高中细胞染色专题
细胞染色方法大全
之杨若古兰创作Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(次要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察后果.hoechst 有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258，hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性感化更小一些，所以普通来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！染色步调PI(Propidium Iodide碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，经常使用于细胞凋亡检测. 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料(红色），它不克不及透过完好的细胞膜，但凋亡中初期的细胞和坏死细胞因为细胞膜通透性的添加，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红.用PI单一染色观测培养细胞，只能暗示细胞的坏死情况，而不是凋亡（当然初期凋亡PI亦可着色）.但是如果您只是想晓得细胞的死亡情况，而不是细心区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也能够.但是如果您必定要认定细胞的凋亡，那么PI单一染色明显不敷！annexin-v染色细胞凋亡初期,细胞膜标记发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻 ,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合.如许,Annexin-v 染色阳性,暗示细胞处于初期凋亡形态.Annexin-V结合分歧的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生.Annexin V用FITC标识表记标帜发绿色荧光；如果用PE标识表记标帜就发红色荧光.JC-1染色 JC-1是一种阳离子染料，可以在线粒体内聚集，低浓度时次要以单体(monomer)存在，发射光以绿光(～525nm)为主；而在高浓度时则可以构成多聚体(aggregation)，发射光以红光(-590nm)为主.线粒体本人存在必定的极性(polarization)，其外膜为负极，内膜为正极.电位差由Ca2+、Na+和H+流调控.当线粒体形态良好时对JC-l摄取量少，因此在线粒体内次要以单体的方式存在绿光强度/红光强度的比值较高.在线粒体发生去极化(depolarization)时，线粒内JC-l的浓度较高，多以多聚体的方式存在，绿光强度/红光强度的比值降低.JC-1染色的绿光强度/红光强度仅取决于线粒体的膜电势(membrane potential)，而与线粒体的形状、体积和密度都有关，因此能更好地反映线粒体的功能形态.因为凋亡发生的初期存在线粒体的去极性，是以，JC-1染色被用于检测凋亡的初期发生.其实验方法如下.JC-l染色非常简单.首先可将成品JC-1以DMSO配成储存液(1～5mg/ml)，储存于-20℃，用时以培养液浓缩至10ug/ml 终浓度.对贴壁细胞可以直接弃去培养液，漂洗细胞后直接加入染色液，10-30min后在荧光显微镜下或者激光共聚焦下观察.线粒体形态好时细胞以绿色为主，当红光旌旗灯号加强时，红绿相叠，以橙色为主.该染色应用于悬浮细胞时还可以通过流式细胞仪进行检测，收集红/绿旌旗灯号强度，计算其强度比.钙黄绿素-AM(Calcein-AM):Calcein -AM本人其实不是荧光分子，但通过活细胞内的酯酶感化，Calcein -AM能脱去AM 基，发生的Calcein能发出强绿色荧光（激发：490 nm，发射：515 nm）.是以Calcein -AM仅对活细胞染色细胞活力鉴定——台盼蓝染色法道理：细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色.而活细胞能禁止染料进入细胞内.故可以鉴别死细胞与活细胞.用品：1. 4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4度保管.使用时.用PBS浓缩至0.4%.2. 吸管、血细胞计数板、显微镜步调：1、制备单细胞悬液.并作适当浓缩（106细胞/ml）2、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀.3、计数：在三分钟内，用计数板分别计数活细胞和死细胞结果统计：镜下观察，死细胞被染成淡蓝色，而活细胞拒染.根据下式求细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100留意事项：台盼蓝染细胞时，时间不宜过长.否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数.台盼蓝染色道理通常认为细胞膜丧失完好性，细胞即可被认为曾经死亡.台盼蓝(Trypan Blue)是检测细胞膜完好性最经常使用的生物染色试剂.健康的正常细胞能够排斥台盼蓝，而死亡的细胞，膜的完好性丧失，通透性添加，细胞可被台盼蓝染成蓝色.根据此道理，细胞经台盼蓝染色后，可通过显微镜，直接镜下计数或拍照后计数，实现对细胞存活率比较精确的定量分析.试述台盼蓝染发鉴别死活细胞的道理，试分析染色时间过长本来是活细胞也被染色的缘由死细胞的细胞膜无屏障感化，台盼蓝马上进入细胞而显蓝色.活细胞细胞膜有选择透性，对台盼蓝的透性小，进入细胞慢.若染色时间过长，台盼蓝可能通过胞吞或胞饮感化进入细胞.。
细胞染色
++++ ++++ ++++
临床意义
鉴别急性单核细胞白血病。但单核细胞中的酶活性可被 氟化钠抑制，故在染色时同时进行氟化钠抑制实验。急 性粒细胞白血病时成阴性或弱阳性，但不受氟化钠影响 。因此主要用于急性单核细胞白血病与急性粒细胞白血 病鉴别。
苏丹黑B染色（SB 基本原）理
脂溶性染料，可溶于细胞质内的含脂物质中，使胞质中的脂类物质显色或 深黑色颗粒。
醋酸AS萘酚酯酶（naphthol-AS-acetate esterase,AS-AE）
氯化醋酸AS-D萘苯分醋酶（naphthol-AS-D-Chloroacetate esterase,AS-D-CE）
α-乙酸萘酚酯酶
基本原理
α-乙酸萘酚酯 α-乙酸萘酚酯酶
重氮染料 α-萘酚
有色沉淀
结果
有沉淀者为阳性
重
氮
盐
红色沉淀
GBC
结果
有沉淀者为阳性
此酶主要存在于粒细胞系。
细胞
原粒细胞
早幼粒细胞
中性粒细 胞
中幼 晚幼
杆状核
分叶核
嗜酸性粒 细胞
中幼 晚幼
杆状核
分叶核
嗜碱性粒 细胞
中幼 晚幼
杆状核
分叶核
结果
++++ +++
++ + + -
细胞
结果
红细 原红细胞
-
胞系 早幼红细胞 统
-
中幼红细胞
-
晚幼红细胞
-
淋巴 原淋巴细胞
细胞核染色
细胞核染色细胞核染色是生物学中一项非常重要的实验技术和研究方法。
通过对细胞核进行染色，可以帮助科学家们观察和分析细胞核的结构、功能以及病变情况。
本文将详细介绍细胞核染色的原理、常用方法以及在科研和临床中的应用。
一、细胞核染色的原理细胞核染色的原理基于细胞核内DNA的性质和结构。
在细胞核内，DNA是负责遗传信息传递和细胞功能调控的重要分子。
染色是将染色剂与细胞核内的DNA结合，从而使细胞核的结构更加明显可见。
细胞核染色的原理可以分为两个方面：1. DNA的亲和性染色：染色剂能够与DNA发生特异性的相互作用，形成稳定的染色结合物。
常用的染色剂有荧光染料（如荧光素），还有一些化学染料（如伊红、甲苯胺蓝等）。
2. DNA的碱基对应染色：DNA由四种不同的碱基组成，每个碱基对应着一种特定的染色剂，使得DNA能够具有不同的颜色。
这种染色方式可以通过荧光原位杂交技术来实现，从而观察到具有不同颜色的DNA序列。
二、细胞核染色的常用方法1. 核色素染色法：核色素染色法是一种常规的细胞核染色方法，也是最早被广泛应用的染色方法之一。
它的原理是利用核色素能与细胞核内的DNA结合，并在显微镜下观察到染色物质。
常用的核色素染色剂有苏丹红B、甲苯胺蓝、伊红等。
这些染色剂能与DNA中的磷酸结合，形成深蓝色的染色团，使细胞核的结构清晰可见。
2. 荧光染色法：荧光染色法是一种利用荧光染料来标记和观察细胞核的方法。
荧光染料具有高度的亲和性和选择性，可以选择性地与细胞核内的DNA结合。
常用的荧光染料包括伊红、荧光素、舒芬奇的碘化丙啶等。
这些染料在显微镜下能够发出荧光信号，从而使细胞核的位置和形态更加明显可见。
3. 免疫组化染色法：免疫组化染色法是一种利用抗体与特定分子的相互作用来标记和观察细胞核的方法。
通过使用特异性抗体，可以选择性地标记细胞核内的特定分子，如核蛋白、核酸等。
这种染色方法常常用于研究特定疾病的发生机制，或者辅助诊断某些肿瘤。
实验三—细胞的活体染色
1、在仔细观察的基础上，选择典型结构进行描绘， 要求真实、准确（注意各部分结构的比例关系）。
2、用铅笔绘图，线条要明确清晰，图的深浅明暗一 律以点的疏密来表示，点要圆而一致，不得涂暗影 或进行其它美术加工。
3、各部结构名称要在图的一侧引直线注明。各引线 要平行不得交叉。
4、每幅图的大小、位置在纸面上必须安排得当，并 注意纸面的整洁。
台盼蓝(trypan blue)是一种偶 氮类酸性染料，它可以通过死亡细 胞的质膜而使细胞着色，但不能通
过活细胞的质膜，故可用台盼蓝鉴
别活细胞与死细胞。
Hale Waihona Puke 活体染色詹纳斯绿B(Janus green B)能够活 染线粒体为蓝色，主要是由于线粒 体内膜上的细胞色素酶系使染料始 终保持在氧化状态(即有色状态)，
在周围的细胞质内，这些染料被还
原为无色的色基(即无色状态)。
中性红是液泡系的特殊活体染
色剂，它可将不同发育时期的
液泡染成不同深度的红色，在 细胞处于生活状态下细胞质和 核不被染色，该染料对液泡系 具有一定专一性。
(2)吸出染液，滴加Ringer氏液，盖片、
镜检，注意观察线粒体分布及所呈形
状。
2、用动物细胞观察线粒体的活体染色。
(1)取鼠肝边缘较薄的肝组织一小块，放入盛 有Ringer氏液的表面皿中洗去血液。 (2)将肝组织洗净后吸去血液，加入1／5000詹 纳斯绿B染液染色30分钟，注意不可将组织块完全淹 没。 (3)染色后撕开组织块，这样溶液中就会有一 些细胞或细胞群。 (4)用吸管吸取溶液，放在载玻片的Ringer氏 液中。垫两根短头发，加盖玻片，即可镜检。 (5)用油镜观察活染色的线粒体标本，要不断 地来回转动细调焦螺旋，使盖玻片上下慢慢移动。使
高中生物洋葱染色实验教案
高中生物洋葱染色实验教案
实验目的：通过观察洋葱细胞在显微镜下的染色结构，理解植物细胞的基本结构。
实验材料：
1. 新鲜洋葱叶片
2. 75%乙醇
3. 甲醇
4. 盐水
5. 带标度的玻璃滴管
6. 显微镜
7. 推兰管或橡皮头镊子
8. 注射器或滴管
9. 洋纱布
10. 小磁瓶
11. 色素（如甲醇中的苏丹Ⅲ溶液）
实验步骤：
1. 将洋葱叶片切成片状，用盐水浸泡5分钟，目的是软化细胞壁。
2. 将洋葱叶片放入乙醇中煮沸1-2分钟，马上取出放入冷水中冲洗，然后转移到甲醇中固
定细胞膜。
3. 取出固定的洋葱叶片，用洋纱布或橡皮头镊子轻轻在玻片上拍下，将细胞压碎并滴上色
素溶液。
4. 用显微镜观察染色的细胞结构，观察细胞壁、细胞膜、细胞核等微观结构。
实验结果：
在显微镜下观察，可以看到洋葱细胞的细胞核、细胞壁和细胞质的分布和形态。细胞核通
常呈现为圆形或椭圆形，细胞壁呈现为透明带状结构，细胞质内部则有颗粒状结构，代表
着细胞内的器官。
实验注意事项：
1. 操作实验时要戴手套，避免对皮肤造成刺激。
2. 操作实验时小心使用刀具，以免割伤手指。
3. 使用显微镜时要小心放置，以免摔落和损坏。
4. 实验后要及时清理实验台面和器具，保持实验环境整洁。
拓展实验：
1. 使用不同的染色剂观察洋葱细胞在显微镜下的变化。
2. 观察植物不同部位的细胞结构，比较其异同点。
3. 尝试在洋葱细胞上进行其他实验，如显微注射、显微探针实验等。
高中生物细胞分裂过程中染色体的行为
高中生物细胞分裂过程中染色体的行为高中的同学们，咱们今天来聊聊细胞分裂过程中染色体的那些事儿。
要说细胞分裂，这就好比是一场精心编排的“舞蹈表演”，而染色体就是舞台上的“主角”。
它们的一举一动那可都有着重要的意义。
先来说说有丝分裂吧。
想象一下，细胞就像一个大大的房间，染色体们原本都在里面安静地待着。
当有丝分裂开始的时候，就像是听到了开场的铃声，一切都变得热闹起来。
细胞核膜和核仁消失，染色体们开始“梳妆打扮”，它们先是把自己“压缩”得紧紧的，变得又短又粗，这样能更方便地行动。
然后，纺锤体出现了，就像是舞台上的道具，牵引着染色体们各就各位。
我记得有一次在实验室观察细胞有丝分裂的切片，那真是一次神奇的经历。
我拿着显微镜，眼睛紧紧地盯着目镜，心里满是期待。
当我终于找到一个处于分裂中期的细胞时，我清晰地看到染色体整齐地排列在赤道板上，就像是一排训练有素的士兵，整整齐齐，丝毫不乱。
那一刻，我真切地感受到了生命的神奇和美妙。
在分裂后期，染色体更是展现出了它们的“活力”。
姐妹染色单体被纺锤丝拉着，分别向细胞的两极移动。
这时候的染色体，就像是两个被拔河的队伍拉着的绳子，拼命地朝着两边跑。
最后，到了末期，细胞一分为二，染色体又舒展开来，重新变成了细丝状，细胞核膜和核仁也重新出现，就好像一场精彩的表演落下了帷幕。
再说说减数分裂，这可比有丝分裂更加复杂和有趣。
减数第一次分裂前期，染色体们两两配对，形成了同源染色体。
这就像是找到了自己的“伙伴”，手牵手准备一起行动。
在这个过程中，还会发生交叉互换，就像是两个小伙伴互相交换了礼物，增加了彼此的“特色”。
减数第一次分裂中期，同源染色体排列在赤道板两侧，等待着下一步的指令。
到了后期，同源染色体分离，分别向细胞的两极移动。
这就像是小伙伴们要分开去探索不同的世界。
减数第二次分裂过程和有丝分裂有些相似，但没有同源染色体的参与。
染色体们再次经历了浓缩、排列和分离的过程。
总之，细胞分裂过程中染色体的行为就像是一场精心设计的表演，每一个步骤都精准无误，有条不紊。
细胞各种染色方法
细胞各种染色方法细胞染色方法是一种用于研究细胞结构和功能的重要技术。
通过对细胞进行染色，可以使细胞成分和结构可见，便于观察和研究。
下面将介绍几种常用的细胞染色方法。
1.基本染色方法-干燥染色法干燥染色法是最常见的染色方法之一，用于观察细胞的形态和结构。
在细胞表面涂上染色剂（如吉姆萨、范斯丁染料等），然后用胶片或显微镜进行观察。
这种方法方便快捷，适用于常规的细胞观察。
-神经元染色法神经元染色法主要用于研究神经系统的结构和功能。
常见的神经元染色方法包括尼氏染色法、戈登染色法和格尔染色法等。
这些方法可以染色神经元的胞体、突触和轴突等结构，以及神经元之间的连接方式。
2.核酸染色方法-核酸荧光染色法核酸荧光染色法是一种用于检测细胞核酸的方法。
常见的核酸染色剂包括达尔林紫、伊曼纽尔蓝和乳胶蓝等。
这些荧光染料可以与DNA或RNA 结合，生成荧光信号，便于观察和分析。
-原位杂交法原位杂交法是一种利用互补的单链DNA或RNA探针与目标细胞中的互补序列发生杂交反应的方法。
这种方法可以检测特定的基因表达情况或检测一些病毒的感染情况。
常见的原位杂交方法包括原位PCR、荧光原位杂交和非放射性原位杂交等。
3.蛋白质染色方法-共聚焦显微镜染色法共聚焦显微镜染色法是一种利用荧光染料标记特定蛋白质的方法。
常见的荧光染料包括荧光素、乳酸钙蓝和荧光蛋白等。
这种方法可以使用不同的荧光染料标记不同的蛋白质，通过共聚焦显微镜观察细胞中的蛋白质分布和相互作用。
-银染法银染法是一种用于检测蛋白质的方法，特别适用于低表达量的蛋白质。
该方法通过将目标蛋白质与银离子结合，形成黑色或棕色的颗粒，便于观察和分析。
银染法常用于检测蛋白质在凝胶电泳中的分子量和含量。
4.细胞器染色方法-非特异性染色法非特异性染色法是一种用于检测细胞器的方法，常用的非特异性染色剂包括宙斯金、吉姆萨和荧光素等。
这些染料可以与细胞器特有的成分结合，使其在显微镜下可见。
-特异性染色法特异性染色法是一种用于检测特定细胞器的方法，常见的特异性染色剂包括桡胞蛋白、核蛋白和线粒体染料等。
高中生物染料总结
高中生物染料总结
生物染料是一类从天然植物、动物、微生物中提取的染色物质。
它们具有良好的染色效果，对人体和环境都相对安全。
下面是对几种常见的高中生物染料的总结。
1.伊红
伊红是一种红色的天然染料，常用于细胞核染色。
它能与DNA结合，使细胞核染成暗红色。
伊红染色后的细胞核清晰可见，便于观察细胞形态和结构。
2.甲苯胺蓝
甲苯胺蓝是一种蓝色的天然染料，常用于细胞质染色。
它能与RNA结合，使细胞质染成浅蓝色。
甲苯胺蓝染色后的细胞质清晰可见，便于观察细胞质内的细胞器和结构。
3.苏木精
苏木精是一种红色的天然染料，常用于组织切片染色。
它能与细胞质和细胞核内的蛋白质结合，使细胞染成红色。
苏木精染色后的组织切片清晰可见，便于观察组织形态和结构。
4.格拉姆染色
格拉姆染色是一种特殊的染色方法，可用于区分细菌的不同类型。
它将细菌染成紫色或红色，依据细菌细胞壁的不同结构，紫色代表革兰氏阳性菌，红色代表革兰氏阴性菌。
以上是几种常见的高中生物染料的总结，希望对同学们理解生物染色和观察细胞组织有所帮助。
细胞染色方法总结
Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色.Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst 有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258，hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！染色步骤PI(PropidiumIodide碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测.碘化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一种核酸染料(红色），它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红.用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况，而不是凋亡（当然晚期凋亡PI亦可着色）。
但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以。
但是如果您一定要认定细胞的凋亡，那么PI单一染色显然不够！annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合.这样,Annexin-v染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态.Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。
AnnexinV用FITC标记发绿色荧光；如果用PE标记就发红色荧光。
JC-1染色JC-1是一种阳离子染料，可以在线粒体内聚集，低浓度时主要以单体(monomer)存在，发射光以绿光(～525nm)为主；而在高浓度时则可以形成多聚体(aggregation)，发射光以红光(-590nm)为主。
细胞或者组织染色实验介绍
引言：细胞或组织染色实验是生物学和医学研究中常用的技术手段之一，它可以用来观察细胞和组织的结构、功能和变化。
本文将介绍细胞或组织染色实验的基本原理、方法和应用，帮助读者了解并运用这一实验技术。
概述：细胞或组织染色实验是通过特定的染色剂与细胞或组织中的目标分子或结构发生化学反应，从而使其呈现出明显的颜色或荧光信号。
这样，研究者就可以通过显微镜观察和分析染色后的细胞或组织，了解其中的结构、功能和变化。
正文内容：1.细胞或组织染色实验的基本原理1.1染色剂的选择和特点1.2染色剂的工作原理1.3染色剂的种类和应用2.细胞或组织染色实验的方法2.1常用的细胞染色方法2.1.1原位杂交技术2.1.2免疫组织化学染色2.1.3细胞膜染色2.2常用的组织染色方法2.2.1组织病理学染色2.2.2原位免疫组织化学染色2.2.3特殊组织染色技术3.细胞或组织染色实验的应用3.1细胞定位研究3.2细胞和组织结构研究3.3细胞功能研究3.4细胞分子诊断研究3.5细胞治疗研究4.细胞或组织染色实验的关键技术和注意事项4.1样本处理和固定技术4.2染色条件的优化4.3染色结果的解析和图像处理4.4交叉染色和共定位技术4.5负控制和正对照的设计5.细胞或组织染色实验的发展趋势和前景5.1自动化和高通量技术的应用5.2多通道和多标记技术的发展5.3实时和动态观察技术的进步5.4应用于临床医学的前景5.5结合其他技术的发展方向总结：细胞或组织染色实验是一种重要的生物学和医学研究技术，通过染色剂与目标分子或结构发生化学反应，实现对细胞或组织的结构、功能和变化的观察和分析。
掌握细胞或组织染色实验的基本原理、方法和应用，对于开展生物学和医学研究具有重要的意义。
随着技术的不断进步，细胞或组织染色实验将在自动化、高通量、多通道等方面有更广泛的应用，并将为临床医学研究提供更加准确和有力的手段。
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细胞染色专题zz细胞染色专题之一：台盼蓝台盼蓝（Trypan Blue，也称Direct blue 14）：一种死细胞染色用色素化学名：3,3'-{[3,3'-Dimethyl(1,1'-biphenyl)-4,4'-diyl]bis(azo)}bis(5-amino-4-hydroxy-2,7-naphthalenedisulfo nic acid), tetrasodium salt3,3’-{[3,3’-二甲基-(1,1’-二苯基)-4,4’-二基]双(偶氮)}-双(5-氨基-4-羟基-2,7-萘二磺酸)，四钠盐分子式：C34H24N6Na4O14S4分子量：960.81CAS Number：72-57-1外观：黑褐色结晶粉末摩尔吸光度：>69,000(在606nm附近)染色原理：细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。
而活细胞能阻止染料进入细胞内。
故可以鉴别死细胞与活细胞。
严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。
这被称为染料排除测试（dye exclusion），Erythrosin B(红色)、negrosine、eosin Y、AO和EB也用于此目的。
通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞，并可使用细胞计数器进行计数。
溶于水，可以配制成10mg/ml的水溶液，水溶液呈深蓝色。
台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况，用0.4%台盼蓝直接染色5-10分钟，在显微镜下观察即可。
应用于细胞凋亡：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。
如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。
尽管在凋亡的早期到中期检测是很困难的，此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。
储存条件：常温保存注意事项：1. 台盼蓝对人体有毒2. 台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。
否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数。
3. 台盼蓝染色法对于悬浮细胞来说，还比较方便，对贴壁细胞来说，较为繁琐。
因为要消化，有时，96孔板不一定能消化干净。
而且，该法是测定细胞浓度的方法，与细胞悬液的体积有关，加入的胰蛋白酶或1640要计入终体积。
可以说，该法相对准确，可能有一些人为因素的干扰。
细胞染色专题之二：美蓝美蓝英文名：Methylene blue，Swiss blue中文名：亚甲基蓝、次甲基蓝、品蓝、美蓝、亚甲蓝、四甲基蓝、盐基湖蓝、碱性亚甲天蓝等。
分子式：C16H18ClN3S分子量：319.85 g/mol结构式：/wiki/Image:Methylene_blue.svgCAS Number：61-73-4EINECS Number：200-515-2熔点：100 °C沸点：分解密度：？吸收峰：668nm和609nm。
染色原理：美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。
细胞染色专题之三：吖啶橙吖啶橙：N,N,N',N'-tetramethylacridine-3,6-diamine中文名：3,6-双(二甲基氨基)吖啶英文名：Acridine Orange（AO），Euchrysine，3,6-Acridinediamine，Waxoline Orange A，Acridine Orange Base，Solvent Orange 15，Rhoduline Orange，Rhoduline Orange N，Acridine Orange NO，Rhoduline Orange NO，Basic Orange 14分子式：C17H19N3分子量：265.35 g/molCAS number：10127-02-3外观：橙色、红棕色粉末染色原理：吖啶橙（AO）与双链DNA形成发绿色荧光的复合物。
AO还可与单链DAN或RNA形成发红色荧光的复合物。
一个AO分子嵌入双链DNA的三个碱基对并发出最大波长为526nm（激发502nm）的绿色荧光。
一个AO分子与单链DNA或RNA的一个磷酸基相互作用形成聚集或堆叠的结构，此结构发出最大波长为650nm（激发460nm）的红色荧光。
因此，AO用于被利用来检测双链DNA和单链DNA或RNA。
它使得用氩激光激发器或流式细胞仪同时测定DNA和RNA成为可能。
光谱数据：与DNA作用时和荧光素相似，激发最大波长502nm，发射最大525nm（绿光）。
于RNA作用时，激发最大波长移动到460nm（蓝光），发射最大移动到650nm（红光）。
染色程序：1. 用PBS或合适缓冲液制备10-50μM AO溶液。
a)2. 将1/10细胞培养基体积的AO溶液加入细胞培养基中。
b)3. 37℃下孵育细胞10-20分钟。
4. 用PBS或合适缓冲液洗涤细胞2次。
5. 用带有500nm激发和530nm发射滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a) 由于AO可能具有致癌性，因此操作过程中须格外小心。
b) 可以用1/10浓度的AO缓冲液代替培养基。
储存条件：避光, 冷藏保存细胞染色专题之四：碘化丙啶碘化丙啶化学名：3,8-Diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenylphenanthridinium diiodide，3,8-二氨基-5-[3-(二乙基甲氨基)丙基]-6-苯基啡啶二碘英文名：Propidium iodide, Propidium diiodide; PI分子式：C27H34I2N4分子量：668.39外观：红棕色粉末应用：DNA染色染色原理：碘化丙啶(PI)是一种溴化乙啶的类似物，它在嵌入双链DNA后释放红色荧光。
尽管PI不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。
PI经常被用来与Calcein-AM或者FDA 等荧光化合物一起使用，能同时对活细胞和死细胞染色。
光谱性质：PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535nm和615nm。
染色过程：1．用PBS或适当的缓冲液制备10～50μM的PI溶液。
a)2．将1/10培养基体积的PI溶液加入到细胞培养基中。
b)3．在37℃培养细胞10-20分钟。
4．用PBS或合适的缓冲液洗涤细胞两次。
5．用535nm激发波长，615nm发射波长的滤光器的荧光显微镜观察细胞。
a) 由于PI可能具有致癌性，请小心操作。
b) 也可以用1/10浓度的PI缓冲液代替培养基。
保存条件：4℃避光保存注意事项：对人体有刺激性，请注意适当防护细胞染色专题之五：罗丹明123罗丹明123：Rhodamine 123分子式：C21H17ClN2O3分子量：381外观：橙红色、红棕色固体/粉末溶解性：可溶于DMSOCAS Number：62669-70-9染色原理：Rh 123是一种细胞通透性的、阳离子的荧光探针，容易被有活性的线粒体摄取，没有细胞毒性。
Rh123透过细胞膜在活细胞的线粒体内聚集，发出黄绿色荧光，可用于对许多种细胞进行染色，包括植物细胞和细菌。
由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性，此化合物被应用于检测细胞内的ATP。
Rh123还用于癌症研究。
光谱性质：l ex\l em (MeOH) = 505nm\534nm. e (505 nm, MeOH) = 97,000.染色步骤：1. 将0.4mg Rh123溶解到1ml DMSO中制备成1mM Rh123-DMSO溶液。
2. 用载玻片准备细胞。
细胞数目应为5×10e4 - 5×10e5个/ml。
3. 孵育该载玻片，用PBS或Hank’s液洗涤细胞。
4. 用培养基稀释1mM Rh123溶液以制备1-20μM Rh123缓冲液。
5. 将Rh123缓冲液a) 加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。
6. 去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞。
b)7. 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a) 加入细胞前将Rh123缓冲液放在37℃下孵育。
b) 洗涤细胞后为了固定，加入10％福尔马林缓冲液并孵育15-20分钟，接着用PBS洗涤。
储存条件：避光冷藏保存细胞染色专题之六：溴乙锭溴乙锭：Ethidium bromide化学名：溴化3,8-二氨基-5-乙基-6-苯基啡啶英文名：2,7-Diamino-10-ethyl-6-phenylphenanthridinium bromide，2,7-Diamino-10-ethyl-9-phenylphenanthridinium bromide，3,8-Diamino-1-ethyl-6-phenylphenantridinium bromide，3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridinium bromide，Homidium bromide，EB，EtBr别名：胡溴胺;溴乙胺菲啶;溴乙菲啶分子式：C21H20BrN3分子量：394.31 g/mol结构式：/wiki/Image:Ethidium_bromide.svgCAS number：1239-45-8熔点：260 - 262 °C（from wiki）性质：从酒精中结晶的是具苦味的深红晶体，熔点238～240℃；20℃时溶于20份水和750份氯仿。
染色原理：EB不能穿过活细胞的细胞膜，然而可以通过死细胞破损的细胞膜而对细胞核DNA染色。
EB含有一个可以嵌入的堆积碱基之间的一个平面基团，这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致染料与DNA结合并呈现荧光，由于EB-DNA复合物的荧光产率远大于未结合染料的荧光产率，所以当电泳凝胶中含有游离EB时，也可检测出少量DNA。
它是一种高灵敏的荧光试剂，也是一种重要的荧光染料，常用于检测DNA和RNA。
EB与DNA结合后抑制DNA的复制和转录。
光谱性质：EB-DNA复合物的激发波长和发射波长分别为518nm和605nm。
染色过程：1. 用PBS或合适的缓冲液制备10-50μM EB溶液。
a)2. 将1/10培养基体积的EB溶液加入细胞培养基中。
b)3. 37℃下孵育细胞10-20分钟。
4. 用PBS或合适的缓冲液洗涤细胞两次。
5. 用带有515nm激发波长和600nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a) 由于EB可能有致癌性，操作时须十分小心。