核蛋白提取方法

4. 每 20ul 细胞压积中加入 200μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，
置冰上 15 分钟，中间每隔 5 分钟涡旋振荡或吹打混匀。。
5. 再次高速涡旋振荡 5 秒，然后在 4℃，12000×g 条件下离心 5 分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80
I2PP2A/SET in Alzheimer disease
Neurobiology of Aging
2013 （IF=6.189）
● Xiaoling Ma et al.
Staphylococcal Panton-Valentine Leukocidin Induces
Pro-Inflammatory Cytokine Production and Nuclear Factor-Kappa B Activation in Neutrophils
合物和磷酸酶抑制剂，混匀后置冰上备用。 2. 取 5-10×106 个细胞①，在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养基，
尽可能吸干，收集细胞。 3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 4. 每 20ul 细胞压积中加入 200μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，
有效期： 一年。
产品简介： 贝博核蛋白提取试剂盒提供配套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组
织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组 织等哺乳动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在 1 小时内完成。制备 的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白 研究。
置冰上 15 分钟，中间每隔 5 分钟涡旋振荡或吹打混匀。 5. 再次高速涡旋振荡 5 秒，然后在 4℃，12000×g 条件下离心 5 分钟。 6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80
℃冰箱保存备用。 7. 沉淀用 PBS 洗涤一次，然后在 4℃，12000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。 8. 在沉淀中加入 200μl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒。 9. 置冰上 40 分钟，每隔 10 分钟高速涡旋振荡 15 秒。 10. 在 4℃，12000×g 条件下离心 10 分钟。 11. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 12. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
应用示例：
123 图片说明：用核蛋白提取试剂盒提取大肠组织样本的SDA-PAGE的电泳考染照片和Western照片。 图1泳道中1、2、3分别为Marker、胞浆蛋白、核蛋白样本。图2为以上样品的GAPDH内参的WB结果照片。
使用方法：
细胞蛋白提取 1. 提取液制备：每 200ul 冷的蛋白提取液 A 和 B 中分别加入 2ul 蛋白酶抑制剂混
℃冰箱保存备用。
7. 沉淀用 PBS 洗涤一次，然后在 4℃，12000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。
8. 在沉淀中加入 200μl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒。
9. 置冰上 40 分钟，每隔 10 分钟高速涡旋振荡 15 秒。
10. 在 4℃，12000×g 条件下离心 10 分钟。
PloS one
2012
（IF=4.411）
● Jinchun Qian et al.
Ophiopogonin D prevents H2O2-induced injury in primary human
umbilical vein endothelial cells
Journal of Ethnopharmacology
组织蛋白提取
1. 提取液制备：每 200ul 冷的蛋白提取液 A 和 B 中分别加入 2ul 蛋白酶抑制剂混
合物，混匀后置冰上备用。
2. 取适量组织样本剪碎，加冷 PBS，用组织匀浆器匀浆①至无明显肉眼可见固体（或
用液氮研磨），冰上静置 5 分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
3. 在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，弃上清。
2010 Volume 128, Issue 2, Pages 438-445 （IF=2.466）
相关产品：
产品 总蛋白提取试剂盒 核蛋白提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒 细胞蛋白提取试剂盒 组织蛋白提取试剂盒 细菌蛋白提取试剂盒 酵母蛋白提取试剂盒 磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
11. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 12. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
参考ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ献：
● Guang Yu, Tonghai Yan et al.
Ser9 phosphorylation causes cytoplasmic detention of
核蛋白提取试剂盒
产品组成：
产品组成 规格
提取液 A 提取液 B 蛋白酶抑制剂混合物 磷酸酶抑制剂混合物
BB-3102-1 50T 10ml 10ml 250ul 250ul
BB-3102-2 100T 20ml 20ml 500ul 500ul
储存条件： 蛋白提取液，磷酸酶抑制剂 2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105 BB-3702
产品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒 蛋白 Marker 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 磷酸酶抑制剂混合物 SDS-PAGE 上样 Buffer
产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3401 BB-3721 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311 BB-3703