干扰物质进行去除或稀释。
可以使用溶剂提取的方法将农产品中的农药残留物质提取出来，然后通过蒸发或其他手段将干扰物质去除，最终得到纯净的样品溶液进行分析。
另一种常用的消除基质效应的方法是使用内标物质进行校正。
内标物质是与目标化合
物相似的化合物，在样品中添加一定浓度的内标物质后，可以通过测定内标物质的峰面积
或峰高与目标化合物的峰面积或峰高的比值来校正基质效应。
这种方法可以有效地减小基
质效应的影响，提高分析结果的准确性。
选择合适的分析方法也可以减小基质效应的影响。
可以选用色谱柱、色谱条件和检测
器等，以尽量减小基质和目标化合物的相互作用，提高分析的选择性和灵敏度。
在农残分析检测中，基质效应是一个需要注意和解决的问题。
通过适当的样品前处理、使用内标物质和选择合适的分析方法等措施，可以有效地消除基质效应，得到准确可靠的
分析结果。
农残分析检测中的基质效应及消除
农残分析检测中的基质效应及消除随着人们对食品安全的重视程度不断提高，农残分析检测逐渐成为农业生产和食品加工领域的重要环节。
在农残分析检测中，基质效应是一个重要的概念，对于准确检测农产品中的农药残留量具有重要意义。
本文将从基质效应的概念、基质效应对农残检测的影响以及基质效应的消除方法等方面进行探讨。
一、基质效应的概念基质效应是指基质（即样品本身的组成成分）对分析结果产生的影响。
在农残分析检测中，样品的基质效应主要表现为两个方面：一是对待检农药的提取效果产生影响，导致部分农药难以完全提取；二是对检测方法的准确性产生影响，导致检测结果出现误差。
基质效应的产生主要与样品的物理、化学性质相关，比如样品的成分复杂性、含水量、pH值等因素。
不同类型的农产品样品由于其特有的基质效应特点，需要针对性地制定检测方法和消除基质效应的措施。
二、基质效应对农残检测的影响基质效应对农残检测的影响主要体现在两个方面：一是降低了检测的灵敏度，使得部分农药的残留量难以被准确检测；二是导致检测结果出现误差，影响了检测的准确性和可靠性。
对于一些特殊的农产品样品，比如高脂肪、高糖、高酸、高水分等样品，基质效应尤为明显。
在这些样品中，某些农药的残留量可能被掩盖，甚至无法被检测出来，给食品安全带来一定的隐患。
基质效应还可能导致检测结果的误差增大，从而影响检测结果的准确性和可靠性。
这对食品加工企业的质量控制和监管部门的食品安全监测都带来了一定的挑战。
为了准确检测农产品中的农药残留量，消除样品基质效应是非常必要的。
目前主要的消除基质效应的方法包括样品前处理、检测方法优化和内标法等。
1. 样品前处理样品前处理是消除基质效应的重要手段之一。
通过对样品的提取、净化和浓缩等处理过程，可以有效地消除基质效应带来的影响。
常用的样品前处理方法包括固相萃取、液液萃取、凝胶过滤、离子交换树脂吸附、超声波提取等。
通过选择适合样品特性的前处理方法，能够有效地提高样品中农药残留的提取率，降低基质效应的影响。
水产品兽药残留检测技术
水产品兽药残留检测样品前处理技术
2、提取方法 均浆提取法；震荡法；索氏提取法（考虑热 稳定性，适合水分少如饲料样品，水产品组 织要和海砂或无水硫酸钠一起研磨成干粉）； 超声波提取（SAE，空化作用，增加溶解， 时间不能长，发热）；超临界流体萃取 （SFE），强化溶剂萃取（ASE）和微波辅 助萃取（MAE）
1、提取溶剂的选择
乙腈，甲醇，丙酮与样品容易结合，溶剂化作用和 渗透能力强，粘度小，提取速度快，能使结合态的 药物释放，提取的同时脱蛋白脱脂，PH值可调，待 测物分布均匀。但提取的杂质较多，进一步萃取乳 化严重，效果相似，甲醇提取液的杂质最高。“万 能溶剂”DMSO沸点高极少用。 在酯溶性的残留物中，采用非水溶性极性溶剂，乙 酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙醚。 加无水硫酸钠，盐析提高回收率。干样（含水小 10%）加水增强提取。
内标工作方式：
在每个样品、标准和空白中加入 测定到每个样品中内标的响应 根据实际测定内标响应值与预期内标响应值的比值 来校正其他化合物的信号 用分析信号和内标的比作标准曲线或乘校正因子或 除内标回收率 计算未知样品的分析信号和内标的比值并从标准曲 线中读出信号
建立液质定量分析方法 3、内标选择
水产品兽药残留检测样品前处理技术 3、净化方法
固相萃取（SPE）
采用固相萃取小柱作为分离媒介，小柱中添加了不 同填料的固定相，以键合硅胶为基质的C18、NH2、 COOH、PSA、SAX等，是硅胶的表面活性大为降 低，最大程度的降低了极性化合物的不可吸附和拖 尾，使样品回收率和重现性得到保障；以高分子聚 合物为基质的如PEP、HXN、PAX、PCX等，具 有高纯度、高比表面的特点；以吸附型填料为固定 相的如硅酸镁、氧化铝等，主要通过表面的极性吸 附达到分离的目的。因此，固相萃取法适用于各种 极性的化合物
液相色谱质谱基质效应
液相色谱质谱基质效应
液相色谱-质谱（LC-MS）是一种分析化学技术，广泛用于复杂样品中各组分的分离和定量。
在这个过程中，"基质效应"是一个重要的考虑因素，它可能影响分析的准确性和可靠性。
基质效应通常指的是样品基质成分对分析物信号的增强或抑制。
在液相色谱-质谱分析中，基质效应主要由样品矩阵中的其他成分（如蛋白质、盐、脂质等）引起。
这些成分可能与分析物竞争电离源中的离子化，从而影响分析物的检测。
1.信号抑制：这是最常见的基质效应，其中基质成分
干扰或抑制了分析物的离子化，导致检测信号降
低。
2.信号增强：在某些情况下，基质组分可以促进分析
物的离子化，从而增强信号。
3.离子抑制/增强的机制：这种效应可能是由于电离源
中的空间竞争、电荷竞争或化学反应（如离子对形
成或酸碱反应）。
4.影响因素：基质效应的程度可能取决于多种因素，
如样品的复杂性、制备方法、分析物的性质、使用
的离子化技术等。
为了减少基质效应的影响，科学家们采用了多种策略，如改进样品准备方法（如固相萃取），优化色谱条件以更好地分离分析物和干扰物，以及使用内标物进行校正。
理解并控制基质效应对于确保液相色谱-质谱分析的准确性和重复性至关重要。
水产品中七种药物残留检测技术研究
2020，29（6）福建分析测试Fujian Analysis &Testing水产品中七种药物残留检测技术研究陈彬，慕妮，施炎炎，丁红梅，陈丹丹*（南通市食品药品监督检验中心，江苏南通226006）收稿日期：2020-7-2基金项目：南通市科技局科技项目（项目编号：JC2019053）作者简介：陈彬（1978—），男，高级工程师，从事食品药物残留检测技术研究.Email ：*************通讯作者：陈丹丹（1986—），女，工程硕士/工程师，主要从事食品安全检验工作，E-mail:**************。
摘要：建立采用LC/MS/MS 同时测定水产品中7种药物残留的方法，主要为AOZ 、AMOZ 、SEM 、AHD 、克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇。
色谱条件为：色谱柱Zorbax XDB-C18，流动相0.3%乙酸水溶液-0.3%乙酸乙腈溶液，采用梯度洗脱，流速250μL/min ，柱温35℃。
质谱条件：扫描方式正、负离子扫描；采用电喷雾离子源，离子源温度350℃；喷雾电压4200V ；雾化气压力35psi ；离子扫描气体压力0psi ；辅助气压力8psi 。
7种组分在0.5μg/L ～8μg/L 浓度范围内线性关系良好（r=0.9990～0.9999），加标回收率在90.0%～110.0%之间，相对标准偏差均低于5.0%。
此方法可以用于同时检测水产品中七种药物残留。
关键词：LC/MS/MS ；水产品；药物残留；同时检测中图分类号：O657.72文献标识码：A文章编号：1009-8143（2020）06-0027-07Doi:10.3969/j.issn.1009-8143.2020.06.05Study on the Detection Technology of Seven Drug Residues in Aquatic ProductsChen Bin ，Mu Ni ，Shi Yan-yan ，Ding Hong-Mei ，Chen Dan-dan *（Natong Food and Drug Supervision and Inspection Center ，Nantong ，Jiangsu 226006，China ）Abstract:Objective ：Simultaneous determination of seven drug residues in aquatic products by LC/MS/MS （AOZ ，AMOZ ，SEM ，AHD ，clenbuterol ，lexopamine ，albuterol ）.Methods ：The column was separated by a column of Zorbax XDB-C18，eluted with 0.3%acetic acid aqueous solution-0.3%acetic acid in acetonitrile ，Gradient elution.The flow rate was 250μL /min and the column temperature was 35℃.Using electrospray ion source ；scanning method ：positive and negative ionscanning ；Spray voltage ：4200V ；atomization gas pressure ：35psi ；ion Sweep Gas Pressure ：0psi ；auxiliary air pressure ：8psi ；ion source temperature ：350℃.Results ：The linear relationship is good （R=0.9990~0.9999），and the recoveries were between 90.0%and 110.0，and the relative standard deviations were less than 5.0%in the range of 0.5~8μg /L.Conclu⁃sion ：This method can be used to simultaneously detect seven drug residues in aquatic products.Key words ：LC/MS/MS ；Aquatic products ；Drug residue ；Simultaneous detection1引言食品安全是当前社会关注的焦点，水产品作为人们日常饮食重要组成部分，其产品质量备受关注。
LC-MS在药物分析中的应用
LC-MS 在药物分析中的应用与进展摘要：液相色谱-质谱联用技术结合了色谱、质谱两者的优点,将色谱的高分离性能和质谱的高鉴别特点相结合,组成了较完美的现代分析技术［1］。
随着液相色谱-质谱接口技术的不断完善,液质联用技术将在药物分析中占据越来越重要的地位。
本文主要介绍近年来液相色谱-质谱/串联质谱联用技术等在药物分析中的应用,包括体内药物分析，天然药物分析，水果蔬菜等农产品药物残留的分析等研究领域，展示了它的发展前景。
关键词：LC-MS；体内药物分析；天然药物分析；农药残留正文：1.LC-MS在体内药物分析的应用与进展体内药物分析即药物在体内代谢过程中质和量的变化，包括药物分子在生物系统内的吸收，分布，代谢和排泄（ADME）。
这些因素决定了药物在体内能否以适当的浓度到达目标位置，并停留一定时间，从而使药物的疗效得以发挥。
这就需要一项分析技术对药物在体内的变化进行精确的分析，HPLC-MS的成功联用，显著地扩展了质谱在药物代谢和药代动力学中的应用范围。
目前，液质联用技术已成为体内药物分析的核心分析技术。
申颖，庄笑梅等［2］建立LC/MS/MS方法,定量检测家兔血浆和房水中咪哒酚衍生物浓度,并用于家兔给予咪哒酚衍生物滴眼后血浆及房水中药代动力学研究。
采用电喷雾离子化电离源(ESI),选择反应离子监测(SRM)方式进行正离子检测,该方法快速、准确、灵敏度高,专属性好,可用于咪哒酚衍生物在家兔体内的药物代谢动力学研究。
Rafaela Martin & Jennifer Schürenkamp &Heidi Pfeiffer & Helga Köhler ［3］运用液体色谱与串联质谱定量的方法对血浆中二甲-4-羟色胺进行定量分析，样品在进行固相萃取时使用抗坏血酸和氮气进行保护，二甲-4-羟色胺的稳定性在血液储存在不同的温度在各个时期时间进行了实验研究，样品室温下储存显示分析物的不断减少导致的损失一个星期后约90%，储存在冰箱里得到改善样品稳定性显著。
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文献著录格式：贝亦江，李诗言，周凡，等.LC-MS法测定水产品药物残留试验中减少基质干扰问题的方法探讨[J].浙江农业科学, 2017, 58 (6) ： 1016-1019, 1023.DOIE 10. 16178/j. issn. 0528-9017. 20170634
LC-MS法测定水产品药物残留试验中 减少基质干扰问题的方法探讨
HI 却 >卷冰科4 2017年第58卷第6期
贝亦江，李诗言，周凡，柯庆青，郑重莺，王扬(浙江省水产质量检测中心，浙江杭州310023)
摘要：对液相色谱一质谱联用法同时测定水产品中6种磺胺类和2种喹诺酮类药物残留的方法进行改进。 结果显示，在50.0 ixg.kg-1的加标水平下，采用液相色谱一质谱联用法同时测定草鱼和南美白对虾中6种磺胺 类和2种喹诺酮类药物，平均加标回收率为56.5% ~100.0%。通过复溶、冷冻的方法除去蛋白，平均回收率可 提高到67.5% ~101.0%，同时增加定容体积至2 mL，在10.0、30.0、50.0 |xg. kg-1加标水平下，平均回收率 可提高到84% ~ 102%，相对标准偏差为3. 5% ~ 10. 2%。关键词：水产品；药物残留；液相色谱一质谱联用 中图分类号：O657.72 文献标志码：A高效液相色谱一质谱联用现已广泛应用于化学 分析、药物检测、环境和食品安全领域。串联质谱 具有很强的选择性，分析结果可靠，检测灵敏度很 高[1]。样品基质，即分析物以外的组分，常对分 析物有显著干扰，并会影响分析结果的准确性，这 些影响和干扰统称基质效应[2-3]。质谱检测需注意 避免基质效应[4-8]。本研究以高效液相色谱一质谱 联用同时测定水产品中6种磺胺类和2种喹诺酮类 物质为例，说明基质效应对分析结果的影响，为相 关研究提供参考。1材料与方法1.1试验仪器与试剂Agilent 1200 高效液相色谱仪；ABI 4000Q Trap 三重四级杆质谱仪，配电喷雾离子源（ESI); Sartorius2202S 型电子天平；THERMO MEGAFGE11R 高速冷冻离心机；IKA涡旋振汤器；RE-2000B型 旋转蒸发仪。乙酸铵缓冲溶液（5 mmol.L-1)，称取0. 38 g 无水乙酸铵溶于水中，加入1 mL甲酸定容至1 L。 甲醇水溶液，量取200 mL甲醇用水稀释至1L。乙 腈、甲醇、正己烷均为色谱纯；无水硫酸钠，分析 纯，650丈灼烧4 h。磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、基质效应文章编号：0528-9017(2017)06-101644
磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺多辛、磺 胺异噁唑、环丙沙星、恩诺沙星、氘代磺胺邻二甲 氧嘧啶、氘代环丙沙星、氘代恩诺沙星标准品购自 Dr. Ehrenstorfer公司，纯度均在98%以上。
标准储备液。准确称取6种磺胺类标准品和2
种喹诺酮类标准品各10. 0 mg，分别加入到100
mL
容量瓶中，磺胺类标准品用乙腈溶解、喹诺酮类标 准品用甲醇溶解，乙腈稀释定容，得6种磺胺类和 2种喹诺酮类的标准储备液。每种标准品的浓度均
为100. 0 pg.mL-1，- 18丈避光保存（有效期6
个月）。使用时用乙腈稀释成1. 0 ^g.mL-1的工作 液，4丈避光保存（有效期7 d)。
内标储备溶液。准确称取氘代磺胺邻二甲氧嘧 啶、 氘 代 环 丙 沙 星、 氘 代 恩 诺 沙 星 标 准 品 各 10.0 mg，用乙腈和甲醇溶解，乙腈稀释定容，得
同位素内标储备溶液。内标液浓度为100. 0 pg-
mL-1，-18丈避光保存（有效期6个月）。使用
时用乙腈稀释成1.0 Pg.mL-1的工作液，4丈避 光保存（有效期7 d)。
1.2仪器工作条件
色谱条件。Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱 (2. 1 mm X 150 mm，5 pm);柱温 40. 0 T!;进样 量10 ^L;流动相A为乙酸铵缓冲溶液，B为乙
收稿日期：2017-03-09基金项目：浙江省水产品质量安全技术支撑团队项目作者简介：贝亦江（1985—），男，浙江舟山人，硕士，工程师，从事水产品质量安全研究工作，E-mail: zsbij@163. com贝亦江，等：LC-MS法测定水产品药物残留试验中减少基质干扰问题的方法探讨腊，流速300 ^L.min_1。梯度洗脱：0 min,流动 相A 98% ,流动相B 2% ; 5 min,流动相A 83% ,
流动相B 17% ; 10 min,流动相A 52% ,流动相B
48% ; 14 min,流动相 A 45% ,流动相 B 55% ; 14. 1 min,流动相 A 98% ,流动相 B 2% ; 18 min, 流动相A 98% ,流动相B 2%。
质谱条件。电喷雾ESI离子源；离子源温度 550丈；正离子扫描模式；多反应监测MRM模式; 电喷雾电压5 500 V。其他质谱参数见表1。
表1多反应监测模式质谱参数化合物质荷比(m/z)去簇电压/碰撞电压/
母离子子离子VV
横胺嘧啶2511086530156*6524磺胺甲基嘧啶2651726523156*6526磺胺二甲基嘧啶2791867025156*7029
磺胺甲基异噁唑2541086539156*6523磺胺多辛3111086543156*6529
磺胺异噁唑2681086535156*6522恩诺沙星3602458038316*8028环丙沙星3322458034288 *8027氘代磺胺邻二甲氧嘧啶314156*6030氘代环丙沙星340322 *6030氘代恩诺沙星365321 *6030注，表示定量碎片离子。1. 3试验方法
1. 3. 1样品提取称取（5.00 ±0.02) g样品于50 mL离心管 内，加入1.0阳• mL-1混合内标溶液100 ^L、
10 g无水硫酸钠、20 mL乙腈，振荡1 min,超声
10 min, 5 000 r.min-1离心5 min。将上清液转入 100 mL鸡心瓶内，再用10 mL乙腈提取残渣，超
声10 min, 5 000 r.min-1离心5 min,提取液并入 100 mL鸡心瓶。
1.3. 2样品净化
将提取液40.0丈旋转蒸发至干，加入1.0 mL甲 醇水溶液和2.0 mL正己院，振荡1 min，3 000 r •
min-1离心5 min。移去正己院层，再加入2.0 mL正
己烷，同法弃去。过0.22 pm微孔滤膜，上机测试。
1. 3. 3样品测定将混合标准工作液和样品液等体积进样测定，
磺胺类以氘代磺胺邻二甲氧嘧啶为内标，环丙沙星 以氘代环丙沙星为内标，恩诺沙星以氘代恩诺沙星 为内标，内标法定量。用Analyst工作站对数据进 行分析处理。
2结果与分析
2.1标准物质色谱
在仪器工作条件下测定6种磺胺类和2种喹诺 酮类的标准溶液，色谱图见图1。可以看出，色谱 峰型、信号强度均较好，磺胺类的出峰时间为：磺 胺嘧啶8. 19 min，磺胺甲基嘧啶9. 82 min，磺胺二 甲基嘧啶10. 86 min，磺胺甲基异噁哩12. 18 min，
磺胺多辛12. 19 min，磺胺异卩惡唑12. 53 min，环丙 沙星10. 58 min，恩诺沙星10. 99 min。
2. 2方法改进
以草鱼、南美白对虾2种基质作为预处理对 象，样品中添加50.0 pg.kg-1的混合标准溶液,
按照1. 3节所述方法平行处理6份，所得加标回收 率如表2所示。可以看出，虽然采用了同样的试验 方法，但不同基质中同一化合物的加标回收率差异 明显，表明前述方法受到基质效应影响较大。
表2不同基质的加标回收率化合物加标量/(^g- kg-1)草鱼
回收率/%南美白对虾横胺嘧啶50.082.256. 5磺胺甲基嘧啶50.085.264. 9磺胺二甲基嘧啶50.087.468. 6磺胺甲基异噁唑50.090.078. 8磺胺多辛50.0100.096. 2磺胺异噁唑50.095.580. 7环丙沙星50.094.582. 8恩诺沙星50.098. 189.4
2.2.1除蛋白
研究表明，大部分水产品基质中蛋白质含量较 高，乙腈有较强的沉淀蛋白质的能力，同时硫酸钠 的存在亦能促使蛋白质变性分散[910]。在试验过程 中发现，采用前述方法进行试验时，提取液中往往 会出现大量的白色絮状沉淀。另外，由于基质中的 水分含量不尽相同，并非所有样品提取液均可以在 旋转蒸发过程中完全蒸发至干。为此，特采取以下 改进措施：提取液旋转蒸发后，在鸡心瓶中加入 2 mL乙腈复溶，重复2〜3次，用乙腈清洗瓶壁, 洗液全部转入10 mL离心管；将离心管放入 -18丈冰箱冷冻2 h以上，待复溶液中白色絮状 沉淀产生完全后，离心，上清液转入另一10 mL离