生物可降解材料聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)纳米粒制备工艺的研究
生物可降解材料聚乳酸．羟基乙酸（ＰＬＧＡ）纳米粒制备工艺的研究＋
薛静１，王希２“，黄岳山１，支晓兴１
（１华南理工大学生物科学与工程学院，广东省广州市５１０００６；２广东食品药品职业学院，
广东省广州市５１０５２０）
摘要：以聚乳酸一羟基乙酸共聚物［ｐｏｌｙ（１ａｃｔｉｃ－ｃｏ－ｇｌｙｃｏｌｉｃａｃｉｄ），ＰＬＧＡ］为材料，采用乳化溶剂挥发法制备纳米粒。以粒径为指标，探讨乳化剂种类、乳化剂含量、油相种类、超声时间、
挥发时间、油相与水相体积比（ｗ：Ｏ）以及聚合物质量浓度等制备条件对纳米粒粒径的影响，确定制备ＰＬＧＡ纳米粒的最佳工艺条件。
关键词：聚乳酸．羟基乙酸（ＰＬＧＡ）纳米粒工艺
ＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＰＲｏＣＥＳＳｏＦＰＲＥＩ恰ＲＡ，Ｉ＇ＩｏＮｏＦＢＩｏＤＥＧＲＡＤＡＢＬＥＰＯＩ删ＥＲ．ＰＬＧＡＮＡＮＯＰＡＲＴＩＣＬＥＳ
ＸＵＥＪｉｎ９１，Ⅵ，ＡＮＧｘｉ２，ＨＵＡＮＧＹｕｅ．ｓｈａｈｌ，ＺＨＩＸｉａｏ－ｘｉｎ９１
《１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，５１０００６；２．ＧｕａｎｇｄｏｎｇＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＶｏｃａｔｉｏｎａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，５１０５２们
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ａｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅｐｏｌｙｍｅｒｐｏｌｙ（１ａｃｔｉｃ－ＣＯ－ｇｌｙｃｏｌｉｃ）ａｃｉｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｆｏｒｍ
ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｂｙｅｍｕｌｓｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎ．ＷｉｔｈＲｅｆｅｒｅｎｃｅｏｆｓｉｚｅ，Ｓｏｍｅｆａｃｔｏｒｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｔｈｅｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｔｙｐｅ，ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｏｉｌｐｈａｓｅｔｙｐｅ，ｓｏｎｉｃｔｉｍｅ，ｖｏｌａｔｉｌｅｔｉｍｅ，ｔｈｅｖｏｌｕｍｅ
ｒａｔｉｏｏｆｗａｔｅｒｔｏｏｉｌ（Ｗ：Ｏ），ａｎｄｐｏｌｙｍｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｏｌｙ（１ａｃｔｉｃ—ＣＯ－ｇｌｙｃｏｌｉｃ）ａｃｉｄ，Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，Ｐｒｏｃｅｓｓ
生物可降解材料聚乳酸一羟基乙酸共聚物ＰＬＧＡ（图１）是一种生物相容性良好的可降解材料，在体内降解生成的乳酸单体可作为能量代谢物质参与三酸循环，不引起明显的炎症性反
应、免疫反应和细胞毒性反应，长期使用体内无蓄积，并可以延缓药物释放时间，提高药物半衰期，降低药物毒性等特点【ｌ】，是抗癌药物理想的找体材料‘２，３１。
Ｏ『Ｉｌ１ＨＯ十ＣＣＨＲＯＨ十Ｒ
ＬＪＩ＇１（Ｒ－Ｈ：乙交酯，Ｒ＝ＣＨ３：丙交酯）
图ｌＰＬＧＡ的分子结构式
尽管聚乳酸．羟基乙酸共聚物（ＰＬＧＡ）作为药物载体材料有上述所示优势，然而限制其应用的主要问题是存在药物突释现象。适最的突释可以使血药浓度快速达到有效治疗浓度，对
治疗有利，但过最的突释会导致血药浓度接近或超过中毒水平，从而产生不良反应。影响突
‘广东省广东省自然科学摹金项Ｒ（项Ｈ编｜号：９１５１０５２００５０００００６）；
”通讯联系人，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｄｗａｎｇｘ＠ｙａｈｏｏ．ｃａ
１６２释的因素有：微球表面形态、主药理化性质、微球制备方法及制备参数、微球载药量等，其
中微球表面形态和粒径是主要影响因素旧。本文以ＰＬＧＡ为载体材料，采用乳化溶剂挥发法，
以纳米粒粒径为指标，通过改变制备参数，对ＰＬＧＡ纳米粒制备工艺进行研究。
１实验部分
１．１试剂与仪器
聚乳酸一羟基乙酸共聚物（ＰＬＧＡ，Ｌ：Ｇ＝－５０：５０，Ｍ。＝１５０００），山东医疗器械研究所；甘
油、Ｔｗｅｅｎ．８０、Ｓｐａｎ．８０、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、聚乙烯醇，国药集团化学试剂有限公司。实验室用水均为双蒸水。恒温磁力搅拌器（ＨＪ．３）江苏宏华仪器厂，超声波仪（ＳＫ８２００ＬＨ）上海科导超声仪器
有限公司，电子天平（ＢＳｌ２４Ｓ）梅特勒．托利多仪器有限公司，冷冻干燥机（ＦＤ．１Ｃ）北京
德天佑仪器有限公司，高速搅拌器（ＪＢ９０．Ｄ）上海素映仪器仪表有限公司，高速离心机
（ＣＲ２１Ｇ）日本日立公司，动态激光粒度分布仪（ＬＢ５５０）日本ＨＯＲＩＢＡ公司。
１．２实验方法
１．２．１ＰＬＧＡ纳米粒的制备
准确称取一定量的ＰＬＧＡ，溶了：不同有机溶剂中，组成有机相，在超声和搅拌下将所得
聚合物溶液在乳化剂的存在下加入到水相中，控制搅拌速度。形成乳液后，置于磁力搅拌器
上搅拌一定时间，有机溶剂挥发后得纳米粒混悬液。将所得纳米粒混悬液先于３０００ｒ／ｍｉｎ低速离心除去大颗粒聚集物，再在１００００ｒ／ｍｉｎ速度下冷冻离心３５分钟，沉淀用蒸馏水洗涤。
将沉淀物超声分散于５０ｍｌ蒸馏水中，真空冷冻十燥２４ｈ得到ＰＬＧＡ纳米粒‘５１。
１．２．２纳米粒制备工艺考察
以１．２．１制各方法为基础，采用单因素考察法对乳化剂种类（ｓ１）、乳化剂含量（ｃ０、油相
种类（Ｓ２）、超声时Ｉｈ］（ｔ１）、挥发时问（ｔ２）、油相与水相体积比（ｗ：Ｏ）以及聚合物质量浓度（Ｃ２）等这几个对纳米粒粒径影响较大的因素进行考察，以筛选制备粒径适中的工艺。各因素水平见表ｌ。实验中考察主要因素时其余因素全部选择水平２。
表Ｉ单因素考察实验方案
水，ＦＳｌＣＩＳ２ｈ（ｍｉｎ）ｔ２（ｈ）Ｗ：０Ｃ２（ｇ·Ｃ。１）
１甘油２％ｊ氯甲烷５４１：１０ｌＯ
２吐温．８０１％内酮８６１：５０５０
３刊盘一８００．５％乙酸乙酯１０８１：２５２５－氯甲烷４聚乙烯醇Ｏ．２５％１２１０１：１００１００＋乙醇
１．３粒度和粒径分布
称取５０ｍｇ冻十后的纳米粒超卢分散于蒸馏水中，用动态激光粒度分布仪测定纳米粒的粒径人小及分布。
１６３２结果与讨论
在纳米给药系统中，药物突释现象是影响其应用的关键问题之一。适量的突释可以使血药浓度快速达到有效治疗浓度，对治疗有利，但过量的突释会导致血药浓度接近或超过中毒
水平，从而产生不良反应。在众多影响微球的突释的因素中，粒径又是最主要的因素。所以，
以粒径作为评价标准之一。
２．１乳化剂种类对ＰＬＧＡ纳米粒制备的影响
图２乳化剂种类对纳米粒制备的影响
为使体系稳定，需要ＪＪＵＡ．降低界面能的物质，Ｉｉ０－％化剂【６Ｊ。乳化剂的作用是使有机相在其
作用下分散为细小的乳滴，减少乳滴间团聚，形成相对稳定的分散体系，有机溶剂从内油相
中扩散出来，纳米粒固化获得较小粒径。固定其他条件，研究乳化剂种类对纳米粒制备的影响。如图２所示，乳化剂的种类对粒径的影响不是很大，在Ｏ／Ｗ体系中加入乳化剂后，乳
化剂能在油水界面发生吸附，形成界面膜。同时界面具有一定的强度，对分散液滴起到保护
作用，使液滴在相互碰撞中不易产生聚结。
２．２乳化剂含量对ＰＬＧＡ纳米粒制备的影响
苟０
４００
３，Ｏ
ｊ３００卿勰２５０
２Ｄ０
１５０
１００００ｊ０．４０＿６０．８Ｉ１２１Ｊ１．６１．８２２２乳化硼衣度，鲁
图３乳化剂含量对纳米粒制备的影响
固定其他条件，研究乳化剂浓度对纳米粒制备的影响。如图３所示，乳化剂浓度在０．３％一ｌ％之问，纳米粒粒径在２００．３００ｎｍ范围内，满足需要。乳化剂的浓度对ＰＬＧＡ纳米粒
的粒径有很大影响，纳米粒粒径随乳化剂浓度的增加而逐渐降低，这是由于有机相在乳化剂
１６４踟啪撇瑚ｍ
ｍ∞ｏ、
搿尊的作用下分散为细小的乳滴，随着乳化剂容量的增加，乳化能力增强，如果乳化剂在分散介
质中的浓度越小，相对浓度越小，乳液分散的越均匀，乳滴间团聚的机会越少，形成相对稳
定的分散体系，有机溶剂从内油相中扩散出来，纳米粒固化获得较小粒径。当乳化剂低于临界胶束浓度时，有机相无法在水相中分散，从而无法获得纳米粒。
２．３油相种类对ＰＬＧＡ纳米粒制备的影响
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３１０湖
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２ＴＯ跏
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图４油相种类对纳米粒制备的影响
固定其他条件，研究油相种类对纳米粒粒径的影响，如图４所示，粒径大ｄ＇，ＪｉＩ页序为：乙
酸乙酯＞二氯甲烷＞二氯甲烷＋乙醇＞－丙酮。从有机溶剂的性质看，聚合物胶束的粒径与有机溶剂．水的可混合性有关［７，８１。可混合性町以定量表达为有机溶剂与水的溶解参数之差（Ａ
６）。随着溶剂在水中的町混合性增加，Ａ６变小。三种有机溶剂与水的可混合性大小为：
丙酮＞二氯甲烷＋乙醇＞二氯甲烷＞乙酸乙酯。所以丙酮为有机溶剂所得到的粒径最小。从制备机理看：乙酸乙酯为水不溶性溶剂，当含有聚合物和药物的乙酸乙酯滴入水中，会形成
油滴。这些油滴仅依靠搅拌作用分散在水中，故形成的粒径较大。而对于水溶性的内酮，当
有机溶剂被滴入水中，溶剂会屯刻分散在水中，聚合物不易聚集在一起，故形成的粒径较小。将ＰＬＧＡ溶于二氯甲烷＋乙醇、二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯制得的纳米粒的均粒径都在３００ｎｍ左右，基本达到了预期实验要求。｛日二氯甲烷等有机溶剂具有毒性，对中枢神经系统具有麻
醉作用，所以选用丙酮效果会好点。
２．４超声对ＰＬＧＡ纳米粒制备的影响
图５超声时间对纳米粒制备的影响
固定其他条件，旨先研究超卢乳化时问对纳米粒制备的影响。结果如图５所示，超卢时
间在８．１２分钟问粒径变化不大。超声时问越短，有机物杂质越多；超声时间越长，粒径反
１６５而变化不大。同时超声频率对纳米粒的形成也有较大影响，超声频率太低，制备的纳米粒粒径较大，往往容易形成几微米到几十微米的微球。
２．５挥发时间对ＰＬＧＡ纳米粒制备的影响
３３０
Ｓ１０
墨２９０颦２７０
２１；０２４６８ｔ０１２明／ｈ
图６挥发时间对纳米粒制备的影响
在其它条件不变的情况下，研究有机溶剂挥发时间对纳米粒粒径的影响。聚合物溶液液
滴滴加于水相中，为使聚合物能完全析出生成纳米粒需除去有机相。由图６可以看出，ＰＬＧＡ纳米粒粒径集中在２５０．３００ｎｍ，满足临床需要，挥发时间选择６－１０个小时就可以。这是因
为ＰＬＧＡ在水中不溶解，聚合物溶液滴加入水相后，经超声和搅拌的共同作用，有机溶剂
扩散开后，ＰＬＧＡ纳米胶束就基本完全形成。所以时间的不同只对有机溶剂的除去速率产生较大差异，而对聚合物纳米粒的形成却没有影响。
２．６水相与油相体积比对ＰＬＧＡ纳米粒制备的影响
图７水相与油相体积比对纳米粒制备的影响
在有机相中聚合物浓度固定的情况下，改变水相与有机相的相比，研究其对纳米粒粒径
的影响。由图７可知，当水油相比大于２５时，粒径不再大幅度的变化。当有机相体积增加，
有机相中的聚合物浓度减小，有机柙被滴入水相中，低浓度的聚合物更易分散在水中，所以随相比的减小，聚合物纳米粒粒径变大。在有机相聚合物浓度不变的情况下，相比减小，会
造成水相对聚合物液滴分散的不利，ｌ司时单位体积内聚合物液滴增多，聚集的町能性加大，
使得ＰＬＧＡ纳米粒粒径变大。
１６６
PLGA纳米_微球作为核酸载体的研究进展(1)
微生物学通报 DEC 20, 2009, 36(12): 1901~1908 Microbiology © 2009 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@
基金项目：欧盟项目FMD-DISCONVAC(No. 226556); 家畜疫病病原生物学国家重点实验室自主研究课题(No. SKLVEB2008ZZKT008); 甘肃省自然科学基金(No. 0710RJZA082) *通讯作者：Tel: 86-931-8342537; E-mail: zhangyg@ 收稿日期：2009-06-11; 接受日期：2009-08-31
专论与综述
PLGA纳米/微球作为核酸载体的研究进展 王 刚 潘 丽 张永光* (中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 农业部畜禽病毒学重点开放实验室 甘肃 兰州 730046) 摘 要: 生物可降解材料[poly(lactide-co-glycolide acid), PLGA]颗粒在持续释放和定位递送各种药剂包括核酸有很大的研究和应用价值。本文综述了PLGA作为核酸载体的制备及其用于基因载体和疫苗佐剂的研究。 关键词: PLGA, DNA, 基因治疗, 疫苗佐剂 Research Progress on PLGA Nanoparticles/Microspheres as DNA Carriers WANG Gang PAN Li ZHANG Yong-Guang* (Key Laboratory of Animal Virology of Agriculture/State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology, Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou, Gansu 730046, China) Abstract: Biodegradable PLGA [poly(lactide-co-glycolide acid)] have shown significant potential for sus-tained and targeted delivery of several pharmaceutical agents, including DNA. We reviewed the formulating approaches of PLGA nanoparticles/microspheres as DNA carriers and utilization for gene therapy and vac-cine adjuvant. Keywords: PLGA, DNA, Gene therapy, Vaccine adjuvant 生物可降解材料PLGA是乳酸(Lactic acid, LA)与羟基乙酸(Glycolic acid, GA)共聚合而成, 有很好的稳定性, 具有易于被吞噬细胞摄取, 通过在颗粒表面吸附相应的配体可以定位到特定的组织或器官等优点, 美国食品药品管理局(FDA)已认定PLGA有良好的生物相容性和安全性, 已被广泛应用于人的临床医学[1,2]。 由于制备工艺不同, PLGA 分子量、LA与GA的摩尔比、光学活性、链末端结构不同, 都会影响PLGA的释放特性。PLGA 可以通过改变自身共聚物中LA与GA 的比例而改变PLGA 的物理化学性质[3]。 DNA包裹进PLGA有4个优点[4,5]: 1) 防止体内DNA降解; 2) 起到控制释放的作用, 并长期刺激树突状细胞(Dentritic cell, DC); 3) 易于转化动物细胞, 易于被DC细胞吞噬; 4) 在抗原存在时, 能够刺激Th1型免疫反应。 1 载核酸PLGA颗粒制备及其对转化的影响 颗粒的直径和表面电势是两个重要的物理参数, 它影响着核酸的包裹率、转化率。 1902 微生物学通报 2009, Vol.36, No.12
纳米粒制备实验报告
一、实验目的
本实验旨在通过纳米粒制备技术，制备出具有特定尺寸、形貌和功能的纳米粒，并对其理化性质进行表征。
二、实验原理
纳米粒是一种尺寸在纳米尺度（1-100nm）的微小颗粒，具有独特的物理化学性质。纳米粒制备技术主要包括物理法制备、化学法制备和生物法制备等。本实验采用化学法制备纳米粒，即通过化学反应合成纳米粒，具有操作简便、成本低廉等优点。
三、实验材料与仪器
1. 实验材料：
（1）金属盐：氯化铁（FeCl3）、氯化钠（NaCl）、硝酸银（AgNO3）等；
（2）有机溶剂：无水乙醇、丙酮、正己烷等；
（3）聚合物：聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）等；
（4）表面活性剂：十二烷基硫酸钠（SDS）、吐温-80等；
（5）pH调节剂：氢氧化钠（NaOH）、盐酸（HCl）等。
2. 实验仪器：
（1）电子天平；
（2）超声波清洗器；
（3）恒温加热磁力搅拌器；
（4）透射电子显微镜（TEM）；
（5）扫描电子显微镜（SEM）；
（6）粒度分析仪；
（7）Zeta电位分析仪。
四、实验步骤
1. 溶液配制 （1）将金属盐溶解于无水乙醇中，配制成一定浓度的金属盐溶液；
（2）将聚合物、表面活性剂、pH调节剂等溶解于无水乙醇中，配制成一定浓度的混合溶液。
2. 纳米粒制备
（1）将金属盐溶液滴加到混合溶液中，控制滴加速度和温度，进行化学反应；
（2）反应完成后，将产物转移至超声清洗器中，进行超声处理，使纳米粒分散均匀；
（3）将超声处理后的产物转移至蒸发皿中，在恒温加热磁力搅拌器上蒸发溶剂，使纳米粒聚集形成固体；
（4）将固体产物用无水乙醇进行洗涤，去除杂质，最后在60℃下干燥，得到纳米粒。
3. 纳米粒表征
（1）TEM观察：将纳米粒分散于无水乙醇中，滴加到铜网上，晾干后进行TEM观察；
（2）SEM观察：将纳米粒分散于无水乙醇中，滴加到样品台上，晾干后进行SEM观察；
生物可降解聚合材料聚羟基乙酸
生物可降解聚合材料聚羟基乙酸
聚羟基乙酸(PGA)作为医用的生物可吸收高分子材料是目前生物降解高分子材料中最活跃的研究领域，当代生物材料的发展不仅强调材料自身理化性能和生物安全性、可靠性的改善，而且更强调赋予其生物结构和生物功能，以使其在体内调动并发挥机体自我修复和完善的能力，重建或康复受损的人体组织或器官。聚乙醇酸是生物降解材料类高分子中结构最简单的一个，也是体内可吸收高分子最早商品化的一个品种。
1. PGA的结构和性能
聚羟基乙酸(PGA)分子组成有一个重复的单元(COCH2O)n，它来源于ɑ-羟基酸，即乙醇酸(HO-CH2COOH)，它是正常人体在新陈代谢过程中产生的。乙醇酸的聚合物就是聚经基乙酸(PGA) 或者叫做聚乙醇酸。PGA是半晶型的聚合物，X射线衍射显示结晶度为45%～55%，熔点Tm为220～225℃，玻璃转化温度Tg为36～40℃。同其他的聚合物一样，PGA的性能主要依赖于其受热历史、分子量、分子量分布及纯度等。用不同的制备方法，所得的聚合物的性能参数有所不同。由于其结晶度高分子链，能够进行紧密的堆积的排列，所以它有很多独特的化学、物理和力学性能。PGA的密度可高达1.5～1.7g/m3。PGA只溶于高氟代的有机溶剂，如六氟代异丙醇。聚合物链上酯键的水解是PGA降解的根本原因，其端羧基对水解起自催化作用。其降解受结晶度、温度、样品分子量、样品形态、降解环境及缓冲溶液pH值等的影响。大量实验表明，聚羟基乙酸在体内完全降解而不需特殊酶的参与，而且降解后的产物可在体内吸收代谢，最终从尿及呼吸道排出：
聚羟基乙酸→羟基乙酸→乙醛酸→甘氨酸→丝氨酸→丙酮酸→乙醛辅酶A
↓ ↓ ↓ ↓
尿 草酸 二氧化碳 二氧化碳
↓ ↓
聚乳酸基生物降解性高分子材料在医用领域的研究进展
中国生化药物杂志Ｃｈｉｎｅ靶ＪｏｕｍａｌｏｆＢｉｏｃｈｅＩＩｌｉｃａｌＰＩＩａ肋ａｃｅｕｔｉｃ８２０１０年第３１卷第ｌ期５９
・综述・
聚乳酸基生物降解性高分子材料在医用领域的研究进展
杨小玲，王珊，张卫红
（咸阳师范学院化学与化工学院，陕西成阳７１２０００）
摘要：综述了国内外聚乳酸基生物降解材料的最新研究进展。简要分析了聚乳酸基共聚物和共混材料的合
成方法及优缺点，简述了其研究、技术和应用成果情况。
关键词：聚乳酸；生物降解性；相容性
中图分类号：Ｒ３１８；Ｒ９４４．９文献标识码：Ａ文章编号：１００５．１６７８（２０１０）０１．００５９．０４
ＤｅＶｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄａｐｐＨｃａｔｉｏｎＯｆｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅｐｏｌｙｌｎｅｒｍａｔｅｒｉａｌｓｂａｓｅｄｏｎ
ｐｏｌｙｌａｃｔｉｃａｃｉｄｉｎｔｈｅｎｅｌｄｏｆｍｅｄｉｃｉｎｅ
ＹＡＮＧＸｉ∞－ｌｉｎｇ，ＷＡＮＧＳｈ锄，ＺＨＡＮＧＷｅｉ＿ｈｏｎｇ（＆枷ｆｏ，Ｃｋ邢打ｙｏ，ｌｄ吼ｅ赢∞Ｚ啦；ｎ∞ｒｉｎｇ，尼口掣口ｗⅣ０丌ｍＺ‰泐瑙砂，舭，咿增７１２０００，吼ｉ阳）
近年来生物降解性高分子材料的研究日渐受到重视。尤
其是医用生物降解材料的研究及在应用中已经取得了很大
成果。聚乳酸（ＰＬＡ）是一种重要的脂肪族聚酯类生物降解材
料，无毒、无刺激，具有良好的生物相容性，在生物医学领域
被广泛用作组织工程、人体器官、药物控制释放、仿生智能等
材料。然而，ＰＬＡ存在不少缺陷，比如性脆、耐冲击性差、在自然条件下降解速率较慢、与软组织的相容性差、合成过程
较为复杂造成产品价位高等，不利于ＰＬＡ的广泛应用。因此，对ＰＬＡ进行改性制备ＰＬＡ基生物降解性高分子材料成为
高分子材料研发的热点。ＰＬＡ改性方法主要有物理改性：如
填充、增塑、共混；化学改性：如嵌段共聚、接枝共聚；以及目
前正在研究的新方法：反应性共混。所谓ＰＬＡ基生物降解性
高分子材料是泛指其组成中含有ＰＬＡ及其衍生化合物，包括
ＰＬＡ基共聚物及ＰＬＡ基共混材料。本文对ＰＬＡ基生物降解
鱼藤酮PLGA纳米粒的制备及诱导大鼠帕金森病模型的实验研究
鱼藤酮PLGA纳米粒的制备及诱导大鼠帕金森病模型的实验研究
毛全高
【摘 要】目的:制备鱼藤酮聚合物纳米分散液,建立与人类帕金森病发病特征相类似的动物模型.方法:采用溶剂扩散法制备鱼藤酮聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]纳米粒,检测冷冻干燥保护剂(海藻糖、甘露醇、葡萄糖)及其浓度对冻干样品粒径的影响.将PLGA纳米粒制成冻干粉,28只SD大鼠分为4组,分别为空白对照组(6只),鱼藤酮组(6只),高剂量鱼藤酮PLGA纳米粒组(R-PLGA,8只)以及低剂量R-PLGA组(8只).各组均为皮下注射给药,空白对照组给予生理盐水,鱼藤酮组给予普通鱼藤酮溶液,R-PLGA组给予鱼藤酮纳米粒冻干粉.除高剂量组每4天给药1次(剂量为3.5 mg/kg)外,其他组均为每3天给药1次,每次剂量均为2.5 mg/kg.各组整个处理过程均为27 d.采用纳米粒度仪/Zeta电位仪测定纳米粒的粒径与Zeta电位;差示扫描量热仪(DSC)分析纳米粒中鱼藤酮的熔点,HPLC法测定鱼藤酮含量.观察大鼠外观行为表现(评分)、体质量、实格试验中移动潜伏期,用免疫组化法测定大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性细胞数.结果:制得的R-PLGA纳米粒平均粒径为306.5 nm,Zeta电位为-2.66 mV,包封率为89.14％,载药量为18.22％.2％海藻糖作为冷冻干燥保护剂保护作用最好,冻干粉平均粒径312.6 nm.与对照组比较,普通鱼藤酮组与高、低剂量R-PLGA组的大鼠行为学评分升高(P＜0.01),移动潜伏期从(0.93±0.21)s延长至(7.35±3.27)s,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组TH免疫阳性细胞数为82.06±10.20,低剂量模型组(17.54±4.20)明显减少(P＜0.01).结论:制得可用于制作帕金森病大鼠模型的R-PLGA纳米粒冻干粉.
一种plga微球的制备方法
- 1 - 一种plga微球的制备方法
随着生物医学领域的发展，PLGA（聚乳酸-羟基丁酸共聚物）微球作为一种重要的药物载体，在药物传递和组织工程等方面得到了广泛应用。然而，PLGA微球的制备方法对于微球的质量和性能具有重要影响。本文介绍了一种简单、高效的PLGA微球制备方法，该方法可用于制备不同尺寸和形状的PLGA微球，以满足不同的应用需求。
材料与方法
材料：PLGA（50:50，分子量为10,000）、聚乙烯醇（PVA，分子量为9,000-10,000）、乙酸乙酯、石油醚、无水乙醇、荧光素（用于荧光显微镜观察）
方法：
1. 制备PLGA溶液：将PLGA加入乙酸乙酯中，浓度为10 mg/mL。在磁力搅拌器上搅拌至PLGA完全溶解。
2. 制备PVA溶液：将PVA加入无水乙醇中，浓度为1%。在磁力搅拌器上搅拌至PVA完全溶解。
3. 制备PLGA微球：将PLGA溶液滴加入PVA溶液中，以形成水-油-水（W/O/W）乳液。使用高速离心机将乳液离心，以分离出PLGA微球。用石油醚洗涤PLGA微球，去除残留的乙酸乙酯和PVA，并用无水乙醇再次洗涤PLGA微球。最后，用荧光素标记PLGA微球，以便在荧光显微镜下观察。
结果与讨论
通过上述方法，制备了不同尺寸和形状的PLGA微球。通过调整 - 2 - PLGA和PVA的浓度，可以控制微球的大小。例如，当PLGA浓度为10
mg/mL，PVA浓度为1%时，制备的PLGA微球平均直径为20 μm。当PLGA浓度为5 mg/mL，PVA浓度为1%时，制备的PLGA微球平均直径为10 μm。此外，通过改变乳液的搅拌速度和时间，还可以制备不同形状的微球，如球形、椭圆形和棒状等。
为了评估制备的PLGA微球的质量和性能，进行了荧光显微镜观察和扫描电子显微镜（SEM）分析。荧光显微镜观察表明，标记的PLGA微球具有良好的荧光性能，可以用于药物追踪和显微镜观察。SEM分析表明，制备的PLGA微球表面光滑，形状规则，没有明显的缺陷和孔洞，符合要求的微球形态。
PLGA合成步骤
PLGA合成步骤
PLGA，即聚乳酸-羟基丁酸共聚物，是一种生物降解性高分子材料，常用于药物缓释系统和组织工程材料。下面是PLGA合成的一般步骤。
1.原料选择：PLGA的合成需要两种单体，即乳酸和羟基丁酸。这两种单体可以通过化学合成或微生物发酵获取。在选择乳酸和羟基丁酸时，可以根据需要调整它们的摩尔比例来控制PLGA的特性，如聚合度、分子量和降解速率等。
2.单体聚合：在PLGA的合成中，乳酸和羟基丁酸首先以酯键的形式聚合，生成一个长链的共聚物。这一步骤可以通过开环聚合或缩聚法来实现。
2.1开环聚合：开环聚合是指将乳酸单体和羟基丁酸单体加入到不溶于它们的有机溶剂中。常用的有机溶剂有氯仿、二甲基甲酰胺等。在反应过程中，加入合适的络合剂，如焦磷酸三丁酯等，可以帮助催化酯键的形成。随着反应的进行，乳酸和羟基丁酸单体将发生开环聚合，生成PLGA共聚物。
2.2缩聚法：缩聚法是指将乳酸和羟基丁酸单体通过酸催化剂或酶催化剂等缩聚成酯键。此方法更加精确，可以控制PLGA的特性，如分子量和聚合度。首先将乳酸和羟基丁酸单体溶解在相应的溶剂中，然后加入适量的酸或酶催化剂，如焦磷酸三丁酯或脲酶等。温度和反应时间等条件的控制也对反应结果具有重要影响。
3.聚合反应控制：在PLGA的合成过程中，可以通过调节反应条件来控制其特性。例如，增加乳酸或羟基丁酸单体的浓度可以增加PLGA的含量和聚合度。反应温度的控制可以影响PLGA的分子量和熔点等。此外，还可以使用添加剂来调整PLGA的降解速率和溶解性等。
4.纯化和制备：合成完成后，PLGA共聚物需要经过纯化和制备步骤，以去除未反应的单体、溶剂和副产物等。一般来说，溶剂的蒸发、溶剂提取或沉淀等方法可以用于纯化PLGA。
5.结构表征：合成的PLGA需要经过结构表征的步骤，以确定其分子量、聚合度和组成等。常用的表征方法包括核磁共振（NMR）、凝胶渗透色谱（GPC）和红外光谱（IR）等。
乳酸羟基乙酸共聚物
乳酸羟基乙酸共聚物
简介
乳酸羟基乙酸共聚物（Polylactic-co-glycolic acid，简称PLGA）是一种生物可降解的高分子材料，由乳酸和羟基乙酸共聚而成。PLGA具有良好的生物相容性、可降解性和可调控的药物释放特性，广泛应用于药物传递、组织工程、生物医学材料等领域。
特性
生物相容性
PLGA是一种天然来源的高分子材料，不含任何有毒或致癌成分，因此具有良好的生物相容性。在体内降解过程中，PLGA会逐渐分解为乳酸和羟基乙酸，这两种物质在人体内均有代谢途径，不会对人体造成损害。
可降解性
PLGA具有优异的可降解性能。由于其化学结构中含有大量的酯键，PLGA可以在体内被水解为无毒且易于代谢的产物。降解速度可以通过调整聚合度、组分比例等方式进行控制。
药物释放特性
PLGA具有可调控的药物释放特性，可以根据药物的特性和需求设计不同的释放方式。PLGA可以通过控制聚合度、组分比例、微球尺寸等参数来调节药物的释放速率和持续时间。PLGA还可以通过添加表面活性剂或改变微球结构来实现定向或渐进式的药物释放。
应用领域
药物传递
PLGA在药物传递领域有广泛应用。由于其良好的生物相容性和可降解性，以及可调控的药物释放特性，PLGA被广泛用于制备缓释微球、纳米粒子、纳米纤维等载体，用于输送各种类型的药物，包括小分子药物、蛋白质药物、核酸药物等。这些载体可以通过靶向修饰提高药物的靶向性和生物利用度。
组织工程
PLGA在组织工程领域也有重要应用。由于其可降解性和生物相容性，PLGA可以作为支架材料用于组织修复和再生。通过将干细胞或生长因子等生物活性物质与PLGA复合，可以促进组织的再生和修复过程。PLGA还可以通过三维打印等技术制备复杂结构的支架，为组织工程提供更多可能性。
生物医学材料
PLGA还被广泛应用于生物医学材料领域。由于其可降解性和生物相容性，PLGA可以用于制备各种类型的植入物和修复材料，如骨修复材料、缝线、薄膜等。这些材料能够在体内缓慢降解，并促进组织的再生和修复。
plga包裹药物原理
PLGA包裹药物原理
介绍
PLGA（聚乳酸-羟基乙酸聚合物）是一种生物可降解聚合物，被广泛应用于药物传递系统中。PLGA包裹药物原理指的是将药物通过包裹在PLGA纳米颗粒或微球中，以实现精确的控释和靶向释放。本文将详细探讨PLGA包裹药物的原理、优势以及在药物传递方面的应用。
PLGA包裹药物的原理
PLGA包裹药物的原理基于PLGA颗粒的特殊性质，其中乳酸和羟基乙酸的比例决定了颗粒的降解速率。PLGA可以通过微球制备方法（如乳化剂溶剂挥发法）制备纳米颗粒或微球，这些颗粒能够包裹药物并在体内实现控释。
药物可以通过物理吸附、包埋或共聚合的方式与PLGA相结合。在药物包裹过程中，PLGA颗粒会封装药物并保护其免受外界环境的影响。PLGA颗粒可以形成药物的稳定储存形式，并在需求时逐渐释放药物。
PLGA包裹药物的优势
PLGA包裹药物具有多个优势，使其成为药物传递领域的研究热点：
1. 控释性能：PLGA颗粒能够实现持续、稳定的药物释放。通过调整PLGA的降解速率和药物的包裹方式，可以实现精准的控释效果。
2. 生物相容性：PLGA是经过FDA批准用于医疗应用的生物可降解聚合物，具有良好的生物相容性。它会在体内逐渐降解为乳酸和羟基乙酸，这些代谢产物会被身体自然排出。
3. 靶向性：通过调整PLGA颗粒的大小、形状和表面修饰，可以实现对药物的靶向输送。例如，可以在颗粒表面修饰靶向剂，使药物更有效地定位到特定组织或细胞。
4. 改善溶解性和稳定性：某些药物由于其特殊的物理化学性质，例如溶解度低、易分解等，在体内很难实现有效的治疗浓度。通过包裹在PLGA颗粒中，可以提高药物的溶解度并保护其免受降解。 PLGA在药物传递中的应用
PLGA包裹药物的原理已被广泛应用于药物传递系统中，涵盖了多个领域和应用。
1. 肿瘤治疗
通过改变PLGA颗粒的大小和表面修饰，可以实现对肿瘤组织的靶向输送。PLGA纳米颗粒可以被肿瘤细胞主动摄取，从而提高药物在肿瘤组织中的浓度，减少对正常组织的副作用。此外，PLGA颗粒还可以通过控制释放速率延长药物在体内的停留时间，增强治疗效果。
plga纳米粒载药原理
plga纳米粒载药原理
哎呀，说到PLGA纳米粒载药原理，这可真是个技术活儿，得慢慢道来。PLGA，全称是聚乳酸-羟基乙酸共聚物（Poly(lactic-co-glycolic
acid)），这玩意儿在生物医学领域里可火了，因为它能降解，对人体友好，所以经常被用来做药物载体。
咱们先聊聊这个PLGA纳米粒是啥。想象一下，你手里拿着一个超级小的气球，小到肉眼都看不见，这就是PLGA纳米粒。这个气球不是普通的气球，它是由PLGA这种特殊的材料制成的，可以装载药物。
那么，这个载药原理到底是怎么一回事呢？首先，得把药物“塞”进PLGA纳米粒里。这个过程有点像是把糖塞进糖纸里，只不过这里的“糖”是药物，而“糖纸”是PLGA。药物被包裹在PLGA纳米粒的内部，就像是被保护起来了。
接下来，这个装满药物的纳米粒就可以被注射到人体里了。这时候，PLGA纳米粒就开始发挥它的作用了。因为PLGA是一种可以被人体慢慢降解的材料，所以随着时间的推移，这个“气球”会逐渐变小，最终消失。在这个过程中，药物就会慢慢地从纳米粒里释放出来。
这个过程有点像是慢慢挤牙膏。你每天早上刷牙的时候，轻轻一挤，牙膏就出来了。PLGA纳米粒也是这样，随着它的降解，药物就一点点地被释放出来，这样可以保证药物在体内有一个持续的、稳定的释放。
而且，PLGA纳米粒还有一个好处，就是它可以被设计成控制药物释放的速度。这就像是你可以控制挤牙膏的力度，想要快一点就用力挤，想要慢一点就轻轻挤。通过调整PLGA纳米粒的大小、形状或者药物的装载量，就可以控制药物释放的速度。
总之，PLGA纳米粒载药原理就是利用PLGA这种材料的特性，把药物包裹起来，然后通过降解过程慢慢释放药物。这种方法不仅可以保护药物，还可以控制药物的释放，让药物在体内发挥作用的时间更长，效果更稳定。这就像是给药物穿上了一件智能的“外衣”，让它在需要的时候发挥作用。