血管平滑肌细胞增殖与p21基因启动子甲基化的影响-论文
DNA甲基化与肺癌临床关系研究进展
等Ｉｌ叫应用甲基化特异性ＰＣＲ技术检测到３４／９０例（３７．７８％）
ＮＳＣＬＣ癌组织ＭＧＭＴ基因促进子甲基化，而无肺癌正常肺 组织未检测到ＭＧＭＴ基因促进子甲基化；９０例ＮＳＣＬＣ的
中位生存期是４．３年．而ＭＧＭＴ基因促进子甲基化阳性组中
位生存期仅为２．６年，两组差异显著（Ｐ＝０．０１７）。故认为
有独立的ＣｐＧ岛。ＮＯＲＥｌＡ启动子高甲基化频率在ＮＳＣＬＣ 中为１８％（３门７）。ＮＯＲＥｌＢ在同细胞系中无甲基化现象。原 发ＮＳＣＬＣ标本中２４％（６／２５）有ＮＯＲＥｌＡ甲基化【ｌ引。
３．２．２．２
ＭＧＭＴ促进子甲基化是独立的ＮＳＣＬＣ不利预后因索，是疾
病进展的重要标记物。Ｋｉｋｕｃｈｉｆ２０ｌ等在ｌ ０３例ＮＳＣＬＣ中检测
ＡＰＣ基因
万方数据
中国血液流变学杂志．２００９；１９（１）
１５５
』，肺腺癌表达分化蛋白．１ｆＤＡＬ，１）基因甲基化，结果显示在
肺腺癌中ＤＡＬ．１基因甲基化阳性发生率随肿瘤临床分期的增 高而逐渐增高『Ｉ期１ ３／３６例（３６．Ｉｌ％），Ⅱ期４／１２（３３．３３％）， ⅡＩ期１４／１７（８２．３５％），Ⅳ期３／３（１００％★Ｐ＝０．００２６】。ＤＡＬ．１ 基因甲基化的肺腺癌的元病生存期和总牛存期也显著缩短
基因异常与肺癌的发生密切相关。ＺｉＳｃｈｂａｕｅｒ－ＭＵｌｌｅｒ等”４｜报 道原发性ＮＳＣＬＣ中３７％出现该基因启动子ＣｐＧ岛甲基化，
肺癌细胞系为６５％。经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和免疫组化分析，ＦＨＩＴ 基因甲基化和其ｍＲＮＡ表达及蛋白缺失密切相关。提示
ＦＨＩＴ基因甲基化参与肺癌的形成，并可以作为危险因子检 测的指标。且ＦＨＩＴ基因可能为烟草致肺癌的靶基因，其肩 动子甲基化可能是肺癌的早期分子事件。
NAD+和Nampt与SIRT1的研究进展
NAD+和Nampt与SIRT1的研究进展吴梦然;张红胜【摘要】热量限制可以引起细胞、生物体寿命延长和降低衰老相关疾病的发生.沉默信息调节因子2在酵母和果蝇中已被证实是热量限制引发长寿效果的关键,在哺乳类动物中的名字是沉默信息调节因子1(SIRT1).最近,SIRT1的激活物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)成了研究中心,因为它很可能是连接细胞及生物体的能量代谢和热量限制导致延缓衰老中枢.与NAD+相关的还有NAD+的限速酶尼克酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)和细胞能量调节因子腺苷酸活化蛋白激酶及NAD+下游因子Sir2-相关酶类(sirtuins)家族成员.它们之间的关系研究的最终结果就很可能解释在哺乳类动物中热量限制的奥秘,从而为今后以此为靶点的药物开发奠定良好的基础.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2010(016)007【总页数】4页(P968-971)【关键词】烟酰胺腺嘌呤二核苷酸;腺苷酸活化蛋白激酶;尼克酰胺磷酸核糖转移酶;沉默信息调节因子2;沉默信息调节因子1【作者】吴梦然;张红胜【作者单位】北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒药理室,北京,100124;北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒药理室,北京,100124【正文语种】中文【中图分类】Q291;R346摘要:热量限制可以引起细胞、生物体寿命延长和降低衰老相关疾病的发生。
沉默信息调节因子 2在酵母和果蝇中已被证实是热量限制引发长寿效果的关键,在哺乳类动物中的名字是沉默信息调节因子 1(SIRT1)。
最近,SIRT1的激活物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)成了研究中心,因为它很可能是连接细胞及生物体的能量代谢和热量限制导致延缓衰老中枢。
与NAD+相关的还有NAD+的限速酶尼克酰胺磷酸核糖转移酶 (Nampt)和细胞能量调节因子腺苷酸活化蛋白激酶及NAD+下游因子Sir2-相关酶类(sirtuins)家族成员。
它们之间的关系研究的最终结果就很可能解释在哺乳类动物中热量限制的奥秘,从而为今后以此为靶点的药物开发奠定良好的基础。
Wnt信号通路在动脉粥样硬化及血管钙化中的研究进展
[收稿日期]㊀2020-12-21[修回日期]㊀2021-05-27[基金项目]㊀国家自然科学基金(81770451)[作者简介]㊀李敏,博士研究生,研究方向为血管钙化发病机制,E-mail 为1406593240@㊂通信作者刘乃丰,博士,教授,博士研究生导师,研究方向为血管钙化及动脉粥样硬化发病机制,E-mail 为liunf@㊂[文章编号]㊀1007-3949(2021)29-11-0995-05㊃文献综述㊃Wnt 信号通路在动脉粥样硬化及血管钙化中的研究进展李敏1,2,朱奕1,2,方丽娟1,2,程守全1,2,刘乃丰2(1.东南大学医学院,2.东南大学附属中大医院心血管内科,江苏省南京市210009)[关键词]㊀Wnt 信号通路;㊀心血管疾病;㊀动脉粥样硬化;㊀血管钙化[摘㊀要]㊀Wnt 信号调控胚胎发育过程的多种生物学行为,包括细胞增殖㊁凋亡㊁细胞极性和器官发生,在胚胎发育过程起着重要作用㊂而在成人中,该信号处于沉默状态㊂最近证据表明,Wnt 信号通路在许多生物学过程和疾病中被重新激活,参与代谢㊁炎症㊁肿瘤等疾病的发生,调节骨稳态,促进成骨细胞分化,诱导骨生成,并与动脉粥样硬化和血管钙化的发展进程密切相关㊂本文重点就Wnt 信号通路的激活在内皮功能障碍㊁炎症反应㊁平滑肌细胞增殖及促进动脉粥样硬化和血管钙化等方面的作用进行综述㊂[中图分类号]㊀R543[文献标识码]㊀AResearch progress of Wnt signaling pathway in atherosclerosis and vascular calcificationLI Min 1,2,ZHU Yi 1,2,FANG Lijuan 1,2,CHENG Shouquan 1,2,LIU Naifeng 2(1.School of Medicine ,Southeast University ,Nanjing ,Jiangsu 210009,China ;2.Department of Cardiology ,Zhongda Hospital Affiliated to Southeast University ,Nanjing ,Jiangsu 210009,China )[KEY WORDS ]㊀Wnt signaling pathway;㊀cardiovascular disease;㊀atherosclerosis;㊀vascular calcification[ABSTRACT ]㊀Wnt signaling pathway regulates a variety of biological behaviors during embryonic development,inclu-ding cell proliferation,apoptosis,cell polarity and organogenesis,and plays an important role in embryonic development.In an adult,it is thought to be silent.㊀However,recent evidences show that Wnt signaling is reactivated in many biologi-cal processes and disease.㊀It is involved in metabolism,inflammation,tumor and other diseases.㊀Meanwhile,the signa-ling pathway regulates bone homeostasis,promotes osteoblast differentiation,induces bone formation,and is closely related to the development of atherosclerosis and vascular calcification.㊀This review focuses on the effects of continuous activation of this signaling in endothelial dysfunction,inflammation,smooth muscle cell proliferation,and promotion of atherosclerosis and vascular calcification.1㊀Wnt 信号通路概述Wnt 家族是一组进化保守,由19种基因编码的富含半胱氨酸的分泌型糖蛋白㊂Wnt 基因于1982年由Nusse 等人在小鼠体内发现[1]㊂随后在黑腹果蝇体内发现了同源序列,被正式命名为Wnt 基因[2]㊂Wnt 信号分为经典和非经典两种形式㊂经典的Wnt 信号由Wnt 蛋白控制关键效应因子β-catenin 触发,因此,经典通路亦称为Wnt /β-catenin 信号通路㊂该信号通路的激活主要有三个步骤:Wnt 信号膜内传递㊁细胞质内β-catenin 的稳定和细胞核内Wnt 靶基因的激活[3]㊂当Wnt 信号缺失时,由散粒蛋白(dish evelled,DVL)㊁轴蛋白(axin )㊁腺瘤性结肠息肉病蛋白(adenomatous polyposis coli,APC)㊁糖原合酶激酶3(glycogen syn-thase kinase 3,GSK-3)和酪蛋白激酶1(casein kinase1,CK1)组成的蛋白复合体使β-catenin 磷酸化,磷酸化的β-catenin 被泛素化标记,由蛋白酶体降解,阻止内部信号的传递[4]㊂相反,当Wnt 配体存在时,它与细胞表面的卷曲蛋白(frizzled,FZD)和低密度脂蛋白受体相关蛋白5/6(low-density lipoprotein (LDL)-receptor-related protein 5and 6,LRP5/6)受体结合,招募DVL 和Axin-GSK3β-APC-CK1复合体,抑制β-catenin 磷酸化,导致β-catenin 在细胞质内蓄积并核内转移,随后β-catenin 与T 细胞因子/淋巴细胞增强因子(T-cell factors /lymphoid enhancing factor,TCF /LEF)结合并激活靶基因的表达(图1)[3],如生存素(survivin)㊁胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1)㊁细胞周期蛋白D1(cyclin D1)㊁Runt 相关转录因子2(runt-related tran-scription factor 2,Runx2)㊁原癌基因c-Myc㊁过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-acti-vated receptor delta,PPARδ)以及一些细胞外基质成分[5-6]㊂一些可溶性抑制剂,包括Dickkopf(DKK)㊁可溶性卷曲蛋白(secreted frizzled-related protein,SFRP)㊁卷曲蛋白B 和Wnt 抑制剂蛋白可与FZD㊁LRP5/6结合抑制该信号的传递[5,7]㊂相反,顶板特异性脊椎蛋白(roof plate-specific spondins)和Norrie 疾病蛋白通过与FZD 及共受体LRP5/6的结合,作为典型的Wnt 激动剂[8-9]㊂非经典的Wnt 信号是不依赖于β-catenin 的通路,Wnt 配体可与FZD 受体或受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(receptor tyrosine kinase-like orphan receptor2,ROR2)结合[6],主要有Wnt /Ca 2+依赖途经和平面细胞极性途径(planar cell polarity pathway,PCP)两种(图1)㊂Wnt /Ca 2+途径的激活,G 蛋白(G-protein)作用于磷脂酶C(phospolipase C,PLC)诱导细胞内钙的释放,进而激活钙敏感蛋白 蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和钙/钙调蛋白激酶Ⅱ(calcium and calmodulin dependent kinase Ⅱ,CAMK Ⅱ)㊂这些共效应激酶会触发活化T 细胞的核因子和活化B 细胞的轻链增强子(nuclear factor-κB,NF-κB),导致下游调控基因的转录[10]㊂PCP 通路有两种激活途径,DVL 触发小GTP 酶Rho 和GTP 酶Rac,Rho 在Damm1的作用下活化并激活Rho-相关激酶(Rho-associated kinase,ROCK),Rac 不依赖Damm1而激活下游的Jun 氨基末端激酶(Jun N-terminal ki-nase,JNK)[11]㊂该通路在维持上皮细胞顶-基底侧极性及调节细胞骨架重组等方面发挥重要的作用㊂FZD 和DVL 的突变会导致上皮结构的紊乱[12]㊂但目前对于DVL 如何调控两种通路的转换,仍尚未完全阐明㊂图1.Wnt 信号通路Figure 1.Wnt signaling pathway2㊀Wnt 信号在动脉粥样硬化中的作用Wnt 信号与动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的发生发展直接相关㊂内皮细胞(endothelial cell,EC)功能障碍是As 发生发展的关键[13]㊂脉管系统血流紊乱可引起EC 损伤,尤其在分支区域㊂损伤的EC 驱动促As 微环境的形成[14]㊂在As 早期,Wnt5a 诱导单层EC 通透性增加[15]㊂Wnt5a 配体以NF-κB 依赖的方式激活Wnt /Ca 2+途径上调炎症基因的表达[16],导致炎性细胞因子的释放和内皮功能障碍㊂内皮功能障碍和炎症是As 发展的早期事件㊂且经典Wnt /β-catenin 的激活使单核细胞对血管EC 的黏附作用增强,随后单核细胞迁移至内皮下吞噬脂质,形成As 特有的泡沫细胞(图2)㊂其中,Wnt 共受体LRP5参与了脂质摄取㊁巨噬细胞分化和迁移过程[17]㊂聚集的低密度脂蛋白诱导LRP5转录㊂沉默LRP5可显著减少巨噬细胞内脂质沉积以及巨噬细胞向泡沫细胞的转化[18]㊂此外,巨噬细胞富集区域存在高水平的Wnt5a,通过与FZD5相互作用,加速炎症反应㊂相反,Wnt3a 可通过抑制GSK3β和NF-κB 途经发挥抗炎作用[19]㊂图2.Wnt 信号在As 中的作用Figure 2.Effect of Wnt signaling in As血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)从中膜向内膜的迁移是As 斑块形成的标志之一[20]㊂静止状态下的VSMC 由复杂的机制激活,从收缩型向合成型转变,其特征是细胞外基质的产生增加和收缩蛋白表达的减少㊂上调Wnt2和Wnt3a 促进VSMC 向内膜迁移[21-22]㊂其次,Wnt 还参与了VSMC 的增殖,并导致血管再狭窄过程㊂Wnt1和Wnt3a 诱导经典的Wnt /β-catenin 信号[23-24],通过转录因子TCF4上调促增殖基因Cyclin D1表达,进而降低了细胞周期抑制剂p21的水平[25]㊂进一步还发现VSMC 增殖的内源性激活剂Wnt4[26]㊂过表达Wnt /FZD 拮抗剂SFRP (FrzA 和FZD-1)或LRP 和TCF 的显性失活则抑制了Cyclin D1的表达,缩短了细胞存活周期[27]㊂经典Wnt 信号传导的关键步骤是β-catenin 核内集聚㊂其中,IL-18对VSMC 增殖和管腔再狭窄的影响,是与Akt 相互作用,使GSK-3β磷酸化失活[28],而miR-210则抑制了APC 的活性[29]㊂提示功能性Wnt 受体复合物在调节VSMC 增殖和导致血管再狭窄中的重要性㊂在非经典途经中,CaMKⅡ介导了VSMC 的增殖,在As 斑块稳定区高表达㊂As 病变中,巨噬细胞在管壁的累积会减少VSMC 的增殖,同时释放基质降解酶,削弱纤维帽的厚度,导致斑块破裂和急性冠状动脉事件的发生㊂CaMKⅡ通过调控巨噬细胞和VSMC 之间的平衡来控制斑块的进展[30]㊂此外,在球囊诱导的血管壁损伤中,还发现了NFATc1或JNK 的激活对VSMC 增殖的影响(图2)[24]㊂上述研究表明Wnt 信号通路贯穿于As 发生发展的整个过程,靶向该信号通路的调控是延缓As 进展的关键㊂3㊀Wnt 信号与血管钙化血管钙化是As 病情进展的另一重要特征[31]㊂骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)与成骨细胞发生密切相关㊂在As 进程中,活化的内皮和血管成纤维细胞是BMP-2等分子产生的主要来源㊂氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)启动免疫应答,引起管壁炎性反应,进而促进TNF-α和BMP-2的表达㊂高表达的BMP-2引起血管钙化的发生[32]㊂其中,BMP-2通过上调成骨转录因子Msx2,促进多种Wnt 配体(如Wnt3a㊁Wnt7a)的产生,减少了内源性抑制剂DKK1的生成,导致Wnt 信号通路的增强[33];增强的Wnt 信号驱动成骨程序促进血管钙化㊂同样,在人As 钙化部位,升高的骨特异性蛋白骨钙素(osteo-calcin)也激活了Wnt 信号通路,促进核内成骨转录因子Runx2的表达[34]㊂据此提示氧化还原信号及Wnt 信号通路在介导血管钙化中发挥重要作用㊂在高脂饮食或糖尿病中,炎性反应和氧化应激增强,BMP-2-Msx2-Wnt 信号的促成骨作用更明显[35-36]㊂此外,晚期糖基化终产物及其受体也增强了Wnt 信号的激活和VSMC 成骨分化及钙化(图3)[37]㊂图3.Wnt 信号在血管钙化的作用Figure 3.Effect of Wnt signaling invascular calcification血管钙化是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)常见并发症,与心血管事件发生和死亡率的增加有关㊂CKD中也有Wnt信号的参与㊂透析患者中Wnt抑制剂硬化蛋白水平与主动脉和冠状动脉钙化程度密切相关[38]㊂与此一致的是, Wnt5a㊁Wnt5b和Wnt11在主动脉瓣钙化部位的表达水平明显高于非钙化部位[39]㊂一方面,与CKD 患者中钙磷代谢紊乱,高磷酸盐诱导VSMC中Wnt/β-catenin信号的激活和下游骨相关转录因子Runx2的表达增加有关[34]㊂另一方面,这类人群的肾脏清除率降低,体内多种有毒物质蓄积,活性氧产生增加,导致Msx2/TNF水平升高[40],介导Wnt信号的激活[41]㊂激活的Wnt通路不但促进了成骨转录因子Runx2的表达,还诱导了基质金属蛋白酶2/9 (matrix metalloproteinase-2/9,MMP-2/9)的产生,驱动As和钙化的发生(图3)㊂Wnt相关配体抑制剂则显著抑制了VSMC钙化[42]㊂总之,Wnt信号参与心血管疾病进展的整个过程,包括内皮功能紊乱㊁炎症反应㊁脂质浸润㊁VSMC 的增殖和管壁钙化等多个方面㊂不同Wnt信号之间也存在相互作用㊂当合并有糖尿病㊁CKD等多种疾病时,相互作用机制更为复杂㊂深入探讨Wnt信号与疾病间的关系具有重要的意义㊂[参考文献][1]NUSSE R,VARMUS H E.Many tumors induced by the mouse mammary tumor virus contain a provirus integrated in the same region of the host genome[J].Cell,1982,31(1):99-109.[2]RIJSEWIJK F,SCHUERMANN M,WAGENAAR E,et al. The drosophila homolog of the mouse mammary oncogene int-1is identical to the segment polarity gene wingless[J]. Cell,1987,50(4):649-657.[3]SUN X,PENG X,CAO Y,et al.ADNP promotes neural differentiation by modulating Wnt/β-catenin signaling[J]. Nat Commun,2020,11(1):2984.[4]NUSSE R,CLEVERS H.Wnt/β-Catenin signaling,disease, and emerging therapeutic modalities[J].Cell,2017,169(6): 985-999.[5]WM B.Interventions in Wnt signaling to induce cardiomyo-cyte proliferation:crosstalk with other pathways[J].Mol Pharmacol,2020,97(2):90-101.[6]BADIMON L,BORRELL-PAGES M.Wnt signaling in the vessel wall[J].Curr Opin Hematol,2017,24(3): 230-239.[7]PARK H B,KIM J W,BAEK K H.Regulation of Wnt sig-naling through ubiquitination and deubiquitination in cancers[J].Int J Mol Sci,2020,21(11):3904.[8]JACKSON H,GRANGER D,JONES G,et al.Novel bis-pecific domain antibody to LRP6inhibits Wnt and r-spondin ligand-induced Wnt signaling and tumor growth [J].Mol Cancer Res,2016,14(9):859-868. [9]ZEILBECK L F,MÜLLER B B,LEOPOLD S A,et al. Norrin mediates angiogenic properties via the induction of insulin-like growth factor-1[J].Exp Eye Res,2016,145: 317-326.[10]GONG B,SHEN W,XIAO W,et al.The Sec14-like phos-phatidylinositol transfer proteins Sec14L3/Sec14L2act as GTPase proteins to mediate Wnt/Ca2+signaling[J].Elife, 2017,6:e26362.[11]VLADAR E K,KÖNIGSHOFF M.Noncanonical Wnt pla-nar cell polarity signaling in lung development and disease [J].Biochem Soc Trans,2020,48(1):231-243. [12]CARVAJAL-GONZALEZ J M,ROMAN A C,MLODZIKM.Positioning of centrioles is a conserved readout of Friz-zled planar cell polarity signalling[J].Nat Commun, 2016,7:11135.[13]李红蓉,刘红利,马柳一.动脉粥样硬化进程中单核/巨噬细胞的行为变化[J].中国动脉硬化杂志,2015, 23(12):1291-1296.[14]WOLF D,LEY K.Immunity and inflammation in athero-sclerosis[J].Herz,2019,44(2):107-120. [15]MATTHIJS BLANKESTEIJN W,HERMANS K C.Wntsignaling in atherosclerosis[J].Eur J Pharmacol,2015, 763(Pt A):122-130.[16]GAY A,TOWLER D A.Wnt signaling in cardiovasculardisease:opportunities and challenges[J].Curr Opin Lip-idol,2017,28(5):387-396.[17]BADIMON L,LUQUERO A,CRESPO J,et al.PCSK9and LRP5in macrophage lipid internalization and inflam-mation[J].Cardiovasc Res,2021,117(9):2054-2068.[18]VALLÉE A,VALLÉE J N,LECARPENTIER Y.Meta-bolic reprogramming in atherosclerosis:Opposed interplay between the canonical Wnt/β-catenin pathway and PPARγ[J].J Mol Cell Cardiol,2019,133:36-46. [19]SCHAALE K,NEUMANN J,SCHNEIDER D,et al.Wntsignaling in macrophages:augmenting and inhibiting my-cobacteria-induced inflammatory responses[J].Eur J Cell Biol,2011,90(6/7):553-559.[20]DURHAM A L,SPEER M Y,SCATENA M,et al.Roleof smooth muscle cells in vascular calcification:implications in atherosclerosis and arterial stiffness[J].Cardiovasc Res, 2018,114(4):590-600.[21]WILLIAMS H,MILL C A,MONK B A,et al.Wnt2andWISP-1/CCN4induce intimal thickening via promotion of smooth muscle cell migration[J].Arterioscler ThrombVasc Biol,2016,36(7):1417-1424.[22]WU X,WANG J,JIANG H,et al.Wnt3a activatesβ1-integrin and regulates migration and adhesion of vascular smooth muscle cells[J].Mol Med Rep,2014,9(4): 1159-1164.[23]ZHUANG Y,MAO J Q,YU M,et al.Hyperlipidemia in-duces vascular smooth muscle cell proliferation involving Wnt/β-catenin signaling[J].Cell Biol Int,2016,40(2):121-130.[24]FOULQUIER S,DASKALOPOULOS E P,LLURI G,etal.Wnt signaling in cardiac and vascular disease[J].Pharmacol Rev,2018,70(1):68-141. [25]KIM J,KIM J,KIM D W,et al.Wnt5a induces endothe-lial inflammation via beta-catenin-independent signaling [J].J Immunol,2010,185(2):1274-1282. [26]BROWN B A,WILLIAMS H,BOND A R,et al.Carotidartery ligation induced intimal thickening and proliferation is unaffected by ageing[J].J Cell Commun Signal, 2018,12(3):529-537.[27]LABBÉP,THORIN E.Therapeutic targeting of LRP6incardiovascular diseases:challenging but not Wnt-Possible![J].Can J Cardiol,2019,35(11):1567-1575. [28]YAN D Y,TANG J,CHEN L,et al.Imperatorin promotesosteogenesis and suppresses osteoclast by activating Akt/GSK3β/β-catenin pathways[J].J Cell Mol Med,2020, 24(3):2330-2341.[29]REDDY V S,VALENTE A J,DELAFONTAINE P,etal.Interleukin-18/Wnt1-inducible signaling pathway pro-tein-1signaling mediates human saphenous vein smooth muscle cell proliferation[J].J Cell Physiol,2011,226(12):3303-3315.[30]MAIONE A S,CIPOLLETTA E,SORRIENTO D,et al.Cellular subtype expression and activation of CaMKⅡreg-ulate the fate of atherosclerotic plaque[J].Atherosclerosis, 2017,256:53-61.[31]孙学娇,刘乃丰.关注糖尿病与血管钙化的共同发病机制和临床意义[J].中国动脉硬化杂志,2020,28(2):169-174.[32]YANG P,TRONCONE L,AUGUR Z M,et al.The roleof bone morphogenetic protein signaling in vascular calcifi-cation[J].Bone,2020,141:115542. [33]SHAO J S,CHENG S L,PINGSTERHAUS J M,et al.Msx2promotes cardiovascular calcification by activating paracrine Wnt signals[J].J Clin Invest,2005,115(5): 1210-1220.[34]CAI T,SUN D,DUAN Y,et al.Wnt/β-catenin signalingpromotes VSMCs to osteogenic transdifferentiation and cal-cification through directly modulating Runx2gene expres-sion[J].Exp Cell Res,2016,345(2):206-217. [35]SHAO J S,ALY Z A,LAI C F,et al.Vascular BMPMsx2Wnt signaling and oxidative stress in arterial calcifi-cation[J].Ann N Y Acad Sci,2007,1117:40-50.[36]谈君,任晓妹,刘乃丰.糖尿病大鼠钙化血管中Msx2和Wnt3a的表达[J].中国动脉硬化杂志,2010,18(3):173-176.[37]LIU Y,WM W,ZHANG X L,et al.AGE/RAGE pro-motes thecalcification of human aortic smooth muscle cells via the Wnt/β-catenin axis[J].Am J Transl Res,2016, 8(11):4644-4656.[38]YANG C Y,CHANG Z F,CHAU Y P,et al.CirculatingWnt/β-catenin signalling inhibitors and uraemic vascular calcifications[J].Nephrol Dial Transplant,2015,30(8):1356-1363.[39]ALBANESE I,YU B,AL-KINDI H,et al.Role of non-canonical Wnt signaling pathway in human aortic valve calcification[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2017, 37(3):543-552.[40]SCHUNK S J,FLOEGE J,FLISER D,et al.Wnt-β-catenin signalling-a versatile player in kidney injury and repair[J].Nat Rev Nephrol,2021,17(3):172-184.[41]ZHANG H,CHEN J,SHEN Z,et al.Indoxyl sulfate ac-celerates vascular smooth muscle cell calcification via mi-croRNA-29b dependent regulation of Wnt/β-catenin sig-naling[J].Toxicol Lett,2017,284:29-36. [42]LIAO R,WANG L,LI J,et al.Vascular calcification isassociated with Wnt-signaling pathway and blood pressure variability in chronic kidney disease rats[J].Nephrology (Carlton),2020,25(3):264-272.(此文编辑㊀秦旭平)。
CDKN2A在宫颈癌组织中的表达及调控Wntβ-catenin通路影响SiHa细胞增殖和凋亡的机制
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－７３８６．２０２１．０５．００２·论著·ＣＤＫＮ２Ａ在宫颈癌组织中的表达及调控Ｗｎｔ／β ｃａｔｅｎｉｎ通路影响ＳｉＨａ细胞增殖和凋亡的机制江静 陈勇 蒋璐作者单位：４０００５３ 重庆市第七人民医院妇产科（江静）；陆军军医大学第一附属医院妇产科（陈勇）；重庆市第六人民医院妇产科（蒋璐）通讯作者：陈勇，４０００５３ 重庆市，陆军军医大学第一附属医院妇产科；Ｅ ｍａｉｌ：ｂｈｉｓ２８９９＠１６３．ｃｏｍ 【摘要】 目的 探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白２Ａ（ＣＤＫＮ２Ａ）在宫颈癌组织中的表达及对宫颈癌ＳｉＨａ细胞增殖和凋亡的影响和作用机制。
方法 采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测宫颈癌组织和相应癌旁组织中ＣＤＫＮ２Ａ蛋白表达情况，将人宫颈癌ＳｉＨａ细胞分为空白对照（Ｃｏｎｔｒｏｌ）组、阴性对照（ｐｃＤＮＡ）组和过表达（ｐｃ ＣＤＫＮ２Ａ）组，转染４８ｈ后采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测３组ＳｉＨａ细胞中ＣＤＫＮ２Ａ蛋白表达水平，噻唑蓝（ＭＴＴ）和ＡｎｎｅｘｉｎⅤ ＦＩＴＣ／ＰＩ双染色法分别检测ＳｉＨａ细胞增殖和凋亡情况，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ＳｉＨａ细胞中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶３（ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ ３）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶９（ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ ９）及Ｗｎｔ／β ｃａｔｅｎｉｎ信号通路中β 连环蛋白（β ｃａｔｅｎｉｎ）和下游关键靶蛋白ｃ ｍｙｃ的表达情况。
结果 ＣＤＫＮ２Ａ在宫颈癌组织中的表达明显低于正常癌旁组织（Ｐ＜０．０５）；与ｐｃＤＮＡ组相比，ｐｃ ＣＤＫＮ２Ａ组ＳｉＨａ细胞中ＣＤＫＮ２Ａ蛋白表达水平明显升高，细胞增殖能力减弱，凋亡率升高，ＰＣＮＡ、βｃａｔｅｎｉｎ和ｃ ｍｙｃ蛋白表达明显下调，ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ ３和ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ ９的表达明显上调，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；与ｐｃＤＮＡ组相比，Ｃｏｎｔｒｏｌ组中以上各指标差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。
血管外科研究进展
ＭＡＰＫ）是一组广泛分布于胞浆内具有丝氨酸和酪氨
万方数据
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酸双重磷酸化能力的蛋白激酶。哺乳动物中，ＭＡＰＫ
发病原因不甚清楚，因此成为很多学者的研究热点，另 一热点问题是ＡＡＡ的腔内治疗技术。其发病原因研 究集中于以下几个方面。 一、腹主动脉解剖学缺陷和腹主动脉壁结缔组织 的降解和损伤 腹主动脉的解剖学缺陷已研究明确。具有家族遗 传倾向的结缔组织疾病如Ⅲ型前胶原蛋白突变、马凡 综合症、Ｅｈｌｅｒｓ—Ｄａｎｌｏｓ综合征Ⅳ型以及动脉炎性病变 中的高安氏病、白塞氏病等，也是ＡＡＡ的高危人群。 吸烟是ＡＡＡ形成和发展的最重要的环境因素。吸烟 者ＡＡＡ的发病率是不吸烟者４倍，而且吸烟者ＡＡＡ 的扩张速度明显高于非吸烟者，其具体机制目前尚不 明确。 导致腹主动脉壁结缔组织损伤最重要的原因，是 导致动脉中外层纤维损伤的基质金属蛋白酶类（ｍａｏ
理生理过程。单纯抑制某种特定的因子并不能完全抑 制病灶形成。因此，采取综合措施阻断细胞增殖、分 化、迁移等成为治疗的关键，也成为有效防止再狭窄的 研究方向。 近年来，针对再狭窄形成的机制，涌现出许多的防 治措施。 １．药物治疗：现有研究表明，阿斯匹林、肝素、ＴＸＡ 拮抗剂、凝血酶抑制剂、华法令、糖皮质激素、血管紧张 素转化酶抑制剂等均有一定实验疗效，但临床并未证 实。Ａｂｃｉｘｉｍａｂ，Ａｍｌｏｄｉｐｉｎｅ，ＡＢＴｌ４７６２７等对抑制血管 再狭窄具有一定的疗效，但临床尚未应用。 ２．药物洗脱支架（ｄｒｕｇ—ｅｌｕｔｉｎｇ ｓｔｅｎｔｓ）：一些数据 表明使用药物洗脱支架（雷帕霉素洗脱的Ｃｙｐｈｅｒ支架 或紫衫醇洗脱的Ｔａｘｕｓ支架）的患者，其再狭窄的发生 率明显低于使用裸金属支架的患者ｎ Ｊ。 ３．放射治疗：放射治疗局部血管损伤部位预防再 狭窄已走向临床应用阶段。ＢＥＲＴ试验共８６例患者 进行冠脉内Ｓｒ放射治疗，６个月后再狭窄率为１７％。
腺病毒介导的p16基因表达对体外细胞增殖和衰老的影响
腺病毒介导的p16基因表达对体外细胞增殖和衰老的影响吴红平;孙娟娟;李林芳;钱其军【摘要】目的探讨p16基因表达对正常细胞和肿瘤细胞增殖和衰老的影响.方法采用腺病毒载体构建并包装过表达p16基因的腺病毒,分别感染原代小鼠成纤维细胞(MEF)和肝癌SMMC-7721细胞,用CCK8法检测细胞增殖,SA-β-gal染色检测细胞衰老.结果成功构建腺病毒介导的p16基因表达系统,并在MEF和SMMC-7721细胞中高效表达.CCK8法检测p16基因表达对MEF细胞增殖的抑制率在第1～4天分别为(6.8±0.25)％、(10.6±0.68)％、(12.4±0.93)％和(45.7±1.13)％(P ＜0.01);但对SMMC-7721细胞增殖抑制不明显;SA-β-gal染色显示P16基因可明显诱导MEF细胞衰老[(15±5)个/视野],但不能诱导SMMC-7721细胞发生衰老(0个/视野).结论单独p16基因表达在体外不足以诱导肿瘤细胞的衰老和生长阻滞.【期刊名称】《中国癌症防治杂志》【年(卷),期】2015(007)005【总页数】5页(P320-324)【关键词】肿瘤;p16基因;衰老;增殖;腺病毒【作者】吴红平;孙娟娟;李林芳;钱其军【作者单位】200438 上海第二军医大学东方肝胆外科医院病毒及基因治疗实验室;200438 上海第二军医大学东方肝胆外科医院病毒及基因治疗实验室;200438 上海第二军医大学东方肝胆外科医院病毒及基因治疗实验室;200438 上海第二军医大学东方肝胆外科医院病毒及基因治疗实验室【正文语种】中文【中图分类】R730.2细胞衰老是指正常细胞经过有限的次数分裂后停止生长，细胞形态和生理代谢活动发生显著改变的现象［1，2］。
细胞衰老在肿瘤的发生、发展中非常重要，在早期是抑制肿瘤的发生［3］，但当细胞衰老引起衰老相关分泌表型（senescence associated secretary phenotype， SASP）时又可促进肿瘤发生［4～7］。
p16、DAPK和APC基因甲基化在肺癌早期诊断中的价值
p16、DAPK和APC基因甲基化在肺癌早期诊断中的价值骆江龙;李鲲;冯旭【摘要】目的检测肺癌患者外周血中p16、死亡相关蛋白激酶(DAPK)和结肠腺瘤样息肉蛋白(APC)基因启动子异常甲基化情况并分析其在肺癌早期诊断中的意义.方法收集79例原发性肺癌患者(肺癌组)、40例肺良性病变患者(对照组)的外周血标本,应用甲基化特异性PCR(MSP)法检测两组p16、DAPK和APC基因启动子的甲基化情况,并分析3个基因与肺癌患者的各项临床特征的关联情况.结果肺癌组血清中p16、DAPK和APC的甲基化率分别为51.9％ (41/79)、50.6％ (40/79)、35.4％ (28/79),对照组中分别为2.5％ (1/40)、5.0％ (2/40)、2.5％ (1/40),两组比较差异均有统计学意义(P均＜0.05).p16、DAPK和APC基因甲基化单项鉴别肺癌的灵敏度分别为51.9％ (41/79)、50.6％ (40/79)、35.4％ (28/79).3种基因甲基化联合鉴别肺癌的灵敏度为73.4％ (58/79),高于单项指标.3个基因的甲基化与肺癌患者性别、年龄、吸烟史、组织学类型、肿瘤分期和淋巴结转移等多项临床资料均无相关性(P＞0.05).结论外周血p16、DAPK和APC基因启动子甲基化与肺癌有关,联合检测p16、DAPK和APC基因甲基化可提高肺癌诊断的准确性.【期刊名称】《微创医学》【年(卷),期】2018(013)001【总页数】5页(P12-16)【关键词】甲基化;肺癌;p16基因;DAPK基因;APC基因【作者】骆江龙;李鲲;冯旭【作者单位】广西医科大学第一附属医院心胸外科,南宁市530021;广西医科大学第一附属医院心胸外科,南宁市530021;广西医科大学第一附属医院心胸外科,南宁市530021【正文语种】中文【中图分类】R734.2当今世界肺癌的发病率仍然高居不下，文献[1]显示肺癌发病率在恶性肿瘤中已处于第一的位置，并且男性和女性的发病率都处于首位。
川芎_当归药对研究进展
2015 年 1 月 第 37 卷 第 1 期
中成药 Chinese Traditional Patent Medicine
January 2015 Vol． 37 No． 1
指纹图谱考察研究［12］ 表 明，不 同 比 例 川 芎、当 归 的 合 煎 液，可以抑制或促进某些成分的溶出，但没有新的化合物 生成。川芎嗪是川芎独有的成分，川芎当归共煎液中的川 芎嗪比川芎单煎液中要高，因此药对合煎可以促进川芎嗪 的 溶 出［13］。 UPLC-TQ-MS / MS 对 川 芎、 当 归 和 川 芎 当 归 （ 2 ∶ 3） 3 种酚酸 （ 绿原酸、阿魏酸、咖啡酸） 和 6 种苯肽 类 （ 洋川芎内酯 I、洋川芎内酯 H、洋川芎内酯 A、藁本内 酯、丁基苯肽、丁烯基肽内酯） 进行测定，结果显示，川 芎当归配伍后各成分含有量不仅仅是单味药成分含有量的 加和［14］。因此，川 芎 当 归 药 对 配 伍 合 煎， 与 单 味 药 相 比， 可以提高有效成分溶出，但是作用机制尚不明确，需要进 一步研究。
2015 年 1 月 第 37 卷 第 1 期
中成药 Chinese Traditional Patent Medicine
January 2015 Vol． 37 No． 1
川芎-当归药对研究进展
周 鸿1 ， 黄含含1 ， 张静泽2 ， 高文远1* （ 1． 天津大学药 物 科 学 与 技 术 学 院，天 津 300072； 2． 武 警 后 勤 学 院 生 药 学 与 药 剂 学 教 研 室，天 津 300162）
冰片可以促进川芎嗪吸收，增加其脑分布，达到更好 的治疗效果。川芎嗪肠吸收研究表明，口服磷酸川芎嗪， 在不同肠段的单位面积吸收量顺序为： 结肠 ＞ 十二指肠 ＞ 空肠 ＞ 回肠，且随药物浓度的增大各个肠段的单位面积吸 收量均没有吸收饱和现象，推断磷酸川芎嗪在大鼠肠道以 被动扩散方式吸收，加入冰片后，四个肠段的吸收量均有 所增加［18］。冰片可 以 提 高 川 芎 嗪 经 鼻 腔 吸 收 入 脑 的 速 度 ， 增加脑组织中川芎嗪的吸收量［19］。盐酸川 芎 嗪 静 脉 给 药 后，组织器官中药物最高浓度分布由高向低依次为： 肝脏、 脾脏、血浆、大 脑、 心 脏、 睾 丸、 肾 脏、 肺、 肌 肉， 药 物
中药抗动脉粥样硬化作用机理研究进展
中药抗动脉粥样硬化作用机理研究进展关键词动脉粥样硬化中药信号分子网络文献综述动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是严重危害人类健康的常见病和多发病，5000年前埃及木乃伊的动脉中就已发现粥样硬化性病变。
其发生机制涉及脂质代谢障碍，血管内皮细胞损伤，单核细胞迁移并分化为巨噬细胞，平滑肌细胞从中膜迁移至内膜并增殖，泡沫细胞的形成，细胞坏死和脂质沉积等许多过程。
最新研究表明其病变过程主要与血管内皮细胞功能失调、大量平滑肌细胞增殖与迁移、纤溶减弱、炎症和氧化加强等因素有关。
研究发现中药在防治AS方面具有特别的优势，现对其近几年的研究综述如下。
1 中药治疗动脉粥样硬化的机制冠状动脉粥样硬化使血管腔阻塞，导致心肌缺血、缺氧而引起的心脏病，属于中医胸痹范畴。
其病因与寒邪内侵，饮食不当，情志失调，年迈等有关，其病位在心，但与脾肾有关，其病机属本虚标实，本虚为阴阳气血的亏虚，标实为阴寒、痰浊、血瘀交互为患。
1．1作用机理；有研究认为中医证的本质是信号分子网络紊乱，从现代医学研究中可看出中药复方物质基础的本质是化学成分组合，作用机理的核心是信号分子组合。
现在的研究表明中药复方的作用方式是多靶点、多层次的整体调节方式，复方中药的药理作用和作用机理是复方中药中众多的有效分子组合对机体生物分子网络进行调节的结果，是通过化学成分组合影响到信号分子组合，使紊乱的信号分子网络恢复平衡，从而达到治疗中医的证和相关疾病的作用和效果。
1．2研究现状；有学者从动脉粥样硬化发生、发展过程的病理基础角度，总结了炎性反应在动脉粥样硬化形成早期、进展期、成熟期、破裂期的重要作用，并提出了从抗炎角度研究、筛选、治疗动脉粥样硬化中药的思路和方法也有人从调脂作用、抗氧化作用、对动脉壁细胞的直接作用、血管平滑肌细胞增殖的抑制作用、对细胞因子和生长因子的作用、对凝血纤溶系统作用、钙拮抗作用等方面进行了中药治疗研究。
2治疗动脉粥样硬化的中药制剂研究2．1护脉胶囊：护脉胶囊由淫羊藿、补骨脂、骨碎补等补肾中药组成。
Ras基因及其调节异常与肿瘤发生的研究进展
Ras基因及其调节异常与肿瘤发生的研究进展【摘要】癌基因不可逆的积累突变和失调是恶性肿瘤发生的重要分子机制,其中Ras基因突变、过量表达与肿瘤发生发展的关系密切。
Ras癌基因与细胞癌变的关系不仅是一个重要的基础理论问题,也是肿瘤诊断、治疗及预后等具有应用前景的临床问题。
RASAL1作为RasGAPs具有GTP酶活性,可使Ras蛋白失活,进而抑制肿瘤的发生发展。
因此深入研究RASAL1基因可以进一步阐明肿瘤的发生机制,对肿瘤早期诊断及分子靶向治疗奠定基础。
【关键词】基因,Ras;基因,肿瘤抑制;恶性肿瘤的形成、进展和转移与癌基因、抑癌基因不可逆的积累突变和失调有关。
其中,Ras基因与肿瘤发生发展的关系引起人们较高的关注。
Ras基因是第一个被鉴定的人类癌基因,自从1982年Parada等首先从人膀胱癌细胞中克隆出活化的癌基因C-Ha-Ras以来[1],对于Ras基因、蛋白及其参与的信号转导通路的研究一直是分子肿瘤学的研究热点之一。
1Ras基因与恶性肿瘤的关系与肿瘤相关的Ras原癌基因家族主要分为3类:H-Ras、K-Ras和N-Ras[1],编码相对分子质量为21×103的蛋白,通常称p21[2]。
p21ras是一类重要的功能蛋白,介导生长因子、细胞因子和多种细胞外信号的信息通路,对细胞的增殖、分化、凋亡等多种生理过程发挥重要调节作用。
当Ras基因被异常活化后p21ras蛋白持续地保持活化状态,激活下游信号分子,造成细胞生长失控而无限制地增殖,进而引起肿瘤[3],其中下游信号分子有:RAF/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、PI3K/AKT、PLC/PKC和GTP酶级联效应等[4]。
研究认为,Ras基因被异常激活的方式主要有以下几种:1)基因点突变;2)基因扩增;3)染色体异位与基因重排;4)基因甲基化改变;5)基因过量表达。
其中后4种方式少见,最常见的方式是编码区内的点突变。
Ras基因突变率在不同种类的人类肿瘤有明显不同,有文献报道,最高为胰腺癌达90%,结肠癌为40%~50%,肺癌和膀胱癌为40%,而在胃癌Ras基因的突变率较低,仅在15%左右[5]。
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目的 ：观 察血 管平 滑肌 细胞 ｐ ２ １ 基 因启动 子 甲基化 对其 增殖 活性 的影 响。
文章编号： ２ ０ ９ ５ ４３ － ４ ４ （ ２ ０ １ ４ ） ３ ８ － ０ ６ ０ ７ ４ － ０ ５
稿件接 受：２ ０ １ ４ － ０ ８ － ２ ５
方法： 采用组织贴块法培养人脐血管平滑肌细胞，给予不同质量浓度氧化低密度脂蛋Ａ（ ０ ，１ ０ ， ２ ０ ， ４ ０ ｍｇ ／ Ｌ ） 孵育 ２ ４ ｈ ， 甲基 化特 异 Ｐ Ｃ Ｒ检 测 ｐ ２ １基 因启动 子区 Ｃｐ Ｇ 岛甲基化 程度 ， 反 转录 Ｐ ＣＲ检 测 ｐ ２ １ ｍＲ Ｎ Ａ 表达 ，
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主题 词 ：
侯 晓菲 ，女 ，１ ９ ７ ８年 生 ， 山东省 文登 市人 ，汉 族 ，
２ ０ ０ ９年 东南大 学毕业 ， 硕 士 ，主 管检 验 师 ，主 要从 事抑癌基 因研究。 通 讯作 者 ：孙 晓健 ，博士 ， 主任医师，青岛大学医学 院 附属 烟 台毓 璜 顶 医院心 内科 ，山 东省烟 台市
与 该过程 。
ｄ ｏ ｉ ： ｌ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ２ ０ ９ ５ － ４ ３ ４ ４
２０ １ ４． ３８ ． ０ ０ ２
【 ｈ ｔ ｔ ｐ ： ／ ／ ｗ ｗｗ ． ｃ ｒ ｔ ｅ ｒ ． ｏ ｒ ｇ 】
中图分类号： Ｒ３ １ ８ 文献标识码： Ｂ
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中 国组织工程研 究 第 ７ ８眷 第 ３ ８ 期
２ ０ １ ４— ０ ９— １ ０出版
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侯 晓菲 ．孙晓 健． 血管 平涝瞻 细穗 增殖 ｓ ｐ ２ 基 因寤动 子 甲基 化 的影响 ． 中 国缓织Ｉ 程研 究 ．２ ０ １ ４ ．１ ８ 【 ３ ８ １
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ＭＴ Ｔ比色 法测 定血 管平滑 肌细 胞增 殖活 性 。 结 果与 结论 ：氧化 低 密度脂 蛋 白呈浓 度依赖 性促 进 ｐ ２ １启动 子 甲基 化和 降低 ｐ ２ １ ｍＲ Ｎ Ａ表达 ，同时平滑 细胞 增殖 活 性增 高 。提 示氧 化低 密度 脂蛋 白可 以通过 ｐ ２ １基 因 甲基化促 进血 管平 滑肌 细胞 增殖 ，ｐ ２ １基 因 甲基化 可 能在动 脉 粥样硬 化发 生 中起 到一定 作用 。
ｔ ｈ ｅ ｏ ｃ ｃ ｕｒ ｒ ｅｎ ｃ ｅ ｏｆ ａｔ ｈ ｅｒ ｏｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｓ ｉ ｓ ， ａｎ ｄ ａ ｓ ｅｒ ｉ ｅｓ ｏ ｆ ｒ ｅｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｇｅ ｎ ｅｓ ｖ ｉ ａ ｍｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ａ ｔ ｉ ｏｎ ａｒ ｅ Ｉ ｎ ｖ ｏｌ ｖ ｅｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅｓ ｓ ．
血管平滑肌细胞增殖－ ￣ ｐ ２ １ 基因启动子甲基化的影响
侯晓菲’ ，孙晓健 （ 青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院，’ 检验科 ， 心内科，山东省烟台市 ２ ６ ４ ０ ０ ０ ）
文章 亮点 ：
１细 胞周 期是 各种 因素刺 激血 管平 滑肌 细胞增 殖 的最后 信 号通路 ，既往 研 究多集 中于促 动脉 粥样 硬化 因子对 血 管平 滑肌 细胞 增殖 及表 型 的改变 。实验 从体 内最 重要 的细胞 周期 负性 调节 因子 ｐ ２ １ （ 。 ・ Ｗ Ａ ’ ） 甲基 化着 手 ， 观 察其 表观 遗传 修饰 对平 滑肌 细胞增 殖 的影响 ， 目前 未见 报道 。 ２ 实验 结果提 示 ，氧化 低密 度脂 蛋 白可 以通 过 ｐ ２ １ 基 因 甲基化 促进 血管平 滑肌 细胞 增殖 ，ｐ ２ １ 基 因 甲基 化可 能在 动脉 粥样 硬化 发生 中起到 一定 作用 。 关键 词 ： 组织 构建 组 织Ｉ程 ；血 管平 滑飘 细胞 ：ｐ ２ １基 医 ： 甲基化 ｝动 脉 斑样硬化 细 跑蜀 期蛋 自
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基 因； 甲基化 ；动脉 粥样 硬化 ：细 胞躅期 蛋 白类 基 金资助 ：
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涵 台亩科 技发 展计 如项 黾 幢０ １ ０ １ ４ ８ － ￣ ：课 题题 强： ｐ ２ １基 医宕动 子 甲基 化在 动泳 褒祥硬 化 发生 中的作 甬 摘 要 背景 ：血管平 滑 肌细 胞增 殖 、迁移 及表 型改变 是 动脉 粥样 硬化 发生 的 中心环节 ，一系 列相 关基 因 的甲基化 参
ｐ ｒ ｏ ｍｏ ｔ ｅ ｒ ｒ ｅ ｇ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｐ ２ １ ｇ ｅ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ ｉ ｔ ｓ ｐ ｏ ｔ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｌ ｍｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｉ ｓ ｍ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ａ ｔ ｈ ｅ ｒ ｏ ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｓ ｉ ｓ ． ＭＥ ＴＨ ０Ｄ Ｓ： Ｃｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｄ ｈ ｕ ｍａ ｎ ｖ ａ ｓ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｓ ｍｏ ｏ ｔ ｈ ｍｕ ｓ ｃ ｌ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｔ ｒ ｅ ａ ｔ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ ｏ ｘ ． Ｌ ＤＬ
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