指纹图谱与质谱分析竹叶化学成分
中药指纹图谱的研究进展
中药指纹图谱的研究进展唐兴刚,李雪,李盛强,郭世宁(华南农业大学兽医学院,广东广州510642)中图分类号:S853文献标识码:A文章编号:052926005(2010)0620062203中药生产的原材料,因土壤、气候等环境因素及采收加工的不同,实际使用时不能保证药材质量的稳定,经加工提取得到的中间体,每个批次在成分含量、成分组成及各成分比例方面都不能保持一致。
因此对中药原材料、中间体及成方制剂的质量控制在中药的应用上占据着很主要的位置。
中药指纹图谱借用了法医学上指纹鉴定的概念,对中药的化学信息以现代分析技术给予表征并加以描述,全面反映中药内在化学成分的种类与数量,对判断中药真伪优劣,控制中药原材料、中间体及成品的质量,减少批间差异,并最终控制成品的质量起到了极其重要的作用。
1色谱指纹图谱1.1薄层色谱(TLC)指纹图谱薄层色谱法(T LC)一开始以简单快速的鉴别为起点,20世纪60年代以后很快取代了纸色谱技术,至今在中药鉴别中其应用频率仍然最高,近年来发展的TLC自动扫描仪,用固定波长对薄层的各个斑点作扫描的图谱比目测的层析图谱更为客观准确,也具有更好的指收稿日期:2009206215基金项目:国家/十一五0科技支撑计划(2008BADB4B0126)作者简介:唐兴刚(19852),男,硕士生,研究方向为中草药成分提取、分离及中药新剂型研究,E2mail:twct00@stu.s 通讯作者:郭世宁,E2mail:sh ining@ 纹鉴别意义。
李彩君等[1]以高良姜素为对照品,建立了高良姜药材的薄层色谱定性鉴别,发现高良姜素、山柰素等8个特征荧光斑点构成了高良姜乙酸乙酯提取部位的薄层色谱指纹图谱。
刘和平等[2]以柴胡正品北柴胡为基础建立柴胡皂苷高效薄层荧光色谱指纹图谱,并对同属品种南柴胡、锥叶柴胡、多枝柴胡、三岛柴胡、西藏柴胡等的指纹图谱进行比较分析,发现北柴胡指纹图谱由19个特征荧光条斑组成。
神农香菊化学成分及指纹图谱研究
神农香菊化学成分及指纹图谱研究神农香菊（Scientific name: Chrysanthemum indicum L.）是一种古老的中草药，被广泛用于中医药学领域。
它具有清热解毒、消肿利尿、活血化瘀等功效。
近年来，越来越多的研究表明，神农香菊中的化学成分和指纹图谱是其药效的重要决定因素。
神农香菊中的化学成分非常丰富，主要包括不同类别的化学物质，如黄酮类、多糖类、挥发油、酚类化合物、醇类等。
其中，黄酮类化合物是神农香菊中的主要活性成分。
研究发现，黄酮类化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、调节免疫等多种功效。
另外，多糖类化合物也是神农香菊中的重要成分，具有增强机体免疫力、抗肿瘤等作用。
为了揭示神农香菊中的化学成分及其药效之间的关系，研究人员采用高效液相色谱技术（HPLC）进行了指纹图谱的研究。
指纹图谱是将药材中的各种化学成分按照一定的条件分离，并通过特定的检测器进行检测，从而得到一个产峰的图谱。
该图谱可以准确地鉴定神农香菊的真伪，同时也可以评估其质量。
通过比较不同产地、不同药材质量等因素对指纹图谱的影响，可以为神农香菊的生产和质量控制提供科学依据。
研究人员首先收集了不同产地的神农香菊，并进行了经典提取、色谱分离等处理步骤。
然后，利用HPLC技术进行化学成分的分析和指纹图谱的制作。
研究发现，不同产地的神农香菊中的化学成分有所差异，主要是黄酮类化合物的含量有明显的变化。
同时，通过对不同产地的神农香菊进行药效评价，发现其药效与指纹图谱之间存在一定的相关性。
这说明神农香菊中的化学成分对其药效具有重要影响。
此外，研究人员还发现神农香菊的质量与其生长环境、种植技术等因素密切相关。
在相同的种植条件下，不同品种的神农香菊质量也有所不同。
因此，进行指纹图谱研究的同时，还需要对神农香菊的种植和加工进行科学规范的管理，以保证其质量和药效。
综上所述，神农香菊中的化学成分及指纹图谱研究对于揭示其药效机制、评估药材质量以及指导其生产和应用具有重要意义。
中药鉴定依据
中药鉴定依据中药鉴定是通过对中药材的外部特征、理化性质、化学成分、显微组织、药效成分等多方面的观察和检测，来判断中药材的真实性、质量和药效的过程。
鉴定中药需要结合多个方面的依据，以下是一些常见的中药鉴定依据：1.形态学特征：•植物性中药：观察植物的根、茎、叶、花、果实等器官的形态、大小、颜色、表面特征等。
•动物性中药：观察动物的形态、大小、颜色、外部结构等。
2.理化性质：•湿度：检测中药材的湿度，以评估其贮存状况。
•溶解性：测定中药材在水、醇等溶剂中的溶解性，有助于判断其成分。
•密度、硬度等：测定中药材的密度、硬度等物理性质。
3.化学成分：•色谱法：使用色谱法检测中药中的挥发性成分，如挥发油。
•光谱法：包括红外光谱、紫外光谱等，用于分析中药中的特定化学成分。
•质谱法：通过质谱分析，可以识别中药中的分子结构。
4.显微组织学：•显微镜观察：观察中药的显微结构，包括细胞、细胞壁、细胞核等，用于判断其真实性。
•组织切片：对中药样品进行切片，并使用显微镜进行细胞组织结构的观察。
5.药效成分：•含量测定：测定中药中活性成分的含量，如提取物中有效成分的浓度。
•生物活性检测：使用生物学实验方法，如细胞实验或动物实验，评估中药的生物活性。
6.指纹图谱：•高效液相色谱（HPLC）指纹图谱：通过HPLC等技术建立中药的指纹图谱，用于快速鉴别和评估中药的质量。
7.其他特殊性质：•气味：中药常有独特的气味，通过嗅觉来鉴别。
•滴定法：用于检测中药中的酸碱度。
在实际鉴定中，这些依据通常会综合运用，结合中药材的实际特点进行全面鉴别。
鉴定的结果对于确保中药的质量、安全和药效具有重要意义。
同时，鉴定中还可以参考相关的中药学、植物学、药理学等学科知识。
柴胡应用与指纹图谱研究进展
柴胡应用与指纹图谱研究进展作者：陈良胜殷双兴来源：《中国民族民间医药·上半月》2021年第12期【摘要】文章对三峡库区道地药材柴胡所面临的现状进行综述性探讨，并对柴胡的应用及指纹图谱进行综述性研究。
柴胡作为常用的药材，历史悠久，临床应用广泛。
运用系统的HPLC-MS等方法对道地柴胡药材的有效成分进行指纹图谱研究，并进行鉴别、检查、含量测定。
【关键词】柴胡;指纹图谱;道地药材;研究进展【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2021）23-0060-05Research Progress on Application and Fingerprint of BupleurumCHEN Liangsheng YIN Shuangxing*The People's Hospital of Xin County of Henan Province， Xinxian 465550， ChinaAbstract：In this paper， the problems faced by the genuine medicinal material Bupleurum in the Three Gorges Reservoir area were explained， and the index fingerprints of Bupleurum were reviewed. Bupleurum， as a commonly used medicinal material， has a long history and is widely used in clinic. The effective components of genuine Bupleurum medicinal materials were studied by HPLC-MS and other methods， and the identification， examination， content determination，heavy metal examination and pesticide residue examination were summarized， therefore， it is significant to control the quality of Bupleurum.Key words：Bupleurum; Fingerprint Spectrum; Genuine Medicinal Materials; Research Progress柴胡历史悠久，为伞形科植物柴胡（Bupleurum chinense DC.）或狭叶柴胡（Bupleurum scorzonerifolium Willd.）的根。
质谱法全序列检测方法
质谱法全序列检测方法质谱法是一种常用于生物样品分析的技术，可以快速、准确地测定样品的氨基酸序列和蛋白质表达水平。
下面是质谱法全序列检测方法的步骤：1.样品准备在进行质谱分析前，需要将生物样品进行处理和准备。
通常需要将样品进行蛋白酶解，将蛋白质分解为氨基酸序列，以便于后续的分析。
此外，还需要对样品进行清洗、纯化等步骤，以去除杂质和干扰物质。
2.离子化离子化是质谱分析的关键步骤之一，即将样品中的化合物转化为带电离子。
常用的离子化方法有电喷雾离子化（ESI）和基质辅助激光解吸离子化（MALDI）。
在离子化过程中，样品中的化合物会吸收能量并转化为带电离子。
3.质量分析在离子化后，需要对样品中的离子进行质量分析。
常用的质量分析器有飞行时间质量分析器和四极杆质量分析器等。
通过质量分析器，可以测定离子的质荷比（m/z），即离子的质量和电荷之比。
根据离子的质荷比，可以初步推断离子的类型和分子量。
4.谱图解析通过对离子的质荷比和相对丰度的测定，可以生成质谱图。
质谱图是一种包含大量信息的图像，可以通过谱图解析来识别和解析离子的类型和分子量。
常用的谱图解析方法有指纹图谱法和数据库比对法等。
指纹图谱法是根据样品的质谱图与已知指纹图谱进行比较，确定样品中的化合物类型；数据库比对法则是将样品的质谱数据与已知数据库中的数据进行比对，从而识别出样品中的化合物类型。
5.数据库比对在进行谱图解析时，通常需要将样品的质谱数据与已知数据库中的数据进行比对。
常用的数据库包括Uniprot、NCBI等。
通过比对，可以确定样品中存在的氨基酸序列和蛋白质表达水平等信息。
同时，还可以利用数据库中的注释信息和其他相关数据，对样品的生物学功能进行深入分析。
总之，质谱法全序列检测方法是一种高效、准确的蛋白质分析技术，可以广泛应用于生物医学领域的研究。
通过对样品进行深入的质量分析和数据库比对，可以获得样品的氨基酸序列和蛋白质表达水平等信息，为进一步研究提供重要的参考依据。
神奇的竹叶茶
神奇的竹叶茶竹叶茶是以竹叶为主要原料制作的一种茶。
竹为禾本科植物，中空有节，茎、叶常绿，在长江以南各省都有载种。
竹叶含三萜类物质、芦竹素、白芳素等。
取鲜竹50-100克，水煎代茶饮，滋味清午纯和，具有清热利尿，清凉解暑作用。
目录1简介2竹子种类3做法4灯心竹叶茶5功效6植物按语1他如酚酸类化合物、蒽醌类化合物、萜类内酯、特种氨基酸和活性肽、锰、锌、硒等微量元素。
竹叶中所含的功能因子主要是黄酮糖苷和香豆素类内酯。
其有效成的含量和生物活性均与银杏叶具有可比性。
竹叶黄酮安全无毒，众所周知，银杏叶中含有一定量的白果酸，对人体有害，必须彻底去除。
而在竹叶有效成分的研究中，迄今尚未发现任何有毒、有害成分，其安全性大大高于银杏提取物。
竹叶提取物具有优良的抗自由基、抗氧化、抗衰老、降血脂和血胆固醇、扩张毛细血管、疏通微循环、活化大脑促进记忆、改善睡眠、抗癌症、美化肌肤等功效。
竹叶提取物以其丰富的资源、优秀的品质、确凿的保健功效、清新怡人的风味和极大的安全性，在功能性食品和医药保健品领域有着十分广阔的应用。
竹叶提取物是竹叶茶的主要成分，所以常喝对人体有益。
【出处】《食物中药与便方》【组成】竹叶菜30～60克，淡竹叶30克。
【功用】其作用有：治疗关格诸癃结、小便不通、出刺、决肿、明目去翳、破胎堕子、下闭血。
养肾气、逐膀胱邪逆、止霍乱、长毛发。
主五林、月经不通、破血块排脓、痔瘘并泻血、眼目肿痛及肿毒，治浸淫疮并妇人阴疮。
【主治】①流行性感冒，发热，口渴，烦躁，尿少色赤。
②上呼吸道感染，咽喉、扁桃体炎，口渴烦热。
【制法】上药挫碎，纳入热水瓶中，用沸水冲泡，盖闷10多分钟。
频频饮用，于1日内饮尽。
【宜忌】风寒型感冒，恶寒明显者，不宜饮用。
2竹子种类全球竹类计有65属1250种，我国是竹类资源最丰富的国家，素有“竹子王国”之称，目前有竹子500多种，竹林面积720万公顷，竹林种类、面积和蓄积量均居世界前列。
依生长型态分类：丛生竹：新的竹是从老竹子的秆根茎侧芽长出来的，所以看起来都会聚在一起，一丛一丛的。
淡竹的生物化学成分与功效
淡竹的生物化学成分与功效淡竹，又称苦竹、商湐竹，是一种常见的竹类植物，属于禾本科竹亚科。
它的英文名为"Sweet Bamboo"，是一种乔木状的植物，常见于亚洲地区的温暖和湿润地带。
淡竹的茎干直立挺拔，通常可达到10到20米的高度，呈圆柱形，通常呈黄绿色或淡翠绿色。
淡竹富含多种生物化学成分，这些成分赋予了它许多药用和保健功效。
首先，淡竹中富含丰富的纤维素。
纤维素是一种无机结构多糖，不会被人体内的酶所消化吸收，但可以增加食物的体积，促进肠道蠕动，缓解便秘问题。
由于淡竹中含有大量纤维素，因此食用淡竹能够起到通便润肠的作用，维持肠道健康。
此外，淡竹还富含植物蛋白。
植物蛋白是一种优质的蛋白质来源，不含饱和脂肪酸，有助于维持血脂平衡。
淡竹的蛋白质含量丰富，比例适中，容易被人体吸收利用。
食用淡竹能够提供身体所需的必需氨基酸，促进肌肉生长和修复。
同时，淡竹还含有多种维生素和矿物质。
维生素和矿物质对于人体的正常生理机能至关重要。
淡竹中富含的维生素C能够增强免疫力，促进胶原蛋白合成，有助于维持皮肤的弹性和光泽。
此外，淡竹中还富含维生素B、维生素E、钙、镁、锌等，有助于提供全面的营养保障，维持身体的健康。
另外，淡竹还具有抗氧化和抗炎作用。
抗氧化物质可以中和身体内的自由基，减少細胞的损伤，降低患疾病的风险。
淡竹中富含的抗氧化物质能够保护细胞免受氧化损伤，防止衰老和疾病的发生。
此外，淡竹还含有一些天然的抗炎物质，有助于缓解炎症反应，减轻疼痛和不适。
除了上述成分与功效外，淡竹还含有一些其他的生物活性物质。
例如，淡竹中所含的竹子素具有抗菌和抗病毒作用，可用于预防感染和提高免疫力。
此外，淡竹还含有一种叫做竹醇的物质，具有降低血糖和改善胰岛素敏感性的作用，对于预防和治疗糖尿病具有一定的潜力。
总之，淡竹是一种营养丰富、具有多种生物化学成分与功效的植物。
它富含纤维素、植物蛋白、维生素、矿物质和抗氧化物质，有助于促进肠道健康、提供全面的营养保障、增强免疫力，同时还具有抗炎、抗菌、抗病毒和降血糖的作用。
2024版《中药学》教学课件
泽泻
利水渗湿，泄热，化浊降脂。主治小 便不利，水肿胀满，泄泻尿少，热淋 涩痛，高血脂症。
薏苡仁
利水渗湿，健脾止泻，除痹，排脓， 解毒散结。主治水肿，脚气，小便不 利，脾虚泄泻，湿痹拘挛，肺痈，肠 痈。
2024/1/28
11
补益类中药材
2024/1/28
人参
大补元气，补脾益肺，生津止渴，安神益智。主治元气虚脱证，肺脾心肾气虚证，热病气虚 津伤口渴及消渴证。
中药学基本概念与理论
2024/1/28
3
中药学定义及发展历程
2024/1/28
中药学的定义
研究中药基本理论和临床应用的学 科，是中医药学的重要组成部分。
发展历程
从神农尝百草开始，经历历代医家 的不断积累和发展，逐渐形成了独 特的理论体系和丰富的实践经验。
4
中药分类与命名规则
中药分类
按药物性质、功效、产地等不同标准 进行分类，如解表药、清热药、祛湿 药等。
利用现代科技手段如基因编辑、细胞治疗等，结合中药活性成分，开发
新型治疗方法和药物。
2024/1/28
03
研发策略思考
在创新药物研发过程中，应注重多学科交叉融合，加强国际合作与交流，
同时关注知识产权保护和市场开拓等问题。
24
06
CATALOGUE
实验操作规范与安全注意事项
2024/1/28
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实验室安全规章制度介绍
6
配伍禁忌与合理用药原则
配伍禁忌
指某些药物在配伍使用时可能产生不良反应或降低药效，需要避免同时使用。如“十八反”、“十九畏” 等。
合理用药原则
根据患者病情、体质等因素，选择适当的药物和剂量进行治疗，同时遵循中药的煎煮、服用等规范操作。
中药竹叶功效与作用
中药竹叶功效与作用中药竹叶是指从竹子上采摘下来的嫩叶，常用于中药的制备中。
竹叶在民间有着广泛的应用，其功效与作用也备受关注。
本文将详细介绍中药竹叶的功效与作用。
一、竹叶的基本信息竹叶是竹科植物中一种常见的叶片，一般为长条状，表面光滑而叶脉清晰。
竹叶有深绿色、嫩绿色和青黄色等不同的颜色，而且竹叶的大小也有所差异，有些竹叶很大，有些则相对较小。
竹叶的气味清香，口感略苦。
竹叶的营养丰富，含有丰富的蛋白质、碳水化合物、维生素和矿物质等。
二、竹叶的功效与作用1. 清热解毒：竹叶具有清热解毒的功效，可用于治疗疮疖肿痛、咽喉肿痛、痈疽疮毒等症状。
竹叶中含有丰富的黄酮类物质，具有抗菌、抗病毒和抗氧化的作用，可以有效地清除体内的热毒。
2. 利水消肿：竹叶有利水消肿的作用，可用于治疗水肿、腹胀等症状。
竹叶中含有一定量的天冬氨酸和天门冬氨酸等氨基酸，这些物质可以促进体内水分的排出，减轻水肿和消除腹胀。
3. 抗氧化：竹叶中含有丰富的维生素C和维生素E等抗氧化物质，这些物质可以中和体内的自由基，保护细胞免受氧化损伤。
同时，竹叶中的茶多酚也具有很强的抗氧化作用，可以延缓衰老过程，提高人体的抵抗力。
4. 舒缓作用：竹叶有一定的舒缓作用，可以缓解焦虑、紧张和压力等不良情绪。
竹叶中的氨基酸可以增加脑内的谷氨酸水平，促进中枢神经系统的正常功能，从而改善心情和睡眠质量。
5. 凉血止血：竹叶具有凉血止血的功效，可用于治疗咯血、便血等症状。
竹叶中的黄酮类物质具有收敛作用，可以减少血管的渗透和破裂，从而达到止血的效果。
6. 降脂降压：竹叶中的黄酮类物质和花青素具有降脂降压的作用，可以调节血脂水平和血压水平，预防心脑血管疾病的发生。
7. 增强免疫力：竹叶中含有丰富的多糖类物质，可以提高机体的免疫功能，增强对疾病的抵抗力。
此外，竹叶还富含胡萝卜素等物质，可以增加机体内的抗氧化酶活性，提高免疫系统的防御能力。
三、竹叶的使用方法竹叶可以作为中药材进行煎煮、浸汤、炒煮等处理，也可以加工成竹叶粉、竹叶茶等产品。
中药淡竹叶质量标准研究概况
中药淡竹叶质量标准研究概况蔡慧卿;詹志来;郑丽香;黄泽豪【期刊名称】《中医学报》【年(卷),期】2017(32)12【摘要】在淡竹叶的鉴别方面,历版药典与各地中药饮片炮制规范均只记载叶的表面观,多数学者对淡竹叶与其混伪品的研究也多停留在性状方面,可见,在淡竹叶的鉴别方面还有许多不足。
在淡竹叶检查方面,《中华人民共和国药典》仅记载水分和总灰分检查,各地中药饮片炮制规范中仅《上海市中药饮片炮制规范》2008年版收载"杂质检查";《江西省中药饮片炮制规范》2008年版收载"水分检查";《湖南省中药饮片炮制规范》2010年版收载"浸出物检查"。
其他皆没有检查方面的记载。
在加工炮制方面,各省区炮制规范收载不一,有切长段,有切短段,还有不明确长短,且多数收载的炮制方法没有明确杂质涵盖的范围。
再者,各地标准参差不齐,不利于标准的执行,也使市场监管存在困难。
淡竹叶的质量控制指标较少,对于当下先进的用于质量标准研究的方法如GC-MS法、色谱、指纹图谱等,未来都可用于淡竹叶的质量标准。
【总页数】5页(P2430-2434)【关键词】淡竹叶;质量标准;炮制规范;中药【作者】蔡慧卿;詹志来;郑丽香;黄泽豪【作者单位】福建中医药大学;中国中医科学院中药资源中心/道地药材国家重点实验室培育基地【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.中药配方颗粒质量标准研究概况 [J], 王元清2.中药淡竹叶质量标准分析研究 [J], 李学明; 林善华; 陈华龙3.淡竹叶浸出物提取方法的建立及其质量标准研究 [J], 鲁云;李燕珍;林碧珊;王寿富;魏梅;孙冬梅;梁志毅4.中药枳壳的质量标准研究概况 [J], 曹君;龚千锋;钟玲云;汪红英;易炳学;蔡瑞丽5.中药砂仁化学成分与质量标准研究概况 [J], 陈红;程再兴因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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指纹图谱与质谱分析竹叶化学成分张飞虎;于燕子;张胜;李湘洲【摘要】为比较不同种竹叶化学成分的差异,建立了基于6种竹叶的指纹图谱分析实验方法,并运用高效液相色谱-质谱联用技术对具有地域特点的长沙青皮竹竹叶的化学成分进行鉴定.通过相似性评价系统计算了6种竹叶的色谱指纹图谱之间的相似性.长沙青皮竹与水竹化学成分最为相似,相似度为0.992,说明两者化学成分很相似;长沙青皮竹与班竹之间的化学成分相似性最小,相似度为0.209.质谱分析通过相对分子质量可鉴定出8个成分,多为黄酮类,符合竹叶化学成分的一般规律.通过该实验的实践可使学生系统地掌握指纹图谱分析方法,了解高效液相色谱-质谱联用技术在天然活性成分研究中的应用.【期刊名称】《实验室研究与探索》【年(卷),期】2019(038)004【总页数】4页(P25-28)【关键词】指纹图谱;质谱;竹叶;实验课程【作者】张飞虎;于燕子;张胜;李湘洲【作者单位】中南林业科技大学材料科学与工程学院,长沙410004;中南林业科技大学材料科学与工程学院,长沙410004;中南林业科技大学材料科学与工程学院,长沙410004;中南林业科技大学材料科学与工程学院,长沙410004【正文语种】中文【中图分类】S789.40 引言指纹图谱分析是一种综合、定量，基于天然产物化学成分研究基础上的检测方法，一般采用高效液相色谱法结合分析软件进行，指纹图谱技术已广泛应用在中药生产过程控制中[1]，可以有效地解决生产中内在质量控制问题，保证中药制剂的药物作用。
同时其也大量应用于不同来源物种的鉴别分析。
指纹图谱常见的分析方法有非线性映射[2]、聚类分析[3]、相似性分析[4]、神经网络[5]和重叠率分析[6]等。
高效液相色谱-质谱联用是将高效液相色谱与质谱串联而成的仪器。
高效液相色谱将样品中成分分离，质谱提供成分的相对分子量，从而获得化学成分的信息。
高效液相色谱-质谱联用整合了高效液相色谱高分离和质谱高鉴别的特点，是天然活性成分研究的重要技术手段[7-8]，在实验教学中常与指纹图谱配合使用。
竹是一种重要的非木本森林资源，含有多种活性成分，竹叶提取物的低毒性和其广泛的药理活性，吸引了大量研究者的研究兴趣[9]。
关于竹叶活性成分质量控制的两个主要方法：一种是用指纹图谱分析的方法，可提供样品完整的化学成分信息[10-11]；而另一种是基于特定的活性成分，对其进行分析研究[12-13]。
如黄酮(荭草苷、异荭草素、牡荆素和异牡荆)[14] 、酚酸(咖啡酸和绿原酸)[15]的含量。
本文将校园中常见6种竹的叶片进行高效液相指纹图谱分析所获得的数据进行了比较分析化学成分差异，让学生掌握指纹图谱分析在天然活性成分分析中的应用。
对于有深入研究兴趣的同学，向他们展示运用高效液相色谱-质谱联用技术对具有地域特点的长沙青皮竹竹叶的具体成分进行鉴定，让学生了解高效液相色谱-质谱联用技术在天然活性成分研究中的应用。
1 实验方法1.1 实验仪器与材料指纹图谱分析的仪器为美国安捷伦公司生产的高效液相色谱仪(型号：Agilent1260)，配有紫外检测器与四元液相泵；用于液相-质谱分析的仪器为美国应用生物系统公司生产的高效液相色谱-质谱联用仪(型号：API QSTAR Pulsar)，配备四极杆/飞行时间串联质谱。
实验用乙腈、甲醇为色谱纯，甲酸、磷酸为分析纯。
实验用水为超纯水。
6种竹叶采自中南林业科技大学校园内，经中南林业科技大学林学院陈建华教授鉴定分别为长沙青皮竹(Bambusa textilis var. persistens. B.M.Yang)；水竹(Phyllostachys heteroclada Oliver)；假毛竹(Phyllostachys kwangsiensis)；琴丝竹(Phyllostachys aureosulcata)；斑竹(Phyllostachys bambusoides cv. Lacrima-Deae)；毛竹(Phyllostachys heterocycla cv. Pubescens)。
上述竹叶样品依次编号为S1，S2，S3，S4，S5，S6。
1.2 样品的制备竹叶收集后在阴凉处干燥，用植物粉碎机将竹叶粉碎成粗粉。
分别称取粗粉2 g，加甲醇100 mL，回流提取2 h。
将提取液浓缩至10 mL，然后用微孔滤膜(0.45μm)过滤，取滤液进样。
1.3 指纹图谱分析条件反相C18柱(长度与直径：250 mm×4.6 mm，填料粒度：5 μm)；流动相为0.1%磷酸(A)和乙腈(B)。
洗脱条件：初始比例A相为88%，B相为12%；0～30 min之内A相由88%降低至84%，B相由12%升至16%；30～60 min之内A相由84%降低到75%，B相由16%升至25%；60～80 min之内A相由75%降低至40%，B相从25%升至60%。
流速：1.0 mL/min，各样品的进样量为10 μL，检测波长330 nm。
使用国家食品药品监督管理局发布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本号：2004A)对色谱图进行分析。
1.4 高效液相色谱-质谱条件反相C18柱(长度与直径：100 mm×2 mm，填料粒度：5 μm)；流动相为0.1%甲酸(A)和乙腈(B)。
洗脱条件：0 min：90%A，10%B；0～20 min，90%A→70%A，10%B→30%B；20～22 min：70%A→0，30%B→100%B；22～25 min：100%B。
流速：0.20 mL/min, 各样品的注射量为10 μL。
波长为330 nm。
质谱分析条件：电喷雾离子源，正离子扫描模式，毛细管电压3.5 kV，喷雾电压5 500 V，雾化气压力0.11 MPa，辅助气柱前压68 kPa，干燥温度450 ℃，干燥气体流速为8.0 L/min。
2 结果与讨论2.1 指纹图谱相似性评价6种竹叶的色谱图见图1，共有峰的相对面积和保留时间分别见表1和2，相似性分析结果见表3。
图1 6种竹叶的色谱图由表1可知，6种竹叶色谱图中有8个共有峰。
以最大峰面积的7号峰为对照，峰面积设为1，每个竹叶图谱中的其他共有峰与之相除得到相对峰面积。
表2则提供了8个共有峰出峰的保留时间。
由表内数据可知，每个竹叶色谱图中共有峰的保留时间的标准差(SD)均<1。
说明这些峰的选取符合共有峰的特点。
指纹谱图的相似性是一个量化的参数。
该参数结合了色谱图中共有峰的重叠率和峰面积强度。
每对样品色谱图之间的相似性体现了化学成分的差异性(见表3)。
相似性范围在0～1之间，值为1时表示图谱是相同的，值为0则表示图谱完全不同。
通过相似性评价系统计算了6种竹叶的色谱指纹图谱之间的相似性。
长沙青皮竹的色谱图与水竹相似性最大，为0.992，说明两者化学成分很相似。
长沙青皮竹和斑竹色谱图之间的相似性最小，为0.209，说明两者化学成分有很大的不同。
表1 共有峰的相对峰面积峰编号S1S2S3S4S5S610.016 0.021 1.109 1.6141.959 0.906 20.042 0.048 0.633 0.510 1.049 0.567 30.201 0.275 0.194 4.7872.113 0.263 40.077 0.094 5.418 2.9903.382 3.798 50.731 0.861 1.81219.802 0.245 1.057 60.396 0.483 4.013 15.748 1.971 3.427 7(S)1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 80.083 0.066 0.286 0.165 0.545 0.306表2 共有峰的保留时间 min峰编号S1S2S3S4S5S6X±SD%110.70 10.36 10.56 10.55 10.56 10.57 10.55±0.11214.75 15.13 14.52 14.55 14.48 14.5814.27±0.24322.14 22.68 21.61 20.37 21.59 21.56 21.66±0.77422.89 23.3622.35 21.67 22.33 22.38 22.50±0.57523.67 24.06 23.18 22.33 23.15 23.1923.26±0.58633.60 33.50 32.65 32.63 33.15 32.68 33.04±0.44750.94 50.57 50.22 50.27 50.23 50.29 50.42±0.29872.13 71.94 71.94 71.93 71.92 71.94 71.97±0.08表3 竹叶指纹图谱的相似性分析样品编号S1S2S3S4S5S6S11.0000.9920.3130.5560.2090.293S20.9921.0000.3200.5800. 2140.299S30.3130.3201.0000.5320.8310.980S40.5560.5800.5321.0000.2590. 473S50.2090.2140.8310.2591.0000.880S60.2930.2990.9800.4730.8801.000 2.2 长沙青皮竹化学成分长沙青皮竹样品通过高效液相色谱-质谱联用仪获得色谱的图见图2，质谱分析通过相对分子质量可鉴定出8个成分，见表4。
成分多为黄酮类，符合竹叶化学成分的一般规律。
图2 长沙青皮竹叶液相色谱-质谱分析图表4 质谱分析长沙青皮竹叶中所含化学成分相对分子质量化学结构式可能的化学成分1448.10C21H20O11木犀草苷/荭草苷2594.16C27H30O15牡荆素葡萄糖苷3578.16C27H30O14山奈苷4608.17C28H32O15斯皮诺素5638.18C29H34O16水仙苷6548.15C26H28O13葛根素芹菜糖苷7578.16C27H30O14牡荆素鼠李糖苷8592.18C28H32O14蒙花苷3 结语本实验通过指纹图谱分析对不同来源的6种竹类植物叶片化学成分的差异进行了比较，为竹叶的化学成分评价提供了一个新的视角。
另外，通过高效液相色谱-质谱技术对具有地域特点的长沙青皮竹中的化学成分进行鉴定分析。
实验教学是林产化工专业培养的重要环节。
竹叶指纹图谱分析实验课共8 学时，其中4 学时进行高效液相色谱实验，另外4 学时进行液相色谱-质谱联用仪的讲解和操作，指纹图谱的数据分析由学生在课后进行分析。
该实验主要是色谱分析与质谱分析的应用，同时还涉及了数据统计分析的知识，综合性与实践性强，可全面提升学生的科研能力和实验操作能力。